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        復(fù)合免疫增強成分對幼貓生長指標(biāo)和免疫功能的影響

        2023-12-20 04:56:54作者肖再利唐超趙世元?;?/span>黎華浩
        廣東飼料 2023年10期

        ◆作者:肖再利 唐超 趙世元 ?;?黎華浩

        ◆單位:佛山市雷米高動物營養(yǎng)保健科技有限公司

        近年來,養(yǎng)貓人數(shù)激增,根據(jù)《中國寵物行業(yè)白皮書》,2021年城鎮(zhèn)貓數(shù)量為5806 萬只,貓的整體年齡較低,2 歲以下貓咪占比56.9%,養(yǎng)寵時間在1 年以內(nèi)的貓主人占比26.9%,說明在養(yǎng)貓人群中,幼貓的占比較大。然而幼貓的抵抗力較差。因此,貓咪自身免疫力的加強顯得十分重要,通過寵物食品來幫助貓咪提高免疫力尚為一種可行方式。

        目前,市場上能夠提供激活免疫力的營養(yǎng)素較多,如維生素C、?;撬帷ⅵ? 胡蘿卜素、牛初乳、羊初乳和β- 葡聚糖等(王昱丁等,2018)。根據(jù)前人研究報道,在幼貓飼糧中添加0.1%的牛初乳粉,有助于增強機體免疫力(GORE 等,2021);飼糧中添加0.03%和0.05%殼寡糖,成貓血清的免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)水平顯著上升(王莎等,2022);在育成羔羊飼糧中添加10 g/kg 黃芪根粉,能改善平均日增重、抗氧化和免疫功能(HAO 等,2020),而黃芪多糖應(yīng)用在蛋雞飼糧上,具有提高禽流感疫苗抗體效果的趨勢(王天元,2016)。此外,β- 葡聚糖也報道過具有增強動物免疫、促進(jìn)動物生長的作用(賈淑庚等,2014)。然而,這些營養(yǎng)素以組合形式添加在幼貓飼糧中的研究尚未報道。因此,本試驗?zāi)康氖翘骄繉ⅫS芪、牛初乳粉、殼寡糖和β- 葡聚糖以適宜添加量組成的復(fù)合免疫增強成分對幼貓生長指標(biāo)、血常規(guī)指標(biāo)和免疫功能的影響,以期為復(fù)合免疫增強成分在貓糧上的應(yīng)用提供科學(xué)參考。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        試驗所使用的黃芪購自安徽某生物科技公司,牛初乳粉購自上海某生物科技有限公司,殼寡糖購自陜西某生物科技有限公司,β- 葡聚糖購自湖北某股份有限公司。

        1.2 試驗設(shè)計

        試驗選用24 只4~6 月齡、體重為1.7±0.4kg 的健康英短藍(lán)貓幼貓,公母各半,隨機分為3組,每組8 個重復(fù),每個重復(fù)1只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗組分為低濃度組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.30%黃芪+0.10%牛初乳粉+0.025%殼寡糖+0.025%β- 葡聚糖)和高濃度組(飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.60%黃芪+0.20%牛初乳粉+0.05%殼寡糖+0.05%β- 葡聚糖)復(fù)合免疫增強成分,配制基礎(chǔ)飼糧參照NRC(2006)中幼貓營養(yǎng)需要 和 國 標(biāo)《GB/T 31217-2014 全價寵物食品貓糧》,基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平參見表1。預(yù)飼期7d,正式試驗期14d。

        表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

        1.3 飼養(yǎng)管理

        本試驗所有的貓飼養(yǎng)于同一貓舍,單籠飼養(yǎng)。試驗前已做好驅(qū)蟲和按照常規(guī)免疫程序注射三聯(lián)疫苗。貓的飼喂時間分別為每天08:00 和16:00 各飼喂30g 飼糧,記錄每餐的采食量和每天的糞便評分,糞便評分(fecal score,FS)標(biāo)準(zhǔn)參考表2。試驗期間保持貓舍清潔,通風(fēng)良好,保證貓咪自由飲水。每日糞便評分后,鏟干凈貓砂,日常做好環(huán)境的消毒清潔。動物試驗在廣東省云浮市雷米高犬貓科學(xué)試驗中心進(jìn)行。

