黃蒙蒙,周廣濤,張霞,曹桂云,王全軍,林永強(qiáng),孟兆青

(1.山東宏濟(jì)堂制藥集團(tuán)股份有限公司,山東 濟(jì)南 250100;2.山東肺康中醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司,山東 濟(jì)南 250100;3.山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院,山東 濟(jì)南 250101)

續(xù)斷為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷(DipsacusasperWall.ex Henry)的干燥根,其來(lái)源在中國(guó)古代各時(shí)期雖有變化,但自明清時(shí)期至近現(xiàn)代再到《中國(guó)藥典》均以川續(xù)斷為唯一正品來(lái)源。明代《本草綱目》載:“續(xù)斷、屬折、接骨,皆以功效名也”,“接骨以功而名,別名接骨木”,在明代的《滇南本草》中,更是首次將川續(xù)斷科植物川續(xù)斷引入[1]?！吨袊?guó)藥典》2020年版(一部)收載其來(lái)源為“于秋季采挖,除去根頭和須根,用微火烘至半干,堆置‘發(fā)汗’至內(nèi)部變綠色時(shí),再烘干”[2]。關(guān)于續(xù)斷的研究,10年前主要集中在化學(xué)成分和質(zhì)量差異方面[3-7],近10年國(guó)內(nèi)外亦有關(guān)于續(xù)斷的綜述報(bào)道,但存在報(bào)道不全,內(nèi)容不夠前沿等問(wèn)題[8-11]。前通過(guò)整理總結(jié)近10年來(lái)對(duì)續(xù)斷化學(xué)成分和藥理作用的文獻(xiàn)報(bào)道,以期有助于對(duì)其更深入研究。

1 化學(xué)成分研究進(jìn)展

續(xù)斷中主要含有三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜類、木脂素類、揮發(fā)油類、生物堿類和多糖等成分,三萜皂苷類以及環(huán)烯醚萜類也是其含量最高的成分。近年來(lái),隨著對(duì)續(xù)斷研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)其中還含有苯丙素類、有機(jī)酸類、蛋白質(zhì)類等成分。

1.1 三萜皂苷類三萜皂苷類不僅是續(xù)斷中含量最高的成分更是其主要活性成分。目前已報(bào)道發(fā)現(xiàn)的約有20余種,且均為齊墩果烷型五環(huán)三萜皂苷,在3位和(或) 28位糖基取代[12]。其中以川續(xù)斷皂苷VI含量最高?！吨袊?guó)藥典》2015年版(一部)中續(xù)斷含量測(cè)定項(xiàng)下,便以川續(xù)斷皂苷VI作為指標(biāo)成分進(jìn)行定量控制[1]?，F(xiàn)代常用的發(fā)汗、酒制和鹽制炮制加工方法均可達(dá)到增效目的。白玫等[13]對(duì)酒續(xù)斷最佳炮制工藝研究發(fā)現(xiàn),川續(xù)斷浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量最高時(shí)的炮制工藝為加酒量10%,溫度150 ℃,炒制6 min。劉艷等[14]對(duì)續(xù)斷的發(fā)汗炮制進(jìn)行評(píng)分比較,發(fā)現(xiàn)將續(xù)斷烘至半干時(shí)發(fā)汗,其川續(xù)斷總皂苷和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量最高。

1.2 環(huán)烯醚萜類張芬等[15]通過(guò)HPLC法測(cè)定發(fā)現(xiàn),馬錢苷、馬錢苷酸和當(dāng)藥苷為續(xù)斷中3種高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的環(huán)烯醚萜類成分。此外,孫欣光等[16]運(yùn)用大孔樹脂、反相硅膠及制備高效液相等色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化,發(fā)現(xiàn)了7個(gè)環(huán)烯醚萜類成分,分別為馬錢苷、獐牙菜苷、續(xù)斷苷H、續(xù)斷苷F、續(xù)斷苷E、6′-O-β-D-apiofuranosyl-sweroside、triplostoside A。

1.3 揮發(fā)油類揮發(fā)油也是續(xù)斷的主要成分之一。關(guān)于續(xù)斷中揮發(fā)油的提取研究,較早的有吳知行等[17]采用索氏提取法,以乙醚連續(xù)回流6 h,回收乙醚,再將提取物用水蒸氣蒸餾法提取,共鑒定得到41種化合物。近年來(lái),李濤等[18]采用超聲輔助提取川續(xù)斷揮發(fā)油。并通過(guò)GC-MS進(jìn)行揮發(fā)油化學(xué)成分分析,共檢測(cè)出53種成分,鑒定出51種。

