■ 楊旭紅 黃 凱* 黃明磊 夏樂文 林向東 于 凱 郭睿婕 黃 嬌

（1.廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530004；2.吉林酉盛達農(nóng)業(yè)科技有限公司，吉林白山 134300；3.南寧海寶路水產(chǎn)飼料有限公司，廣西南寧 530031）

美國牛蛙（Lithobates catesbeiana）俗稱牛蛙，屬于兩棲綱（Amphibia）、蛙科(Ranidae)，原產(chǎn)于北美洲，因其肉鮮味美、生長迅速，牛蛙養(yǎng)殖業(yè)在我國中南部快速發(fā)展。2013 年以來，牛蛙養(yǎng)殖年產(chǎn)量達15 萬噸以上[1-2]。然而，在高密度集約化養(yǎng)殖下，出現(xiàn)牛蛙生長速度慢、飼料利用率低及對細菌病毒抵抗能力弱的情況。為提高牛蛙生長性能及防治病害，以抗生素為主的各種藥物開始在養(yǎng)殖過程濫用，引發(fā)了社會對養(yǎng)殖牛蛙安全性的憂慮。近年來，許多的研究表明中草藥在養(yǎng)殖上具有顯著的優(yōu)勢和功能[3-5]。研究發(fā)現(xiàn)，在鞍帶石斑魚（Epinephelus lanceolatus）飼料中添加2 g/kg復(fù)方中草藥能提高生長性能和消化酶活性[4]。目前，中草藥在畜禽上也有應(yīng)用。研究表明添加1.0%的復(fù)方中草藥可改善山東麻羽綠殼蛋雞（Green-eggshellLaying Hens）的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)[5]。在飼料中添加中草藥能提高養(yǎng)殖動物自身的免疫能力，減少常規(guī)抗生素、化學(xué)藥等漁藥的使用，在促進魚類的健康生長同時，又能提升水產(chǎn)品質(zhì)量安全水平。

為了使得新聞?wù)虾徒馕龈佑猩疃?，新聞編輯需要具備?fù)合型的知識儲備和人文素養(yǎng)，如交叉學(xué)和邊緣學(xué)等。知識素養(yǎng)主要源于新聞稿件組織，除了文字和圖片，還包括視頻和語音。這也就要求新聞編輯還得具備較強的視聽語言素養(yǎng)。除此之外，新聞編輯還得具備人文素養(yǎng)，以便能夠更好地考慮到受眾的想法，然后再多多從受眾的角度進行新聞信息的管理，只有這樣才能夠促使新聞信息的感染力不斷提升。

蒲公英為菊科蒲公英，屬多年生草本植物，富含礦物質(zhì)、維生素等營養(yǎng)成分。能夠清熱解毒、抗菌消炎，提高機體免疫[6-7]。青果又名橄欖，是橄欖的干燥成熟果實，含有豐富的生物活性物質(zhì)，具有清熱解毒、抗菌消炎、抗氧化作用[8]。敗醬草，又稱苦菜等，隸屬于敗醬科多年生草本植物。具有祛瘀止痛、清熱解毒、保肝利膽等功效[9]。羅摩是可食用的攀援草本植物，富含類固醇、多酚和黃酮醇衍生物，具有廣譜抗菌活性和顯著的抗氧化作用[10]。葡萄籽是原花青素的豐富來源，該化合物具有抗氧化、抗炎、免疫刺激、抗病毒和抗血栓等有益健康的作用[11]。我國的中草藥資源豐富且安全，目前，關(guān)于中草藥的報道大多在魚類、畜禽上[3，12-13]，在兩棲類動物上進行試驗的報道很少。因此，本試驗將蒲公英、青果、敗醬、羅摩、葡萄籽5 種中草藥按一定配比混合制作成的復(fù)方中草藥，替代常規(guī)的抗生素，以研究其對美國牛蛙生長性能、血清生化指標、腸道消化酶和腸道組織形態(tài)的影響，為該復(fù)方中草藥在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理

