【摘要】目的：對(duì)奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑有關(guān)物質(zhì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。方法：HPLC法，紫外檢測(cè)器，DAD檢測(cè)器，梯度洗脫。結(jié)果：各已知雜質(zhì)與奧美拉唑分離度均大于1.5，空白輔料不干擾各雜質(zhì)的檢測(cè)。結(jié)論：該方法各雜質(zhì)的準(zhǔn)確度良好，峰純度良好，適合奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑的測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑；有關(guān)物質(zhì)；方法學(xué)驗(yàn)證

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.04.008

Methodological Validation of Related Substances in Omeprazole Sodium Bicarbonate Dry Suspension

PAN Li， TANG Kuanxia

（Haikou Pharmaceutical Factory Co.， Ltd.， Haikou 570311， China）

Abstract： Objective： To verify the substance method of omeprazole sodium bicarbonate dry suspension. Method： HPLC， UV detector， DAD detector， gradient elution. Result： The separation degree between all known impurities and omeprazole was greater than 1.5， blank excipients do not interfere with the detection of various impurities. Conclusion： This method has good accuracy and peak purity for various impurities， and is suitable for the determination of omeprazole sodium bicarbonate dry suspension.

Keywords： omeprazole sodium bicarbonate dry suspension； related substances； methodology validation

奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑廣泛用于醫(yī)治胃潰瘍、食管反流病、十二指腸潰瘍以及有關(guān)的胃灼熱和其他癥狀，并且在糜爛性食管炎醫(yī)治與維持康復(fù)上效果明顯。該藥物中的碳酸氫鈉對(duì)于中和胃酸有明顯療效，可避免胃酸被奧美拉唑降解，將奧美拉唑治療消化性潰瘍的效果充分發(fā)揮。奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑能夠迅速起效，并且藥性持久。

1儀器與試藥

島津公司的LC-2010AHT高效液相色譜儀，紫外檢測(cè)器，DAD檢測(cè)器，色譜柱：辛烷基鍵合硅膠柱（250 mm×4.6 mm，5μm），色譜乙腈，磷酸氫二鈉，水，磷酸，自制品（201101批）。

2方法學(xué)驗(yàn)證

2.1檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

在選擇奧美拉唑或奧美拉唑磺?；镒鳛閷?duì)照品時(shí)，應(yīng)取適量的樣品，使用流動(dòng)相將其溶解，同時(shí)將其制成質(zhì)量濃度為20μg/mL的溶液，選擇紫外-可見(jiàn)分光光度法進(jìn)行分析，掃描控制在200～400 nm。

結(jié)果：奧美拉唑磺?；镌?73.2 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，奧美拉唑在275 nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。兩者的最大吸收波長(zhǎng)相近，都在280 nm附近。參照《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版二部中奧美拉唑原料及腸溶片公示的標(biāo)準(zhǔn)及歐洲藥典原料的標(biāo)準(zhǔn)，選擇280 nm為本品的檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2色譜條件的選擇及專(zhuān)屬性試驗(yàn)

空白輔料溶液：參照處方配制無(wú)奧美拉唑的空白輔料，稱(chēng)取空白輔料約1.8 g，置于50 mL量瓶中，加溶劑將其溶解后進(jìn)行稀釋至刻度，搖勻，作為空白輔料溶液。

混合溶液：精密移取雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I定位溶液各1.0 mL，置于同一50 mL量瓶中；取本品適量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），置于上述量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

精密量取上述溶液各20μL，注入液相色譜儀，按設(shè)計(jì)色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)，記錄色譜圖。由試驗(yàn)結(jié)果可知，空白輔料無(wú)干擾，各已知雜質(zhì)與奧美拉唑主峰均能有效分離。在DAD條件下，各成分主峰處均無(wú)不純物檢出，各雜質(zhì)均在280 nm處有較大吸收，證明該方法專(zhuān)屬性良好。

2.3強(qiáng)制降解試驗(yàn)

空白輔料溶液的配制：按照處方配比，稱(chēng)量不含奧美拉唑的空白輔料1.8 g放入50 mL容量瓶中，加入溶劑使其溶解，稀釋到刻度，搖勻，即得。

試驗(yàn)樣品溶液的配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)量出相應(yīng)的含量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），放入50 mL容量瓶中，加入有機(jī)試劑使其溶出，稀釋到刻度，搖勻，即得。

光降解試驗(yàn)樣品溶液的配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)量出相應(yīng)的含量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），放入50 mL的大容量瓶中，加入30 mL的有機(jī)溶劑使其溶出，在4500 lx的熒光燈下放置24 h，加入有機(jī)化合物，直至刻度，搖動(dòng)，過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即得。

氧化破壞試驗(yàn)溶液配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)量出相應(yīng)的含量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），放入50 mL的容量瓶中，加入30 mL的溶劑使其溶解，加30%過(guò)氧化氫0.5 mL，放置0.5 min，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即得，配制完成后應(yīng)迅速進(jìn)樣。