1.4 木脂素類有關(guān)續(xù)斷中木質(zhì)素類成分的報(bào)道較少。孫欣光等[16]運(yùn)用大孔樹脂、反相硅膠及制備高效液相等色譜技術(shù)對(duì)續(xù)斷藥材進(jìn)行分離純化,共分離得到6個(gè)木質(zhì)素類化合物,分別為(7R,8S,7′R,8′S)-5-methoxyprinsepiol-4-O-β-D-glucopyranoside、(7R,8S,7′R,8′S)-prinsepiol4-β-D-glucopyranoside、acanthoside D、(7R,8S,7′R,8′S)-fraxiresinol-4′-O-β-D-glucopyranoside、(7R,8S,7′R,8′S)-8-hydroxypinoresinol-4′-O-β-D-glucopyranoside、(7R,8S,7′R,8′S)-8-hydroxypin-oresinol-4-O-β-D-glucopyranoside。

1.5 生物堿類張丹等[19]對(duì)比了不同炮制方法對(duì)續(xù)斷中總生物堿的影響,發(fā)現(xiàn)鹽制續(xù)斷中總生物堿含量最高,生品次之,而清炒和酒制法得到的續(xù)斷其生物堿較低。目前已報(bào)道鑒定出的續(xù)斷生物堿主要有venoterpine、cantleyine和gentianine[20]。

1.6 多糖類多糖也是續(xù)斷中含量較多的成分之一。張丹等[21]采用超聲波輔助提取法提取續(xù)斷多糖,并對(duì)工藝進(jìn)行了優(yōu)化,最終確定最佳提取工藝為料液比1∶20(g∶mL),提取時(shí)間60 min,提取4次,測(cè)得續(xù)斷多糖的平均提取率為7.472%。商龍臣等[22]采用微波輔助水浴浸提方法提取續(xù)斷多糖,并對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,最終確定最佳提取條件為微波功率800 W處理6 min、料液比1∶100(g∶mL)、水浴浸提時(shí)間80 min。

1.7 其他隨著近年來(lái)對(duì)續(xù)斷研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)其中還含有苯丙素類、有機(jī)酸類、蛋白質(zhì)類等。楊瑩等[23]研究續(xù)斷“發(fā)汗”前后水煎液HPLC指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)續(xù)斷中有綠原酸、異綠原酸C、咖啡酸等成分,說(shuō)明續(xù)斷中含有苯丙素類、有機(jī)酸類成分。晉海軍等[24]采用Tris-HCl法提取不同產(chǎn)地川續(xù)斷根蛋白,用SDS-PAGE凝膠電泳技術(shù)對(duì)比不同產(chǎn)地續(xù)斷根蛋白條帶差異,為在蛋白質(zhì)層面闡釋因產(chǎn)地差異造成續(xù)斷質(zhì)量差異提供基礎(chǔ)資料。

2 藥理作用

續(xù)斷在臨床中應(yīng)用較廣泛,目前主要用于治療筋傷骨折、跌撲損傷、風(fēng)濕痹痛、肝腎不足、腰膝酸軟、崩漏、胎漏等病癥。近年來(lái),也有文獻(xiàn)報(bào)道續(xù)斷有誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡作用,為續(xù)斷在臨床應(yīng)用方面研究提供了基礎(chǔ)。

2.1 對(duì)骨組織的續(xù)斷用于治療骨折、骨質(zhì)疏松早有報(bào)道。近年來(lái),研究者對(duì)其作用機(jī)制又有深入研究。楊瑩等[23]研究分析續(xù)斷HPLC指紋圖譜與細(xì)胞增殖分化藥效的譜效關(guān)系發(fā)現(xiàn),川續(xù)斷皂苷VI、川續(xù)斷皂苷IV同分異構(gòu)體系列、馬錢苷、綠原酸、川續(xù)斷皂苷X、異綠原酸C、咖啡酸可能是續(xù)斷影響細(xì)胞增殖分化作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。劉開飛[25]通過(guò)建立體外RANKL誘導(dǎo)破骨細(xì)胞的培養(yǎng)體系和體內(nèi)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型,發(fā)現(xiàn)川續(xù)斷皂苷Ⅵ通過(guò)抑制NF-κB中P65的核轉(zhuǎn)位和AKT通路以及MAPK中JNK和p38的磷酸化,繼而影響下游C-Fos、NFATcl的活化進(jìn)而抑制體外RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成及其骨吸收活性,緩解體內(nèi)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎小鼠的骨破壞。楊瑩等[26]通過(guò)將人成骨樣MG-63細(xì)胞、幼鼠成骨細(xì)胞分別與續(xù)斷水煎液和大鼠含藥血清共同培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)續(xù)斷水煎液和含藥血清均能明顯促進(jìn)MG-63細(xì)胞、幼鼠成骨細(xì)胞的增殖,且提高成骨細(xì)胞ALP活性。高歌等[27]研究續(xù)斷治療骨質(zhì)疏松作用機(jī)制,發(fā)現(xiàn)續(xù)斷可能主要通過(guò)AKT1、MAPK1、MAPK3影響PI3K-AKT信號(hào)通路治療骨質(zhì)疏松。