        表2 糞便評分標(biāo)準(zhǔn)

        1.4 檢測指標(biāo)與方法

        1.4.1 日采食量和糞便評分

        日采食量(g/d)= 統(tǒng)計期內(nèi)總采食量/ 天數(shù)

        糞便評分= 統(tǒng)計期內(nèi)總糞便評分/ 統(tǒng)計次數(shù)

        1.4.2 血液指標(biāo)檢測

        于試驗前1 天和第14 天08:00 空腹采集貓左前肢靜脈血1.5 mL,取0.5mL 入乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)抗凝管中,充分抗凝,用于血常規(guī)指標(biāo)測定。使用BC-5000 Vet 邁瑞獸用全自動血常規(guī)分析儀,測定了紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板相關(guān)指標(biāo),具體包括:白細(xì)胞數(shù)目、中性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、淋巴細(xì)胞數(shù)目及百分比、單核細(xì)胞數(shù)目及百分比、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、紅細(xì)胞數(shù)目、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差、血小板數(shù)目、平均血小板體積、血小板分布寬度和血小板壓積。剩下1 mL置于管內(nèi),常溫傾斜30min 后以3000 r/min 離心15min,收集血清于-20℃冰箱保存,用于測定血清免疫球蛋白 A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)含量,采用貓酶聯(lián)免疫反應(yīng)試劑盒(購自江蘇酶免生物科技有限公司)進(jìn)行檢測。

        1.5 數(shù)據(jù)分析

        用EXCEL 2019 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,三組比較采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,Duncan’s 方法進(jìn)行多重比較,結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,P<0.05 代表差異顯著。兩組比較采用獨立樣本t 檢驗,采用Graphpad Prism 8.0 軟件進(jìn)行圖形繪制,*表示差異顯著。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 復(fù)合免疫增強成分對幼貓生長指標(biāo)的影響

        由表3 可知,三組貓的試驗前體重?zé)o差異(P>0.05),飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分對貓咪的試驗后體重、日采食量及糞便評分均無顯著影響(P>0.05)。其中各組的糞便評分均在2~3 分,屬正常糞便。

        表3 復(fù)合免疫成分增強劑對貓咪生長指標(biāo)的影響

        2.2 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血常規(guī)指標(biāo)的影響

        由表4 可知,飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分對幼貓血液中的白細(xì)胞數(shù)目、中性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、淋巴細(xì)胞數(shù)目及百分比、單核細(xì)胞數(shù)目及百分比、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目及百分比、紅細(xì)胞數(shù)目、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差、血小板數(shù)目、平均血小板體積、血小板分布寬度和血小板壓積均無顯著影響(P>0.05),均在正常范圍內(nèi)。

        表4 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血常規(guī)指標(biāo)的影響

        表4 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血常規(guī)指標(biāo)的影響(續(xù))

        2.3 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血清免疫指標(biāo)的影響

        由圖1 可知,試驗前后,試驗各組幼貓的血清IgA 和IgG均無顯著變化(P>0.05)。而與試驗前相比,試驗后高濃度組顯著提高了幼貓血清IgM 的水平(P<0.05),試驗前平均值6.59 mg/L,試驗后平均值8.55 mg/L,提升幅度為29.74%,這表明飼喂含高濃度復(fù)合免疫增強成分的飼糧能顯著提高貓咪的免疫力。

