張軼敏　王東　王煜　郝建秀　周洪友

摘要：為了解棘孢木霉（Trichoderma asperellum）PT-29的抑菌機制及其代謝產(chǎn)物對尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）ZY-3-1的生防作用，采用雙培養(yǎng)試驗、對扣試驗、培養(yǎng)濾液試驗，測定棘孢木霉PT-29及其代謝產(chǎn)物對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的拮抗作用，并使用熒光定量PCR和高效液相色譜技術(shù)，定量分析了棘孢木霉代謝產(chǎn)物對尖孢鐮刀菌ZY-3-1中鐮刀菌酸的抑制作用。結(jié)果表明，棘孢木霉PT-29對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的抑菌率達63.64%，同時增強了馬鈴薯植株對尖孢鐮刀菌的抗性；木霉代謝液、揮發(fā)性物質(zhì)對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的抑菌率分別達52.22%、42.86%。木霉代謝產(chǎn)物處理抑制鐮刀菌酸相關(guān)合成基因的表達；木霉代謝液處理后，尖孢鐮刀菌中鐮刀菌素含量為0.003 3 μg/mL，木霉揮發(fā)性代謝產(chǎn)物處理后，尖孢鐮刀菌中鐮刀菌素的含量為0.031 8 μg/mL，均顯著低于對照組菌株鐮刀菌素的含量（0.086 0 μg/mL）。本研究初步解釋了棘孢木霉對尖孢鐮刀菌的生防機制，棘孢木霉PT-29的代謝產(chǎn)物在防治馬鈴薯枯萎病中展現(xiàn)出巨大潛力，可為馬鈴薯枯萎病的防治提供新的思路和見解。

關(guān)鍵詞：棘孢木霉；生物防治；尖孢鐮刀菌；鐮刀菌酸；次級代謝物

中圖分類號：S435.32 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2023）21-0126-07

馬鈴薯（Solanum tuberosum）是我國重要的糧食作物之一，由于其自身獨特的營養(yǎng)和適應(yīng)性，在提供碳水化合物、蛋白質(zhì)、纖維、多種維生素、礦物質(zhì)方面發(fā)揮著舉足輕重的作用［1］。近年來，隨著對馬鈴薯種植和生產(chǎn)的愈發(fā)重視，我國馬鈴薯的種植范圍不斷擴大。然而，馬鈴薯植株易受土傳真菌的侵染，造成馬鈴薯的產(chǎn)量和品質(zhì)下降，導致嚴重的經(jīng)濟損失。其中，馬鈴薯枯萎病的發(fā)生較為嚴重［2］。病原尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）通過菌絲侵入宿主維管系統(tǒng)，損害宿主植物，分泌水解酶和真菌毒素，造成馬鈴薯的根、莖壞死，細胞凋亡，葉片萎蔫，植株在幾周內(nèi)死亡，最終導致馬鈴薯產(chǎn)量受損［3-5］。馬鈴薯枯萎病的防治一直是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的難題，傳統(tǒng)的防治措施包括加強田間管理、使用化學殺菌劑、利用抗性品種等［6］。對于許多病原真菌，應(yīng)用化學殺菌劑是一種高效的管理措施。但過度使用合成農(nóng)藥，會導致空氣污染、土壤肥力下降、食物中農(nóng)藥殘留超標等負面影響；而過度使用化學殺菌劑，極有可能產(chǎn)生新的病原菌或抗藥性菌株［7-8］。

