周艷明，袁善奎，單煒力

(1.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所，北京 100125；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100125)

明確農(nóng)藥的代謝途徑是農(nóng)藥風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)。早在1982年我國(guó)就要求提交植物代謝和代謝物的毒性資料[1]。2007年《農(nóng)藥登記資料規(guī)定》[2]要求提交土壤降解、水解、水中光解、水-沉積物系統(tǒng)降解的代謝途徑、母體和主要代謝物的降解速率，但未明確要求使用放射性同位素標(biāo)記，也未要求提交代謝物的毒理學(xué)、生態(tài)毒理學(xué)和土壤吸附資料。向中國(guó)出口農(nóng)藥的企業(yè)在申請(qǐng)新農(nóng)藥登記時(shí)基本按要求提交了土壤降解(代謝途徑、母體和主要代謝物的代謝速率)、水解(代謝途徑、母體的代謝速率)、水中光解(代謝途徑、母體的代謝速率)、水-沉積物降解(代謝途徑、母體的代謝速率)相關(guān)試驗(yàn)報(bào)告，部分產(chǎn)品還提交了主要代謝物的土壤吸附和部分生態(tài)毒理試驗(yàn)資料。由于條件限制，國(guó)內(nèi)企業(yè)申請(qǐng)新農(nóng)藥登記時(shí)雖進(jìn)行了上述試驗(yàn)，但絕大多數(shù)產(chǎn)品未使用同位素標(biāo)記，代謝途徑不明確。

我國(guó)從60年代初起就利用放射性同位素標(biāo)記化合物進(jìn)行農(nóng)藥代謝研究[3]，但在農(nóng)藥登記管理中一直未要求采用放射性同位素示蹤技術(shù)開(kāi)展農(nóng)藥的環(huán)境代謝試驗(yàn)。2016～2017年，我國(guó)發(fā)布實(shí)施了《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》系列行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在《農(nóng)藥登記資料要求》中明確了土壤代謝和水-沉積物系統(tǒng)代謝試驗(yàn)應(yīng)以放射性同位素標(biāo)記物開(kāi)展試驗(yàn)、并提供主要代謝物的部分環(huán)境歸趨和生態(tài)毒性資料，提出了農(nóng)藥環(huán)境代謝試驗(yàn)和農(nóng)藥代謝物環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的管理要求。

本文綜述了歐盟和美國(guó)對(duì)農(nóng)藥代謝物的資料要求和代謝物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法。

1 歐盟對(duì)代謝物的環(huán)境資料要求和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

1.1 環(huán)境資料要求 代謝物應(yīng)提供以下環(huán)境資料[4]：

(1)按土壤和水中監(jiān)測(cè)殘留物定義提供分析方法。

(2)以下代謝物需提交土壤好氧降解速率和土壤吸附試驗(yàn)：①母體試驗(yàn)任一次采樣中出現(xiàn)的>10%初始放射性(AR)的代謝物；②母體試驗(yàn)連續(xù)兩次采樣>5%AR的代謝物；③母體試驗(yàn)結(jié)束時(shí)>5%AR且仍在增加的代謝物；④在淋溶豎井(lysimeter)試驗(yàn)的淋出液中>0.1 μg/L的代謝物。

(3)以下代謝物需提交土壤厭氧降解速率：①任一次采樣>10%AR的代謝物；②連續(xù)兩次采樣>5%AR的代謝物；③試驗(yàn)結(jié)束時(shí)>5%AR且仍在增加的代謝物。

(4)無(wú)法得出準(zhǔn)確的吸附系數(shù)(Koc<25)時(shí)需提供土壤淋溶試驗(yàn)。

(5)必要時(shí)對(duì)非靶標(biāo)生物可能接觸到且無(wú)法用原藥試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估的代謝物進(jìn)行單獨(dú)試驗(yàn)。

(6)如數(shù)據(jù)表明在原藥試驗(yàn)中代謝物有足夠的濃度和持續(xù)時(shí)間，代謝物可不進(jìn)行蚯蚓繁殖試驗(yàn)、尖狹下盾螨和白符跳蟲(chóng)毒性試驗(yàn)。

