劉 杰,叢 瑋,趙敏蝶,趙茹茜*

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,南京 210095;2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動(dòng)物生理生化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京 210095)

在規(guī)模化養(yǎng)殖中,應(yīng)激會(huì)影響肉雞的健康,并造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。品種的選育提高了肉雞的生長(zhǎng)性能,也改變了肉雞對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力和應(yīng)激敏感性。不同品種的雞對(duì)各種急性和慢性應(yīng)激的抵抗能力不同,包括急性或慢性熱應(yīng)激[1-2]、慢性冷應(yīng)激[3]、約束應(yīng)激[4]等。應(yīng)激反應(yīng)由下丘腦-垂體-腎上腺軸(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA)調(diào)節(jié)[5]。應(yīng)激會(huì)激活HPA軸釋放糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC),而海馬和下丘腦中的糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor,GR)通過與GC結(jié)合[6],負(fù)反饋調(diào)節(jié)HPA軸來(lái)終止應(yīng)激反應(yīng)。慢性應(yīng)激可引起HPA軸過度激活和GCs水平持續(xù)升高,導(dǎo)致中樞GR表達(dá)下調(diào),HPA軸的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制受損。與白來(lái)航雞相比,紅原雞對(duì)急性應(yīng)激表現(xiàn)出更強(qiáng)的行為和生理反應(yīng),但能夠更快地恢復(fù)正常水平,說明紅原雞可以更好地應(yīng)對(duì)環(huán)境應(yīng)激[7]。因此,HPA軸的負(fù)反饋能力在調(diào)節(jié)雞的應(yīng)激反應(yīng)中至關(guān)重要。

FK506結(jié)合蛋白5(FK-506 binding protein 5,FKBP5)是GR的分子伴侶,通過減少GR與GC結(jié)合和阻礙GC/GR復(fù)合物向細(xì)胞核的轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)調(diào)節(jié)GR的功能[8-9]。GR作為FKBP5的轉(zhuǎn)錄因子,其激活會(huì)誘導(dǎo)FKBP5轉(zhuǎn)錄增加,FKBP5與熱休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)相互作用阻止GC/GR復(fù)合物向核的易位,在細(xì)胞中形成超短負(fù)反饋環(huán)路[10-11]。通過這一過程,FKBP5降低了應(yīng)激后GR對(duì)GC的敏感性。海馬和下丘腦在HPA軸的反饋抑制中起著重要作用。FKBP5在多種應(yīng)激性精神疾病患者或動(dòng)物模型的外周血、海馬和下丘腦表達(dá)增加[12-15]。體外研究發(fā)現(xiàn),抑制FKBP5可以促進(jìn)海馬神經(jīng)元的生長(zhǎng)、分化和增殖[16-17]。FKBP5在小鼠下丘腦的基礎(chǔ)表達(dá)水平較低,但在地塞米松暴露或應(yīng)激原刺激后,FKBP5顯著增加[18]。鳥類的大腦中也發(fā)現(xiàn)了同樣的變化,并且FKBP5表達(dá)與HPA軸的靈敏度呈負(fù)相關(guān),下丘腦FKBP5表達(dá)越高,對(duì)GR的抑制作用越強(qiáng),導(dǎo)致GR對(duì)HPA軸的負(fù)反饋功能受損,使得應(yīng)激后升高的血漿CORT水平不能及時(shí)恢復(fù),從而導(dǎo)致持續(xù)應(yīng)激和行為異常[19]。因此,FKBP5作為治療應(yīng)激相關(guān)疾病的潛在藥物靶點(diǎn)而備受關(guān)注,而肉雞應(yīng)激敏感性的品種差異是否與海馬和下丘腦FKBP5表達(dá)有關(guān)尚不清楚。

本研究選取AA肉雞和如皋黃雞,通過皮下注射皮質(zhì)酮建立慢性應(yīng)激模型,分析海馬和下丘腦GR和FKBP5的表達(dá)是否與應(yīng)激敏感性有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),AA肉雞抗應(yīng)激能力較差,這與海馬和下丘腦GR和FKBP5表達(dá)的差異有關(guān)。研究結(jié)果為抗應(yīng)激肉雞品種選育和肉雞應(yīng)激調(diào)控提供了新的靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物模型和樣品采集

