林春芳，孫音，林曉嵐

福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院（福州 350002）

隨著我國經(jīng)濟和社會的發(fā)展，人們的生活水平得到顯著的提高，對于飲食的需求也不再滿足于食品的色香味，更多地追求飲食健康和食品的品質(zhì)方向，消費者對身材體型的要求促使一些減肥保健類食品備受青睞。西布曲明是一類治療肥胖癥的高效藥物，擾亂人體內(nèi)激素的調(diào)節(jié)功能，并刺激交感神經(jīng)，抑制人的食欲從而達到減肥效果。由于西布曲明可以有效減輕肥胖患者的體重[1]，生產(chǎn)減肥保健藥品的廠商往往把西布曲明當(dāng)作減肥類或保健品類食品的主要添加劑成份，但在西布曲明心血管結(jié)局（SCOUT）試驗表明它對人體的心血管有不良影響[2-3]，尤其是患有心臟疾病的人群。這份報告發(fā)表后，西布曲明已然成為當(dāng)前社會各界關(guān)注的熱點話題，美國立即市場從市場上撤出西布曲明[4]。與此同時，中國國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布停止使用西布曲明制劑和原料藥的公告。近幾年，許多不良商家為攫取更多的經(jīng)濟效益，在保健食品中非法添加西布曲明，并夸大其使用效果，導(dǎo)致市場上持續(xù)存在西布曲明非處方減肥配方，而大量、長期且盲目地服用含有西布曲明的藥品，會給人體造成嚴重危害[5]。目前對保健食品中添加西布曲明的劑量沒有明確的標(biāo)準，且西布曲明與不同物質(zhì)之間的相互作用不明確等問題，市場對西布曲明的監(jiān)管力度小等因素，導(dǎo)致非法添加西布曲明的現(xiàn)象層出不窮，因此規(guī)范和標(biāo)準化西布曲明的使用及檢測技術(shù)具有急迫性和重要性。

1 西布曲明的理化性質(zhì)及危害

西布曲明（Sibutramine），分子式為C17H26ClN，分子量為334.33 g/mol，是一種非苯丙胺類中樞神經(jīng)抑制劑[6-7]，其通過擾亂人體內(nèi)激素的調(diào)節(jié)功能，并刺激人體的交感神經(jīng)，抑制人的食欲從而達到減肥效果[8]。動物試驗觀察發(fā)現(xiàn)西布曲明具有致突變、致畸胎等作用，在臨床應(yīng)用中被證實其對心臟和神經(jīng)系統(tǒng)有極大的危害，甚至導(dǎo)致非致死性心臟病發(fā)作和非致死性中風(fēng)等嚴重心血管疾病風(fēng)險，嚴重影響人體健康[9-11]。同時對人體心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)造成不同程度的影響。失眠、口干、頭疼等是西布曲明作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見的癥狀，其還會導(dǎo)致煩躁、易激惹、睡眠障礙、焦慮等問題，還會影響判斷、思考和運動能力。畏食、便秘等是西布曲明作用于消化系統(tǒng)常見的疾病，還會導(dǎo)致腹瀉、腹痛、胃腸脹氣、肝功能異常。呼吸困難、氣管炎等是西布曲明作用于呼吸系統(tǒng)上常見的疾病。對泌尿生殖系統(tǒng)來講，西布曲明會導(dǎo)致腎炎，月經(jīng)紊亂等問題。臨床試驗和動物試驗證實西布曲明帶來的副作用遠遠大于其減肥效益，但是由于西布曲明的成效好，不法商家為牟取暴利將西布曲明非法摻入減肥類保健食品中的現(xiàn)象層出不窮，而消費者在不知情情況下使用非法摻入西布曲明的保健品后出現(xiàn)心肌損害、心力衰竭、嚴重致死亡的食品安全事故頻發(fā)，嚴重的危害了民眾的身體健康，影響了民眾對食品安全的信心。

