關(guān)鍵詞 氧化石墨烯； 二氧化錳納米片； 豬流行性腹瀉病毒； 抗病毒活性； 納米治療平臺(tái)

中圖分類號(hào) TB383.1 ； TQ127.11 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1000-2421（2024）03-0267-08

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是一種由豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrheavirus，PEDV）感染引起的接觸性腸道傳染病，該病具有高發(fā)病率、高死亡率、能感染任何年齡及生產(chǎn)階段的豬等特點(diǎn)［1］。PEDV 屬于尼多病毒目、冠狀病毒科、冠狀病毒屬，是一種有包膜的單鏈正向RNA病毒［2］。近年來(lái)，冠狀病毒在全球范圍內(nèi)的大暴發(fā)引起了廣泛關(guān)注。納米顆粒因其獨(dú)特的物理、化學(xué)和生物學(xué)特性，如比表面積增大、表面活性增強(qiáng)、反應(yīng)特性更好、易于控制藥物釋放和靶向藥物輸送等［3］，在抗病毒研究應(yīng)用中取得了快速進(jìn)展。利用納米材料本身特性損傷或殺死病毒［4-5］；將抗病毒藥物負(fù)載到納米顆粒中，不僅提高了藥物的生物利用程度，降低了藥物毒性，還可以實(shí)現(xiàn)靶向藥物遞送、精準(zhǔn)釋放、藥效延長(zhǎng)［6］；功能化的納米顆?？梢蕴禺惏邢蚬鉄釟缣囟ǖ牟《荆?］等。這些研究成果為開(kāi)發(fā)抗病毒感染的新型廣譜納米治療平臺(tái)拓展了思路。

氧化石墨烯（graphene oxide，GO）是由石墨烯氧化剝離得到［8］，具有鋒利邊緣帶負(fù)電荷的單層片狀結(jié)構(gòu)，表面帶有大量活性氧化基團(tuán)，包括環(huán)氧基、羥基、羰基和羧基，材料的親水性和生物相容性提高，易于功能化修飾。此外，GO 已被證實(shí)具有抗病毒活性，其作用機(jī)制主要涉及3 個(gè)方面：一是GO 能通過(guò)靜電力作用和氧化還原反應(yīng)吸附和破壞病毒［9］，對(duì)一些帶正電荷，或者衣殼蛋白富含精氨酸且?guī)д姾山Y(jié)構(gòu)域的病毒具有抗病毒活性［10］；二是GO 具有鋒利邊緣的單層結(jié)構(gòu)，可直接對(duì)病毒造成物理破壞，如Ye等［5］以PEDV 和PRV 為病毒模型，證實(shí)了GO 具有廣譜抗病毒的活性且效果顯著，并指出GO 的抗病毒活性可能取決于其特殊的具有鋒利邊緣的單層結(jié)構(gòu)和表面電荷；三是GO 還具有優(yōu)異的光催化活性，能夠增強(qiáng)ROS 的生產(chǎn)，從而直接作用于捕獲的病毒，表現(xiàn)出良好的抗病毒效果。Hu 等［11］利用GO 的光催化特性，制備石墨烯-適配體納米片捕獲并殺死噬菌體，證實(shí)了GO 光催化活性的抗病毒作用。

二氧化錳納米片（MnO₂ nanosheets，MnO₂ NSs）是一種二維片狀的功能性納米材料，具有穩(wěn)定性好、光學(xué)性質(zhì)優(yōu)異、比表面積大、生物相容性好等特點(diǎn)［12］。目前對(duì)MnO₂ NSs 的研究主要集中在催化、電池以及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的生物傳感器、藥物輸送控釋以及生物成像等方面，但MnO₂對(duì)食源性致病菌和動(dòng)物源性病原體的抑制作用研究較少。本研究將GO 與MnO₂ NSs 復(fù)合，保留了2 種原材料的本身特性，以期產(chǎn)生協(xié)同增效的抗病毒效果，為抗動(dòng)物源性病毒新型材料的研發(fā)提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

