國春柘 成芳 薛喬 孫世心 趙英免 南艷 安紅

(1.邢臺(tái)市人民醫(yī)院兒科,河北 邢臺(tái) 054000;2.河北大學(xué)附屬醫(yī)院結(jié)核科,河北 保定 071000)

肺炎支原體肺炎是由肺炎支原體感染引起的一種急性呼吸道及肺部炎癥[1-2]。研究顯示,小兒支原體肺炎發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì),占兒科各種類型肺炎的10%以上,嚴(yán)重影響小兒身心健康[3]。伴隨疾病的發(fā)展,肺炎支原體肺炎可造成多系統(tǒng)免疫損傷,最常見為心肌損害,而支原體肺炎引起心肌損害除與病原體直接侵害外,并且還與機(jī)體免疫功能失衡、紊亂有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),促炎性Th17細(xì)胞與抑制性Treg細(xì)胞間平衡的打破,Treg缺失會(huì)造成效應(yīng)Th12細(xì)胞過度增殖在很多自體免疫疾病及炎癥疾病密切相關(guān)[4-5]。因此,及時(shí)有效的診斷和治療小兒支原體肺炎所致的心肌損害尤為關(guān)鍵?；诖?本研究通過探討小兒支原體肺炎血Th17/Treg細(xì)胞失衡與心肌損害發(fā)生相關(guān)性,為診斷和治療心肌損害提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年3月—2022年3月于邢臺(tái)市人民醫(yī)院就診的支原體肺炎患兒137例作為觀察對(duì)象,其中男性78例,女性59例;年齡1～14歲,平均(5.98±1.65)歲。另選擇同期健康體檢兒童96例作為對(duì)照組,其中男性61例,女性35例;年齡1～14歲,平均(6.14±1.27)歲。支原體肺炎患兒納入標(biāo)準(zhǔn):①符合《實(shí)用兒科學(xué)》[6]標(biāo)準(zhǔn)。②通過臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)檢查證實(shí)為支原體肺炎。③無先天性心臟病史。④年齡1～14歲。⑤與患兒家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①既往病史存在肝功能損害及心肌損害。②反復(fù)呼吸道感染患兒。③由于其他病原菌感染引起肺炎患兒。④存在凝血功能嚴(yán)重異?；純?。⑤嚴(yán)重精神疾病患兒。心肌損害判定標(biāo)準(zhǔn)[7]:臨床表現(xiàn)主要為胸悶、心慌、紫紺,部分伴呼吸困難、心功能衰竭、血壓明顯下降等;肌酸激酶同工酶(CK-MB)>24U/L;影像學(xué)檢查:心臟擴(kuò)大,存在心腦綜合征、心源性休克或心功能不全;心電圖表現(xiàn):以R波為主的2個(gè)或2個(gè)以上主要導(dǎo)聯(lián)的ST-T改變持續(xù)4天以上伴動(dòng)態(tài)變化,新近發(fā)現(xiàn)的房室、竇房傳導(dǎo)阻滯,完全性左束或右束支傳導(dǎo)阻滯,竇性停搏,多源性、多形性、成對(duì)或成聯(lián)律期前收縮,非房室結(jié)劑房室折返造成的異位性心動(dòng)過速、異常Q波、QRS低電壓、心室顫動(dòng)、心室撲動(dòng)、心房顫動(dòng)等。存在上述2項(xiàng)或以上判定為心肌損害。

1.2 收集臨床資料 包括心肌酶、影像學(xué)及心電圖情況。其中心肌酶水平測(cè)定:采集受試兒童靜脈血3 mL,離心10 min,收集血清,于-20 ℃保存待測(cè)。應(yīng)用美國Beckman庫爾特有限公司全自動(dòng)生化分析儀(型號(hào):AU5800型)及配套試劑盒測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和CK-MB水平,嚴(yán)格依據(jù)試劑盒說明書標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定。LDH正常范圍120～270 IU/L,CK正常范圍0～190 U/L,CK-MB正常范圍<25 U/L。

1.3 檢測(cè)Th17/Treg 采集受試兒童清晨空腹外周靜脈血3 mL,取100 μL全血肝素抗凝后加入CD127 PEMAB、CD8 APC-CY7、CD25 PE-CY7、CD3FITC抗體各10 μL,避光室溫孵育20 min,溶解紅細(xì)胞后固定共50 min,再加入IL-10、IL-17 ALEXA647標(biāo)記抗體各10 μL,避光下50 min,PBS溶液洗滌細(xì)胞并重懸后,以流式細(xì)胞儀(美國BD公司)測(cè)定Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例。

