關(guān)卓明 何敬銘 林泳儀 李礪

【摘要】對(duì)采用紫外-可見分光光度（UV）法測(cè)定紫草中羥基萘醌總色素含量全過程進(jìn)行分析，建立數(shù)學(xué)模型，確定影響總色素測(cè)定不確定度的因素并對(duì)其進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果表明，總色素含量測(cè)定的擴(kuò)展不確定度為0.06%，測(cè)定結(jié)果表示為（1.69±0.06）%（k=2），能力驗(yàn)證結(jié)果為滿意。

【關(guān)鍵詞】紫草；羥基萘醌；分光光度法；能力驗(yàn)證；不確定度

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.01.009

Determination of Total Hydroxynaphthoquinone Pigment Content in Purple Grass by Spectrophotometry Evaluation of Uncertainty and Application in Capability Verification

GUAN Zhuoming， HE Jingming， LIN Yongyi， LI Li*（Sinopharm group fengliaoxing〔Foshan〕herbal medicine decoction pieces Co.， Ltd.， Foshan 528000， China）

Abstract： To verify the ability of UV spectrophotometry to determine the total content of hydroxynaphthoquinone pigments in purple grass， establish a mathematical model， determine the factors that affect uncertainty， and evaluate each factor. Results showed that the expanded uncertainty of the total pigment content determination was 0.06%， and the determination result was expressed as （1.69±0.06）% （k=2）， indicating a satisfactory capability validation result.

Keywords： hydroxyanaphthoquinone； spectrophotometry； capability verification； uncertainty

紫草的使用歷史非常悠久。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載，紫草性寒，具有活血和清熱解毒的功效。現(xiàn)代研究表明，紫草含有多種活性成分，包含羥基萘醌類、三萜類、生物堿類等有效物質(zhì)。其中，羥基萘醌類是紫草中最重要、最具代表性的活性有效成分，具有抗炎、抗菌、抗腫瘤等藥理活性。

《中華人民共和國藥典（2020年版）》收錄了以UV法測(cè)定羥基萘醌總色素的含量，以左旋紫草素的吸光系數(shù)進(jìn)行計(jì)算。使用UV法測(cè)定羥基萘醌總色素的含量會(huì)受到多種因素的影響，如儀器精度、實(shí)驗(yàn)員的主觀因素、操作實(shí)驗(yàn)條件和玻璃量具的校準(zhǔn)等。測(cè)量得到的總含量與其真實(shí)值之間存在偏差，要對(duì)測(cè)量的羥基萘醌總色素含量的可靠性進(jìn)行客觀評(píng)價(jià)，這就需要引進(jìn)測(cè)量不確定度的概念。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法的能力驗(yàn)證是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制內(nèi)容之一。能力驗(yàn)證能夠綜合考察實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，是實(shí)驗(yàn)室管理非常重要的手段[1]。本研究測(cè)量了參加能力比對(duì)驗(yàn)證的紫草試樣中羥基萘醌總色素的含量，同時(shí)對(duì)測(cè)量的不確定度進(jìn)行評(píng)定，找到影響不確定度的因素，對(duì)不確定度貢獻(xiàn)率進(jìn)行分析。建立了羥基萘醌總色素測(cè)定能力驗(yàn)證的測(cè)量不確定度評(píng)定方法，為紫草中羥基萘醌總色素含量的測(cè)定方法改善提供參考。

1.1儀器與試劑

UV計(jì)（北京普析TU-1901）；電子天平（上海舜宇恒平FA2104），25 mL和100 mL量瓶、5 mL移液管；紫草（能力驗(yàn)證樣品）；乙醇（分析純）。

1.2測(cè)量方法

《中華人民共和國藥典（2020年版）：一部》中的紫草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)。為減少測(cè)量誤差，使檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性更加可靠，本研究同步進(jìn)行了含量測(cè)定不確定度的分析。

2.1不確定度數(shù)學(xué)模型

2.2不確定度來源分析

采用UV法測(cè)定羥基萘醌總色素含量的不確定度來源主要有：方法本身引入不確定度，天平稱量不確定度，體積測(cè)量不確定度，UV計(jì)引入不確定度。體積測(cè)量不確定度主要有兩個(gè)來源：一是，測(cè)量器具最大允許誤差引起不確定度；二是，實(shí)驗(yàn)室溫度變化引起體積變化不確定度[2]。

經(jīng)分析確定，影響本試驗(yàn)紫草含量測(cè)定結(jié)果的不確定度因素主要有樣品稱量、樣品稀釋和儀器測(cè)量等。

2.3分量不確定度的測(cè)量

2.3.1方法精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

測(cè)量重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（ P ）。測(cè)定10份供試品中羥基萘醌總色素的含量，具體結(jié)果見表1。采用A類評(píng)定。

2.4計(jì)算合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（ X ）

測(cè)量不確定度各分量結(jié)果見表2。

通過紫草中羥基萘醌總色素含量能力驗(yàn)證不確定度評(píng)定可知，采用UV法測(cè)定總色素含量時(shí)，主要不確定因素為UV計(jì)的吸光度測(cè)定和溶液稀釋定容。由此可知，對(duì)UV計(jì)進(jìn)行定期校準(zhǔn)維護(hù)和提高操作員對(duì)儀器熟練程度是降低吸光度引起的不確定度的兩個(gè)主要方法。體積越小的玻璃量器引起不確定度越大，因而盡可能使用A級(jí)大容量容量瓶和移液管。通過對(duì)紫草中羥基萘醌總色素含量測(cè)定的不確定度評(píng)定，詳細(xì)分析計(jì)算各項(xiàng)不確定度來源，為提高測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了依據(jù)。實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證結(jié)果得到了滿意的答復(fù)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]李向威.檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)能力驗(yàn)證實(shí)施探討[J].中國檢驗(yàn)檢測(cè)，2023，31（1）：95-96.

[2]趙富華，楊星，韓寧寧，等.紫外-可見分光光度法測(cè)定甲磺酸達(dá)氟沙星粉含量的不確定度評(píng)定[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2022，41（5）：53-56.

【作者簡介】

關(guān)卓明，男，1987年出生，中級(jí)中藥師，學(xué)士，研究方向?yàn)樗幤贰⑹称钒踩珯z測(cè)。

通訊作者：李礪，女，1977年出生，副主任藥師，研究方向?yàn)橹兴幖笆称窓z驗(yàn)。電子郵箱：toby319@126.com。

（編輯：侯睿琪）