夏晶穎, 張 倩

海軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院 干部病房,上海 200081

惡性腫瘤是機(jī)體細(xì)胞過(guò)度增殖,失去正常調(diào)節(jié)而引起的疾病,被稱為三大非自然死亡疾病之一[1]。化療是目前治療癌癥的主要方法,可以有效地控制腫瘤細(xì)胞的增殖,延長(zhǎng)患者生命。但老年患者免疫功能低下,機(jī)體重要臟器功能及儲(chǔ)備均嚴(yán)重下降,化療產(chǎn)生的不良反應(yīng)會(huì)引起骨髓造血抑制,影響整體治療效果[2-3]。因此,尋找能夠靈敏且有效監(jiān)測(cè)化療后患者骨髓造血功能情況的指標(biāo)十分重要。網(wǎng)織紅細(xì)胞是未成熟階段的紅細(xì)胞,其在周圍紅細(xì)胞中的數(shù)量可用來(lái)反映機(jī)體的骨髓紅系造血功能,判斷是否貧血等異常情況[4]。促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)是一種酸性糖蛋白,也是紅細(xì)胞生成的主要調(diào)節(jié)因素[5]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是具有高度特異性的血管生成因子,低氧環(huán)境下可與受體結(jié)合,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖,促進(jìn)新生血管形成,并增加血管的通透性[6]。本研究擬通過(guò)檢測(cè)老年惡性腫瘤患者化療前后血清中EPO、VEGF及網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的表達(dá)情況,探討其對(duì)評(píng)估骨髓抑制的臨床意義。報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取自2017年5月至2022年7月于海軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的89例老年惡性腫瘤患者設(shè)為觀察組,其中,男性38例,女性51例;平均年齡(68.65±5.74)歲;疾病類型:胃癌22例,肺癌27例,結(jié)腸癌8例,乳腺癌5例,淋巴瘤4例,直腸癌9例,卵巢癌5例,食管癌4例,鼻咽癌5例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)臨床和病理檢查確診為惡性腫瘤;(2)首次接受化療;(3)年齡60～82歲;(4)無(wú)相關(guān)基因突變;(5)可提供完整臨床資料。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)近期使用抑制骨髓造血功能的藥物;(2)近期接受血清VEGF、EPO治療;(3)患有自身免疫疾病、感染性疾病;(4)既往有骨髓抑制史;(5)有精神類疾病。另選取同期于本院進(jìn)行健康體檢的80例老年人設(shè)為常規(guī)組,其中,男性34例,女性46例;平均年齡(68.71±5.66)歲。兩組研究對(duì)象的年齡、性別比例比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有研究對(duì)象均知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 常規(guī)組于體檢當(dāng)日清晨,觀察組在化療前及化療3 d、1周、2周、3周清晨抽取空腹靜脈血5 ml,放入抗凝管。將血樣在室溫下以3 400 r/min離心10 min,收集上清液,然后于-80℃儲(chǔ)存,直到使用。

1.2.2 臨床指標(biāo)檢測(cè) 采用全自動(dòng)血液分析儀器檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)(platelet count,PLT)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(white blood cell,WBC)、網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)等指標(biāo)。網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)包括:低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(low fluorescent reticulocvte,LFR)比率、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(middle fluorescent reticulocyte,MFR)比率、未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)(immature reticulocyte fraction,IRF)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(reticulocyte,RET)比率、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)絕對(duì)值(RET#)、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(hemoglobin content of reticulocyte,RET-He)、高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(high fluorescent reticulocyte,HFR)比率。

1.2.3 血清中EPO、VEGF水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測(cè)血清VEGF、EPO水平,檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行,人VEGF ELISA試劑盒購(gòu)自武漢菲恩生物科技有限公司(貨號(hào):EH3953),人EPO ELISA試劑盒購(gòu)自上海酶研生物科技有限公司(貨號(hào):EK-H10513)。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中EPO、VEGF及網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)表達(dá)水平比較 觀察組患者血清EPO、VEGF、RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均高于常規(guī)組,RET-He、LFR比率均低于常規(guī)組,組間比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1、表2。

表1 各組血清中EPO、VEGF表達(dá)水平比較

表2 各組血清網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)表達(dá)水平比較

2.2 觀察組患者血清中EPO、VEGF水平與網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的相關(guān)性分析 Pearson法分析結(jié)果顯示,觀察組患者血清EPO、VEGF水平與RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相關(guān),與RET-He、LFR比率均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 觀察組患者血清中EPO、VEGF水平與網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)的相關(guān)性分析

2.3 觀察組化療前后患者血清中EPO、VEGF及網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)表達(dá)水平比較 化療后3 d,觀察組患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均開(kāi)始下降,但與化療前比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);化療后1周,觀察組患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均明顯下降,化療后2周下降至最低值,化療后3周逐漸上升,各指標(biāo)與化療前比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組患者的VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后3 d均呈明顯下降趨勢(shì),且均在化療后1周降至最低值,化療后2周開(kāi)始呈現(xiàn)上升趨勢(shì),與化療前比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);各指標(biāo)上升趨勢(shì)持續(xù)到化療后3周,且VEGF、EPO、RET比率與化療前比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 觀察組患者化療前后血清中各指標(biāo)表達(dá)水平比較