試驗蛙苗購于廣西柳州某牛蛙養(yǎng)殖場。飼養(yǎng)試驗在廣西大學(xué)水產(chǎn)試驗基地進行。試驗開始前暫養(yǎng)2 周，暫養(yǎng)結(jié)束后，停喂24 h，挑選出體質(zhì)健康、規(guī)格均勻的牛蛙600只。試驗牛蛙初始體重為（7.87±0.16） g。隨機分為5 組，每組設(shè)3 個重復(fù)，每個重復(fù)放置40 只牛蛙。飼喂以魚粉為蛋白源配制基礎(chǔ)飼糧。分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0、0.25%、0.50%、0.75%、1.00%的復(fù)方中草藥，制作5種等氮等能的試驗飼料（標記為DC組、DC 0.25組、DC 0.50組、DC 0.75組、DC 1.00組）。飼料差額部分采用微晶纖維素補充?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。根據(jù)飼料配方，原料經(jīng)粉碎、混勻、過60 目篩后，用飼料膨化機制成直徑為2.5 mm 的浮性飼料。試驗期為90 d，飼喂時間為09：00和17：00。養(yǎng)殖期間水位為60～80 cm，水溫為（25±3） ℃。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)，%）

1.2 試驗材料

試驗使用的復(fù)方中草藥是以蒲公英（15 g）、青果（20 g）、敗醬（15 g）、羅摩（10 g）、葡萄籽（30 g）作為原材料，采用植物因子萃取方法在吉林酉盛達農(nóng)業(yè)科技有限公司的生產(chǎn)車間進行提取，再按一定比例配比后，經(jīng)冷凍抽干等工藝制備而成。

SIGMA 1-14 高速離心機，德國SIGMA 公司；BCD-256WDGK 冰箱，青島海爾股份有限公司；9FQ30-20 飼料粉碎機，上海奧然科貿(mào)有限公司；MS-105 電子天平，梅特勒·托利多儀器（上海）有限公司；ELx800酶標儀，Bio-TeK 寶特；FYL-YS-50L電熱恒溫箱，北京福意聯(lián)冷藏設(shè)備有限公司；SLG-70 擠壓膨化機，山東佳偉機械設(shè)備有限公司。

1.3 樣品采集

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，對美國牛蛙禁食24 h 處理，每個養(yǎng)殖池隨機取12只牛蛙。其中6只用于生長指標的測定。3只牛蛙活體置于-80 ℃冰箱，用于全蛙組成分分析。3只牛蛙采用雙毀髓法處理，用1 mL的注射器抽取血液注入1.5 mL的離心管中，4 ℃冰箱靜止24 h，之后離心10 min（3 000 r/min，4 ℃），分離取得血清，置于-80 ℃冰箱保存，用于生化指標測定；解剖后取腸道組織，用生理鹽水清洗后，一部分置于-80 ℃冰箱保存，用于腸道消化酶測定，另一部分放入4%預(yù)冷的多聚甲醛固定液中，用于腸道形態(tài)分析。

Wf——牛蛙終末體質(zhì)量（g）；

1.4 指標測定

1.4.1 常規(guī)營養(yǎng)成分測定

水分含量采用105 ℃恒溫干燥失重法測定（GB/T 5009.3—2016）；粗灰分含量采用550 ℃馬弗爐灼燒法測定（GB/T 5009.4—2016）；粗蛋白含量采用凱氏定氮法測定（GB/T 5009.5—2016）；粗脂肪含量采用索氏抽提法測定（GB/T 5009.6—2016）。

1.4.2 血清生化指標和腸道消化酶測定

Ni——初始蛙數(shù)；

由表4 可知，各試驗組間水分含量無顯著差異（P＞0.05）；DC 組粗蛋白含量顯著高于DC 0.25、DC 0.75、DC 1.00 組（P＜0.05），與DC 0.50 組無顯著差異（P＞0.05）；DC 0.25、DC 0.75 組粗灰分含量顯著高于DC、DC 0.50、DC 1.00組（P＜0.05）。DC組粗脂肪顯著高于DC 0.25、DC 0.75 組（P＜0.05），與DC 0.50 組、DC 1.00組無顯著差異（P＞0.05）。