氯化錳（AR）、無(wú)水乙醇（AR）、甲醇（AR），購(gòu)于天津市百世化工有限公司；單層氧化石墨烯粉末，購(gòu)于南京先豐納米材料科技有限公司，4% 多聚甲醛（AR），購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；噻唑藍(lán)（MTT，BR）、牛血清白蛋白（BSA，BR）、脫脂奶粉、總RNA 提取試劑、RIPA 組織/細(xì)胞裂解液、JC-1 試劑盒，購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司；四甲基氫氧化銨（AR）、二甲基亞砜（DMSO，AR），購(gòu)于美國(guó)Aladdin公司；FITC-羊抗鼠二抗、HRP-羊抗鼠二抗，購(gòu)于武漢艾美捷科技有限公司；DMEM 培養(yǎng)基（BR），購(gòu)于美國(guó)賽默飛世爾科技公司。

1.2 GO-MnO₂ NSs 的制備

1） 二氧化錳納米片（MnO₂ NSs）的制備。在劇烈攪拌下，15 s 內(nèi)將10 mL 0.3 mol/L 氯化錳（MnCl₂·4H₂O）溶液注入到20 mL 含有0.6 mol/L 四甲基氫氧化銨和3% H₂O₂的混合水溶液中，溶液立即變成深棕色，表明Mn²⁺被氧化為Mn⁴⁺。將深棕色懸浮液于室溫下劇烈攪拌過(guò)夜，離心、洗滌、干燥后得到塊狀MnO₂，利用超聲制備MnO₂ NSs，剩余塊狀MnO₂于常溫放置，備用。

2）GO-MnO₂ NSs 的制備。參照文獻(xiàn)［13］并加以改進(jìn)合成GO-MnO₂ NSs。將0.2 g 單層氧化石墨烯粉末分散于30 mL 去離子水中，超聲處理20 min，將0.25 mmol MnCl2·4H₂O 在攪拌中慢慢加入，超聲處理1 h，用四甲基氫氧化銨溶液調(diào)節(jié)pH 值至8.5。

在上述2 種溶液中，快速攪拌下滴加0.55 mL 的30% H₂O₂ 溶液，攪拌30 min 后，離心、洗滌，將最終產(chǎn)物烘干，常溫放置，備用。

1.3 細(xì)胞毒性的測(cè)定

將Vero 細(xì)胞接種到96 孔板中，培養(yǎng)至單層后棄去上清液。使用0.22 μm 一次性無(wú)菌濾膜將GOMnO₂NSs 過(guò)濾除菌，將細(xì)胞與不同質(zhì)量濃度（1250、625、313、156 μg/mL）的GO-MnO₂ NSs 分別培養(yǎng)24、48 h，每孔加入20 μL MTT 試劑（5.0 mg/mL），繼續(xù)培養(yǎng)4 h 后棄去上清，加入二甲基亞砜（DMSO）輕輕振蕩使甲瓚完全溶解。用酶標(biāo)儀測(cè)定OD490 nm 的吸光值，根據(jù)公式（1）計(jì)算細(xì)胞存活率（cell survivalrate，CSR）。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇細(xì)胞毒性低的GOMnO₂NSs 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

CSR=［（A_s-A_b）/（A_c-A_b）］ × 100% （1）

式（1）中，As 表示實(shí)驗(yàn)孔吸光度（含細(xì)胞、培養(yǎng)基、MTT 溶液和GO-MnO₂ NSs）；Ab 表示空白孔吸光度（含培養(yǎng)基、MTT 溶液，但不含細(xì)胞和GOMnO₂NSs）；Ac表示對(duì)照孔吸光度（含細(xì)胞、培養(yǎng)基、MTT 溶液，但不含GO-MnO₂ NSs）。