以近年在歐盟取得登記的溴氰蟲(chóng)酰胺、氯氟醚菌唑和氯氟吡啶酯為例，根據(jù)其評(píng)估報(bào)告[5-7]，土壤好氧代謝的主要代謝物均提交了土壤好氧降解速率、土壤吸附、蚯蚓繁殖和土壤微生物氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)資料；大部分提交了魚(yú)、溞、藻急性毒性資料。溴氰蟲(chóng)酰胺原藥對(duì)魚(yú)、藻低毒而對(duì)溞劇毒，主要代謝物未提交魚(yú)、藻試驗(yàn)資料，但提交了大型溞急性毒性試驗(yàn)資料，部分代謝物提交了大型溞繁殖毒性資料。對(duì)于其他代謝途徑的代謝物，數(shù)據(jù)則相對(duì)較少，這與歐盟主要以旱田作物為主、水稻種植較少有關(guān)。根據(jù)農(nóng)藥特性還開(kāi)展了其他試驗(yàn)以滿足環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需要。例如，氯氟吡啶酯為除草劑，多個(gè)代謝物開(kāi)展了穗狀狐尾藻生長(zhǎng)抑制和植物活力試驗(yàn)。溴氰蟲(chóng)酰胺進(jìn)行了在向日葵、油菜、西紅柿、西葫蘆、菊蒿葉沙鈴花(Phaceliatanacetifolia)花粉和雄蕊中的遷移試驗(yàn)(14C標(biāo)記)和代謝物蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)。

1.2 水生生態(tài)系統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 在土壤降解、在地表水中的降解中滿足以下條件的代謝物應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[8]：①任一次采樣>10% AR的代謝物；②連續(xù)兩次>5%AR的代謝物；③試驗(yàn)結(jié)束時(shí)>5%AR且仍在增加的代謝物。CO2，無(wú)機(jī)物(重金屬除外)，含4個(gè)或以下CHNO原子且不含環(huán)氧、亞硝胺、腈等已知有毒性結(jié)構(gòu)的脂肪族化合物不需要進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

對(duì)于確定不含毒性基團(tuán)(toxophore)的代謝物，可采用定量構(gòu)效關(guān)系(QSAR)等非試驗(yàn)方法獲得其水生生物毒性數(shù)據(jù)。

對(duì)于保留毒性基團(tuán)的代謝物，首先考慮以母體最敏感的物種或分類(lèi)開(kāi)展試驗(yàn)。對(duì)于不含毒性基團(tuán)且需要開(kāi)展試驗(yàn)(使用QSAR預(yù)測(cè)毒性數(shù)據(jù)開(kāi)展評(píng)估，風(fēng)險(xiǎn)不可接受的)的代謝物，應(yīng)進(jìn)行虹鱒(急性)、大型溞(急性)和綠藻的毒性試驗(yàn)。如代謝物與母體毒性相當(dāng)，則應(yīng)進(jìn)行其他物種的試驗(yàn)。

對(duì)于沉積物相出現(xiàn)的代謝物，應(yīng)考慮其對(duì)底棲生物的風(fēng)險(xiǎn)。

當(dāng)代謝物可能進(jìn)入地表水且在水中穩(wěn)定(24 h 水解率<90%)時(shí)，需開(kāi)展慢性生態(tài)毒性試驗(yàn)。僅要求以魚(yú)類(lèi)或無(wú)脊椎動(dòng)物的較敏感分類(lèi)進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)。根據(jù)有效成分作用機(jī)理認(rèn)為對(duì)大型溞不敏感時(shí)應(yīng)開(kāi)展搖蚊幼蟲(chóng)慢性毒性試驗(yàn)。

如果沒(méi)有母體的慢性毒性數(shù)據(jù)且代謝物在水中穩(wěn)定，代謝物應(yīng)開(kāi)展慢性毒性試驗(yàn)。代謝物可能存在內(nèi)分泌干擾特性時(shí)，應(yīng)開(kāi)展魚(yú)類(lèi)慢性毒性試驗(yàn)。