        圖1 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血清免疫指標(biāo)的影響

        3 討論

        3.1 復(fù)合免疫增強成分對貓咪生長指標(biāo)的影響

        在寵物行業(yè),1-12 月齡的貓為幼貓,12 月齡以上的貓為成貓。貓的一生中,幼貓由于離開原有的母體喂養(yǎng),免疫力低下,容易生病,因此幼貓的免疫情況尤為重要(夏婷婷,2022)。而幼貓的生長情況,如體重、采食量和糞便情況恰恰是判斷幼貓是否處于健康狀況最直觀的表現(xiàn)。本試驗結(jié)果表明,三組幼貓在試驗后體重?zé)o差異,說明幼貓在試驗期間,體重的增幅無差異,均表現(xiàn)出良好的生長,幼貓糧中添加免疫增強成分在短期內(nèi)對幼貓能達(dá)到同樣的增重效果。另一結(jié)果顯示,飼喂添加復(fù)合免疫增強成分的貓糧對貓咪采食量也無顯著影響,表明在飼糧中添加以黃芪為主要的復(fù)合免疫增強成分不會影響貓糧的適口性,這與前人研究結(jié)果相似,HAO 等(2020)在育肥羔羊飼糧中添加5~30 g/kg 黃芪,發(fā)現(xiàn)試驗飼糧的干物質(zhì)攝入量與基礎(chǔ)飼糧無差異。

        貓咪的糞便情況反映糧食在貓咪體內(nèi)的消化情況,也間接反映貓咪健康狀況。本試驗結(jié)果表示,與對照組相比,飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分對貓咪的糞便評分無顯著影響。其中,高濃度組貓咪的糞便情況與對照組更為接近,而低濃度組的糞便評分雖在數(shù)值上高于對照組,但在2-3 分,屬于正常糞便。王莎等(2022)研究表明,飼糧中加入0.03%和0.05%殼寡糖能保持成年貓糞便正常, 對糞便初水分無顯著影響,這與本試驗結(jié)果一致。王忠等(2007)在飼糧中添加50 mg/kgβ-1,3/1,6- 葡聚糖飼喂斷奶仔豬,顯著提高日增重和降低腹瀉發(fā)生率,這與本試驗結(jié)果不相一致,可能是因為一方面斷奶仔豬比本試驗4 月齡幼貓的生長速度更快,另一方面28日齡斷奶仔豬更易受到外界環(huán)境影響而造成腹瀉。以上結(jié)果表明,當(dāng)飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分,糧食的消化效果較好,可以維持貓咪良好的糞便狀況。

        3.2 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血常規(guī)指標(biāo)的影響

        機體血液中有著參加機體免疫功能的主要成分,如白細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,以及血漿中的抗體等相關(guān)免疫蛋白(張立春等,2018),其數(shù)量的變化通常代表著機體抵抗疾病能力高低和健康程度,而健康的機體內(nèi)相關(guān)細(xì)胞和蛋白含量會處于相對恒定的范圍(ABDEL等,2016)。本試驗中各組幼貓血常規(guī)指標(biāo)都處在正常范圍,說明試驗幼貓較為健康,而飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分對血常規(guī)指標(biāo)無顯著影響,證明能夠保持幼貓的機體健康。目前,關(guān)于飼糧中添加黃芪、牛初乳粉、殼寡糖和β- 葡聚糖對動物血常規(guī)指標(biāo)影響的報道較少,王天元等(2016)在海蘭褐蛋雞飼糧中添加維生素C 和黃芪多糖,發(fā)現(xiàn)對平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量及濃度、白細(xì)胞數(shù)目、紅細(xì)胞體積、壓積及數(shù)目、血紅蛋白影響不顯著,這與本試驗結(jié)果相似。有報道表明,飼糧中添加200 mg/kgβ-1,3/1,6- 葡聚糖可極顯著提高仔豬血清球蛋白水平,顯著降低血清總膽固醇和低密度脂蛋白水平,對血清甘油三酯、高密度脂蛋白和葡萄糖的水平均無顯著影響,同樣也證明復(fù)合免疫增強成分對幼貓機體的安全性(王忠等,2007)。

        3.3 復(fù)合免疫增強成分對幼貓血清免疫指標(biāo)的影響

        免疫系統(tǒng)主要由免疫器官、細(xì)胞和分子構(gòu)成,免疫分子中的免疫球蛋白IgA、IgG 與IgM 的含量是反映免疫功能的重要指標(biāo),具有高特異性和高親和性(王莎等,2022)。因此,免疫球蛋白的提高,對動物免疫機能的提升具有一定意義。據(jù)前人研究報道,本研究使用的黃芪(馬學(xué)明,2022)、牛初乳(SATYARAJ 等,2013)、殼寡糖(張麗萍等,2016)和β- 葡聚糖(唐佩娟等,2014;楊天驕等,2008;劉影等,2003)均有提高動物機體免疫力的相關(guān)報道,但目前研究多集中在單獨添加,以復(fù)合形式添加的報道較少。本研究結(jié)果表明,與試驗前相比,復(fù)合免疫增強成分對幼貓血清的IgA 和IgG 無影響,能夠顯著提高IgM 的含量,這可能是由于本次添加的復(fù)合成分均具有提高免疫力的作用。