1.4.3 腸道形態(tài)分析

腸道組織采用4%預(yù)冷多聚甲醛固定24～48 h，經(jīng)水洗、脫水、透明、石蠟包埋等步驟后，制作5 μm厚切片，置于切片盒中，保存?zhèn)溆谩.E.染色參照許波[14]染色方法。顯微鏡下觀察腸道組織的形態(tài)特征。

1.5 計算公式

增重率（WGR,%）=（Wf-Wi）/Wi×100

特定生長率（%/d）=（lnWf-lnWi）×100/t

飼料系數(shù)（FCR）=W0/(WfNf-WiNi+Wd)

目前，干旱災(zāi)害已成為影響我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和糧食安全的主要因素之一，我國每年因干旱災(zāi)害造成的糧食損失約占各種自然災(zāi)害損失總量的60%?；春恿饔蛎娣e約為27萬km2，主要涉及河南、安徽、江蘇和山東四省，是我國重要的糧、棉、油產(chǎn)地和能源基地。同時，淮河流域?qū)儆谫Y源性嚴重缺水地區(qū)，人均水資源量、畝均水資源量分別處于全國十大水資源評價片中的第9位和第8位，水資源不足導(dǎo)致的干旱災(zāi)害已成為制約流域內(nèi)農(nóng)業(yè)乃至社會經(jīng)濟發(fā)展的瓶頸。

肥滿度(CF，g/cm3)=Wf/L13×100

2）價格昂貴、維護成本高。高校用于科研的大型儀器設(shè)備品質(zhì)精良，價格昂貴。例如：美國Precitech公司的納米精密車銑復(fù)合機床Nanoform X約290萬元/臺套；FIE公司的聚焦離子電子雙束系統(tǒng)Small dual beam是500多萬元/臺套，單個鏡頭的最低價格十幾萬元，維保費近30萬元/年。這些儀器設(shè)備精度高，對環(huán)境要求也高。例如：大型重載裝備需要構(gòu)筑減振地基；納米級制造裝備及測量儀器需要恒溫、無塵，具備萬級凈化間標準環(huán)境；OLED柔性電子薄膜封裝實驗不僅需要恒溫、無塵，還需要真空環(huán)境等。

肝體比（HSI，%）=100×Wh/Wf

企業(yè)合并重組后，其成本支出將在短期內(nèi)增加。造成這一問題的原因主要有兩個方面。首先，合并企業(yè)的經(jīng)營范圍通常會存在一定的交集，因此其生產(chǎn)要素會部分重疊。在合理整合這部分生產(chǎn)要素前，企業(yè)必然會為其支付相應(yīng)的開支。其次，合并重組后新企業(yè)的內(nèi)部管理將進入磨合期，在這一過程中，企業(yè)的要素流轉(zhuǎn)效率將進一步下降，其運營成本也將相應(yīng)提高。總之，合并重組將改變企業(yè)的資源配置與運營結(jié)構(gòu)，常態(tài)環(huán)境下的財務(wù)管理機制難以對各環(huán)節(jié)進行有效評價。

式中：Wi——牛蛙初始體質(zhì)量（g）；

Where: ra is armature winding; rf is excitation winding;rD is direct-axis damping winding;rQ is cross-axis damping winding; w is electrical angular velocity of rotor.

W0——每個養(yǎng)殖箱中所投喂飼料總量（g）；

Wd——終末每個養(yǎng)殖箱死亡牛蛙體質(zhì)量（g）；

Nf——終末牛蛙數(shù)；

根據(jù)沖片工藝要求，提出模具設(shè)計思路：在復(fù)試落料模的基礎(chǔ)上，增加可換位鍵槽凸模模塊，相鄰兩個換位鍵槽的夾角設(shè)計為90°。模具工作時，第一張沖片鍵槽位于Y軸正方向，第二張沖片鍵槽位于X軸正方向，第三張沖片鍵槽位于Y軸負方向，第四張沖片鍵槽位于X軸負方向……(圖1)，如此實現(xiàn)循環(huán)換位沖制。沖片壓裝時，相鄰的兩張沖片相差90°，避免由于沖片板厚偏差而導(dǎo)致的質(zhì)量問題。