對(duì)于在水中穩(wěn)定且log Pow>3的代謝物，首先用QSAR預(yù)測(cè)生物富集系數(shù)，也可考慮母體生物富集/生物蓄積試驗(yàn)或動(dòng)物代謝試驗(yàn)中代謝物的生物富集方面的信息。

1.3 鳥(niǎo)類(lèi)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 重點(diǎn)關(guān)注鳥(niǎo)類(lèi)攝取施藥后植物中含有的代謝物導(dǎo)致的風(fēng)險(xiǎn)[9]，同時(shí)認(rèn)為種子處理、幼苗和顆粒劑的評(píng)估中可覆蓋代謝物的風(fēng)險(xiǎn)。若已知代謝物的毒性高于母體，應(yīng)對(duì)代謝物開(kāi)展評(píng)估。

1.3.1 代謝物的來(lái)源 一般根據(jù)植物代謝試驗(yàn)數(shù)據(jù)確定，有魚(yú)類(lèi)代謝試驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)作為確定魚(yú)體內(nèi)相關(guān)代謝物的依據(jù)。后茬作物代謝試驗(yàn)可覆蓋土壤代謝物內(nèi)吸至植物體內(nèi)的部分。

1.3.2 評(píng)估流程 第一步：代謝物在植物體內(nèi)達(dá)到10%總殘留放射性(TRR)和0.01 mg eq/kg，或數(shù)據(jù)表明代謝物比母體的毒性更高？

否：不需進(jìn)一步評(píng)估；

是：轉(zhuǎn)到第二步。

第二步：在家禽代謝試驗(yàn)中是否形成了該代謝物？

否：轉(zhuǎn)到第四步；

是：轉(zhuǎn)到第三步。

第三步：母體毒性試驗(yàn)是否可涵蓋代謝物的毒性(家禽代謝試驗(yàn)，排泄物中代謝物量占給藥量的10%以上)？

否：轉(zhuǎn)到第四步；

是：代謝物的風(fēng)險(xiǎn)已被母體的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估涵蓋；

若缺少家禽代謝數(shù)據(jù)，可考慮其他脊椎動(dòng)物代謝數(shù)據(jù)。若尿液、血漿、膽汁中代謝物占給藥量的20%以上，不需評(píng)估代謝物對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)；低于20%，應(yīng)評(píng)估。

第四步：

(1)進(jìn)行鳥(niǎo)類(lèi)急性篩查評(píng)估

①毒性數(shù)據(jù)選擇 如有代謝物鳥(niǎo)類(lèi)毒性數(shù)據(jù)，應(yīng)使用該數(shù)據(jù)。代謝物毒性與母體相當(dāng)或高于母體，開(kāi)展聯(lián)合效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估(combined risk assessment)。無(wú)代謝物鳥(niǎo)類(lèi)毒性數(shù)據(jù)時(shí)假設(shè)代謝物的毒性為母體的10倍。

②暴露分析 代謝物暴露量計(jì)算公式與母體相同，但使用代謝物的單位劑量殘留量。

③評(píng)估結(jié)果

TER≥10：低風(fēng)險(xiǎn)

TER<10：轉(zhuǎn)到第五步。

(2)進(jìn)行鳥(niǎo)類(lèi)繁殖篩查評(píng)估 大多數(shù)情況下不需要評(píng)估，代謝物可能比母體毒性高則有必要評(píng)估。代謝物在環(huán)境中具有持久性，或后茬作物代謝試驗(yàn)確定為相關(guān)代謝物時(shí)，應(yīng)評(píng)估代謝物鳥(niǎo)類(lèi)繁殖風(fēng)險(xiǎn)。

毒性數(shù)據(jù)選擇和暴露分析方法與急性評(píng)估相同。評(píng)估結(jié)果，TER≥5為低風(fēng)險(xiǎn)，TER<5轉(zhuǎn)到第五步。