2 檢測方法

2.1 檢測方法

2.1.1 離子遷移譜快速檢測法

離子遷移譜（Ion Mobility Spectrometry，IMS）是20世紀60年代末發(fā)展起來的一種利用儀器分析樣品分子電離后的離子遷移率差異來進行檢測分析的技術(shù)[12]。何歡等[13]建立離子遷移譜技術(shù)測定出保健食品中可能非法添加藥物的數(shù)據(jù)庫，并通過參數(shù)驗證、實際樣品檢測和實驗室方法比較等表明IMS可以用于篩查保健食品中是否含有西布曲明。Dunn等[14]表明，使用便攜式IMS光譜儀可以在低水平（2 ng）檢測到從膳食補充劑中提取到的西布曲明，并將類似的方法用于分析其他減肥產(chǎn)品的摻雜物。離子遷移色譜儀具有裝置簡單、靈敏度高、無需樣品處理、效率高、成本低[15-16]、攜帶方便、能與傳統(tǒng)檢測設(shè)備聯(lián)用等優(yōu)點，可以快速篩查出保健食品中的化合物。

2.1.2 毛細血管電泳法

毛細血管電泳（Capillary Electrophoresis，CE）是一項以毛細管作為分離通道，高壓電場作為驅(qū)動力的液相分離分析技術(shù)[17]。毛細管電泳法可對食品中的非法添加物、食品的摻假情況進行分析。徐遠金等[18]使用膠束電動毛細管色譜法測定食品中的西布曲明，根據(jù)其在電泳過程中，膠束電荷運動方向的不同而分離，這種方法能夠有效地檢測分析出食品中是否添加西布曲明，但無法確定西布曲明在其中的添加量。Carvalho等[19]研究了一種新的分析方法，通過毛細管電泳和非接觸式電導(dǎo)檢測來測定草藥制劑中西布曲明的摻雜物，所提出的方法已成功應(yīng)用于功能食品中兩種目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)的檢測，其回收率為95.3%~103.4%，測定結(jié)果良好。毛細血管電泳法簡便、快速、靈敏、分離效率高、速度快、樣品用量少，其為食品中的西布曲明檢測奠定了基礎(chǔ)。然而，毛細管電泳技術(shù)對蛋白質(zhì)進行分離時，由于蛋白質(zhì)與芯片內(nèi)壁之間的吸附能力很弱，使得其分離效率降低，峰形變寬，從而影響了樣品的重復(fù)性，這一問題仍需要進一步研究，以提高樣品的效率。

2.1.3 質(zhì)譜聯(lián)用法

質(zhì)譜具有高特異性、高靈敏度、快速單次分析、檢測限低等的特點，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用以及液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用是目前食品檢測中應(yīng)用最廣泛的質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，該法對復(fù)雜混合物的分離能力差，但對化合物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息檢測結(jié)果準確、靈敏度高、重復(fù)性好，可用于減肥類保健食品中非法添加藥物的定量分析[20-23]。Lee等[24]建立了利用液相色譜和高分辨質(zhì)譜識別多種化合物減肥的碎片離子的方法，高分辨率質(zhì)譜的高選擇性與這些碎片途徑和串聯(lián)質(zhì)譜方法相結(jié)合，成功地應(yīng)用于篩選和鑒定減肥化合物，對非法銷售的保健功能食品、食品和非法藥物進行連續(xù)阻斷和監(jiān)管。Jignesh等[25]開發(fā)并驗證了一種新的、快速、靈敏的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法，用于常規(guī)生物等效性研究，該方法從血漿中快速固相萃取，省去了干燥和重組步驟，以伊米帕明為內(nèi)標(biāo)，定量測定人血漿樣品中西布曲明活性代謝物一去甲基西布曲明（M1）和二去甲基西布曲明（M2）。Song等[26]利用流動注射串聯(lián)質(zhì)譜法開發(fā)了一種新方法，用于半定量篩查膳食補充劑中的減肥藥物，包括膳食補充劑中的西布曲明，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法進一步確認和量化樣品中西布曲明的陽性鑒定。何燕等[27]應(yīng)用通道型紙芯片結(jié)合敞開式質(zhì)譜，建立親水性通道確定溶液的流路，減少了噴霧溶劑的揮發(fā)，減少檢測樣品的損失，提高電壓的有效利用率，通過產(chǎn)生的穩(wěn)定噴霧流提高目標(biāo)物的響應(yīng)信號，以此來檢測出樣品，這種方法滿足了食品中違法添加物的檢測快速篩查的需求，但其檢測的精度不高，只能對西布曲明進行半定量的分析。