3 討論

隨著人們生活、工作方式的變化,以及社會(huì)老齡化加重,惡性腫瘤發(fā)病率逐年上升[7-9]?；熤委煯a(chǎn)生的毒副作用如骨髓抑制可導(dǎo)致外周血細(xì)胞數(shù)量減少,增加患者感染、貧血和出血的風(fēng)險(xiǎn),影響腫瘤的有效治療并增加病死率[10-11]。因此,化療后及時(shí)、準(zhǔn)確地判斷患者骨髓抑制發(fā)生情況仍是目前研究的重點(diǎn)。

網(wǎng)織紅細(xì)胞是反映骨髓造血功能、鑒別貧血的重要指標(biāo)[12]。近年來(lái),隨著網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,其相關(guān)新參數(shù)正逐步應(yīng)用于臨床。在既往研究中,WBC、PLT是用于監(jiān)測(cè)惡性腫瘤患者化療后骨髓造血功能的主要指標(biāo),當(dāng)二者出現(xiàn)下降時(shí),骨髓造血功能已被顯著抑制。寧軍等[13]研究發(fā)現(xiàn),網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)IRF、RET比率在檢測(cè)骨髓造血功能時(shí)表現(xiàn)出更高的靈敏度。王春陽(yáng)等[14]研究發(fā)現(xiàn),RET、RET比率、IRF、MFR比率等指標(biāo)的下降與惡性腫瘤化療患者發(fā)生骨髓抑制關(guān)系密切。本研究通過(guò)對(duì)腫瘤患者化療前后各指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化比較發(fā)現(xiàn),患者化療后3 d,MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均開(kāi)始下降,但與化療前比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);化療后1周下降明顯,2周下降至最低值,至3周時(shí),表達(dá)逐漸上升。RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后3 d均呈明顯下降趨勢(shì),且均在化療后1周降至最低值,化療后2周開(kāi)始呈現(xiàn)上升趨勢(shì),直到第3周。從上述結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)RET-He、RET#、IRF、RET比率4個(gè)指標(biāo)相較于MFR比率、HFR比率、LFR比率下降更明顯,可對(duì)以上指標(biāo)進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)測(cè),為臨床早期評(píng)估骨髓造血功能提供參考依據(jù)。

EPO可以作用于骨髓中的紅系造血祖細(xì)胞,促使造血紅細(xì)胞的增殖及分化[15]。VEGF是機(jī)體重要的細(xì)胞因子,其與血管生成等關(guān)系密切[16]。此外,VEGF還是影響骨髓微環(huán)境的關(guān)鍵細(xì)胞因子之一。骨髓微環(huán)境又被稱為造血干細(xì)胞的“土壤”[17]。有研究報(bào)道,VEGF在再生障礙性貧血患者中呈低表達(dá)[18]。因此,EPO、VEGF二者均有可能與化療后骨髓抑制的發(fā)生有關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),老年惡性腫瘤患者血清中EPO、VEGF水平明顯高于健康人群,通過(guò)與網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)相關(guān)性研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),EPO、VEGF與RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相關(guān),與RET-He、LFR比率均呈負(fù)相關(guān),提示EPO、VEGF可能會(huì)影響網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)的變化。通過(guò)對(duì)患者化療前后血清中VEGF、EPO的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn),VEGF、EPO在化療后3 d均呈明顯下降趨勢(shì),且在化療后1周下降至最低值,分析其原因,VEGF、EPO與骨髓造血均存在密切聯(lián)系,VEGF、EPO水平異常降低,會(huì)造成血管通透性降低,造血環(huán)境逐漸惡化,導(dǎo)致造血功能障礙趨于嚴(yán)重,因此,推測(cè)二者與骨髓抑制程度也存在一定聯(lián)系?；熀?周開(kāi)始呈現(xiàn)上升趨勢(shì),直到3周腫瘤患者接受化療后,VEGF、EPO水平進(jìn)一步增高,其原因可能是化療導(dǎo)致骨髓造血產(chǎn)生抑制,引起紅系祖細(xì)胞對(duì)VEGF、EPO的利用度減少。以上結(jié)果提示,相對(duì)于臨床常用的血清指標(biāo)WBC、PLT,EPO、VEGF具有更高的敏感度,在患者化療后3 d即可檢測(cè)到下降趨勢(shì)。這也提示,EPO、VEGF也可作為診斷老年惡性腫瘤化療患者化療后發(fā)生骨髓抑制的生物學(xué)標(biāo)志物,可為患者的臨床化療提供參考依據(jù)。

綜上所述,EPO、VEGF及網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)指標(biāo)可用來(lái)監(jiān)測(cè)老年惡性腫瘤患者化療后骨髓抑制的發(fā)生。其中,VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化療后檢測(cè)骨髓抑制發(fā)生的敏感度較高,對(duì)老年惡性腫瘤的臨床治療具有重要指導(dǎo)意義。但本研究樣本納入量較少,將在今后的研究中進(jìn)行完善驗(yàn)證。