張 麗，蒙炳超，黃瑞芬，汪 勇

（1.貴州省黔南布依族苗族自治州羅甸縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)，貴州黔南 550100；2.黔南州養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中心，貴州都勻 558000；3.貴州省黔南布依族苗族自治州羅甸縣沫陽(yáng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，貴州黔南 550100；4.貴州省黔南布依族苗族自治州羅甸縣養(yǎng)殖發(fā)展中心，貴州黔南 550100）

豬傳染性胃腸炎（Transmissible Gastroenteritis，TGE）是一種由豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible Gastroenteritis Virus，TGEV）感染引起的高度傳染性、致死性腸道致病性疾病。不同生長(zhǎng)階段、不同品種和性別的豬群都對(duì)其易感，特別是新生仔豬，被感染后死亡率極高，將近100%；該病毒主要攻擊豬只的腸道黏膜，引發(fā)食欲不振、水樣腹瀉和嘔吐，最終可因極度脫水而死亡。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查表明，TGEV多發(fā)于秋冬交匯和冬春交匯季節(jié)，炎熱的夏季相對(duì)較少，環(huán)境應(yīng)激加劇疾病的發(fā)生率。有時(shí)可與其他腹瀉病毒混合感染，引起各日齡仔豬病毒性腸炎和嚴(yán)重腹瀉，嚴(yán)重影響?zhàn)B殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。

黔南地區(qū)地處東亞季風(fēng)區(qū)，四季冷暖變化很大，呈現(xiàn)驟冷驟熱的高原天氣特征，對(duì)豬群腸道應(yīng)激，特別是仔豬應(yīng)激影響較大，極易造成TGEV的流行，嚴(yán)重威脅貴州養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展，為了探究貴州黔南地區(qū)豬傳染性胃腸炎的具體流行情況，本研究通過血清學(xué)調(diào)查方法對(duì)TGE 的流行現(xiàn)狀進(jìn)行分析，為制定有效的預(yù)防措施提供依據(jù)，對(duì)促進(jìn)貴州養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。

1 試驗(yàn)材料

1.1 主要儀器設(shè)備

恒溫生化培養(yǎng)箱（BXP-130，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）、高速離心機(jī)（JW2006H，安徽嘉文儀器裝備有限公司）、微量振蕩器（DH400，杭州瑞誠(chéng)儀器有限公司）、移液器（4642070，賽默飛世爾科技公司）、Multiskan FC 酶標(biāo)儀（賽默飛世爾科技公司）、超凈工作臺(tái)（SW-1，廣州市康恒儀器有限公司）。

1.2 主要試劑

豬傳染性胃腸炎病毒阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自青島瑞爾唯特生物技術(shù)有限公司。

1.3 樣品采集

本實(shí)驗(yàn)2020—2022 年采集貴州黔南地區(qū)6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，總共采集600 份血清，用離心機(jī)5 000 r/min 離心3 min，取上清液，于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?，?20 ℃冰箱保存，解凍后使用（見表1）。

表1 樣品采集情況（份）

2 試驗(yàn)方法

2.1 操作步驟

依據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行操作。簡(jiǎn)要步驟如下：取出反應(yīng)板，反應(yīng)孔分別加50 μL 待檢血清樣品和50 μL 稀釋液，封膜置37 ℃恒溫培養(yǎng)箱溫育60 min。棄液體，吸水紙拍干，洗板，加200 μL 洗滌液靜置1 min 后拍干，重復(fù)3 次；結(jié)束后，每孔加100 μL 結(jié)合物，封板置37 ℃恒溫培養(yǎng)箱溫育30 min，重復(fù)6 次；洗板結(jié)束后，每孔加100 μL 底物溶液，置室溫避光孵育10 min，每孔加100 μL 終止液，5 min 內(nèi)讀取OD450nm值。

2.2 結(jié)果判讀

（1）有效結(jié)果：當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照孔OD450nm值＜0.3，且陰性對(duì)照孔OD450nm值＞0.37 時(shí)，結(jié)果為有效結(jié)果。

（2）臨界值計(jì)算：臨界值（+）=陰性對(duì)照孔OD450nm值×0.6；臨界值（+）=陰性對(duì)照孔OD450nm值×0.7）。

（3）結(jié)果判定：陽(yáng)性，若樣品OD450nm值≤臨界值（+），則樣品為陽(yáng)性；陰性，若樣品OD450nm值＞臨界值（+），則樣品為陰性；可疑，若樣品OD450nm值在兩個(gè)臨界值之間，則為可疑樣品，要重新檢測(cè)。

3 結(jié)果

3.1 貴州黔南部分地區(qū)豬傳染性胃腸炎的流行情況

調(diào)查結(jié)果顯示，該地區(qū)豬群感染TGE 陽(yáng)性率為7.67%，其中規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性率為5.0%，散養(yǎng)戶陽(yáng)性率為10.33%；其中仔豬陽(yáng)性感染率最高11.25%，陽(yáng)性率最低為后備母豬5.0%；經(jīng)SPSS25.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯示規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶陽(yáng)性率差異顯著（P ＜0.05）。見表2。