選用1日齡(d)雄性AA肉雞(購(gòu)自江蘇京海禽業(yè)集團(tuán)有限公司)和如皋黃雞各40只(購(gòu)自江蘇省家禽科學(xué)研究所)。肉雞在密閉雞舍內(nèi)3層疊層籠養(yǎng),每籠3只雞,自由采食和飲水,肉雞配合飼料購(gòu)自新希望六和。每天光照16 h,黑暗8 h。35 d時(shí),分別將AA肉雞和如皋黃雞隨機(jī)分為對(duì)照組(n=20)和CORT組(n=20)。CORT組連續(xù)10 d每天兩次皮下注射CORT(C104537,阿拉丁)建立慢性應(yīng)激模型[20-21],劑量為4.0 mg·(kg·d)-1。每天記錄采食量,每7 d稱量體重。45 d屠宰,采集抗凝血用于血漿分離。參考雞腦部圖譜[22-23]對(duì)海馬和下丘腦組織進(jìn)行采集,置于液氮速凍,并保存于-80 ℃。

1.2 緊張性不動(dòng)(tonic immobility, TI)測(cè)試

TI測(cè)試通常用于評(píng)估動(dòng)物的恐懼和應(yīng)激反應(yīng)程度。在CORT處理前和處理后進(jìn)行TI檢測(cè)。在一個(gè)安靜的房間里,將雞背部朝下平放在桌面上,用手輕輕地固定住雞的胸部和頭部。若10 s內(nèi)雞沒有翻身,則誘導(dǎo)成功,開始記錄時(shí)間,直到雞翻身站起。如果雞平躺時(shí)間超過4 min,停止計(jì)時(shí),記錄時(shí)間240 s。

1.3 血漿生化指標(biāo)測(cè)定

將采集的抗凝血置于冰上,3 500 r·min-1離心10 min,收集血漿。使用生化分析儀(Hitachi,日本)檢測(cè)血漿三酰甘油(TG)(H201)、葡萄糖(GLU)(H108)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)(H001)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)(H002),試劑盒均購(gòu)自美康生物科技股份有限公司。采用ELISA檢測(cè)血漿CORT含量,按照雞皮質(zhì)酮檢測(cè)試劑盒(0160c,Elbscience)說明書上的操作步驟測(cè)定。

1.4 異嗜性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比率

異嗜性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞(heterophil/lymphocyte, H/L)比率的變化反映肉雞的應(yīng)激程度,可以作為檢測(cè)肉雞應(yīng)激程度的指標(biāo)。從翅靜脈采集血液制備血涂片,用瑞氏染液(G1040,索萊寶)和姬姆薩染液(G1010,索萊寶)染色。顯微鏡下隨機(jī)選擇視野,共計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和異嗜性粒細(xì)胞,計(jì)算異嗜性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞的比值。

1.5 總RNA提取和qPCR

采用Trizol法提取總RNA,使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(AE341,全式金)合成cDNA。參考GenBank設(shè)計(jì)相關(guān)引物(表1)。使用ABI快速實(shí)時(shí)PCR系統(tǒng)(QuantStudioTM6 Flex,Applied Biosystems,美國(guó))進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR,檢測(cè)相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平。相對(duì)基因表達(dá)量采用2-ΔΔCt法計(jì)算。

表1 引物序列Table 1 Nucleotide sequences of primers

1.6 蛋白提取和Western blot檢測(cè)

RIPA裂解液配制:1% Triton-100,0.5%脫氧膽酸鈉,150 mmol·L-1NaCl,0.1% SDS,50 mmol·L-1Tris以及1%蛋白酶抑制劑(B14001,Bimake)。用RIPA裂解液提取組織蛋白,用BCA蛋白檢測(cè)試劑盒(DQ11,全式金)測(cè)定蛋白濃度。用20 μg蛋白進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳。雞GR抗體(本實(shí)驗(yàn)室自制,1∶2 000)或FKBP5抗體(ab46002,Abcam,1∶250)4 ℃孵育過夜。次日,使用二抗(bl003a,Biosharp,1∶100 000)室溫孵育1 h后,使用ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒(bl523,Biosharp)進(jìn)行孵育顯影。使用ImageJ進(jìn)行條帶灰度定量分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié) 果