        黃芪是一種可飼用天然植物,其中有多糖、甲苷、黃酮、生物堿等多種有效成分,在體內(nèi)外均有較好的免疫調(diào)節(jié)作用。目前大多報道集中在黃芪多糖,舒迎霜等(2019)在犬糧中添加1%和2%黃芪多糖發(fā)現(xiàn),顯著提高犬血清中IgA、IgG、IgM 和γ 干擾素水平,促進(jìn)犬小腸IgA mRNA 和分泌型IgA 蛋白表達(dá),提高機體免疫力。趙桂秀等(2012)使用0.5 mL/(kg 體重)黃芪多糖給犬肌肉注射,發(fā)現(xiàn)不僅大幅度提高機體C3、C4 補體水平,還能顯著提高機體IgG 和IgA 的含量。

        免疫球蛋白是牛初乳中最主要的免疫因子,其中IgG 約占免疫球蛋白總含量的(楊紅等,2022)。GORE 等(2021)和SATYARAJ 等(2013)分別在幼貓和犬的飼糧中添加0.1%噴霧干燥牛初乳,均發(fā)現(xiàn)加強了糞便IgA的表達(dá)以及更高的疫苗反應(yīng)。

        殼寡糖是由2-10 個氨基葡萄糖通過β-1,4- 糖苷鍵鏈接而成的低聚糖(胡志鵬,2003),王莎等(2022) 在貓糧中添加0.03%和0.05%殼寡糖,顯著提高成貓血清總蛋白和IgA 水平。LAN 等(2020)報道,飼糧中添加殼寡糖可以減輕熱應(yīng)激引起的肉雞腸道氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)(降低十二指腸和空腸黏膜IL-1β含量)。

        β葡聚糖普遍存在于細(xì)菌、真菌、酵母和植物細(xì)胞壁中。劉影等(2003)在飼糧中添加β-1,3/1,6- 葡聚糖,發(fā)現(xiàn)提高了肉仔雞的體液免疫和細(xì)胞免疫,主要體現(xiàn)在提高法氏囊的重量和新城疫疫苗的抗體水平和免疫應(yīng)答。同樣地,研究顯示,實驗小鼠口服β- 葡聚糖4 周以后,增強了體液免疫活性,主要體現(xiàn)在B淋巴細(xì)胞數(shù)量、IgM 和IgG 的含量顯著增加(VETVICKA 等,2007)。VOJTEK 等(2017)報道,幼犬口服可溶性葡聚糖4 mg·kg-1·d-1,比未口服幼犬更早達(dá)到抗狂犬病毒和抗犬細(xì)小病毒2型抗體的保護(hù)水平。王忠等(2007) 在飼糧中添加50~200 mg/kgβ-1,3/ 1,6- 葡聚糖飼喂斷奶仔豬,發(fā)現(xiàn)可極顯著提高血清球蛋白的濃度,表明可增強機體免疫功能。

        以上研究均表明,飼糧中添加黃芪、牛初乳、β- 葡聚糖和殼聚糖可以提高動物機體免疫能力。但在寵物貓上的研究還需要更為長期和更多的試驗驗證,作用機理也需進(jìn)一步探索。

        4 結(jié)論

        飼糧中添加復(fù)合免疫增強成分(0.60%黃芪+0.20%牛初乳粉+0.05%殼寡糖+0.05%β- 葡聚糖),幼貓的采食量、糞便評分均可保持正常,能顯著提高幼貓血清中IgM的水平,增強幼貓免疫力,呵護(hù)貓咪健康成長。

        參考文獻(xiàn):(略)

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