第五步：對(duì)代謝物風(fēng)險(xiǎn)的進(jìn)一步評(píng)估

首先嘗試不需要額外脊椎動(dòng)物試驗(yàn)的可能性，必要時(shí)開(kāi)展鳥(niǎo)類(lèi)急性或繁殖毒性試驗(yàn)：

(1)考慮代謝物是否有哺乳動(dòng)物毒性數(shù)據(jù)，以及哺乳動(dòng)物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果是否為低風(fēng)險(xiǎn)且有較高的安全系數(shù)。如果母體對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)和哺乳動(dòng)物的毒性相似，可認(rèn)為對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)低風(fēng)險(xiǎn)。

(2)使用QSAR模型估算毒性終點(diǎn)，但僅適用于急性毒性。

(3)使用代謝物的DT50代替默認(rèn)值。

(4)使用初始?xì)埩袅繑?shù)據(jù)優(yōu)化鳥(niǎo)類(lèi)食物中代謝物的濃度。

(5)進(jìn)行代謝物的急性或繁殖毒性試驗(yàn)。

1.3.3 二次中毒和飲用水暴露評(píng)估 土壤中代謝物滿足二次中毒觸發(fā)條件時(shí)，應(yīng)評(píng)估其對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)；土壤中代謝物應(yīng)評(píng)估通過(guò)飲用水暴露對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)；評(píng)估流程與母體相同。缺少代謝物鳥(niǎo)類(lèi)毒性數(shù)據(jù)時(shí)假設(shè)代謝物的毒性為母體的10倍。

1.4 蜜蜂風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 以下情況應(yīng)評(píng)估代謝物對(duì)蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)[10]：

(1)代謝物在植物代謝試驗(yàn)或殘留試驗(yàn)中在花粉和花蜜中達(dá)到10%TRR和0.01 mg eq/kg；

(2)代謝物在植物代謝試驗(yàn)或殘留試驗(yàn)中在花粉和花蜜中達(dá)到10%TRR或0.01 mg eq/kg，且母體對(duì)蜜蜂急性LD50<0.01 μg/蜂。

1.4.1 效應(yīng)分析 代謝物的資料要求與母體相同，即蜜蜂的急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、慢性毒性試驗(yàn)和幼蟲(chóng)發(fā)育毒性試驗(yàn)。

代謝物數(shù)據(jù)完整時(shí)，使用代謝物毒性數(shù)據(jù)開(kāi)展評(píng)估。代謝物對(duì)蜜蜂的毒性比母體低3倍以上不需要評(píng)估。代謝物與母體毒性相當(dāng)或高于母體時(shí)，應(yīng)進(jìn)行聯(lián)合效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

代謝物僅有急性毒性數(shù)據(jù)時(shí)，使用代謝物毒性數(shù)據(jù)開(kāi)展急性評(píng)估，并通過(guò)急性毒性數(shù)據(jù)估算慢性毒性數(shù)據(jù)。代謝物對(duì)蜜蜂的急性毒性比母體低10倍以上，可假設(shè)代謝物對(duì)蜜蜂的慢性毒性與母體相當(dāng)。

當(dāng)沒(méi)有代謝物的毒性數(shù)據(jù)，或急性毒性數(shù)據(jù)不能估算慢性毒性數(shù)據(jù)時(shí)，可根據(jù)代謝物對(duì)其他無(wú)脊椎動(dòng)物急性和慢性毒性數(shù)據(jù)估算對(duì)蜜蜂的急性和慢性毒性，或使用QSAR等非試驗(yàn)方法。如這些方法表明代謝物的毒性不會(huì)高于母體，則假設(shè)代謝物的毒性與母體相當(dāng)。當(dāng)QSAR或其他無(wú)脊椎動(dòng)物數(shù)據(jù)表明代謝物的毒性可能高于母體時(shí)，申請(qǐng)人應(yīng)考慮提供代謝物的蜜蜂毒性試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.4.2 暴露分析 對(duì)于成蜂應(yīng)考慮代謝物的急性和慢性膳食暴露，對(duì)于幼蟲(chóng)應(yīng)考慮慢性暴露。代謝物暴露量計(jì)算公式與母體相同，但需考慮母體到代謝物的轉(zhuǎn)化系數(shù)。