大量研究表明，生物防治是一種綠色可持續(xù)的農(nóng)業(yè)管理措施，能夠有效控制病原菌的生長和繁殖［9］。近年來，來自微生物的次生代謝產(chǎn)物（secondary metabolites，SMs）在植物病害防治中發(fā)揮了重要作用［10］。2021年，Yue 等從海葵共生真菌Emericella sp. SMA01中分離出吩嗪類物質(zhì)吩嗪-1-羧酸（phenazine-1-carboxylic acid），能有效抑制辣椒疫霉［11］。棘孢木霉是當今使用最廣泛的生防制劑，其生防機制與其次生代謝產(chǎn)物（SMs）密切相關(guān)，木霉屬物種能夠產(chǎn)生多種次級代謝物，不同次級代謝物可抵抗不同的病原體［12］。例如，棘孢木霉（CBS 433.97）產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物——苯乙醇，對禾谷鐮刀菌和尖孢鐮刀菌均具有明顯的抑制作用［13］。Tomah 等研究發(fā)現(xiàn)，綠色木霉（T. virens）產(chǎn)生的膠霉毒素（gliotoxin）能顯著降低辣椒疫病的發(fā)病率和嚴重程度［13］。尖孢鐮刀菌是一種絲狀真菌，可產(chǎn)生44種具有多種生物活性的次級代謝產(chǎn)物［14］。鐮刀菌酸（fusaric acid，F(xiàn)A）（5-丁基吡啶羧酸）是尖孢鐮刀菌分泌的常見毒素之一，也是主要致病因子，其合成基因和調(diào)控途徑已被廣泛研究。Smith等研究表明，鐮刀菌酸的合成與FUB基因簇相關(guān)［15-16］。聚酮合酶（PKS，F(xiàn)UB1）、未知蛋白（FUB2）、天冬氨酸激酶（FUB3）、絲氨酸水解酶（FUB4）共同作用產(chǎn)生鐮刀菌酸毒素，通過qPCR方法檢測其基因表達水平，可推斷鐮刀菌酸的合成是否受到影響［17］。

越來越多的研究更加關(guān)注利用木霉衍生的抗真菌化合物探索防治病害的機制［18-19］。鑒于木霉菌次級代謝產(chǎn)物的廣泛應(yīng)用及其顯著的抗真菌活性，有必要對以棘孢木霉（T.asperellum）PT-29的次級代謝產(chǎn)物作為防治馬鈴薯枯萎病的潛在生物農(nóng)藥進行評價［20］。本試驗在溫室條件下評價尖孢鐮刀菌（F. oxysporum）ZY-3-1對馬鈴薯的致病性，分析棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對菌株ZY-3-1的抑制作用，同時結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，初步探究棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對菌株的抑制機制，以期為馬鈴薯枯萎病的防治提供新的思路和方法［21］。

1 材料與方法

1.1 菌株材料與培養(yǎng)條件

棘孢木霉 （T.asperellum） PT-29與尖孢鐮刀菌（F. oxysporum）ZY-3-1由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學生物農(nóng)藥實驗室菌種保藏庫提供。培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA：200 g馬鈴薯切碎煮沸的濾液，20 g葡萄糖，17 g瓊脂，1 000 mL蒸餾水）；將用甘油保存的尖孢鐮刀菌（F. oxysporum）ZY-3-1菌餅放入PDA中，黑暗條件（28 ℃）下培養(yǎng) 7 d；長出新菌絲后將5個菌餅放入馬鈴薯葡萄糖肉湯（PDB）中，180 r/min（28 ℃）離心培養(yǎng)7 d。用無菌水將孢子懸液的濃度調(diào)節(jié)至1×106 CFU/mL，使用普通光學顯微鏡觀察計數(shù)。供試馬鈴薯品種為Favorite，種薯和組培苗均購自武川縣塞豐馬鈴薯種業(yè)有限公司。

1.2 棘孢木霉PT-29代謝液的制備

將5個棘孢木霉PT-29菌餅放入含有250 mL馬鈴薯葡萄糖肉湯（PDB）中，180 r/min（28 ℃）離心培養(yǎng)7 d。7 d后用雙層紗布過濾，除去菌絲體，離心10 min（9 000 r/min），收集上清液并使用 0.22 μm 水系過濾器除菌，獲得的代謝物保存于 4 ℃ 條件下備用［22］。