1.4 半數(shù)效應(yīng)濃度（EC₅₀）的測(cè)定

EC₅₀是能夠抑制50% 病毒感染引起的細(xì)胞病變的藥物有效濃度。將Vero 細(xì)胞接種到96 孔板中，培養(yǎng)至單層后棄去上清液，向100TCID₅₀的PEDV 中分別加入625、313、156、78、39 μg/mLGO-MnO₂ NSs，同時(shí)設(shè)置細(xì)胞對(duì)照組和病毒對(duì)照組。置于37 ℃ 5%的CO₂培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)至侵染后12、24、36、48 h，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變情況，直至細(xì)胞病變不再進(jìn)展，記錄并按照Reed-Muench 法［14］計(jì)算EC₅₀。

1.5 間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)

將Vero 細(xì)胞接到24 孔板中，培養(yǎng)至單層，將病毒PEDV 與625 μg/mL GO‐MnO2 NSs 在4 ℃預(yù)混1 h 后加入24 孔板中于37 ℃下培養(yǎng)1 h，同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組及陰性對(duì)照組，PBS 沖洗后，用DMEM（補(bǔ)充10 μg/mL 胰蛋白酶）分別培養(yǎng)至侵染后12、24、36、48 h。參照文獻(xiàn)［15］方法，先用4% 多聚甲醛室溫固定，用-20 ℃預(yù)冷的甲醇透化，并用5% BSA室溫封閉后，加入一抗（抗PEDV N 蛋白小鼠單克隆抗體）溫育1 h，然后加入二抗（FITC 標(biāo)記的羊抗鼠二抗）溫育45 min，最后加入DAPI 染料避光染色，PBS 沖洗3 遍后，使用倒置熒光顯微鏡對(duì)FITC 所呈現(xiàn)的綠色熒光和DAPI 所呈現(xiàn)的藍(lán)色熒光進(jìn)行拍攝。

1.6 蛋白免疫印跡（Western blot）實(shí)驗(yàn)

將Vero 細(xì)胞接種到6 孔板中，培養(yǎng)至單層，將病毒PEDV 與625 μg/mL GO-MnO₂ NSs 在4 ℃預(yù)混1 h 后加入6 孔板中，在37 ℃下培養(yǎng)1 h，同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組及陰性對(duì)照組，先用PBS 沖洗后，加入DMEM（補(bǔ)充10 μg/mL 胰蛋白酶）分別培養(yǎng)至侵染后12、24、36、48 h；然后使用150 μL 裂解緩沖液收獲細(xì)胞，通過(guò)12% SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳解析裂解的樣品，并將樣品轉(zhuǎn)移到PVDF 膜上，參照文獻(xiàn)［16］的方法，最后使用化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行顯色分析。

1.7 細(xì)胞因子表達(dá)水平的測(cè)定

干擾素刺激基因（ISGs）作為由干擾素（IFNs）誘導(dǎo)表達(dá)的基因，在宿主抵抗病毒感染中發(fā)揮著重要作用。將Vero 細(xì)胞接種到24 孔板中，培養(yǎng)至單層。每孔加入625 μg/mL GO-MnO₂ NSs，同時(shí)設(shè)置細(xì)胞對(duì)照組，各3 個(gè)復(fù)孔，培養(yǎng)至侵染后24 h，每孔加入1.0 mL 的Trizol 試劑，通過(guò)Trizol 法［16］提取細(xì)胞樣品的總RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)Ⅰ型干擾素（IFN?α、IFN?β）和干擾素刺激基因（ISG?20、ISG?54）2 種抗病毒因子的表達(dá)水平，進(jìn)而評(píng)估GO-MnO₂NSs 對(duì)抗病毒因子表達(dá)水平的影響。

1.8 活性氧水平的測(cè)定

將Vero 細(xì)胞接種到24 孔板中，培養(yǎng)至單層，將病毒PEDV 與625 μg/mL GO-MnO₂ NSs 在4 ℃預(yù)混1 h 后加入24 孔板中，同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組，37 ℃下培養(yǎng)1 h，PBS 沖洗后，用DMEM（補(bǔ)充10 μg/mL 胰蛋白酶）分別培養(yǎng)至侵染后12、24、36、48 h。然后加入10 mmol/L 2'，7'-二氯熒光二乙酸酯（DCFH-DA），37 ℃避光染色30 min，PBS 洗掉多余染料后，通過(guò)倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)菌細(xì)胞熒光強(qiáng)度，測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ROS 水平。