1.4.3 評(píng)估流程 代謝物對(duì)蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估流程如下：

第一步：代謝物在花粉和花蜜(以植物基質(zhì)代替)中≥10%TRR且0.01 mg eq/kg，或≥10%TRR或0.01 mg eq/kg且母體對(duì)蜜蜂LD50<0.01 μg/蜂？

否：不需進(jìn)一步評(píng)估；

是：轉(zhuǎn)到第二步。

第二步：開(kāi)展蜜蜂(包括熊蜂、獨(dú)居蜂)篩查評(píng)估

PESPG≤10%：低風(fēng)險(xiǎn)；

PESPG>10%：轉(zhuǎn)到第三步。

PESPG為對(duì)蜂群的整體預(yù)測(cè)影響水平，單位為蜂群數(shù)量的降低百分比。農(nóng)藥暴露后蜂群規(guī)模減少的最大允許水平為10%。

第三步：開(kāi)展蜜蜂(包括熊蜂、獨(dú)居蜂)的第1階段評(píng)估

PESPG≤10%：低風(fēng)險(xiǎn)；

PESPG>10%：轉(zhuǎn)到第四步。

第四步：首先考慮暴露和效應(yīng)的優(yōu)化，如：檢測(cè)花粉和花蜜中的殘留量和殘留量的減少趨勢(shì)；開(kāi)展代謝物的蜜蜂毒性試驗(yàn)。如果采用有效成分或代表性制劑開(kāi)展了蜜蜂田間試驗(yàn)，可認(rèn)為試驗(yàn)中涵蓋了代謝物的風(fēng)險(xiǎn)，無(wú)需額外確認(rèn)試驗(yàn)中有無(wú)代謝物的存在。

1.5 地下水風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 歐盟指令546/2011中規(guī)定，農(nóng)藥及相關(guān)代謝物在地下水中的濃度不應(yīng)高于以下兩個(gè)限值的低值：

——?dú)W盟指令2006/118/EC規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)(母體或相關(guān)代謝物不高于0.1 μg/L，母體和相關(guān)代謝物的總量不高于0.5 μg/L)

——按1107/2009批準(zhǔn)農(nóng)藥有效成分時(shí)，根據(jù)毒理學(xué)數(shù)據(jù)規(guī)定的最大濃度；未規(guī)定該濃度時(shí)，為ADI的十分之一。

根據(jù)歐盟確定地下水中相關(guān)代謝物的指南[11]，按以下步驟確定代謝物是否為相關(guān)代謝物：

(1)排除不關(guān)注的代謝物

CO2，無(wú)機(jī)物(重金屬除外)，含4個(gè)或以下CHNO原子且不含環(huán)氧、亞硝胺、腈等已知有毒性結(jié)構(gòu)的脂肪族化合物不需要進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。已知的不涉及毒理學(xué)或生態(tài)毒理學(xué)問(wèn)題，并且在相應(yīng)的環(huán)境介質(zhì)中以更高的濃度自然存在的物質(zhì)不需要進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

(2)量化地下水的潛在污染

使用FOCUS地下水模型和場(chǎng)景預(yù)測(cè)代謝物在地下水中的濃度。

(3)危害評(píng)估：確定相關(guān)代謝物

未全部通過(guò)以下三個(gè)階段篩查的，認(rèn)定為相關(guān)代謝物。全部通過(guò)三個(gè)階段篩查的，需按

(4)進(jìn)行進(jìn)一步評(píng)估

A代謝物的活性篩查?？衫脴?gòu)效關(guān)系模型，或用最大用量進(jìn)行活性篩查。代謝物的活性大于等于母體活性的50%，需要開(kāi)展進(jìn)一步試驗(yàn)。

