戚顯麗，毛立英

諸暨市婦幼保健院兒科，浙江諸暨 311800

支氣管哮喘是兒童時(shí)期的常見病，流行病學(xué)調(diào)查顯示，近20年我國兒童支氣管哮喘發(fā)病率呈明顯升高趨勢[1]?！吨夤芟嗅t(yī)診療專家共識（2012）》指出，支氣管哮喘是一種以伴可變氣流受阻及氣道高反應(yīng)性為特征的呼吸道慢性炎癥。支氣管哮喘發(fā)病過程中有多種免疫因子、免疫細(xì)胞參與[2]。研究表明，補(bǔ)體作為一種介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)的蛋白質(zhì)系統(tǒng)，其激活可引起并加重支氣管哮喘患兒呼吸道的炎癥反應(yīng)，在上述過程中T淋巴細(xì)胞也扮演重要角色，尤其是CD3+、CD4+細(xì)胞亞群失調(diào)[3]。此外，在關(guān)于兒童支氣管肺炎發(fā)病機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)，免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）水平的改變與肺炎嚴(yán)重程度存在高度相關(guān)性[4]。本研究以支氣管哮喘急性發(fā)作期患兒為研究對象，探討兒童支氣管哮喘急性發(fā)作期免疫相關(guān)指標(biāo)的變化情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2020年1月至2022年7月諸暨市婦幼保健院兒科收治的133例支氣管哮喘患兒的臨床資料，其中男83例，女50例，年齡3～15歲，平均（10.22±4.15）歲，病程2～6年，平均（4.11±0.98）年。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》[5]支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并有喘息、咳嗽、胸悶、氣促等非特異性呼吸道癥狀；②年齡≤18歲；③入組前兩周未使用激素、白三烯受體抑制劑治療；④家長簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他慢性呼吸道疾病、結(jié)核感染、支氣管異物、先天性心臟病者；②營養(yǎng)不良者；③合并其他免疫性疾病者；④嚴(yán)重肝、腎功能障礙者。根據(jù)患者入院時(shí)或門診就診時(shí)是否處于急性發(fā)作期分為急性期組（85例）和穩(wěn)定期組（48例）。兩組患兒的性別、年齡、病程、臨床癥狀等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究的急性發(fā)作期定義：喘息、氣急、胸悶或咳嗽等癥狀突然發(fā)生，或原有癥狀加重，伴有呼氣流量降低；穩(wěn)定期定義：每周均不同頻度和（或）不同程度地出現(xiàn)喘息、氣促、胸悶、咳嗽等癥狀[6]。本研究經(jīng)諸暨市婦幼保健院倫理委員會審批通過（倫理審批號：20190812）。

1.2 方法

所有患兒在入院或就診時(shí)采集靜脈血5ml，4℃條件下使用日本TOMY高速離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/min離心15min，離心后取上層血清，使用德國Steatec公司生產(chǎn)的Lumino發(fā)光免疫分析儀，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（檢測試劑購自深圳市生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）檢測患兒的血清IgG、IgM及B因子水平；采用免疫比濁法（檢測試劑購自深圳市生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）測定補(bǔ)體C3、C4水平。采用Epics-XL Ⅱ流式細(xì)胞儀（美國Beckman Coulter公司）雙標(biāo)法測定T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD8+比例，計(jì)算CD4+/CD8+比值。急性期組患兒根據(jù)《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》進(jìn)行嚴(yán)重度分級[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布的以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M（Q1，Q3）]表示，比較采用U檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，組間比較采用單因素方差分析；相關(guān)性分析采用Spearman線性方程；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒的Ig、B因子及補(bǔ)體水平比較

急性期組患兒的IgG、B因子、IgM、C3及C4水平低于穩(wěn)定期組患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

表1 兩組患兒的Ig、B因子及補(bǔ)體水平比較（±s）

表1 兩組患兒的Ig、B因子及補(bǔ)體水平比較（±s）

組別 IgG（g/L） IgM（g/L） B因子（mg/L） C3（g/L） C4（g/L）穩(wěn)定期組（n=48） 9.37±3.06 1.91±0.63 220.14±70.88 1.35±0.31 0.33±0.07急性期組（n=85） 7.13±2.12 1.57±0.51 95.91±25.49 0.97±0.25 0.24±0.06 t 4.495 3.387 11.707 7.708 7.817 P <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001

2.2 兩組患兒的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

急性期組患兒的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于穩(wěn)定期組患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

表2 兩組患兒的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

表2 兩組患兒的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較（±s）

組別 CD3+（%） CD4+（%） CD4+/CD8+穩(wěn)定期組（n=48） 75.69±9.05 56.71±14.33 1.59±0.16急性期組（n=85） 65.34±6.83 45.82±15.04 1.41±0.17 t 7.444 4.078 5.988 P <0.001 <0.001 <0.001

2.3 不同嚴(yán)重程度的急性期患兒的相關(guān)指標(biāo)比較

隨著哮喘急性發(fā)作嚴(yán)重程度分級的提高，不同分級患兒之間的IgM、B因子、C3、C4、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平逐漸降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；IgG水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表3。