1.9 線粒體膜電位的測(cè)定

線粒體膜電位的降低常作為細(xì)胞凋亡早期的標(biāo)志。將Vero 細(xì)胞接種到玻底細(xì)胞培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)至單層，將PEDV 病毒與625 μg/mL GO-MnO₂ NSs 在4 ℃預(yù)混1 h 后加入24 孔板中，同時(shí)設(shè)置病毒感染組、CCCP 陽(yáng)性對(duì)照組和無(wú)處理的細(xì)胞陰性對(duì)照組，在37 ℃ 下培養(yǎng)1 h，PBS 沖洗后，用DMEM（補(bǔ)充10 μg/mL 胰蛋白酶）進(jìn)一步培養(yǎng)至侵染后12 h，參照J(rèn)C-1 試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作處理，最后用共聚焦激光掃描顯微鏡觀察，以JC-1 熒光探針從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的檢測(cè)指標(biāo)。

1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，每項(xiàng)試驗(yàn)至少重復(fù)3 次，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。采用 t-檢驗(yàn)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。在α=0.05 水平進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 GO-MnO₂ NSs 的透射電子顯微鏡表征

利用透射電子顯微鏡（TEM）對(duì)GO-MnO₂ NSs的表面形貌進(jìn)行表征（圖1）。MnO₂ NSs 與氧化石墨烯薄層之間緊密結(jié)合，合成的GO-MnO₂ NSs 呈典型的片狀二維結(jié)構(gòu)，能提供更多的吸附結(jié)合位點(diǎn)。

2.2 GO-MnO₂ NSs 的XRD表征

通過(guò)X 射線衍射（XRD）測(cè)定GO、MnO₂ NSs 和GO-MnO₂ NSs 的結(jié)晶度，結(jié)果見(jiàn)圖2。GO 在10.76°處的特征峰對(duì)應(yīng)（111）晶面，MnO₂ NSs 在18.42°、36.62°和65.22°處的特征峰分別對(duì)應(yīng)于（101）、（006）和（119）晶面。GO-MnO₂ NSs 在10.68° 處出現(xiàn)與GO 的（111）晶面對(duì)應(yīng)的特征峰，且在17.96°、36.12°、64.7°處的特征峰分別與MnO₂ NSs 的（101）、（006）、（119）晶面對(duì)應(yīng)，證明GO-MnO₂ NSs 復(fù)合納米片材料的成功制備。

2.3 GO-MnO₂ NSs 的XPS表征

通過(guò)X 射線光電子能譜（XPS）光譜測(cè)定GOMnO₂NSs 的元素和表面化學(xué)狀態(tài)。圖3A 為GOMnO₂NSs 的XPS 總譜圖，在284.78、532.59、641.48eV 處有3 個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)C 1s、O 1s、Mn 2p。圖3B為GO-MnO₂ NSs 的C 1s 光譜，在283.88、286.06 eV處分別歸屬于C—C 鍵和C—O 鍵。圖3C 中O 1s 光譜中在531.71 和530.88 eV 處顯示出2 個(gè)擬合峰分別歸屬于Mn—O 鍵和O—H 鍵。圖3D 的Mn 2p 光譜中，在結(jié)合能640.88 和652.17 eV 處顯示出2 個(gè)擬合峰，分別對(duì)應(yīng)Mn 2p3/2、Mn 2p1/2。這些結(jié)果均表明GO-MnO₂ NSs 的制備完成。