高溫降解供試品溶液的配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)取內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），置于50 mL容量瓶中，加30 mL溶劑溶解，水浴放置0.5 h，取出，放冷，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即得。

酸分解供試品溶液的配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)量出相應(yīng)的含量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），置于50 mL的容量瓶中，用膠頭滴管加入48 mol/L的鹽酸，在常溫下放置5 min，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即可得到該樣品。

堿性降解供試品溶液的配制：取奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑1袋，精確稱(chēng)量出相應(yīng)的含量（約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg），置于50 mL的容量瓶中，加入30 mL的溶劑使其溶解，再加入5.0 mol/L的氫氧化鈉溶液1 mL，放置4 h，再用5.0 mol/L的鹽酸調(diào)整pH值，后將其加入混合液中混合，稀釋至刻度線(xiàn)，搖勻，過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即可得到堿性降解的樣品。

用DAD檢測(cè)器將以上各組分20μL加入HPLC并進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，各降解試驗(yàn)的物料平衡結(jié)果均在90%～110%；主峰純度良好；按奧美拉唑峰計(jì)算，理論塔板數(shù)均大于2000，主峰與相鄰雜質(zhì)的分離度均達(dá)到要求，本色譜條件對(duì)降解產(chǎn)物專(zhuān)屬性良好。

2.4空白輔料干擾試驗(yàn)

強(qiáng)制降解試驗(yàn)項(xiàng)下記錄的未降解空白輔料及各強(qiáng)制降解試驗(yàn)條件下的空白輔料圖譜表明，空白輔料有香蘭素峰，空白輔料經(jīng)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、氧化、光照、高溫降解后，均不干擾本品有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，計(jì)算時(shí)扣除空白輔料香蘭素峰即可。

2.5線(xiàn)性關(guān)系試驗(yàn)

雜質(zhì)對(duì)照品線(xiàn)性關(guān)系溶液的配制：分別精密移取專(zhuān)屬性試驗(yàn)項(xiàng)下雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)H及雜質(zhì)I定位溶液各0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL、1.2 mL，置于同一100 mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

雜質(zhì)G對(duì)照品線(xiàn)性關(guān)系溶液的配制：精密移取專(zhuān)屬性試驗(yàn)項(xiàng)下雜質(zhì)G定位溶液各0.4 mL、0.8 mL、1.2 mL、1.6 mL、2.0 mL、2.4 mL，置同一100 mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得。

奧美拉唑線(xiàn)性關(guān)系溶液配制：精確稱(chēng)量奧美拉唑工作標(biāo)準(zhǔn)品約10 mg，置于50 mL容量瓶?jī)?nèi)，加入各種有機(jī)試劑至刻度使其溶解混勻，然后精確吸取該溶液0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL，1.0 mL，1.2 mL置于同一100 mL容量瓶?jī)?nèi)，加入各種溶劑，直至刻度，搖勻，即得。

量取以上各溶液20μL，于液相色譜儀注入，并對(duì)色譜圖進(jìn)行記錄。由試驗(yàn)結(jié)果可知，奧美拉唑在0.05～2.41μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)A在0.03～1.27μg/ mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)B在0.03～ 1.33μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)C在0.05～1.25μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)D在0.05～1.28μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)E在0.03～1.27μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)G在0.05～1.25μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)H在0.04～1.31μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好；雜質(zhì)I在0.03～1.31μg/mL濃度范圍內(nèi)峰面積與濃度線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.6中間精密度試驗(yàn)

選擇同一批號(hào)測(cè)試品，2名分析人員在2臺(tái)高效液相色譜儀上分別按有關(guān)物質(zhì)分析方法進(jìn)行檢測(cè)。供試品中各已知雜質(zhì)、其他單個(gè)雜質(zhì)及總雜質(zhì)測(cè)定結(jié)果的RSD均小于10.0%，方法的中間精密度良好。

2.7溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

溶液的配制：準(zhǔn)確稱(chēng)量被檢樣品10 mg（對(duì)應(yīng)奧美拉唑10 mg）于50 mL容量瓶?jī)?nèi)，加入有機(jī)溶劑至刻度使其溶解，搖勻、過(guò)濾，即可得到該樣品。精確稱(chēng)定1 mL，置于100 mL容量瓶中，加入各種有機(jī)溶劑直至刻度，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)液。

在常溫下，分別于0、2、4、6、8 h，精確吸取20μL，并將其加入液相層析器中，用面積歸一化法對(duì)色譜圖進(jìn)行記錄。由試驗(yàn)結(jié)果可知，供試品溶液在室溫條件下放置8 h，在2 h時(shí)開(kāi)始有降解雜質(zhì)1出現(xiàn)，在6 h時(shí)又有降解雜質(zhì)2（雜質(zhì)E）出現(xiàn)，這表明奧美拉唑溶液穩(wěn)定性差，應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。對(duì)照溶液在室溫條件放置8 h，主峰峰面積的RSD%小于2.0%，這表明對(duì)照溶液的溶液穩(wěn)定性良好。