2.1.4 熒光免疫層析法

免疫層析技術(shù)（Immuno Chromatographic Assay，ICA）是一種結(jié)合免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)的分析檢測方法[28-29]，其在傳統(tǒng)膠體金試紙條檢測基礎(chǔ)上，加入了熒光檢測技術(shù)。譚貴良等[30]在結(jié)合免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)的基礎(chǔ)上，通過設(shè)計梯度抗體的反應(yīng)濃度，建立封裝抗原的檢測線，在一張試紙上構(gòu)建多層次的敏感免疫分析反應(yīng)，在普通熒光手電照射后肉眼可以直接讀取出檢測結(jié)果。Steven等[31]制備膠體金納米粒子（CG），然后使之與單克隆抗體共軛形成CGmAb，將CG-mAb與抗原分別噴涂到基質(zhì)上形成結(jié)合墊和檢測條，可以應(yīng)用于同時檢測不同樣品中非法添加物質(zhì)。熒光免疫層析法測定樣品具有簡單快速、重現(xiàn)性好、取樣量少等優(yōu)點，但其靈敏度較差，無法準確定量，可以作為樣品的初篩。

2.1.5 薄層色譜法

薄層色譜法（Thin layer chromatography，TLC），是一種操作簡單、便捷的檢測方法，其顯色劑專屬性強、靈敏度高。國內(nèi)外的食品檢測工作者通過TLC圖像技術(shù)對天然中藥中的西布曲明進行了定量檢測，Phattanawasin等[32]建立了一種簡單的薄層色譜（TLC）-圖像分析方法，采用硅膠60 F254 TLC板，以甲苯-己烷-二乙胺為流動相，用Dragendorff試劑進行斑點檢測，實現(xiàn)西布曲明的色譜分離，用于快速檢測摻雜在減肥產(chǎn)品中的西布曲明的快速測定和定量。石保龍[33]采用薄層色譜法對樣品進行快速檢測，并且通過液質(zhì)聯(lián)用的方法驗證了該方法的準確性，結(jié)果顯示相吻合。TLC用于測定產(chǎn)品中的西布曲明具有令人滿意的特異性、精確性、準確性和穩(wěn)健性，是目前主要的非法添加物的初步篩選法。

3 結(jié)語

離子遷移譜是一種裝置簡單、靈敏度高、效率高、成本低的檢測方法，但其檢出限高，不適用于含量較低目標(biāo)物的檢測；毛細管電泳法分離效率高、速度快、樣品用量少，但必須用標(biāo)準品作對比進行定性，適用窄；質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是目前保健食品中最廣泛的一種方法，但由于儀器費用昂貴，且需要專門的技術(shù)人員進行操作，難以滿足市場快速篩查需求；免疫層析技術(shù)的重現(xiàn)性好、取樣量少，但其靈敏度較差，無法準確定量；薄層色譜法專屬性強是準確可靠的方法，但保健食品中的成分復(fù)雜，干擾較大，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

通過對領(lǐng)域內(nèi)已有的西布曲明檢測主要文獻的整理分析，對比發(fā)現(xiàn)在西布曲明的定性定量檢測方面取得有效成效，但這些方法所需檢測的時間長、分析基礎(chǔ)設(shè)施昂貴、成本高、樣品制備復(fù)雜以及需要專業(yè)的操作人員等方面阻礙了對西布曲明進行具有成本效益的測試。因此，建立一種快速、簡單低成本的比色篩選方法，開發(fā)出具有卓越的選擇性和敏感性的試劑盒，用于現(xiàn)場快速分析篩查西布曲明，還需要國內(nèi)外學(xué)者進一步深入研究。