2.2 對(duì)生殖系統(tǒng)的作用續(xù)斷在臨床中也常被用于不孕不育、安胎、治療先兆性流產(chǎn)和習(xí)慣性流產(chǎn)的治療,其所含生物堿是主要的活性成分。龔小健等[28]分別以受孕22 d的大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,分別給藥300 μg·mL-1和600 μg·mL-1的生物堿,發(fā)現(xiàn)隨著劑量的增加,起效增快,效果也相應(yīng)增強(qiáng),有一定的量效關(guān)系。王權(quán)勝等[29]研究續(xù)斷種子方對(duì)無(wú)精子癥模型小鼠睪丸精子發(fā)生發(fā)育及c-kit蛋白表達(dá)的影響的作用機(jī)制,發(fā)現(xiàn)該方可有效促進(jìn)睪丸生精上皮的精子發(fā)生發(fā)育,增加精子數(shù)量。

2.3 對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用洪汝[30]研究續(xù)斷提取物對(duì)血管性癡呆大鼠模型的影響,發(fā)現(xiàn)其可明顯改善血管性癡呆大鼠認(rèn)知學(xué)習(xí)記憶障礙;作用機(jī)理可能是通過(guò)調(diào)節(jié)bcl-2、bax蛋白表達(dá)和提高體內(nèi)清除代謝過(guò)程中所產(chǎn)生的自由基能力,從而對(duì)海馬神經(jīng)元起到一定的保護(hù)作用。未小明[31]研究續(xù)斷對(duì)血管性癡呆模型大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響,發(fā)現(xiàn)續(xù)斷水煎液可改善VD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

2.4 對(duì)免疫系統(tǒng)的作用李顏桃等[32]研究川續(xù)斷水煎液對(duì)小鼠血清中免疫球蛋白和細(xì)胞因子的影響,發(fā)現(xiàn)川續(xù)斷水煎劑可升高小鼠血清中免疫球蛋白水平,在降低Th2類細(xì)胞因子的水平的同時(shí)還可增強(qiáng)血清中Th1類細(xì)胞因子水平。李賢讓[33]研究續(xù)斷總皂苷治療骨關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制發(fā)現(xiàn)其可抑制炎性細(xì)胞因子和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá),進(jìn)而達(dá)到對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的治療作用。

2.5 抗腫瘤目前,關(guān)于續(xù)斷抗腫瘤作用的報(bào)道較少。謝瑾玉等[34]對(duì)續(xù)斷水提液誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡作用機(jī)制進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)續(xù)斷水提液能通過(guò)損傷線粒體的方式,導(dǎo)致HeLa細(xì)胞凋亡,為臨床應(yīng)用續(xù)斷治療腫瘤提供研究基礎(chǔ)。

3 總結(jié)

續(xù)斷在我國(guó)具有悠久的藥用史,雖然歷史上均以續(xù)斷為其正名,但也存在基源復(fù)雜,品種混亂的情況。據(jù)考證,其來(lái)源從最早的漢朝時(shí)期的豆科植物、唇形科植物,到南北長(zhǎng)時(shí)期的寄生科植物桑寄生、忍冬科植物接骨木和買麻藤科植物買麻藤,再到唐宋時(shí)期的唇形科植物糙蘇、忍冬科植物接骨木、大薊、大葉糙蘇、短柄影芝麻及野芝麻;至明清時(shí)期其主要來(lái)源則變?yōu)闊粜静菘浦参锸埰c和川續(xù)斷科植物川續(xù)斷,近現(xiàn)代時(shí)期還有日本續(xù)斷這一來(lái)源,《中國(guó)藥典》將川續(xù)斷科植物川續(xù)斷作為其唯一正品來(lái)源。

續(xù)斷作為臨床常用中藥,對(duì)其研究已較全面。但真正深入研究的大多是其含量較高的三萜皂苷類,如川續(xù)斷皂苷Ⅵ,目前,大量的研究也表明,其是續(xù)斷發(fā)揮各種藥理藥效的主要有效成分。但雖然其療效確切,但續(xù)斷中的化學(xué)成分較復(fù)雜,對(duì)于其他成分的研究還有待深入。通過(guò)總結(jié)近10年來(lái)對(duì)續(xù)斷的研究文獻(xiàn),發(fā)現(xiàn)對(duì)續(xù)斷中的生物堿類、有機(jī)酸類、苯丙素類和蛋白質(zhì)類研究報(bào)道較少,這些成分雖含量較低但亦有較高研究?jī)r(jià)值。此外,在藥理作用方面,大多數(shù)研究均集中在續(xù)斷對(duì)骨組織的作用而對(duì)其改善心腦血管血液流通作用及抗腫瘤作用等方面研究報(bào)道較少,值得進(jìn)一步深入探索。