1.4 觀察指標(biāo) ①觀察支原體肺炎患兒心肌損害發(fā)生情況。②觀察各組Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例、Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例及Th17/Treg。③觀察各組心肌酶水平變化。④分析Th17/Treg與心肌酶相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 心肌損害情況 137例支原體肺炎患兒中,發(fā)生心肌損害72例為心肌損害組,無心肌損害65例為無心肌損害組。

2.2 3組心肌酶情況比較 心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于無心肌損害組和對(duì)照組,且無心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于對(duì)照組(P<0.05),見表1。

表1 3組心肌酶水平比較

2.3 3組Th17/Treg水平比較 心肌損害組Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例和Th17/Treg高于無心肌損害組和對(duì)照組,且Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例低于無心肌損害組和對(duì)照組(P<0.05);無心肌損害組Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例和Th17/Treg高于對(duì)照組,且Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞比例低于對(duì)照組(P<0.05),見表2。

表2 3組Th17/Treg水平比較

2.4 Th17/Treg與心肌酶的相關(guān)性 采用Pearson相關(guān)性分析顯示,Th17/Treg與LDH、CK和CK-MB呈線性正相關(guān)(P<0.05),見表3。

表3 Th17/Treg與心肌酶的相關(guān)性

3 討論

支原體在生命結(jié)構(gòu)上處于病毒和細(xì)菌之間,主要經(jīng)空氣、飛沫傳播;目前,關(guān)于支原體肺炎的致病機(jī)制尚未完全明確[7-11]。支原體肺炎主要是由于呼吸道功能障礙而引起心肌缺氧性損傷,加重心肌損害[12-14]。此外,有學(xué)者認(rèn)為,支原體肺炎造成肺外組織損害病理生理基礎(chǔ)可能是平滑肌上皮、腎、肺及心有自身抗體存在,肺受肺炎支原體感染后可導(dǎo)致多種血清學(xué)反應(yīng),即支原體肺炎造成的感染免疫反應(yīng)。心肌酶譜是評(píng)價(jià)心肌損害的重要指標(biāo)[15-17]。LDH主要存在在人體所有組織細(xì)胞內(nèi),用于心肌疾病的檢查。在病理情況如CK、CK-MB水平增高,提示心肌受損。本研究結(jié)果顯示,心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于無心肌損害組和對(duì)照組,由此可見支原體肺炎心肌損害患兒血清LDH、CK和CK-MB水平明顯增高。分析其原因可能是由于支原體肺炎侵入呼吸道后復(fù)制,造成心肌損害,隨著患兒心肌損害程度加重,則會(huì)導(dǎo)致各項(xiàng)指標(biāo)呈增高趨勢(shì)。

Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞是重要的兩類CD4+T細(xì)胞,在免疫功能正常維持方面具有重要作用[18-21]。Treg細(xì)胞主要是可調(diào)節(jié)其他免疫細(xì)胞功能的一種細(xì)胞亞型,并且在機(jī)體免疫功能穩(wěn)定維持方面具有重要作用。Th17細(xì)胞能夠分泌IL-17,在抗感染對(duì)抗病原體侵襲中具有重要作用[22-23]。Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞功能和分化相互遏制,二者數(shù)量的表達(dá)失衡則會(huì)使病毒復(fù)制水平受影響,對(duì)心肌損害發(fā)展和轉(zhuǎn)歸起關(guān)鍵作用。Treg細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用在減輕心肌損害、保護(hù)心肌自身耐受性方面發(fā)揮關(guān)鍵作用;Th17細(xì)胞具有促炎作用,并且在心肌免疫損傷中占主導(dǎo)地位。本研究表明,心肌損害組Th17/Treg高于無心肌損害組和對(duì)照組,由此可見支原體肺炎心肌損害患兒Th17/Treg細(xì)胞比例明顯升高,Th17/Treg細(xì)胞比例明顯失衡。此外,本研究也表明,Th17/Treg與LDH、CK和CK-MB呈正相關(guān)。調(diào)節(jié)Th17/Treg細(xì)胞比例平衡,可作為防治心肌損害的新靶點(diǎn),但其具體作用機(jī)制尚未完全明確,還需后續(xù)進(jìn)一步深入探討,進(jìn)一步證實(shí)和明確Th17/Treg與心肌酶譜之間的關(guān)系。

4 結(jié)論

小兒支原體肺炎心肌損害發(fā)生率較高,且Th17/Treg細(xì)胞比例失衡,及與LDH、CK和CK-MB正相關(guān)。但本研究樣本量相對(duì)較小,還需后續(xù)增加樣本量進(jìn)行多中心、多樣本深入研究,為臨床提供可靠的參考依據(jù)。