2.1 AA肉雞和如皋黃雞應(yīng)激敏感性的差異

為了比較不同品種肉雞的應(yīng)激敏感性,使用CORT處理AA肉雞和如皋黃雞模擬慢性應(yīng)激。結(jié)果顯示,AA肉雞的生長(zhǎng)速度比如皋黃雞快(圖1A)。CORT處理后,AA肉雞的體重顯著下降(P<0.001),而如皋黃雞的體重沒有變化(圖1B)。CORT處理沒有改變AA肉雞和如皋黃雞的采食量(圖1C)。行為學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示,正常情況下如皋黃雞的TI持續(xù)時(shí)間顯著高于AA肉雞(P<0.05),CORT可顯著提高AA肉雞的TI持續(xù)時(shí)間(P<0.01),而如皋黃雞則無(wú)明顯變化(圖1D)。

A. 1～35 d體重;B. 45 d體重;C. 36～45 d采食量;D. TI靜止時(shí)間;E. 血漿皮質(zhì)酮含量;F. 血液中H/L;G. 血涂片染色(標(biāo)尺=20 μm)。圖中所標(biāo)字母相異表示差異顯著(P<0.05),所標(biāo)字母相同表示差異不顯著(P>0.05)。下同A. Body weight from 1 day to 35 days of age; B. Body weight at 45 days of age; C. Feed intake from 36 to 45 days of age; D. Tonic immobility time; E. Corticosterone content in plasma; F. Heterophil/Lymphocyte ratio in blood; G. Blood smear staining (bar=20 μm). Different letters mean significant difference (P<0.05), same letter means not significant difference (P>0.05). The same as below圖1 AA肉雞和如皋黃雞體重、TI持續(xù)時(shí)間和血液指標(biāo)Fig.1 Body weight, TI duration and blood indexes of AA and Rugao broiler chickens

血漿CORT水平和H/L比值是反映機(jī)體應(yīng)激水平的重要指標(biāo)。AA肉雞和如皋黃雞血漿CORT的基礎(chǔ)水平無(wú)差異,但CORT處理后AA肉雞血漿CORT水平顯著升高(P<0.01,圖1E),如皋黃雞沒有變化。品種間H/L的基礎(chǔ)水平無(wú)差異,CORT處理后,AA肉雞和如皋黃雞血液中異嗜性粒細(xì)胞增加,H/L均顯著升高(P<0.001),但AA肉雞明顯高于如皋黃雞(P<0.05)(圖1F、G)。

對(duì)下丘腦和海馬中谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)CORT導(dǎo)致AA肉雞下丘腦GPX3和SOD1表達(dá)上調(diào)(P<0.05)(圖2A～D),以及海馬中GPX1、GPX3、SOD1、SOD3表達(dá)上調(diào)(P<0.05)(圖2E～H),但如皋黃雞沒有變化,說明CORT導(dǎo)致AA肉雞下丘腦和海馬發(fā)生氧化損傷,激活抗氧化酶表達(dá)。

A.D. 下丘腦GPX1、GPX3、SOD1、SOD3 mRNA表達(dá);E～H. 海馬GPX1、GPX3、SOD1、SOD3 mRNA表達(dá) A-D. GPX1, GPX3, SOD1 and SOD3 mRNA expression in hypothalamus; E-H. GPX1, GPX3, SOD1 and SOD3 mRNA expression in hippocampus圖2 AA肉雞和如皋黃雞下丘腦和海馬中抗氧化相關(guān)基因mRNA表達(dá)Fig.2 mRNA expression of antioxidant genes in hypothalamus and hippocampus of AA and Rugao chickens

