盧思捷

（廣州禾信儀器股份有限公司，廣東廣州 510530）

近年來，“網(wǎng)紅”減肥保健品、食品層出不窮。但是有部分減肥藥中含有禁用的藥物成分借此達(dá)到減肥的效果，長(zhǎng)期服用的人群不僅體重沒有達(dá)到預(yù)期的效果，而且還把身體搞垮了。

減肥藥中添加了很多違禁的藥物，使用GCMS必須使用全掃描的模式才能識(shí)別盡量多的物質(zhì)，但是在定性工作上，由于出峰數(shù)目多、峰共流出的現(xiàn)象普遍等，使定性工作不好開展。

本方法使用GCMS 分析減肥沖劑中的成分后，使用解譜軟件對(duì)譜圖的物質(zhì)峰進(jìn)行解譜分析，以發(fā)現(xiàn)共流出峰和低響應(yīng)的物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)更多GCMS 工作站未定性的成分。

1 檢測(cè)方案

1.1 試劑和設(shè)備

甲醇（CH3OH）：色譜級(jí)；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：禾信GC-MS 1000；色譜柱：DB WAX UI，30 m×0.25 mm×0.25 μm；電子天平，超聲波清洗儀，移液槍。

1.2 樣品前處理[2]

稱取1 g 待測(cè)樣品粉末于玻璃瓶，加入10 mL甲醇進(jìn)行液固萃取。將其充分渦旋后，超聲提取10 min，經(jīng)0.22 μm 濾膜過濾，存于新的玻璃瓶中。取1 mL 樣品溶液于氣相小瓶中待分析。

1.3 樣品分析

通過禾信儀器GC-MS 1000進(jìn)行組分分析，儀器配置參數(shù)如下。

色譜條件：液體進(jìn)樣；分流進(jìn)樣，分流比20：1；色譜柱：DB WAX UI，30 m×0.25 mm×0.25 μm；初始柱溫50℃，保持2 min，以10℃/min 的速度升到280℃，保持10 min；柱流量1 mL/min。

質(zhì)譜條件：離子源EI，70 eV；離子源溫度230℃，傳輸線溫度250℃；質(zhì)量采集范圍35~500 amu。

1.4 利用禾信專業(yè)解譜軟件，解譜分析譜圖

解譜軟件的原理：①導(dǎo)出成一個(gè)二維的矩陣；②對(duì)這個(gè)矩陣做奇異值分解（SVD），得到一個(gè) V"陣；③通過觀察陣，找到感興趣的峰或區(qū)間，這個(gè)步驟稱為“鎖峰”；④隨機(jī)生成一個(gè)單位向量T，然后和VT計(jì)算，得到一個(gè)重建純譜，并利用鎖住的峰或區(qū)間，將重建純譜單位化；⑤將單位化后的重建純，建一個(gè)利用Shannon 熵的最小化目標(biāo)函數(shù)和相應(yīng)的函數(shù)；⑥用一個(gè)優(yōu)化方法，不斷優(yōu)化T，并重復(fù)④~⑥直到優(yōu)化完成；⑦和該最優(yōu)T 相對(duì)應(yīng)的譜圖[步④]就是最終的重建純譜。⑧將純譜和數(shù)據(jù)庫比對(duì)，得到該純譜所代表物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息等[3]

2 結(jié)果與分析

GC-MS 樣本成分定性分析。圖1為某減肥沖劑經(jīng)過前處理后到GCMS 分析得到的譜圖。

圖1 減肥沖劑的TIC圖

通過GCMS 自帶的數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行峰自動(dòng)定性，如表2所示，共檢測(cè)到24種有機(jī)物成分。而通過禾信儀器解譜軟件進(jìn)行解卷積分析出36種有機(jī)物成分，結(jié)果如表1所示。

表1 減肥沖劑的化合物組成表（禾信儀器解譜軟件分析結(jié)果）

使用GCMS 工作站和禾信儀器解譜軟件同時(shí)對(duì)譜圖進(jìn)行手動(dòng)定性，從定性分析物質(zhì)數(shù)量來看，相較GCMS 工作站，禾信儀器解譜軟件可多識(shí)別出50%的物質(zhì)。經(jīng)過詳細(xì)分析發(fā)現(xiàn)，兩種定性方法結(jié)果的差異部分大多從共流出峰和信號(hào)較弱的色譜峰中精準(zhǔn)分析得來，如下面例子展示。

例：使用禾信儀器解譜軟件發(fā)現(xiàn)譜圖中共流出峰，如18.0768 min 的峰。在TIC 圖上看是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的單峰（圖1），且經(jīng)GCMS 工作站分析得到一個(gè)物質(zhì)咖啡因（Caffeine）（圖2）。但是經(jīng)過禾信儀器解譜軟件進(jìn)行解譜后，還發(fā)現(xiàn)了另1個(gè)關(guān)鍵的成分，西布曲明（Sibutramine）（圖3），其占比約為整個(gè)共流出峰的60%。諸如此類的還有編號(hào)為4和5、6和7、10和11、12和13、25和26等峰，都是屬于GCMS 自動(dòng)定性分析不出，使用解譜軟件分析得出。

圖2 解譜軟件定性出西布曲明

圖3 解譜軟件定性出咖啡因

此外還有一些微量成分，其含量低，峰面積小，由于背景的干擾，GCMS 工作站未能識(shí)別出來。而禾信儀器解譜軟件通過自動(dòng)去除背景，識(shí)別出來更多微量成分，對(duì)樣品中微量化合物的分析能力極大地增強(qiáng)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)使用GCMS 結(jié)合禾信儀器解譜軟件對(duì)減肥沖劑進(jìn)行非靶向分析，共測(cè)得36 種有機(jī)物成分。該方法比僅使用GCMS 的數(shù)據(jù)分析軟件有較大改進(jìn)，定性更加準(zhǔn)確，可識(shí)別更多低含量的物質(zhì)。

減肥沖劑中含有西布曲明禁用藥品咖啡因含量也比較高。

由以上結(jié)果可知，禾信儀器解譜軟件可以深度發(fā)掘未知的成分，使定性的結(jié)果更加準(zhǔn)確。其適合于復(fù)雜樣品的非靶向分析和應(yīng)急快速篩查等應(yīng)用場(chǎng)景，且操作簡(jiǎn)便，可有效提高分析的效率。使用解譜軟件能協(xié)助定性，如需要準(zhǔn)確定性，需要使用不同的驗(yàn)證手段，比如使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比對(duì)或是使用其他儀器進(jìn)行分析定性。