2.8準(zhǔn)確度試驗(yàn)

供試品溶液配制：選擇本品，對(duì)其進(jìn)行精確稱(chēng)?。▽?duì)應(yīng)奧美拉唑10 mg），然后置于50 mL容量瓶中，加溶劑將其溶解稀釋到刻度，搖勻后濾過(guò)，即得。

80%準(zhǔn)確度溶液的配制：將精密度試驗(yàn)項(xiàng)下雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I貯備溶液各0.8 mL，雜質(zhì)G貯備溶液1.6 mL，置于同一100 mL容量瓶中。

100%準(zhǔn)確度溶液的配制：將精密度試驗(yàn)項(xiàng)下雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I貯備溶液各1.0 mL，雜質(zhì)G貯備溶液2.0 mL，置于同一100 mL容量瓶中。

120%準(zhǔn)確度溶液的配制：將精密度試驗(yàn)項(xiàng)下雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I貯備溶液各1.2 mL，雜質(zhì)G貯備溶液2.4 mL，置于同一100 mL容量瓶中。

各取供試品一袋（對(duì)應(yīng)奧美拉唑20 mg）置于上述容量瓶中，加溶劑溶解稀釋到刻度，并搖勻后濾過(guò)，即得。每個(gè)濃度同法配制3份，現(xiàn)配現(xiàn)進(jìn)。

以上溶液精確吸取20μL，并將其加入液相層析器中，用面積歸一化法對(duì)色譜圖進(jìn)行記錄。由試驗(yàn)結(jié)果可知，奧美拉唑有關(guān)物質(zhì)檢查雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)G、雜質(zhì)H及雜質(zhì)I的回收率均在80%～120%內(nèi)，表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.9耐用性試驗(yàn)

分別在調(diào)節(jié)流動(dòng)相中有機(jī)相比值改變±5%、檢測(cè)波長(zhǎng)改變±5 nm、流動(dòng)相pH數(shù)值改變±0.4、柱溫改變±5℃的條件下，考察變化前后系統(tǒng)適用性及供試品雜質(zhì)檢出情況。

由試驗(yàn)結(jié)果可知，在柱溫、流動(dòng)相比例20%、檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm、流動(dòng)相pH=7.2的條件下，對(duì)本品有關(guān)物質(zhì)檢查結(jié)果幾乎無(wú)影響；在流動(dòng)相比例30%條件下，雜質(zhì)A和雜質(zhì)I與樣品中輔料香蘭素出峰位置重合，輔料干擾雜質(zhì)的檢驗(yàn)；在流動(dòng)相pH=8.0條件下，雜質(zhì)A與雜質(zhì)I重合，無(wú)法有效檢驗(yàn)；在檢驗(yàn)波長(zhǎng)285 nm條件下，雜質(zhì)A峰面積變化較大。以上結(jié)果說(shuō)明，本方法色譜條件耐用性較差，在流動(dòng)相配制過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格把控流動(dòng)相A的pH值，并確保在正確的色譜條件下對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。

3確定的方法

精確稱(chēng)量本品（對(duì)應(yīng)奧美拉唑10 mg）于50 mL容量瓶中，加入有機(jī)溶劑，用超聲波將其溶出，并將其稀釋到刻度，然后搖動(dòng)，過(guò)濾，取出續(xù)濾后，即得。在供試品溶液色譜圖上出現(xiàn)雜質(zhì)峰時(shí)，用修正后的方法求出雜質(zhì)C，奧美拉唑磺酰基和雜質(zhì)E的峰面積，使其不超過(guò)控制液的主峰面積0.5倍（0.5%）。結(jié)果表明：H峰面積不能超過(guò)控制液的最大峰的0.5倍（0.5%）；其他各雜質(zhì)元素的峰面積均不能超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)溶液的0.2倍（0.2%）；各種雜質(zhì)的總和也不能超過(guò)1.0%。

4結(jié)束語(yǔ)

根據(jù)數(shù)據(jù)，通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果得知，該測(cè)定方法專(zhuān)屬性、精密度、準(zhǔn)確度、耐用性良好，能有效檢測(cè)出奧美拉唑相關(guān)雜質(zhì)。各峰之間分離度大于1.5，理論塔板數(shù)高于5000，系統(tǒng)適用性符合要求。該方法可用于奧美拉唑碳酸氫鈉干混懸劑的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定。

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【作者簡(jiǎn)介】

潘麗，女，1984年出生，高級(jí)工程師，學(xué)士，研究方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

（編輯：侯睿琪）