李夏瑩 田永路 韋玉生

(1.北京大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,北京 100871)(2.北京大學(xué) 心理與認(rèn)知科學(xué)學(xué)院,北京 100871)

樹(shù)鼩是我國(guó)正在開(kāi)發(fā)的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新品種,隨著樹(shù)鼩應(yīng)用范圍越來(lái)越廣泛,實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩的標(biāo)準(zhǔn)化也越來(lái)越重要,而實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩微生物質(zhì)量的穩(wěn)定會(huì)有效的保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性、一致性和可重復(fù)性。

微生物學(xué)等級(jí)監(jiān)測(cè)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化(質(zhì)量控制)的重要組成部分。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外也有部分關(guān)于樹(shù)鼩微生物學(xué)的相關(guān)研究報(bào)道。2010年11月16日云南省發(fā)布了《實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩第1部分:微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》的地方標(biāo)準(zhǔn),2017年5月18日中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)發(fā)布《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物樹(shù)鼩微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。本文調(diào)研國(guó)內(nèi)外樹(shù)鼩感染微生物的相關(guān)文獻(xiàn),希望為實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩微生物學(xué)等級(jí)監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供有益的參考。

1 樹(shù)鼩微生物感染研究現(xiàn)狀

對(duì)于感染樹(shù)鼩的微生物的研究,主要涉及真菌、細(xì)菌、病毒和螺旋體四大種類。現(xiàn)在分別就不同的種類進(jìn)行詳細(xì)的闡述。

1.1 真菌

查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),野生樹(shù)鼩可感染以下真菌:鏈格孢屬、曲霉菌屬、毛殼屬、鐮孢菌屬、小孢子菌屬、毛霉菌屬、青霉菌屬、根霉屬、帚霉屬、干朽菌屬、Byssomeruliuscorium、Didymellaceae、leptosphaerulina,人工飼養(yǎng)樹(shù)鼩皮膚發(fā)現(xiàn)了毛霉菌屬、枝孢菌屬、局限曲霉屬真菌的感染。所有感染樹(shù)鼩的真菌中以青霉菌和毛霉菌(卷枝毛霉和多枝總狀毛霉)檢出率最高,攜帶率分別為50.8%和37.7%,詳見(jiàn)表1。

1.2 細(xì)菌

可自然感染樹(shù)鼩的細(xì)菌包括變形桿菌、嗜血桿菌、葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門(mén)氏菌、彎曲桿菌、鏈球菌、大腸埃希菌、沙雷菌、枯草桿菌、支原體?？蓪?shí)驗(yàn)性感染樹(shù)鼩的細(xì)菌有結(jié)核桿菌、螺桿菌。感染率較高的細(xì)菌是變形桿菌(100%)、表皮葡萄球菌(100%)、鏈球菌(100%)、大腸埃希菌(100%)、支原體(93.7%)、金黃色葡萄球菌(83.6%)。野生樹(shù)鼩和人工飼養(yǎng)樹(shù)鼩均會(huì)感染的有變形桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌,詳見(jiàn)表2。

表2 感染樹(shù)鼩細(xì)菌匯總Table 2 Summary of bacteria infected with tree shrews

1.3 病毒

可自然感染樹(shù)鼩的病毒包括皰癥病毒、肝炎病毒、柯薩奇病毒、輪狀病毒、瘤病毒,實(shí)驗(yàn)性感染樹(shù)鼩的病毒有腺病毒、基孔肯雅病毒。也有研究報(bào)道一些樹(shù)鼩特異性的病毒,如樹(shù)鼩細(xì)環(huán)病毒、樹(shù)鼩腺病毒、樹(shù)鼩戊型肝炎病毒、樹(shù)鼩副黏病毒、樹(shù)鼩肝炎病毒、樹(shù)鼩肺炎病毒、樹(shù)鼩細(xì)小病毒、樹(shù)鼩呼腸孤病毒。病毒中感染較高的是腺病毒(61.8%)、皰疹病毒(36.7%)、樹(shù)鼩細(xì)小病毒(69.23%)、樹(shù)鼩呼腸孤病毒(56%)、樹(shù)鼩腺病毒(47.1%)、樹(shù)鼩肝炎病毒(29.31%)、樹(shù)鼩副黏病毒(23.08%)。野生樹(shù)鼩和人工飼養(yǎng)樹(shù)鼩均會(huì)感染的肝炎病毒、腺病毒,詳見(jiàn)表3。