一個轉(zhuǎn)彎之后，王樹林輕拍著方向盤說，還是老話說的好，老馬識途，駕輕就熟。又覺得詞不達意，補充說，就像這車，坐上來無需磨合，一摸就有。

存活率（SR，%）=Nf/Ni×100

t——試驗天數(shù)（d）；

Wh——蛙肝臟重（g）；

Wv——蛙內(nèi)臟重（g）；

L1——終末體長（cm）。

1.6 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗數(shù)據(jù)均采用Excel 和SPSS 26.0 軟件進行統(tǒng)計分析，采用單因素方差分析（one-way ANOVA）與Duncan’s 法多重檢驗進行比較，所有數(shù)據(jù)值均由“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

臟體比（VSI，%）=100×Wv/Wf

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙生長性能的影響

由表2 可知，各試驗組間增重率和特定生長率存在顯著差異（P＜0.05），DC 0.25、DC 0.75 組顯著高于DC、DC 0.50 組（P＜0.05）；DC 0.75 組的終末體重顯著高于DC 組、DC 0.50 組（P＜0.05）；DC 1.00 組成活率顯著高于DC、DC 0.25、DC 0.50組（P＜0.05）；各試驗組飼料系數(shù)無顯著差異（P＞0.05）。

ACL術(shù)前診斷多依靠影像學(xué)檢查,但僅憑影像學(xué)診斷ACL困難。超聲表現(xiàn)為腎上腺區(qū)域邊界清晰的無回聲包塊[4]。CT表現(xiàn)為薄壁非實性非結(jié)節(jié)樣組織，無明顯強化。內(nèi)容物低密度，無強化，有時可伴有出血[5]。磁共振顯像較CT更為靈敏，表現(xiàn)為T1低信號，T2高信號，復(fù)雜型淋巴管瘤T1T2均為高信號[3]。ACL術(shù)前仍需與腎上腺皮質(zhì)腺瘤、嗜鉻細胞瘤、腎上腺單純囊腫相鑒別。GAO等[6]建議其中具有嗜鉻細胞瘤相關(guān)癥狀或者兒茶酚胺值顯著升高且腫物直徑大于4 cm的患者術(shù)前應(yīng)用藥物準備。

表2 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙生長性能的影響

由表3 可知，各試驗組間肥滿度、肝體比和臟體比無顯著差異（P＞0.05）。

表3 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙形體指標的影響

2.2 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙體成分的影響

谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（T-CHO）、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、堿性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）、腸道淀粉酶（Amylase）、胰蛋白酶（Trypsin）、脂肪酶（Lipase）采用試劑盒測定，測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所有限公司。

錢塘江流域耕地變化的時間趨勢如圖1所示。從圖1中可以看出1999-2009年間錢塘江流域耕地面積總體上呈下降趨勢。1999-2004年流域內(nèi)耕地總面積減少了1.45%(7.4khm2)。這個規(guī)律與姚偉等人的研究成果相符(1985-2004年間錢塘江流域內(nèi)各土地利用結(jié)構(gòu)變化比較大，耕地水域和未利用地面積在減少[6])。2005-2006兩年內(nèi)，流域內(nèi)耕地總面積有所增加，這與土地整理以及耕地保護政策的實施有關(guān)。2007-2009年因經(jīng)濟發(fā)展、城市化進程加快占用了大量耕地， 2007年開始，耕地面積快速減少，從2007-2009年減少了0.34%，凈減少1.7 khm2。