2.4 GO-MnO₂ NSs 對(duì)細(xì)胞毒性的影響

采用MTT 法測(cè)定不同濃度GO-MnO₂ NSs 對(duì)Vero 細(xì)胞的細(xì)胞毒性的影響，結(jié)果見(jiàn)圖4。以1 250μg/mL GO-MnO₂ NSs 為最大質(zhì)量濃度，分別與Vero細(xì)胞孵育不同時(shí)間后，625 μg/mL GO-MnO₂ NSs細(xì)胞存活率均在85% 以上，說(shuō)明此濃度的GOMnO₂NSs 細(xì)胞毒性小，生物相容性良好。因此選用625 μg/mL GO-MnO₂ NSs 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

2.5 GO-MnO₂ NSs 的半數(shù)效應(yīng)濃度（EC₅₀）

由圖5 可知，EC₅₀ 為140 μg/mL，即GO-MnO₂NSs 為140 μg/mL 時(shí)已經(jīng)能夠抑制半數(shù)病毒感染引起的細(xì)胞病變效應(yīng)，表明采用625 μg/mL GO-MnO₂NSs 能夠有效抑制PEDV 引起的細(xì)胞病變。

2.6 間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果

不同處理時(shí)間的GO-MnO₂ NSs 間接免疫熒光結(jié)果如圖6 所示。由圖6 可見(jiàn)，與陽(yáng)性對(duì)照組（PEDV 病毒感染組）相比，經(jīng)GO-MnO₂ NSs 處理12、24、36 和48 h 后，試驗(yàn)組的細(xì)胞綠色熒光信號(hào)明顯降低，即PEDV N 蛋白（FITC-羊抗鼠抗體標(biāo)記）的表達(dá)量下降，這說(shuō)明GO-MnO₂ NSs 可以抑制病毒感染細(xì)胞。

2.7 Western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖7 所示，與陽(yáng)性對(duì)照組（PEDV 感染組）相比，經(jīng)過(guò)625 μg/mL GO-MnO2NSs 處理后，PEDV N 蛋白的表達(dá)量在12、24、36 和48 h 均明顯下調(diào)，說(shuō)明GO-MnO₂ NSs 可以有效抑制病毒的復(fù)制，具有較好的抗病毒活性。

2.8 GO-MnO₂ NSs 對(duì)抗病毒因子表達(dá)的影響GO-MnO₂ NSs 對(duì)抗病毒因子表達(dá)的影響如圖8所示，與陰性對(duì)照組相比，GO-MnO₂ NSs 處理后IFN-α、IFN-β、ISG-20、ISG-54 的表達(dá)水平明顯上調(diào)，表明GO-MnO₂ NSs 可以通過(guò)刺激細(xì)胞中Ⅰ型干擾素和干擾素刺激基因（interferon-stimulated genes，ISGs）的mRNA 表達(dá)水平上調(diào)來(lái)抑制病毒感染。

2.9 GO-MnO₂ NSs 對(duì)活性氧的影響

病毒侵染后細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧，而過(guò)量的活性氧（ROS）會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞DNA 的損傷。如圖9 所示，陽(yáng)性對(duì)照組（病毒感染組）綠色熒光明顯，且隨著病毒侵染時(shí)間加長(zhǎng)，綠色熒光增強(qiáng)。而GO-MnO₂NSs 處理組的綠色熒光明顯減弱，說(shuō)明GO-MnO₂NSs 能夠抑制PEDV 感染后引起的ROS 過(guò)量產(chǎn)生。

2.10 GO-MnO₂ NSs 對(duì)線粒體膜電位的影響

如圖10 所示，在沒(méi)有GO-MnO₂ NSs 的情況下，PEDV 侵染Vero 細(xì)胞后，經(jīng)染色可以觀察到強(qiáng)烈的綠色熒光，表明病毒感染會(huì)導(dǎo)致線粒體膜電位下降。而經(jīng)GO-MnO₂ NSs 處理的試驗(yàn)組中綠色熒光明顯降低，表明經(jīng)GO-MnO₂ NSs 處理能夠減少被感染細(xì)胞的線粒體膜電位降低的情況。以上結(jié)果表明GOMnO₂NSs 能夠通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡來(lái)減輕PEDV 的感染。

