赫彥濤,劉愛(ài)琴,安彩秀,秦 沖,劉 安,李 然

(河北省地質(zhì)實(shí)驗(yàn)測(cè)試中心 河北省礦產(chǎn)資源與生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,保定 071051)

環(huán)境空氣中酚類化合物污染主要來(lái)源于汽車尾氣、煤炭燃燒、工業(yè)及制藥行業(yè)排放等[1-2]。酚類化合物在空氣中以蒸氣或氣溶膠方式存在,具有特殊的刺激性氣味,可經(jīng)由呼吸道、消化道及皮膚黏膜進(jìn)入體內(nèi)[3]。長(zhǎng)期接觸含酚類化合物的空氣可引起慢性蓄積性中毒,引發(fā)頭暈、呼吸道刺激等癥狀,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生[4-5]。因此,我國(guó)職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[6]對(duì)工作場(chǎng)所空氣中苯酚、甲酚、2-萘酚和五氯酚的職業(yè)接觸限值做了明確規(guī)定。

目前,空氣中酚類化合物有多種分析方法,常用的有分光光度法[7]、氣相色譜法[8]、氣相色譜-質(zhì)譜法[9-10]、高效液相色譜法[11-13]等。分光光度法檢測(cè)過(guò)程中,顯色劑4-氨基安替比林與非對(duì)位取代基的酚類化合物均可發(fā)生反應(yīng),因此該方法不能準(zhǔn)確反映空氣中不同酚類化合物的污染狀況[7]。酚類化合物極性較強(qiáng),在氣相色譜中峰形較差,且靈敏度較低,衍生后可改善峰形并提高檢測(cè)靈敏度,但衍生步驟繁瑣耗時(shí),限制了其應(yīng)用[8-10]。近年來(lái),高效液相色譜法在空氣中酚類化合物的分析中得到了廣泛的應(yīng)用,我國(guó)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)HJ 638-2012《環(huán)境空氣 酚類化合物的測(cè)定 高效液相色譜法》也使用此法進(jìn)行測(cè)定。然而,由于高效液相色譜法定性能力不強(qiáng),且此法靈敏度較差,不適用于空氣中痕量酚類化合物的檢測(cè)。高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法無(wú)需進(jìn)行衍生化反應(yīng)即可直接對(duì)酚類化合物進(jìn)行測(cè)定,具有準(zhǔn)確度高、檢出限低等特點(diǎn)[14-15]。因此,本工作提出了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定苯酚、4-硝基酚、3-甲酚、2-氯酚、2,4-二甲酚、2,4-二氯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚、1-萘酚、2-萘酚等10種酚類化合物含量的方法,旨在為研究空氣中痕量酚類化合物提供一種新的、高效靈敏的檢測(cè)手段。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Nexera X2-SCIEX TRIPLE QUAD 5500型液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀;TH3000BⅣ型智能恒溫大氣采樣器;XAD-7采樣管(外徑6 mm,長(zhǎng)度80 mm)。

8種酚類化合物的單標(biāo)準(zhǔn)溶液：包括苯酚、4-硝基酚、3-甲酚、2-氯酚、2,4-二甲酚、2,4-二氯酚、2,4,6-三氯酚、五氯酚,質(zhì)量濃度均為100 mg·L-1,介質(zhì)為甲醇。

1-萘酚、2-萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：1 000 mg·L-1,介質(zhì)為甲醇。

10種酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別取適量的8種酚類化合物的單標(biāo)準(zhǔn)溶液和1-萘酚、2-萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,用甲醇定容至10 mL,配制成10種酚類化合物質(zhì)量濃度均為10 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用時(shí),用甲醇稀釋至所需質(zhì)量濃度。

甲酸、乙腈、甲醇均為色譜純;試驗(yàn)用水為超純水。

1.2 儀器工作條件

1.2.1 色譜條件

Kinetex C18色譜柱(100 mm×3.0 mm,2.6 μm);柱溫30 ℃;流動(dòng)相A為甲醇,B為水;流量0.2 mL·min-1;進(jìn)樣量20 μL。梯度洗脫程序：0～7.0 min時(shí),A由30%升到50%;7.0～10.0 min時(shí),A由50%升到90%,保持6.0 min;16.0～18.0 min時(shí),A由90%升到100%;18.0～18.1 min時(shí),A由100%跳轉(zhuǎn)至30%,保持1.9 min。

1.2.2 質(zhì)譜條件

大氣壓化學(xué)電離(APCI)源,負(fù)離子模式;針電流3 mA;離子源溫度550 ℃;噴霧電壓-4 500 V;多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式。10種酚類化合物的其他質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1,其中“*”為定量離子。

表1 質(zhì)譜參數(shù)

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品采集

參照HJ 638-2012,將XAD-7采樣管兩端打開(kāi)并與采樣器連接,采樣管入口端垂直向下,設(shè)置采樣流量為0.5 L·min-1,采樣時(shí)間為50 min。記錄現(xiàn)場(chǎng)采樣時(shí)間、溫度、濕度、大氣壓力。采樣結(jié)束后,取下采樣管,兩端用聚四氟乙烯帽封閉,于4 ℃以下冷藏保存。

1.3.2 樣品測(cè)定

將采樣管恢復(fù)至室溫,從出口端用甲醇洗脫,收集2.0 mL洗脫液。分取0.5 mL洗脫液,用水定容至1.0 mL,過(guò)0.22 μm濾膜,濾液按照儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜行為