2.2 CORT對(duì)AA肉雞和如皋黃雞血漿中TG、ALT和AST的影響

對(duì)AA肉雞和如皋黃雞血漿TG和GLU濃度,以及ALT和AST活性進(jìn)行檢測(cè)(表2)。結(jié)果顯示,CORT處理后AA肉雞和如皋黃雞TG水平均顯著升高(P<0.01)。AA肉雞和如皋黃雞GLU在基礎(chǔ)水平和CORT處理后均沒有差異。AA肉雞ALT和AST的基礎(chǔ)水平顯著高于如皋黃雞(P<0.01)。CORT處理后,AA肉雞的ALT顯著降低(P<0.001),AST顯著升高(P<0.01),從而導(dǎo)致AST/ALT顯著升高(P<0.001),而如皋黃雞沒有變化。結(jié)果表明CORT引起AA肉雞的肝損傷更嚴(yán)重。

表2 AA肉雞和如皋黃雞血漿生化指標(biāo)Table 2 Plasma biochemical parameters of AA and Rugao

2.3 CORT對(duì)AA肉雞和如皋黃雞海馬及下丘腦GR與FKBP5表達(dá)的影響

中樞的GR和FKBP5在應(yīng)激反應(yīng)中起著重要作用,為了探究在品種間是否存在差異,作者對(duì)海馬、下丘腦中GR和FKBP5在mRNA、蛋白水平的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明,海馬中GR和FKBP5 mRNA的基礎(chǔ)表達(dá)水平在兩個(gè)品種間沒有差異。CORT處理后AA肉雞海馬中GRmRNA顯著下降(P<0.05,圖3A),FKBP5 mRNA顯著上調(diào)(P<0.01,圖2B),而如皋黃雞GR和FKBP5 mRNA沒有變化(圖3A、B)。如皋黃雞海馬中GR蛋白的基礎(chǔ)表達(dá)量顯著高于AA肉雞(P<0.001),CORT處理導(dǎo)致AA肉雞和如皋黃雞海馬的GR蛋白表達(dá)均顯著下調(diào)(P<0.001),但應(yīng)激后如皋黃雞的GR蛋白表達(dá)量仍顯著高于AA肉雞(P<0.001)(圖3C)。AA肉雞和如皋黃雞海馬中FKBP5蛋白表達(dá)的基礎(chǔ)水平?jīng)]有差異,在CORT處理后均顯著增加(P<0.001),但應(yīng)激后AA肉雞FKBP5蛋白表達(dá)量仍顯著高于如皋黃雞(P<0.001)(圖3D)。

下丘腦中GRmRNA在兩個(gè)品種和處理之間沒有變化(圖4A)。CORT處理后AA肉雞下丘腦中FKBP5 mRNA顯著上調(diào)(P<0.01),而如皋黃雞沒有變化(圖4B)。如皋黃雞下丘腦GR蛋白的基礎(chǔ)表達(dá)量顯著高于AA肉雞(P<0.05,圖4C),CORT處理導(dǎo)致AA肉雞和如皋黃雞下丘腦的GR蛋白表達(dá)均顯著下調(diào)(P<0.01),但應(yīng)激后如皋黃雞的GR蛋白表達(dá)量仍顯著高于AA肉雞(P<0.05)(圖4C)。AA肉雞和如皋黃雞下丘腦中FKBP5蛋白表達(dá)的基礎(chǔ)水平?jīng)]有差異,在CORT處理后均顯著增加(P<0.001),但應(yīng)激后AA肉雞FKBP5蛋白表達(dá)量仍顯著高于如皋黃雞(P<0.001)(圖4D)。

2.4 GR和FKBP5蛋白表達(dá)水平與血漿皮質(zhì)酮含量的相關(guān)性分析

血漿皮質(zhì)酮含量與應(yīng)激反應(yīng)有關(guān),作者對(duì)海馬和下丘腦中GR和FKBP5的蛋白表達(dá)水平與血漿皮質(zhì)酮含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明,海馬(r=-0.535 5,P=0.007 0,圖5A)和下丘腦(r=-0.555 3,P=0.004 8,圖5B)中GR的蛋白表達(dá)與血漿皮質(zhì)酮含量呈負(fù)相關(guān),海馬(r=0.593 9,P=0.002 2,圖5C)和下丘腦(r=0.694 7,P=0.000 2,圖5D)中FKBP5的蛋白表達(dá)與血漿皮質(zhì)酮含量呈正相關(guān)。表明GR與FKBP5的表達(dá)水平能夠反映肉雞的應(yīng)激程度。海馬(r=-0.713 0,P<0.000 1,圖5E)和下丘腦(r=-0.666 7,P=0.000 4,圖5F)中GR與FKBP5的蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān),表明CORT導(dǎo)致GR表達(dá)的降低與FKBP5增加有關(guān)。