3討論

近年來(lái)，許多功能性納米顆粒已被證實(shí)具有顯著的抗病毒作用，如量子點(diǎn)、金/銀納米顆粒、納米團(tuán)簇、碳點(diǎn)、氧化石墨烯、硅材料、聚合物和樹(shù)枝狀聚合物［17］。作為潛在的抗病毒候選物，盡管在抗病毒機(jī)制和抑制效果方面存在差異，但這些功能性納米顆粒具有各自的突出特征。與其他具有不同結(jié)構(gòu)和尺寸的功能材料相比，二維納米材料憑借超大的比表面積，已成為抗病毒藥物遞送的優(yōu)良載體之一。

GO 是目前研究最廣泛的一種二維納米材料。本研究采用室溫超聲法合成GO-MnO₂ NSs 二維復(fù)合納米片材料，在XRD 表征結(jié)果中，GO 的（111）晶面與Chaiyakun 等［18］的研究結(jié)果一致；MnO₂ NSs 的（101）、（006）和（119）晶面與Peng 等［19］的研究結(jié)果一致。在XPS 的O 1s 光譜圖中，531.71 和530.88 eV處顯示出2 個(gè)擬合峰，可以歸因于晶格氧（Mn—O）和表面吸附的氧物種（如O—H）［20-21］。XRD 和XPS的表征結(jié)果證實(shí)GO-MnO₂ NSs 的制備已完成。

病毒侵入宿主后，宿主的先天免疫系統(tǒng)被觸發(fā)會(huì)迅速誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素（IFN），這些干擾素進(jìn)一步與相應(yīng)的受體結(jié)合，并誘導(dǎo)干擾素刺激基因（ISGs）表達(dá)，從而使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒防御［22］。本文對(duì)GOMnO₂NSs 處理后IFN?α、IFN?β、ISG?20、I SG?54 的基因表達(dá)水平進(jìn)行研究，結(jié)果顯示這些基因均明顯上調(diào)，與已有相關(guān)研究中的變化趨勢(shì)一致［22］，表明GO-MnO₂ NSs 能夠誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)干擾素及干擾素刺激基因等抗病毒因子的表達(dá)，從而增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)抗病毒侵染的第一道防線作用。

此外，有諸多研究表明石墨烯相關(guān)二維材料與細(xì)菌、病毒和真菌之間的相互作用可能產(chǎn)生強(qiáng)大的抗菌和抗病毒活性。例如，氧化石墨烯（GO）衍生物已被證實(shí)在結(jié)合單純皰疹病毒1 型（HSV-1）時(shí)與細(xì)胞表面受體硫酸乙酰肝素競(jìng)爭(zhēng)［23］；Donskyi 等［24］合成了一系列具有特定聚甘油硫酸酯和脂肪胺官能團(tuán)的石墨烯衍生物，研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)二維納米片用C6-和C9-烷基鏈官能化時(shí)，其在Vero E6 細(xì)胞中顯示出對(duì)HSV-1 的有效抑制，且沒(méi)有任何明顯的毒性，這表明可以通過(guò)對(duì)石墨烯片的控制和官能化來(lái)獲得針對(duì)HSV-1 的抗病毒藥物。

綜上，本研究以PEDV 作為冠狀病毒的模式病毒，探索了GO-MnO₂ NSs 對(duì)PEDV 的抗病毒活性和抗病毒機(jī)制。結(jié)果表明，GO-MnO₂ NSs 復(fù)合納米材料的生物相容性較好，對(duì)PEDV 增殖的體外抑制效果顯著，可為冠狀病毒的防治提供新的思路和基礎(chǔ)。此外，基于GO 和MnO₂ NSs 經(jīng)近紅外照射會(huì)產(chǎn)生光熱的特性，可進(jìn)一步探究其光熱抗病毒活性及實(shí)際應(yīng)用。

（責(zé)任編輯：趙琳琳）