10種酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流色譜圖見(jiàn)圖1。

峰號(hào)1～10對(duì)應(yīng)的化合物名稱同表1圖1 總離子流色譜圖Fig.1 Total ion chromatogram

2.2 洗脫溶劑的選擇

試驗(yàn)考察了分別以甲醇、乙腈、體積比1…1的甲醇-乙腈混合溶液作為洗脫溶劑時(shí)對(duì)空白加標(biāo)樣品(加標(biāo)量為2 μg·m-3)中10種酚類化合物回收率的影響,結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 洗脫溶劑對(duì)10種酚類化合物回收率的影響

由表2可知：采用甲醇、乙腈、體積比1…1的甲醇-乙腈混合溶液作為洗脫溶劑時(shí),10種酚類化合物的回收率依次為91.8%～100%,81.9%～111%,87.1%～119%;其中甲醇作為洗脫溶劑時(shí),回收率更好。并且試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),當(dāng)洗脫溶劑中含有乙腈時(shí),苯酚、2-氯酚色譜峰峰形變差。因此,試驗(yàn)選擇以甲醇作為洗脫試劑。

2.3 洗脫液體積的選擇

試驗(yàn)考察了洗脫液體積對(duì)目標(biāo)物回收率的影響。分別收集洗脫液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mL,10種酚類化合物的回收率見(jiàn)圖2。

圖2 洗脫液體積對(duì)10種酚類化合物回收率的影響Fig.2 Effect of volume of leacheate on the recoveries of 10 phenolic compounds

結(jié)果表明：當(dāng)收集2.0 mL洗脫液時(shí),10種酚類化合物的回收率均不小于85.0%,滿足要求;繼續(xù)增大洗脫液體積,回收率不再提升,而且增大洗脫液體積會(huì)在一定程度上稀釋樣品,導(dǎo)致方法檢出限提高。因此,試驗(yàn)選擇的洗脫液體積為2.0 mL。

2.4 流動(dòng)相體系的選擇

試驗(yàn)考察了分別以甲醇-水和甲醇-0.1%(體積分?jǐn)?shù))甲酸溶液作為流動(dòng)相體系時(shí)對(duì)目標(biāo)物質(zhì)譜響應(yīng)值的影響。結(jié)果表明：由于酚類化合物呈弱酸性,甲酸的加入會(huì)抑制酚類化合物的電離,導(dǎo)致苯酚、3-甲酚的質(zhì)譜響應(yīng)值明顯降低;當(dāng)采用甲醇-水作為流動(dòng)相體系時(shí),10種目標(biāo)物響應(yīng)值均較高,分離度良好。因此,試驗(yàn)選擇以甲醇-水作為流動(dòng)相體系。

2.5 質(zhì)譜條件的選擇

在考察質(zhì)譜條件時(shí)發(fā)現(xiàn),采用APCI源時(shí),苯酚和2-氯酚的靈敏度較采用電噴霧離子(ESI)源時(shí)的顯著提高。因此,選用APCI源進(jìn)行試驗(yàn)。采用針泵恒流進(jìn)樣,將100 μg·L-1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液直接注入APCI源,先進(jìn)行母離子掃描,確定各目標(biāo)物的準(zhǔn)分子離子峰;然后開(kāi)啟碰撞氣,對(duì)母離子進(jìn)行轟擊,找出其中兩個(gè)豐度較大的子離子;最后根據(jù)得到的母離子、子離子信息,依次優(yōu)化碰撞能量、去簇電壓等參數(shù)。優(yōu)化后的質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

2.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

以甲醇逐級(jí)稀釋10種酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制成質(zhì)量濃度為10,20,50,100,500,1 000 μg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。按照1.2節(jié)儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定,以目標(biāo)物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明：10種酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍均為10～ 1 000 μg·L-1,線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表3。

表3 線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

連續(xù)分析7個(gè)空白加標(biāo)樣品(加標(biāo)量為2 μg·m-3),控制采樣體積為25 L,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差(s),按照HJ 168-2020《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》附錄A.1中t(n-1,0.99)×s計(jì)算檢出限(3.143s),并與HJ 638-2012、氣相色譜-質(zhì)譜法[9]所得部分目標(biāo)物的檢出限進(jìn)行比對(duì),結(jié)果見(jiàn)表3。

結(jié)果表明：本方法所得10種目標(biāo)物的檢出限均小于HJ 638-2012、氣相色譜-質(zhì)譜法的檢出限,滿足空氣中痕量酚類化合物的檢測(cè)要求。

2.7 精密度和回收試驗(yàn)

在空白XAD-7采樣管入口端分別添加一定量的10種酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照試驗(yàn)方法采集空白空氣樣品并測(cè)定,各濃度水平模擬采樣6次,計(jì)算回收率和測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 精密度和回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

結(jié)果表明：10種酚類化合物在3個(gè)加標(biāo)濃度水平下的回收率為69.3%～102%,測(cè)定值的RSD為1.1%～9.6%,滿足空氣中酚類化合物的檢測(cè)要求。

2.8 樣品分析

采集某化工區(qū)的10個(gè)空氣樣品,按照本方法對(duì)其中10種酚類化合物進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示,3個(gè)空氣樣品中檢出苯酚,質(zhì)量濃度分別為23.3,27.6,40.2 μg·m-3,其余樣品均未檢出目標(biāo)物。某陽(yáng)性樣品的總離子流色譜圖如圖3所示。

圖3 陽(yáng)性樣品的總離子流色譜圖Fig.3 Total ion chromatogram of the positive sample

本工作提出了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定空氣中10種酚類化合物含量的方法,該方法簡(jiǎn)便快速、靈敏度高、準(zhǔn)確度與精密度好,適用于空氣中10種酚類化合物的定性與定量分析。