周麗媛 施喆 劉悅君 李靜霞 崔志利 安欣

子宮內(nèi)膜癌是影響女性最重要的惡性腫瘤之一，占女性生殖系統(tǒng)疾病的37.7%［1］。近年來(lái)，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率逐年上升，且呈年輕化趨勢(shì)［2］。雖然子宮內(nèi)膜癌預(yù)后相對(duì)較好，67%的患者發(fā)現(xiàn)時(shí)處于早期，其5年總生存率可達(dá)81%，但I(xiàn)VA、IVB期患者的5年生存率僅為 17% 和 15%［3］，并且一旦復(fù)發(fā)，治療困難、死亡率高。因此，準(zhǔn)確判斷子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)行為特征及臨床預(yù)后，為患者選擇個(gè)體化的手術(shù)治療方案，降低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)尤為重要。

腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2（tumor necrosis factor α induced protein-8 like-2，TIPE 2）為先天免疫和適應(yīng)性免疫的負(fù)調(diào)控因子，可抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，維持免疫穩(wěn)態(tài)［4-5］。腫瘤增殖抗原Ki-67（marker of proliferation Ki-67，Ki-67）是一種由MKI67基因編碼的核蛋白，其表達(dá)與細(xì)胞的增殖活性正相關(guān)，可用作腫瘤標(biāo)志物和判斷腫瘤侵襲性的良好指標(biāo)［6-7］。TIPE2、Ki67在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)差異對(duì)患者預(yù)后的影響尚未完全探明。鑒于此，本研究納入子宮內(nèi)膜癌患者120例、非子宮內(nèi)膜癌患者130例，分析子宮內(nèi)膜組織中TIPE2、Ki67的表達(dá)差異及對(duì)患者生存的影響，旨在評(píng)估TIPE2、Ki67在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)情況及其對(duì)患者預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月至2020年1月河北工程大學(xué)附屬醫(yī)院婦科收治的子宮內(nèi)膜癌患者120例作為觀察組，另?yè)裢谑罩蔚淖訉m肌瘤107例和子宮脫垂患者23例作為對(duì)照組，所有患者均接受手術(shù)治療。回顧性收集患者臨床及病理資料。研究對(duì)象均為女性，對(duì)照組年齡33～71歲，平均（57.05±6.95）歲；身體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）18～29 kg∕m2，平均（23.89±2.21）kg∕m2。觀察組年齡34～73歲，平均（56.36±6.60）歲；BMI 18～28 kg∕m2，平均（23.48±2.57）kg∕m2。兩組年齡、BMI等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①子宮內(nèi)膜癌符合《子宮內(nèi)膜癌診斷與治療指南（第四版）》［8］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②子宮肌瘤符合《子宮肌瘤的診治中國(guó)專家共識(shí)》［9］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者；③子宮脫垂符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第9版［10］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)者；④近期未參與過(guò)其他臨床研究者；⑤臨床資料完整者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①有惡性腫瘤家族史、合并其他惡性腫瘤、甲亢者；②合并肝腎功能不全者；③術(shù)前接受放化療、免疫治療者；④合并子宮手術(shù)史者；⑤合并自身免疫性疾病、嚴(yán)重貧血者；⑥妊娠期或哺乳期者等。本研究獲我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批件號(hào)：2021［K］078）。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)室檢查 子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本固定、石蠟包埋、切片及免疫組化SP方法詳見(jiàn)文獻(xiàn)［11］。采用過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素試劑盒（B&D公司）檢測(cè)石蠟切片中TIPE2、Ki67表達(dá)情況，鼠抗人TIPE2、Ki67單克隆抗體購(gòu)自DAKO公司。結(jié)果判定：TIPE2陽(yáng)性表達(dá)表現(xiàn)為細(xì)胞核或細(xì)胞漿見(jiàn)棕黃色顆粒，Ki67 陽(yáng)性表達(dá)表現(xiàn)為細(xì)胞核被染成棕黃色。所有載玻片均采用雙盲法進(jìn)行半定量評(píng)分。從每個(gè)標(biāo)本中隨機(jī)抽取10個(gè)高倍視野，分別觀察并記錄腫瘤細(xì)胞中TIPE2、Ki67陽(yáng)性染色細(xì)胞的百分比（0∶0%；1∶1%～25%；2∶26%～50%；3∶51%～75%；4∶76%～100%）和相應(yīng)的染色強(qiáng)度（0：無(wú)染色；1：淺黃色；2.中等棕褐色；3：深棕褐色）。表達(dá)得分由上述兩個(gè)分?jǐn)?shù)的結(jié)果相乘得到，分?jǐn)?shù)≤3分定義為陰性（-），＞3分者為陽(yáng)性［11-12］。典型病理圖片見(jiàn)圖1。

圖1 子宮內(nèi)膜癌組織TIPE2、Ki67免疫組化陽(yáng)性結(jié)果

1.2.2 臨床資料收集 通過(guò)本院電子病歷系統(tǒng)收集研究對(duì)象臨床資料，包括年齡（＜60歲，≥60歲）、BMI（＜24 kg∕m2，≥24 kg∕m2）、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO，2009年）［13］分期、病理類型（內(nèi)膜樣腺癌、非內(nèi)膜樣腺癌）、淋巴結(jié)分級(jí)［14］（N0，N1）、肌層浸潤(rùn)深度（＜1∕2、≥1∕2）、組織學(xué)分級(jí)（高分化、中低分化）、TIPE2（陽(yáng)性、陰性）、Ki67（陽(yáng)性、陰性）。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 TIPE2、Ki67表達(dá) 采用免疫組織化學(xué)方法分析觀察組、對(duì)照組子宮內(nèi)膜組織中TIPE2、Ki67的表達(dá)情況。