A. GR mRNA表達(dá);B. FKBP5 mRNA表達(dá);C. GR蛋白表達(dá);D. FKBP5蛋白表達(dá)A. GR mRNA expression; B. FKBP5 mRNA expression; C. GR protein expression; D. FKBP5 protein expression圖3 AA肉雞和如皋黃雞海馬中GR和FKBP5 mRNA和蛋白表達(dá)Fig.3 mRNA and protein expression of GR and FKBP5 in hippocampus of AA and Rugao chickens

3 討 論

增強(qiáng)抗應(yīng)激能力有利于肉雞的生長(zhǎng),提高肉雞生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。因此,提高肉雞的抗應(yīng)激能力對(duì)生產(chǎn)極為重要。已有研究發(fā)現(xiàn)不同品種肉雞的應(yīng)激敏感性存在差異[1,24-25]。本研究證明如皋黃雞比AA肉雞抗應(yīng)激能力更強(qiáng)。AA肉雞和如皋黃雞的海馬和下丘腦中GR的基礎(chǔ)表達(dá)水平和CORT誘導(dǎo)的FKBP5表達(dá)存在差異,與應(yīng)激敏感性有關(guān)。

為了滿足對(duì)畜禽肉產(chǎn)品日益增長(zhǎng)的需求,經(jīng)過近幾十年的人工選育,肉雞的生長(zhǎng)速度不斷增加,同時(shí)應(yīng)激敏感性也發(fā)生改變[26-27]。AA肉雞為我國(guó)白羽肉雞工廠化生產(chǎn)的主要品種之一,特點(diǎn)為體型大、生長(zhǎng)發(fā)育快、飼料轉(zhuǎn)化率高。如皋黃雞生長(zhǎng)較慢,屬肉蛋兼用型地方品種。已有研究發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)緩慢的品種對(duì)應(yīng)激有更好的抵抗力。在急性熱應(yīng)激試驗(yàn)中,科寶500肉雞的體溫、H/L、血漿CORT含量和腦中HSP70表達(dá)均有升高,而紅原雞和土種雞沒有變化[28]。慢性熱應(yīng)激試驗(yàn)中也得到相似的結(jié)果[29]。限飼引起的慢性應(yīng)激使血漿CORT含量增加,應(yīng)激后快速型肉雞血漿中的CORT含量增加了2.48倍,而慢速型肉雞僅增加了1.30倍[24]。作者的研究結(jié)果與以上研究結(jié)果一致,通過皮下注射CORT模擬慢性應(yīng)激,AA肉雞體重顯著降低,H/L比率和血漿CORT含量顯著升高,說明AA肉雞的應(yīng)激反應(yīng)比如皋黃雞更強(qiáng)烈。TI測(cè)試和循環(huán)皮質(zhì)酮水平通常用于評(píng)估恐懼和應(yīng)激反應(yīng)。在本研究中,AA肉雞的TI時(shí)間在基線時(shí)低于如皋黃雞,在CORT處理后升高,此外,AA肉雞血漿CORT含量也顯著升高,而如皋黃雞的TI時(shí)間和血漿CORT含量沒有改變。研究發(fā)現(xiàn),選育可以改變雞對(duì)應(yīng)激源的恐懼程度,紅原雞比家養(yǎng)雞表現(xiàn)出更多的恐懼行為,以及不同的應(yīng)激恢復(fù)模式[30]。在急性應(yīng)激后,紅原雞的行為反應(yīng)迅速,CORT變化更為顯著,并更快地恢復(fù)到基礎(chǔ)水平[7,31]。和AA肉雞相比,如皋黃雞選育程度可能較低,其應(yīng)激反應(yīng)與紅原雞相似,在自然狀態(tài)下高度警惕,但在受到應(yīng)激時(shí)能夠迅速恢復(fù)。

