黃凌 李楓燁 浦月霞 譚福洋 蘭艷妮 劉艷偉 安春梅 蒙藝英 黃玲莉 黃揚玉

(1. 廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學研究院, 南寧 530007; 2. 廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術推廣站, 南寧 530007)

蠶種出庫催青后發(fā)育至轉青卵,經黑暗保護1 d,翌日感光即可收蟻[1]。在蠶業(yè)生產上往往會因為氣候異常等因素,導致蠶種出庫浸酸后又不能按原計劃收蟻,此時就需要將蠶種放回冷庫冷藏抑制胚胎發(fā)育。通常對蠶卵的冷藏抑制處理適宜在胚胎發(fā)育早期進行。已有的研究表明,在胚胎發(fā)育至丙期或丁期時將蠶卵入庫冷藏抑制比較合適,當胚胎繼續(xù)發(fā)育至戊期后,則不宜再次入庫冷藏,僅可以在轉青期轉入冷庫抑制胚胎發(fā)育[2]。但是,目前業(yè)內對冷藏抑制時間的長短尚有爭議[3-14]。

“兩廣二號”是廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術推廣站與廣東農業(yè)科學院蠶業(yè)研究所合作育成并組配的一對夏秋用強健性家蠶雜交組合,在20世紀90年代曾是兩廣蠶區(qū)的當家蠶品種[15]?！跋鏁煛笔莾蓮V二號的親本品種之一,為了探究蠶卵發(fā)育至轉青期后可以進行冷藏抑制的時間,我們于2022年、2023年分2個批次對該品種的轉青卵進行冷藏抑制試驗。

1 材料與方法

1.1 供試蠶種

供試蠶種為家蠶品種“湘暉”的框制種,由廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術推廣站提供。

1.2 試驗時間

試驗于2022年、2023年分2個批次完成。第1批次于2022年5月中旬制種,當年8月10日出庫催青,18日蠶卵轉青,8月20日至8月30日陸續(xù)收蟻。第2批次于2022年9月下旬制種,次年2023年3月14日出庫浸酸,3月22日蠶卵轉青,3月24日至4月3日陸續(xù)收蟻。

1.3 試驗方法

蠶種出庫后,每天上午9:00解剖胚子,觀察胚子發(fā)育階段,當胚子發(fā)育至丙2～戊3期時,保持催青環(huán)境條件為溫度24.0～24.5 ℃、相對濕度75%～80%,并以自然光線感光;當胚子發(fā)育至戊3～己5期時,保持催青環(huán)境條件為溫度27～28 ℃、相對濕度80%～85%,且每日感光18 h[1]。當95%以上蠶卵發(fā)育至轉青期時,對照組(Q0組)黑暗保護1 d,第2天感光收蟻,5個試驗組則進冷庫(溫度5 ℃,相對濕度80%～90%)分別抑制處理2 d(Q1組)、4 d(Q2組)、6 d(Q3組)、8 d(Q4組)和10 d(Q5組)后再次轉入催青室,黑暗保護1 d,第2天感光收蟻。各試驗組進入冷藏抑制處理前和結束冷藏抑制時,都要經過中間溫度(15～16 ℃)保護3～5 h,以防止溫度激變對胚胎造成不良影響。各試驗組收蟻后調查一日孵化率。

1.4 孵化率調查法

用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析。

2 結果與分析

2.1 不同冷藏抑制處理時間的蠶卵一日孵化率調查

調查結果見表1。

表1 家蠶品種“湘暉”轉青卵不同冷藏抑制處理組的一日孵化率比較

由表1可知,隨著“湘暉”轉青卵冷藏抑制時間的增加,一日孵化率均值大致呈下降趨勢,對照組轉青卵按催青標準直接感光孵化的一日孵化率最高,平均值為95.38%。

2.2 一日孵化率調查數(shù)據(jù)處理與檢驗分析

由于是框制種,母蛾均獨立產卵,故數(shù)據(jù)的獨立性可以保證。但是,本試驗調查各處理組蠶卵的一日孵化率不完全滿足正態(tài)性或方差齊性(數(shù)據(jù)略),故先對一日孵化率做平方根反正弦轉換,得到轉換值。用Shapiro-Wilk[17]檢驗轉換值的正態(tài)性顯示各處理組轉換值的顯著性均>0.05,差異不顯著,可認為各處理轉換值服從正態(tài)分布(表2)。