1.3.2 子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后分析 所有患者在規(guī)范治療結(jié)束后開(kāi)始隨訪，每3～6個(gè)月隨訪1次，隨訪方式為電話隨訪和門診隨訪。隨訪內(nèi)容包括是否定期復(fù)查，復(fù)查項(xiàng)目及結(jié)果；是否出現(xiàn)復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)癥狀及復(fù)發(fā)時(shí)間；是否死亡及死亡原因和時(shí)間等。隨訪終點(diǎn)為患者死亡或達(dá)到隨訪截止時(shí)間（2022年6月）。比較性別、年齡、BMI、FIGO分期、高血壓病、糖尿病、病理類型、淋巴結(jié)分級(jí)、肌層浸潤(rùn)深度、組織學(xué)分級(jí)、手術(shù)方式、術(shù)后并發(fā)癥、TIPE2及Ki67組間生存率的差異及對(duì)預(yù)后的影響。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以［例（%）］表示，予以χ2檢驗(yàn)或校正χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。計(jì)量資料用表示，兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)。TIPE2、Ki67與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性用χ2檢驗(yàn)和Phi （Φ）系數(shù)比較，Phi （Φ）系數(shù)表示兩分類變量之間的關(guān)聯(lián)程度：Φ＜0.3時(shí)，表示相關(guān)較弱；Φ＞0.6時(shí)，表示相關(guān)較強(qiáng)［15］。Kaplan-Meier法繪制生存曲線，組間生存分析用log-rankχ2檢驗(yàn)，子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型。以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜組織中TIPE2、Ki67表達(dá)水平比較 觀察組TIPE2陽(yáng)性率低于對(duì)照組，而Ki67陽(yáng)性率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者TIPE2、Ki67表達(dá)比較[例(%)]

2.2 TIPE2表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的關(guān)系 對(duì)120例子宮內(nèi)膜癌患者隨訪2年，生存93例，死亡27例，生存率77.50%。對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者2年生存率進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：TIPE2陰性患者2年生存率為72.1%，TIPE2陽(yáng)性患者為91.2%，Ki67陽(yáng)性患者2年生存率為57.5%，Ki67陽(yáng)性患者為87.5%，以上兩組生存率比較，經(jīng)log-rankχ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

Cox模型分析（病理類型、淋巴結(jié)分級(jí)、肌層浸潤(rùn)深度、組織分級(jí)、TIPE2、Ki67）顯示，TIPE2陰性（HR=3.736，95%CI=1.016～13.157）是影響患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表2、圖2。

表2 子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的Cox回歸模型分析

2.3 TIPE2表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理特征的關(guān)系 本研究按照TIPE2表達(dá)差異進(jìn)行分組，結(jié)果顯示TIPE2陰性與組織分化呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.397，Φ=0.392，P＜0.001）。見(jiàn)表3。

表3 子宮內(nèi)膜癌組織TIPE2與組織分級(jí)的相關(guān)性分析

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，近年來(lái)，我國(guó)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)［16］。手術(shù)是治療子宮內(nèi)膜癌的主要手段，但患者預(yù)后仍不樂(lè)觀［17-18］。既往研究表明，TIPE2可通過(guò)抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1∕2及核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)，從而發(fā)揮抑制腫瘤微炎癥環(huán)境的作用［19］。TIPE2還可抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及侵襲［20-21］。Ki67是一種廣泛用于評(píng)估腫瘤增殖情況的標(biāo)志物，腫瘤細(xì)胞增殖活躍時(shí)，Ki67表達(dá)增高［22］。

本研究中，120例子宮內(nèi)膜癌患者2年生存率77.50%，與既往研究［23］結(jié)果類似。與正常子宮內(nèi)膜組織相比，TIPE2陽(yáng)性率在子宮內(nèi)膜癌組織中低，Ki67陽(yáng)性率高，且TIPE2陰性與子宮內(nèi)膜癌不良預(yù)后相關(guān)。與此同時(shí)，TIPE2陰性與組織分化相關(guān)，與既往研究［11-12］結(jié)果一致。因此，TIPE2、Ki67表達(dá)情況對(duì)預(yù)后具有一定的評(píng)估價(jià)值，TIPE2可作為子宮內(nèi)膜癌治療的預(yù)后指標(biāo)，為進(jìn)一步研究TIPE2對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為提供了一定臨床依據(jù)。

本研究存在的不足之處包括：子宮內(nèi)膜癌病理類型主要為內(nèi)膜樣腺癌，而非內(nèi)膜樣腺癌病例較少，尚不能反映TIPE2和Ki67水平對(duì)非內(nèi)膜樣腺癌患者預(yù)后的影響，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，增加非內(nèi)膜樣腺癌病例進(jìn)行驗(yàn)證。此外，本課研究未針對(duì)TIPE2對(duì)子宮內(nèi)膜癌惡性生物學(xué)行為的影響及相關(guān)的分子通路進(jìn)行研究，將是本課題組以后的重點(diǎn)研究方向，以期為針對(duì)TIPE2的靶向治療提供理論基礎(chǔ)。