1.3 致病性分析

試驗于2022年7月在內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學園藝與植物保護學院日光溫室內(nèi)進行。馬鈴薯脫毒微型薯置于2% NaClO溶液中滅菌10 min，后置于75%乙醇中1 min，最后用無菌水沖洗3次［23］。將基質(zhì)與土壤按1 ∶4的體積比例混勻，用于培養(yǎng)馬鈴薯幼苗。馬鈴薯播種25 d后，對馬鈴薯幼苗進行傷根處理?？瞻讓φ眨褐唤臃N20 mL無菌水；陽性對照：只接種20 mL 1×106 CFU/mL ZY-3-1菌懸液至根系周圍土壤中；處理：將20 mL 1×106 CFU/mL 的棘孢木霉 PT-29 菌懸液加入至根系周圍土壤中，接菌處理 2 d 后，將20 mL 1×106 CFU/mL 的尖孢鐮刀菌 ZY-3-1 菌懸液加入至上述處理后的盆栽中。每組處理重復3次。接種尖孢鐮刀菌 ZY-3-1 20 d后，觀察植株葉片發(fā)病情況。按病害嚴重度分級，標準如下：1 為無明顯損傷；2 為病斑直徑＜1.0 cm；3 為病斑直徑為1.0～1.5 cm；4 為病斑直徑為1.5～2.0 cm；5 為病斑直徑＞2.0 cm，病斑相連呈不規(guī)則大斑塊；6 為整片葉片侵染發(fā)病。計算病情指數(shù)，病情指數(shù)=∑（各級病葉數(shù)×各級代表值）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級代表值）×100。

取3片大小一致且完全展開的馬鈴薯葉片，放入裝有濾紙的保濕盒中。將真菌接種在馬鈴薯葉片背面，每組重復3次?？瞻讓φ眨–K）：只接種 20 μL 清水；陽性對照（B）：只接種20 μL 1×106 CFU/mL ZY-3-1；處理（A）：先接種20 μL 1×106 CFU/mL棘孢木霉 PT-29 懸浮液，2 d后接種 20 μL 1×106 CFU/mL ZY-3-1。在保濕盒中加入少量水，保證葉片足夠濕潤，每天拍照觀察葉片的發(fā)病情況［24］。

1.4 棘孢木霉PT-29對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的生物測定

將直徑為5 mm的棘孢木霉PT-29、尖孢鐮刀菌ZY-3-1菌餅置于PDA培養(yǎng)基上，彼此相距 5 cm，距離平板兩邊2 cm。對照組中，ZY-3-1被單獨放置在含有PDA的培養(yǎng)皿（9 cm）中。28 ℃下培養(yǎng)7 d，處理和對照平板同時重復3次。每天觀察生長情況并記錄菌落直徑，當對照組中的菌落直徑達到最大值時停止記錄［25］。菌絲生長抑制率=（C-T）/C×100%，其中，T、C分別是處理、對照平板中尖孢鐮刀菌的菌落直徑。

1.5 棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物抗真菌的生物測定

通過密封平板法測試棘孢木霉PT-29的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對尖孢鐮孢菌ZY-3-1生長的影響［26］。棘孢木霉PT-29、尖孢鐮刀菌ZY-3-1在含有PDA 的培養(yǎng)皿中分別生長3、7 d。從培養(yǎng)皿上切下菌餅（直徑5 mm），分別放入培養(yǎng)基的中心，移除培養(yǎng)皿蓋，然后將2個培養(yǎng)皿底部對扣并用密封膜密封。以僅含有ZY-3-1菌餅的PDA作為對照，在28 ℃下培養(yǎng)5 d［27］。采用“1.4”節(jié)中的方法測定揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的菌絲生長抑制率，每個處理重復3次。

配制PDA培養(yǎng)基，將制備好的棘孢木霉PT-29代謝液以25%的體積比加入到PDA中，無菌蒸餾水以25%的體積比加入PDA作為對照，分別制作平板。將菌株ZY-3-1的菌餅 （直徑5 mm） 接種到含有棘孢木霉PT-29代謝液和對照的PDA平板中。28 ℃下培養(yǎng)7 d，每個處理重復3次。用十字交叉法測定ZY-3-1的菌落直徑，計算菌絲生長抑制率，計算方法同“1.4”節(jié)。