HPA軸能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的適應(yīng)能力。GR是機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)系統(tǒng)的關(guān)鍵組成部分,也是GC結(jié)合的主要受體。GR在大腦中大量表達(dá),負(fù)反饋抑制GC誘導(dǎo)的HPA軸激活,在應(yīng)激和精神活動(dòng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn),在紅原雞和白來(lái)航雞的海馬中GRmRNA沒有差異,而白來(lái)航雞下丘腦中GRmRNA高于紅原雞[4]。也有研究發(fā)現(xiàn)科寶肉雞下丘腦中GR mRNA和蛋白表達(dá)高于白來(lái)航雞[32]。在作者的試驗(yàn)中,GRmRNA的基礎(chǔ)表達(dá)水平在兩個(gè)品種間沒有差異,但在蛋白水平,如皋黃雞海馬和下丘腦中GR的基礎(chǔ)水平高于AA肉雞,說明如皋黃雞中樞的GR對(duì)HPA具有更強(qiáng)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用。PTSD和抑郁模型小鼠的海馬和下丘腦中GR表達(dá)降低[33-34]。CORT處理也會(huì)導(dǎo)致雞下丘腦GR蛋白表達(dá)下調(diào)[35],在本研究中觀察到相同的結(jié)果。

GR主要以復(fù)合物的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中,FKBP5是其分子伴侶之一。FKBP5可以調(diào)節(jié)GR敏感性和HPA軸功能,并與許多應(yīng)激相關(guān)的精神疾病有關(guān)。FKBP5是GR的負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子,高水平的FKBP5會(huì)減少GR入核,引起糖皮質(zhì)激素抵抗[36]。GR-FKBP5蛋白復(fù)合物在PTSD患者和小鼠模型中增加。破壞GR-FKBP5結(jié)合可促進(jìn)GR核易位,降低小鼠恐懼記憶的鞏固和回憶[37]。應(yīng)激后麻雀下丘腦中FKBP5表達(dá)越低,HPA軸越靈活[19]。本研究中,GR與FKBP5的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),并且CORT使AA肉雞海馬和下丘腦FKBP5蛋白比如皋黃雞增加更多,表明AA肉雞FKBP5可能與GR結(jié)合更多,形成GR-FKBP5蛋白復(fù)合物,阻止GR進(jìn)入細(xì)胞核,使GR不能發(fā)揮對(duì)HPA軸的抑制作用。

GC含量反映機(jī)體的應(yīng)激水平,可以作為應(yīng)激反應(yīng)的生物標(biāo)志物。GC高分泌與應(yīng)激相關(guān)精神疾病有關(guān),通常伴隨著GR低表達(dá)和FKBP5高表達(dá)[38]。作者發(fā)現(xiàn)肉雞循環(huán)皮質(zhì)酮與海馬和下丘腦中GR的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與FKBP5的表達(dá)正相關(guān),表明海馬和下丘腦中GR和FKBP5的表達(dá)水平可以反映肉雞的應(yīng)激程度,并與應(yīng)激敏感性有關(guān)。因此,GR和FKBP5可以作為肉雞育種篩選的候選基因。在應(yīng)激相關(guān)精神疾病中GR和FKBP5表達(dá)變化與單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)有關(guān)[39-40]。在畜禽養(yǎng)殖中SNPs被應(yīng)用于育種篩選。已有研究發(fā)現(xiàn)豬肝和皮膚中GR SNPs與應(yīng)激反應(yīng)和攻擊行為有關(guān),可以作為育種標(biāo)記[41]。本研究結(jié)果中,AA肉雞和如皋黃雞下丘腦和海馬中GR和FKBP5在應(yīng)激反應(yīng)中的表達(dá)差異可能與SNPs有關(guān),需要進(jìn)一步探究。

4 結(jié) 論

作者對(duì)采用CORT處理AA肉雞和如皋黃雞建立慢性應(yīng)激模型,比較應(yīng)激敏感性的差異。結(jié)果表明,不同品種肉雞海馬和下丘腦中GR和FKBP5的表達(dá)與應(yīng)激敏感性有關(guān)。因此,GR和FKBP5可作為調(diào)控肉雞抗逆性和遺傳改良的靶點(diǎn)。