表2 各試驗組蠶卵一日孵化率的平方根反正弦轉換值的正態(tài)檢驗

用Levene[18]檢驗2個批次蠶卵一日孵化率轉換值的方差齊性,由表3可知,2個批次轉換值的萊文統(tǒng)計值顯著性>0.05,差異不顯著,可認為轉換值滿足方差齊性要求,故可以進一步對轉換值做單因素方差分析。

表3 2個試驗批次蠶卵一日孵化率轉換值的方差齊性檢驗

2.3 一日孵化率調查數(shù)據(jù)轉換值的方差分析

用SPSS軟件進行2個試驗批次蠶卵一日孵化率調查數(shù)據(jù)轉換值的方差分析,結果見表4,顯著性<0.01,差異極顯著,說明2個試驗批次各處理組蠶卵一日孵化率調查數(shù)據(jù)轉換值的均值不完全相同,間接提示“湘暉”2個試驗批次各處理組的一日孵化率均值是不完全相同的。因此,進一步用Scheffe[18]對2022年和2023年試驗批次各處理組的轉換值進行兩兩比較,結果見表5。

表4 2個試驗批次蠶卵一日孵化率轉換值的方差分析

表5 2個試驗批次蠶卵一日孵化率各處理組轉換值的多重比較

2022年第1批次蠶卵一日孵化率的轉換值Q0～Q4試驗組間無顯著差異(α=0.05,P>0.05),但各組與Q5組間均差異顯著(α=0.05,P<0.05);2023年第2批次蠶卵一日孵化率的轉換值Q0(對照組)與Q1～Q5試驗組的差異極顯著(α=0.05,P<0.01)。該結果間接地說明第1個試驗批次“湘暉”的轉青卵冷藏抑制10 d后,一日孵化率與正常催青孵化的蠶卵有顯著差異,但冷藏抑制時間在8 d之內一日孵化率與對照組沒有顯著差異;2023年第2個試驗批次“湘暉”的轉青卵正常催青孵化,其一日孵化率與5個冷藏抑制組均有極顯著差異。

3 討論

本試驗結果顯示,家蠶品種“湘暉”轉青卵冷藏抑制處理不同時間導致一日孵化率有一定差異,并且2個批次試驗所對應處理組的結果又略有不同:2022年第1批次試驗對照組的一日孵化率與抑制8 d之內的Q1～Q4處理組無顯著差異,而次年第2批次試驗對照組的一日孵化率與各抑制處理組(Q1～Q5,分別抑制2、4、6、8、10 d)的差異極顯著,提示可能還有其他因素影響“湘暉”轉青卵的一日孵化率,比如蠶卵本身的營養(yǎng)狀況,催青前冷藏時間等[19-21]。一日孵化率僅是蠶卵健康性的評價指標之一,從本試驗的結果看,2022年第1批次的試驗中,“湘暉”轉青卵抑制10 d后的一日孵化率為92%左右,但在2023年第2批次的試驗中,“湘暉”轉青卵抑制8 d后的一日孵化率已經<92%,這在生產上已經不可取了,并且轉青期冷藏抑制會影響胚子的健康性,造成蠶兒發(fā)育不齊,繭形大小不一等[19-20,22]。綜上分析認為:若非必要,不應對家蠶品種“湘暉”的轉青卵進行冷藏抑制處理,如若遭遇不良氣候因素影響需要延遲收蟻,則對其轉青卵進行冷藏抑制處理的時間應控制在1周內為宜。