表3 感染樹(shù)鼩病毒匯總Table 3 Summary of viruses infected with tree shrews

表4 感染樹(shù)鼩的螺旋體匯總Table 4 Summary of spirochetes infected tree shrews

1.4 螺旋體

可自然感染樹(shù)鼩的螺旋體有伯氏疏螺旋體、回歸熱螺旋體、鉤端螺旋體。其中感染較高的是伯氏疏螺旋體(63.33%)、 回歸熱螺旋體(63.33%),詳見(jiàn)表 4。

2 現(xiàn)有樹(shù)鼩微生物標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比分析

現(xiàn)有樹(shù)鼩標(biāo)準(zhǔn)為云南省質(zhì)量監(jiān)督局2010 年 11 月 16 日發(fā)布,2011 年3 月 1 日實(shí)施的DB53/T 328.1—2010 《實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩 第 1 部分:微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》和中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì) 2017 年 5 月 18 日發(fā)布,2017 年 5 月 18 日實(shí)施的 T/CALAS8-2017《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物樹(shù)鼩微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。無(wú)國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)。

云南的地方標(biāo)準(zhǔn)和學(xué)會(huì)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)都將監(jiān)測(cè)等級(jí)分為了普通級(jí)和無(wú)特定病原體級(jí)(SFP級(jí)),由于在制定時(shí)間上的差異,二者在監(jiān)測(cè)指標(biāo)上有所差異(表5)。在普通級(jí)樹(shù)鼩的監(jiān)測(cè)指標(biāo)上差異在于地標(biāo)中把結(jié)核桿菌列為必檢,團(tuán)標(biāo)把志賀菌列為必檢。根據(jù)查詢文獻(xiàn)可知,報(bào)道樹(shù)鼩感染結(jié)核桿菌的文獻(xiàn)較少,且僅為實(shí)驗(yàn)性感染,而志賀菌可以自然感染樹(shù)鼩,且是常見(jiàn)的人畜共患病的病原,故將志賀菌列為必檢更為合理。在SPF級(jí)樹(shù)鼩的監(jiān)測(cè)指標(biāo)差異較大,團(tuán)標(biāo)和地標(biāo)中設(shè)置的必檢參數(shù)僅有肺炎鏈球菌重疊,必要時(shí)監(jiān)測(cè)參數(shù)有腺病毒和金黃色葡萄球菌重疊。

表5 現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比Table 5 Comparison of existing standards of laboratory tree shrew

3 結(jié)語(yǔ)

現(xiàn)行的樹(shù)鼩地方標(biāo)準(zhǔn)和團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)為樹(shù)鼩人工飼養(yǎng)繁育和科學(xué)研究提供了技術(shù)保障,標(biāo)志著樹(shù)鼩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究取得了階段性進(jìn)展。由于樹(shù)鼩的諸多生物學(xué)特性與人類有高度的同源性或相似性,加之與非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物比較,其具有體型小、繁殖快、飼養(yǎng)和研究成本低等優(yōu)勢(shì),未來(lái)利用樹(shù)鼩開(kāi)展人類疾病動(dòng)物模型創(chuàng)建、揭示疾病的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制和藥物篩選與評(píng)價(jià)將發(fā)揮重要和積極的作用。本文全面的梳理了樹(shù)鼩自然感染和實(shí)驗(yàn)性感染的微生物的情況,期望為樹(shù)鼩的正常飼養(yǎng)繁殖和微生物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)化提供依據(jù)。此外,希望以此文為契機(jī),讓更多的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理部門(mén)及科技工作者更加重視樹(shù)鼩作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新資源對(duì)生命科學(xué)和生物醫(yī)藥研究的重要性和必要性,盡快完善樹(shù)鼩的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和監(jiān)測(cè)體系,為各省市核發(fā)樹(shù)鼩使用許可證提供技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。