1.6 鐮刀菌酸相關(guān)致病基因的相對表達水平

收集 “1.5” 節(jié)中揮發(fā)性代謝產(chǎn)物和代謝液處理菌株ZY-3-1的菌絲，用qRT-PCR方法檢測鐮刀菌酸相關(guān)基因（FUB1、FUB2、FUB3、FUB4）的表達。actin作為內(nèi)參基因。 qRT-PCR中使用的基因引物為FUB1 F：ACTTCGCCTCGTCATCTC，R：GAACCCAGCATCAAACTTAT； FUB2 F：GCCAACTGCTGTCACTAT，R：TTCCGAGGTGGAGATTAG；FUB3 F：CCCGATACACCATACCCT，R：CCAACTTCTTGCCGTGAG；FUB4 F：CACCCTTGCTCATCACAG，R：CGTAAAAATATCCTTCCGAATAATC；actin F：GAGGGACCGCTCTCGTCGT，R：GGAGATCCAGACTGCCGCTCAG。使用Primer Script RT Master Mix （TaKaRa公司，中國）合成第一鏈cDNA，qRT-PCR程序為 95 ℃ 1 min；95 ℃ 5 s，60 ℃ 15 s，40個循環(huán)。每次處理進行3次獨立的定量PCR檢測，根據(jù)CT值法計算目標基因的相對表達水平［28-29］。

1.7 液相色譜定量鐮刀菌酸

尖孢鐮刀菌ZY-3-1及經(jīng)木霉PT-29代謝產(chǎn)物處理后的尖孢鐮刀菌ZY-3-1經(jīng)過4 ℃解凍混勻后，準確移取2 g 菌絲，混于15 mL離心管中，然后加入5 mL乙酸乙酯，振蕩混勻10 min，低溫超聲15 min，5 000 r/min離心10 min，將上清液轉(zhuǎn)移至另一個15 mL離心管中，重復提取3次，合并樣品，低溫凍干，然后用0.5 mL色譜級甲醇定容，振蕩混勻5 min，過0.22 μm濾膜，待測。

通過連接到檢測器（Prostar DAD 330，variable，德國）的HPLC（Jasco公司，日本）進行分析，波長為270 nm，色譜柱為250 nm×4.6 nm，填料直徑為 0.5 μm，柱溫為25 ℃［30］。流動相為10%甲酸水和甲醇的梯度，體積比為1 ∶9。流速為0.1 mL/min，采用外標法定量分析，鐮刀菌酸標準品濃度≥98%。

1.8 統(tǒng)計分析

使用SPSS 25.0軟件進行單因素方差分析（One-way ANOVA）和數(shù)據(jù)處理；并使用Graphpad 9.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析并作圖［31］。

2 結(jié)果與分析

2.1 馬鈴薯盆栽試驗病情指數(shù)的統(tǒng)計及離體葉片的發(fā)病癥狀表現(xiàn)

由圖1的盆栽試驗可知，生長25 d 的馬鈴薯苗，接種菌株ZY-3-1 20 d后，植物表現(xiàn)出葉片變黃、萎蔫及維管束變褐的癥狀，病情指數(shù)為65.91；而棘孢木霉PT-29灌根處理18 d后，馬鈴薯葉片變黃和萎蔫程度顯著降低，病情指數(shù)為25.81，顯著低于陽性對照（P<0.05）（表1）。利用離體葉片接種法接種，接種3 d后，接種部位出現(xiàn)病斑；接種5 d 后，病斑明顯擴大且葉片開始發(fā)黃，接種7 d后馬鈴薯離葉片產(chǎn)生明顯的壞死癥狀，接種部位腐爛明顯，大部分葉片變黃，病斑面積較大，而用棘孢木霉PT-29處理過的葉片癥狀較輕（圖2）。

2.2 棘孢木霉PT-29菌株對病原體拮抗作用的影響

通過雙培養(yǎng)生物測定試驗發(fā)現(xiàn)，棘孢木霉PT-29對菌株ZY-3-1的生長速率和顏色產(chǎn)生影響（圖3），菌株ZY-3-1培養(yǎng)5 d后，菌落的直徑為7.7 cm，呈深紅色，菌絲致密且生長較快；而與棘孢木霉PT-29共培養(yǎng)5 d后，菌株ZY-3-1菌落的直徑為2.8 cm，呈紅色，靠近棘孢木霉PT-29菌株方向的病原菌生長緩慢，菌絲稀疏；棘孢木霉PT-29對菌株ZY-3-1的抑制率達到63.64%。