B遺傳毒性篩查。開(kāi)展體外遺傳毒性試驗(yàn)(Ames試驗(yàn)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)和染色體畸變?cè)囼?yàn))，體外試驗(yàn)結(jié)果可疑(Equivocal)的，應(yīng)進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)。具有致突變性的代謝物為相關(guān)代謝物。

C毒性篩查。

a原藥急性或慢性毒性為“toxic”或“very toxic”，應(yīng)測(cè)定代謝物的急性或慢性毒性。

b具有生殖毒性的原藥，應(yīng)開(kāi)展試驗(yàn)或提供其他證據(jù)證明代謝物沒(méi)有生殖毒性。

c致癌性為“category 1”“ category 2”的原藥，代謝物為相關(guān)代謝物。致癌性為“category 3”的原藥，應(yīng)開(kāi)展試驗(yàn)或提供其他證據(jù)證明代謝物沒(méi)有致癌風(fēng)險(xiǎn)。

(5)暴露評(píng)估：關(guān)注閾值法

歐盟規(guī)定非相關(guān)代謝物和結(jié)構(gòu)不明確的代謝物在地下水中的預(yù)測(cè)濃度不應(yīng)高于0.75 μg/L，該濃度是基于0.02 μg/kg bw/day、每日飲水量2 L計(jì)算得出的。

(6)非相關(guān)代謝物的高級(jí)評(píng)估。對(duì)于地下水中預(yù)測(cè)濃度為0.75 μg/L～10 μg/L的非相關(guān)代謝物應(yīng)進(jìn)一步評(píng)估其對(duì)消費(fèi)者的影響。

1.6 土壤生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 歐盟對(duì)土壤生物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估仍按照陸生生態(tài)毒理指南[12]，但暴露評(píng)估部分已更新[13]。指南中規(guī)定，申請(qǐng)人可以使用所有已有的信息提供科學(xué)合理的評(píng)估。CO2，無(wú)機(jī)物(重金屬除外)，含4個(gè)或以下CHNO原子且不含環(huán)氧、亞硝胺、腈等已知有毒性結(jié)構(gòu)的脂肪族化合物不需要進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。特殊情況下需要考慮低于10%的代謝物，例如含有活性基團(tuán)。

2 美國(guó)對(duì)代謝物的環(huán)境資料要求和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

美國(guó)關(guān)于代謝物評(píng)估的指南[14]主要有兩部分內(nèi)容，一是如何確定關(guān)注殘留物(Residues of Concern)，二是關(guān)注殘留物的資料要求。

2.1 關(guān)注殘留物的確定

2.1.1 從環(huán)境歸趨數(shù)據(jù)確定關(guān)注殘留物 非主要代謝物可排除，以下情況除外：

——試驗(yàn)結(jié)束時(shí)接近10%AR；

——環(huán)境歸趨試驗(yàn)中沒(méi)有明顯降解；

——已知或推測(cè)具有生態(tài)毒理問(wèn)題，例如毒性高于母體，或形成兩種或兩種以上代謝物時(shí)其總和改變了用總殘留法的預(yù)測(cè)暴露量。

僅用于種子處理劑的有效成分，可不考慮光解代謝物。用于水體的農(nóng)藥不考慮水-沉積物系統(tǒng)試驗(yàn)中未檢測(cè)到的代謝物。田間和實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)中迅速降解的代謝物通?？膳懦Ｈ绻J(rèn)為提取方法不盡合理，未萃取殘留也可認(rèn)定為關(guān)注殘留物。

2.1.2 從生態(tài)毒理數(shù)據(jù)確定關(guān)注殘留物 代謝物毒性比母體低10倍以上時(shí)，不計(jì)入關(guān)注殘留物，除非代謝物具有持久性或有蓄積的可能。代謝物與母體的毒性和作用機(jī)理類(lèi)似時(shí)，用“總殘留物”方法評(píng)估。代謝物與母體作用機(jī)理類(lèi)似、毒性更高時(shí)，水生生物用殘留總和模型及相對(duì)效力因子評(píng)估代謝物的風(fēng)險(xiǎn)，陸生生物分別評(píng)估母體和代謝物的風(fēng)險(xiǎn)。代謝物與母體的作用機(jī)理不同時(shí)，分別評(píng)估代謝物和母體的風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.3 總殘留物評(píng)估方法 以土壤代謝試驗(yàn)中關(guān)注殘留物的總放射性計(jì)算DT50，取母體和代謝物土壤吸附koc的低值進(jìn)行暴露評(píng)估，以母體的生態(tài)毒性進(jìn)行效應(yīng)評(píng)估，并進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)表征。