表2 貴州黔南部分地區(qū)豬傳染性胃腸炎的流行情況

3.2 貴州黔南部分地區(qū)規(guī)模場(chǎng)豬傳染性胃腸炎的流行情況

從貴州黔南6 縣的規(guī)模場(chǎng)抽取一定數(shù)量的后備母豬、育肥豬和仔豬的血清，每個(gè)縣共50 份血清作為待檢樣品進(jìn)行豬傳染性胃腸炎的流行情況分析，不同縣抽取后備母豬、育肥豬和仔豬的血清份數(shù)無差別，均為15、15 和20。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果顯示，TGE 總陽(yáng)性率最低的是甕安縣為2.0%，最高為惠水縣8.0%，規(guī)模場(chǎng)的平均總陽(yáng)性率為5.0%；經(jīng)SPSS25.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯示各縣規(guī)模場(chǎng)感染TGE 總陽(yáng)性率差異不顯著（P ＞0.05）。見表3。

表3 貴州黔南部分地區(qū)規(guī)模場(chǎng)豬傳染性胃腸炎的流行情況

3.3 貴州黔南部分地區(qū)散養(yǎng)戶豬傳染性胃腸炎的流行情況

從貴州黔南6 縣的散養(yǎng)戶抽取一定數(shù)量的后備母豬、育肥豬和仔豬的血清，每個(gè)縣共50 份血清作為待檢樣品進(jìn)行豬傳染性胃腸炎的流行情況分析，不同縣抽取后備母豬、育肥豬和仔豬的血清份數(shù)無差別，均為15、15 和20。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果顯示，TGE 總陽(yáng)性率最低的是龍里縣和長(zhǎng)順縣，均為2.0%；最高為甕安縣和惠水縣，均為14.0%；散養(yǎng)戶的平均總陽(yáng)性率為10.33%，經(jīng)SPSS25.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯示各縣散養(yǎng)戶感染TGE 總陽(yáng)性率差異顯著（P ＜0.05）。見表4。

表4 貴州黔南部分地區(qū)散養(yǎng)戶豬傳染性胃腸炎的流行情況

3.4 不同生長(zhǎng)階段感染豬傳染性胃腸炎的情況

不同生長(zhǎng)階段豬群的機(jī)體性能不同，飼養(yǎng)管理方式也有所不同，可能導(dǎo)致豬傳染性胃腸炎感染的情況也有所不同。通過試驗(yàn)結(jié)果分析，在生長(zhǎng)日齡越小的豬群TGE 的感染率越高，仔豬的總陽(yáng)性率達(dá)10.33%，后備母豬和育肥豬的TGE 總陽(yáng)性率分別為5.0%和5.56%，3 個(gè)不同生長(zhǎng)階段的豬群感染TGE的總陽(yáng)性率為7.67；經(jīng)SPSS25.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯示不同生長(zhǎng)階段豬群感染TGE 總陽(yáng)性率差異顯著（P ＜0.05）。見表5。

表5 不同生長(zhǎng)階段感染豬傳染性胃腸炎的流行情況

4 討論

近年來，在非洲豬瘟疫情之后，養(yǎng)豬行業(yè)又重新蓬勃發(fā)展，同時(shí)伴隨著生物安全防控設(shè)備、疫苗以及防控措施的提升，豬群感染急性傳染病情況得到較好地改善，但豬群傳染性胃腸炎作為一種相對(duì)嚴(yán)重的急性腸道型傳染病，依然是防控的主要對(duì)象之一，預(yù)防和治療豬傳染性胃腸炎是養(yǎng)殖業(yè)主要關(guān)注的對(duì)象之一。

通過對(duì)600 份血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析顯示，地區(qū)豬群感染TGE 陽(yáng)性率為7.67%，規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶陽(yáng)性率差異顯著，追蹤原因，散養(yǎng)戶在豬場(chǎng)生物安全管理上比較欠缺，養(yǎng)殖環(huán)境相對(duì)密集，與外界的接觸相對(duì)較高，從而造成病原體的有利傳播；不同生長(zhǎng)階段豬群的機(jī)體性能不同，飼養(yǎng)管理方式也有所不同，可能導(dǎo)致豬傳染性胃腸炎感染的情況也有所不同。在生長(zhǎng)日齡越小的豬群TGE 的感染率越高，仔豬的總陽(yáng)性率達(dá)10.33%，后備母豬和育肥豬的TGE 總陽(yáng)性率分別為5.0%和5.56%，不同生長(zhǎng)階段感染情況不同，也可能與環(huán)境和養(yǎng)殖規(guī)模有一定關(guān)系。

貴州黔南地區(qū)依托自然生態(tài)資源，大力發(fā)展生態(tài)畜牧業(yè)，生豬產(chǎn)業(yè)作為黔南農(nóng)業(yè)第一主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，發(fā)展增速至貴州省排名前列，目前規(guī)模化率位居全省第一。黔南地區(qū)地處東亞季風(fēng)區(qū)，四季冷暖變化很大，呈現(xiàn)驟冷驟熱的高原天氣特征，對(duì)豬群腸道應(yīng)激，特別是仔豬應(yīng)激影響較大。開展TGE 流行調(diào)查及分析，為制定有效的預(yù)防措施提供依據(jù)，促進(jìn)貴州養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。