2.3 棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對生物量和菌落生長的影響

用雙平板法測定棘孢木霉PT-29釋放的揮發(fā)性有機化合物對菌株ZY-3-1菌絲生長的抑制活性，ZY-3-1與棘孢木霉PT-29菌落沒有物理接觸。揮發(fā)性有機化合物抑制了菌株ZY-3-1菌落的直徑，未經(jīng)處理的菌株ZY-3-1菌絲體在培養(yǎng) 5 d 后，直徑為3.5 cm；相比之下，用揮發(fā)性有機化合物處理的菌絲體生長直徑為2.0 cm，抑菌率為42.86%；菌株ZY-3-1菌落產(chǎn)生深紅色素，經(jīng)處理的菌株ZY-3-1菌落為淺紅色（圖4-A）。

在含有棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物的馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）平板上，檢測棘孢木霉PT-29代謝物對菌株ZY-3-1的影響。結(jié)果如圖4-B顯示，在含有棘孢木霉PT-29代謝液的平板中，菌株的菌絲體生長被明顯抑制，抑制率為52.22%，菌絲體質(zhì)地稀疏且無色素產(chǎn)生；而對照組的菌絲體質(zhì)地致密且產(chǎn)生淺紅色素。

2.4 棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對鐮刀菌酸含量的影響

通過液相色譜檢測鐮刀菌酸的含量，結(jié)果（圖 5-A）表明，菌株ZY-3-1、棘孢木霉PT-29揮發(fā)性代謝產(chǎn)物處理的菌株ZY-3-1、棘孢木霉PT-29代謝液處理菌株ZY-3-1產(chǎn)生的鐮刀菌酸的峰面積分別為5.963、1.831、0.120。由此推斷，處理前后菌株中的鐮刀菌酸含量發(fā)生了改變。通過鐮刀菌酸標準品構(gòu)建基于峰面積和鐮刀菌酸質(zhì)量濃度的標準曲線（y=49.178x－72.565，r2=0.998 8）發(fā)現(xiàn)，棘孢木霉代謝液處理組中鐮刀菌酸含量為0.003 3 μg/mL，棘孢木霉PT-29揮發(fā)性物質(zhì)處理組的鐮刀菌酸含量為0.031 8 μg/mL，而對照組中鐮刀菌酸含量高達0.086 0 μg/mL（圖5-B），處理前后鐮刀菌酸含量差異極顯著（P<0.001）。

2.5 棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對鐮刀菌酸毒素合成基因表達的影響

為進一步確認鐮刀菌酸的合成受到了抑制，通過qRT-PCR技術(shù)檢測棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對鐮刀菌酸毒素相關(guān)合成基因表達的影響。結(jié)果表明，經(jīng)棘孢木霉揮發(fā)性物質(zhì)處理過的菌株ZY-3-1中鐮刀菌酸的FUB基因（FUB1、FUB2、FUB3、FUB4）表達均顯著下降（P<0.05）（圖6-A）；經(jīng)棘孢木霉代謝液處理過的菌株ZY-3-1中的鐮刀菌酸合成相關(guān)基因的表達水平均顯著降低（P<0.05）（圖6-B）。以上結(jié)果表明，棘孢木霉代謝物能有效抑制鐮刀菌酸毒素相關(guān)合成基因的表達，進而降低鐮刀菌中鐮刀菌酸毒素的含量。

3 結(jié)論與討論

棘孢木霉具有良好的拮抗能力，常被用作有效生防真菌來抑制病原真菌的生長，對植物及病原菌具有高效的生防機制［32］。研究表明，海洋生境棘孢木霉TCS007對16種植物病原菌的抑制率為56.65%～87.62%［33］。棘孢木霉M2對8種植物病原菌均有較好的抑制能力，并且可以促進植物生長［34］。本研究比較了棘孢木霉PT-29對尖孢鐮孢菌的抑制作用，結(jié)果表明，棘孢木霉PT-29對菌株ZY-3-1有較強的拮抗作用，其抑菌率可達63.64%，防治效果較好。同時盆栽試驗結(jié)果顯示，加入棘孢木霉PT-29后對病原菌ZY-3-1有抑制效果，具有較高的應(yīng)用價值。棘孢木霉能夠通過多種生防機制對多種植物病原真菌起拮抗作用，如通過分泌代謝產(chǎn)物來抑制病原菌的生長。棘孢木霉分泌的6-正戊基-2H-吡喃-2-酮（6-PAP）對尖孢鐮刀菌具有較好的抑制效果［35］。前人研究表明，棘孢木霉菌株GH-20產(chǎn)生的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物（volatile gas，VOG）、非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物（non-VOG）對病原菌的抑菌率分別為59.95%、79.49%［36］。