表3 不同嚴(yán)重程度的急性期患兒的相關(guān)指標(biāo)比較（±s）

表3 不同嚴(yán)重程度的急性期患兒的相關(guān)指標(biāo)比較（±s）

相關(guān)指標(biāo) 輕度（n=30） 中度（n=35） 重度（n=12） 危重度（n=8） F P IgG（g/L） 9.15±3.24 9.33±2.19 9.42±3.58 9.36±3.29 1.342 0.098 IgM（g/L） 1.62±0.23 1.46±0.33 1.39±0.28 1.28±0.40 11.095 <0.001 B因子（mg/L） 310.47±66.82 255.17±53.27 230.44±56.89 186.25±33.71 23.182 <0.001 C3（g/L） 1.14±0.22 1.02±0.31 0.85±0.13 0.68±0.15 10.374 <0.001 C4（g/L） 0.30±0.09 0.23±0.08 0.19±0.05 0.16±0.06 13.462 <0.001 CD3+（%） 71.22±6.84 63.28±5.90 58.73±6.49 50.28±6.39 20.485 <0.001 CD4+（%） 52.24±11.29 44.38±10.77 37.45±9.31 33.27±7.56 18.472 <0.001 CD4+/CD8+ 1.50±0.22 1.40±0.24 1.36±0.18 1.19±0.47 8.945 <0.001

2.4 支氣管哮喘急性發(fā)作期嚴(yán)重程度與Ig、補(bǔ)體及T淋巴細(xì)胞亞群相關(guān)性分析

Spearman線性相關(guān)性分析顯示，B因子、IgM、C3、C4、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），見表4。

表4 支氣管哮喘急性發(fā)作期嚴(yán)重程度與Ig、補(bǔ)體及T淋巴細(xì)胞亞群相關(guān)性分析

3 討論

目前關(guān)于支氣管哮喘與機(jī)體免疫狀態(tài)的研究較多，主流觀點(diǎn)認(rèn)為支氣管哮喘通常由病毒、細(xì)菌等感染引起，當(dāng)病毒、細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體后激活肥大細(xì)胞，進(jìn)而促進(jìn)組胺、前列腺素D2和半胱氨酰白三烯生成，引起氣道平滑肌收縮、微血管通透性增加、黏液分泌增加和炎癥增強(qiáng)[7-8]；同時(shí)活化的肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞產(chǎn)生多種介質(zhì)加劇上皮損傷，刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，導(dǎo)致Ig、補(bǔ)體及T淋巴細(xì)胞亞群水平變化，以應(yīng)答特異性和非特異性觸發(fā)因素[9-10]。

本研究結(jié)果顯示，急性期組患兒的IgG、IgM、C3、C4、B因子水平低于穩(wěn)定期組；且急性期組患兒的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于穩(wěn)定期組患兒。正常狀態(tài)下，IgG、IgM抗體是參與局部免疫的主要抗體，通過特異性結(jié)合進(jìn)入黏膜局部的細(xì)菌、病毒等病原微生物，阻止其黏附到細(xì)胞表面發(fā)揮抗感染作用[11]。但當(dāng)患兒機(jī)體免疫功能降低，IgG、IgM及其補(bǔ)體分泌減少，抗體細(xì)菌、病毒等病原微生物作用減弱，導(dǎo)致大量細(xì)菌、病毒等病原微生物通過呼吸道黏膜進(jìn)入機(jī)體，誘發(fā)哮喘急性發(fā)作，因此急性期哮喘患兒的IgG、IgM、C3、C4、B因子水平下降[12-13]。此外，普遍的觀點(diǎn)認(rèn)為支氣管哮喘患兒T淋巴細(xì)胞亞群存在失調(diào)，特別是CD3+、CD4+比例下降，進(jìn)而導(dǎo)致其對輔助性T淋巴細(xì)胞及抑制性T淋巴細(xì)胞的制約能力下降，導(dǎo)致炎癥介質(zhì)白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5釋放增加，進(jìn)而加重氣道炎癥反應(yīng)[14-15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，隨著哮喘急性發(fā)作嚴(yán)重程度分級的提高，患兒的B因子、IgM、C3、C4及CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平逐漸降低；進(jìn)一步相關(guān)性分析顯示，B因子、IgM、C3、C4、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，表明兒童支氣管哮喘急性發(fā)作期疾病嚴(yán)重程度與B因子、IgM、C3、C4、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平存在顯著相關(guān)性。分析原因：在我國絕大多數(shù)哮喘是由感染誘發(fā)，所以推測哮喘發(fā)作患兒的IgG增高是機(jī)體防御性反應(yīng)的結(jié)果，隨著病情嚴(yán)重程度的增加該指標(biāo)并未升高，提示IgG可能是一種保護(hù)性抗體。另外，炎癥介質(zhì)B因子參與哮喘的急性炎癥過程已被證實(shí)，B因子具有較強(qiáng)的針對中性粒細(xì)胞的趨化、活化作用，被激活的炎癥細(xì)胞釋放大量炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致呼吸道上皮受損，感覺神經(jīng)末梢暴露，導(dǎo)致呼吸道呈高反應(yīng)狀態(tài)，加重喘息程度[16]。T淋巴細(xì)胞亞群在哮喘急性發(fā)作時(shí)存在細(xì)胞免疫抑制，相應(yīng)的T淋巴細(xì)胞水平下降，進(jìn)而抑制免疫應(yīng)答能力。

綜上，支氣管哮喘急性發(fā)作期患兒存在明顯的免疫功能紊亂，監(jiān)測Ig、補(bǔ)體及T淋巴細(xì)胞亞群水平變化有助于臨床醫(yī)生評估疾病嚴(yán)重程度。本研究雖得出CD3+、CD4+及CD4+/CD8+與哮喘發(fā)作嚴(yán)重程度存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，但限于樣本量較小，該結(jié)論尚需進(jìn)一步論證。