2.2 資料要求 代謝物的資料要求根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的需要確定，通常不要求開(kāi)展全套生態(tài)毒理試驗(yàn)。通常需要提交代謝物的土壤吸附和水中分析方法。當(dāng)用總殘留方法時(shí)，不需要生態(tài)毒理資料；當(dāng)代謝物毒性高于母體或作用機(jī)理不同時(shí)，需提交代謝物的魚(yú)、溞、藻、鳥(niǎo)經(jīng)口(土壤代謝物)試驗(yàn)報(bào)告；風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估人員認(rèn)為需要時(shí)，提交搖蚊幼蟲(chóng)急性試驗(yàn)報(bào)告及其他慢性生態(tài)毒理試驗(yàn)報(bào)告。

3 我國(guó)對(duì)代謝物的環(huán)境資料要求和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

3.1 登記資料要求 《農(nóng)藥登記資料要求》(中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告 第2569號(hào)，2017)中明確規(guī)定農(nóng)藥的主要代謝物需提交土壤好氧降解、土壤吸附/淋溶、水和土壤中的分析方法及驗(yàn)證、魚(yú)類(lèi)急性毒性、大型溞急性活動(dòng)抑制、綠藻生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)資料。

3.2 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法 水生生態(tài)系統(tǒng)、地下水和土壤生物部分涉及對(duì)代謝物的評(píng)估。其中土壤生物部分僅規(guī)定“當(dāng)農(nóng)藥存在主要代謝物，且主要代謝物對(duì)土壤生物的毒性數(shù)據(jù)可獲得時(shí)，還應(yīng)對(duì)主要代謝物開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估”。

3.2.1 水生生態(tài)系統(tǒng) 《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南 第2部分：水生生態(tài)系統(tǒng)》(NY/T 2882.2-2016)對(duì)代謝物的評(píng)估方法為：

①存在主要代謝物時(shí)，應(yīng)逐個(gè)分析主要代謝物對(duì)魚(yú)、溞的急性毒性和對(duì)藻的毒性，但不存在顯著的暴露可能性的情況除外；

②原藥資料表明對(duì)某一生物分類(lèi)敏感(100倍)，可選擇最敏感物種進(jìn)行代謝物的試驗(yàn)；

③某一主要代謝物對(duì)魚(yú)、溞的急性毒性和對(duì)藻的毒性與母體相當(dāng)(2倍以內(nèi))或高于母體時(shí)，還需進(jìn)一步分析該代謝物對(duì)其他水生生物的毒性；

④某一主要代謝物對(duì)魚(yú)、溞的急性毒性和對(duì)藻的毒性低于母體或與母體相當(dāng)時(shí)，效應(yīng)分析中可以使用母體的慢性毒性數(shù)據(jù)代替代謝物的慢性毒性數(shù)據(jù)，也可以使用該代謝物的慢性毒性數(shù)據(jù)；

⑤當(dāng)基于急性毒性數(shù)據(jù)，農(nóng)藥母體的毒性和風(fēng)險(xiǎn)都較低時(shí)(>100倍)，則無(wú)需進(jìn)行代謝物的慢性毒性評(píng)估；

⑥主要代謝物為CO2、腐植酸等環(huán)境中廣泛存在的物質(zhì)(重金屬除外)，認(rèn)為該代謝物對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的風(fēng)險(xiǎn)可忽略不計(jì)。