本試驗結(jié)果表明，棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對尖孢鐮刀菌ZY-3-1的生長均有抑制作用，棘孢木霉PT-29釋放的揮發(fā)性化合物對尖孢鐮刀菌 ZY-3-1產(chǎn)生拮抗作用（圖4-A）且防治效果達42.86%，棘孢木霉PT-29培養(yǎng)的代謝液能更好地抑制菌落生長（圖4-B），防治效果達52.22%。揮發(fā)性化合物和代謝液均導致菌絲生長異常、菌落密度稀疏和抑制色素形成。說明棘孢木霉釋放的次生代謝產(chǎn)物可能與尖孢鐮刀菌ZY-3-1的主要代謝產(chǎn)物相互作用。鐮刀菌酸是尖孢鐮刀菌的主要致病毒素之一，并以高濃度存在于菌絲之中［37］。本研究通過液相色譜檢測了FA的含量，其含量在經(jīng)過棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物處理之后顯著降低。作為尖孢鐮刀菌的致病毒素，其含量減少意味毒力降低［38-39］。前人研究表明，哈茨木霉T22可使劍蘭球莖中尖孢鐮刀菌的鐮刀菌酸含量降低［21］。西芹醇層物可使鐮刀菌酸含量下降到38.09%、59.54%、36.78%、36.65%［40］。本試驗通過 qRT-PCR 檢測，證明棘孢木霉PT-29代謝產(chǎn)物對鐮刀菌酸合成相關(guān)基因FUB1、FUB2、FUB3、FUB4的表達具有顯著抑制作用。與對照相比，棘孢木霉 PT-29 揮發(fā)性物質(zhì)處理后FUB1、FUB2、FUB3基因的相對表達水平均在0.12～0.21之間，F(xiàn)UB4基因相對表達水平為0.36；代謝液處理后的FUB基因組相對表達水平均在0.06～0.09之間。通過HPLC試驗，確定棘孢木霉PT-29揮發(fā)性物質(zhì)處理后，菌株 ZY-3-1中鐮刀菌素含量降低62.79%，代謝液處理后，菌株ZY-3-1中鐮刀菌酸含量降低96.16%；這種差異可能與棘孢木霉PT-29中的代謝物質(zhì)差異有關(guān)。

本研究初步證實棘孢木霉PT-29能夠有效抑制鐮刀菌生長，其次級代謝產(chǎn)物可抑制鐮刀菌酸合成，降低尖孢鐮刀菌的致病性，從而對尖孢鐮刀菌進行有效防控。未來將針對棘孢木霉PT-29代謝物中有效抑菌成分及尖孢鐮刀菌防控措施進行深入研究，利用遺傳和生物工程手段提高木霉生防菌劑含量，將其發(fā)展為主要有效成分，應(yīng)用于植物病害防治的生產(chǎn)實踐中。

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收稿日期：2023-02-07

基金項目：內(nèi)蒙古自治區(qū)重點研發(fā)項目（編號：2022YFHH0036）；中央引導地方科技發(fā)展資金（編號：2021ZY0005）；內(nèi)蒙古自治區(qū)科技重大專項（編號：2021ZD0005）。

作者簡介：張軼敏（1996—），女，內(nèi)蒙古鄂爾多斯人，碩士研究生，主要研究方向為有害生物綜合防治。E-mail：1305070717@qq.com。

通信作者：周洪友，博士，教授，研究方向為植物病害防治及植物病理學。E-mail：hongyouzhou2002@aliyun.com。