3.2.2 地下水 《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南 第6部分：地下水》(NY/T 2882.6-2016)中規(guī)定應(yīng)對(duì)母體和相關(guān)代謝物開(kāi)展評(píng)估。相關(guān)代謝物的定義為“對(duì)人類(lèi)具有顯著毒性的主要代謝物”。 當(dāng)農(nóng)藥存在相關(guān)代謝物時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)商值為農(nóng)藥母體和相關(guān)代謝物的風(fēng)險(xiǎn)商值之和。

4 討論和建議

4.1 歐盟和美國(guó)農(nóng)藥代謝物管理的差異 歐盟和美國(guó)在農(nóng)藥代謝物環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)管理方面的差異較大。歐盟的要求是在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上分階段開(kāi)展代謝物的生態(tài)毒性試驗(yàn)以滿足風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的要求，但代謝物通常會(huì)開(kāi)展土壤好氧降解速率、土壤吸附、魚(yú)急性毒性、溞急性毒性、綠藻生長(zhǎng)抑制、蚯蚓繁殖和土壤微生物氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。歐盟也在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法中規(guī)定了代謝物的評(píng)估方法，其中水生生態(tài)系統(tǒng)、鳥(niǎo)類(lèi)、蜜蜂、地下水部分的規(guī)定較完善，而土壤生物部分的規(guī)定較粗糙。在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，通常單獨(dú)評(píng)估代謝物的風(fēng)險(xiǎn)，與母體毒性相當(dāng)?shù)拇x物還需要考慮與母體的協(xié)同作用。

美國(guó)更傾向于用總殘留物的方法評(píng)估母體和代謝物的風(fēng)險(xiǎn)。盡管美國(guó)規(guī)定當(dāng)代謝物毒性高于母體或作用機(jī)理不同時(shí)需提交代謝物的試驗(yàn)報(bào)告，但不開(kāi)展代謝物的毒性試驗(yàn)很難判斷代謝物毒性是否高于母體，更難以確定代謝物的作用機(jī)理與母體是否相同。也已有個(gè)別代謝物毒性顯著高于母體、以總殘留物評(píng)估方法無(wú)法涵蓋代謝物風(fēng)險(xiǎn)的農(nóng)藥已在美國(guó)取得登記。

4.2 我國(guó)現(xiàn)行代謝物資料要求和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法存在的問(wèn)題和改進(jìn)措施建議 與歐盟相比，我國(guó)對(duì)代謝物的要求較低，例如未要求代謝物開(kāi)展土壤生物的毒性試驗(yàn)，鳥(niǎo)類(lèi)、蜜蜂、土壤生物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南中也未要求評(píng)估代謝物的風(fēng)險(xiǎn)。此外，我國(guó)資料要求中對(duì)代謝物統(tǒng)一要求提供魚(yú)、溞、藻毒性試驗(yàn)，未考慮原藥對(duì)不同生物分類(lèi)毒性差異的情況。

下一步建議從以下方面進(jìn)一步完善農(nóng)藥登記資料要求和代謝物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法：

(1)修訂完善《農(nóng)藥登記資料要求》，以滿足環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需要作為代謝物需要提供哪些資料的判定標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于原藥對(duì)水生生物不同生物分類(lèi)存在顯著毒性差異的，代謝物可以僅開(kāi)展最敏感生物分類(lèi)的毒性試驗(yàn)。對(duì)于不能以母體慢性毒性數(shù)據(jù)評(píng)估或使用母體慢性毒性數(shù)據(jù)評(píng)估表明風(fēng)險(xiǎn)不可接受的代謝物，還應(yīng)提供代謝物的慢性生態(tài)毒性試驗(yàn)資料。

(2)修訂完善農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法。綜合考慮環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需要和我國(guó)實(shí)際情況，在條件成熟時(shí)，修訂《農(nóng)藥登記 環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。在水生生態(tài)系統(tǒng)、地下水、土壤生物部分完善代謝物的評(píng)估方法和評(píng)估流程，在鳥(niǎo)類(lèi)、蜜蜂、家蠶評(píng)估方法中引入代謝物的評(píng)估方法。