表4 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙體成分的影響（%）

2.3 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙血清非特異性免疫指標和腸道消化酶的影響

由表5可知，DC 1.00組SOD含量顯著高于DC組、DC 0.25 組（P＜0.05），與DC 0.50 組、DC 0.75 組無顯著差異（P＞0.05）；DC 組MDA 含量顯著高于DC 0.50、DC 0.75、DC 1.00組（P＜0.05），與DC 0.25組無顯著差異（P＞0.05）；DC、DC 0.25 組GPT 含量顯著高于DC 0.50、DC 0.75、DC 1.00組（P＜0.05）；DC組GOT含量顯著高于DC 0.25、DC 0.50、DC 0.75、DC 1.00組（P＜0.05）；DC 1.00組ACP、AKP含量顯著高于其他4組（P＜0.05）；DC組TG含量顯著高于其他4組（P＜0.05）；DC 1.00組、DC 0.75組含量顯著低于DC組、DC 0.25組、DC 0.50組（P＜0.05）。

表5 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙血清生化指標的影響

由表6 可知，DC 1.00 組和DC 0.75 組蛋白酶顯著大于DC 0.50 組、DC 0.25 組和DC 組（P＜0.05）。各組間脂肪酶含量無顯著差異（P＞0.05）。DC 1.00 組淀粉酶含量顯著高于DC 0.25、DC 組（P＜0.05）；與DC 0.75、DC 0.50組無顯著差異（P＞0.05）。

表6 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙腸道消化酶的影響

2.4 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙腸道形態(tài)的影響

由表7 可知DC 1.00 組絨毛高度顯著大于DC、DC 0.50、DC 0.75 組（P＜0.05），與DC 0.25 組無顯著差異（P＞0.05）。各組間絨毛寬度無顯著差異（P＞0.05）。DC 1.00 組肌層厚度顯著大于DC、DC 0.25、DC 0.5 組（P＜0.05），與DC 0.75 組無顯著差異（P＞0.05）。各組間腸上皮細胞高度無顯著差異（P＞0.05）。腸道組織切片圖1 顯示，黏膜下層和固有層無斷層，腸壁較厚，腸絨毛密而粗壯，末端無破損，腸絨毛上皮細胞間可觀察到較多杯狀細胞。

圖1 美國牛蛙腸道組織切片（H.E.染色，200 μm）

表7 飼料中添加復(fù)方中草藥對牛蛙腸道形態(tài)的影響(μm)

3 討論

3.1 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙生長的影響

中草藥作為一種新型的綠色飼料添加劑，其含有的營養(yǎng)和生物活性物質(zhì)，能加快機體代謝和蛋白質(zhì)合成，從而提高生長性能[15]。Mostafavi 等[16]研究發(fā)現(xiàn)，3 g/kg 的蒲公英花提取物，可顯著提高虹鱒魚（Oncorhynchus mykiss）的生長性能。高學(xué)政等[17]在飼料中添加復(fù)方中草藥飼喂大菱鲆（Scophthalmus maximus Linnaeus），降低了飼料系數(shù)，提高了特定生長率。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼料中添加復(fù)方中草藥可以提高美國牛蛙存活率和特定生長率。在黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）研究中發(fā)現(xiàn)，飼喂含有2%復(fù)方中草藥其增重率和存活率卻顯著低于1%組[18]。相似的結(jié)果在花鱸（Lateolabrax japonicus）上也發(fā)現(xiàn)[19]。在本試驗中也發(fā)現(xiàn)，高劑量復(fù)方中草藥會導(dǎo)致特定生長率和增重率下降，可能是中草藥導(dǎo)致機體過度免疫反應(yīng), 從而消耗更多的能量。此外，本試驗結(jié)果還顯示，飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙的臟體比、肝體比和肥滿度并無顯著影響。這與復(fù)方中草藥在影響大菱鲆和鞍帶石斑魚肥滿度的研究結(jié)果有所不同[4，17]，推測可能是所研究的試驗對象不同導(dǎo)致。

3.2 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙體成分的影響

蛋白質(zhì)和脂肪的含量直接體現(xiàn)了動物體的營養(yǎng)價值。本試驗飼料中添加復(fù)方中草藥對牛蛙的水分沒有影響。且隨著添加水平升高，粗蛋白和粗脂肪含量開始降低，其中0.75%和0.25%粗灰分含量顯著高于其他組。馬玲巧等[20]在施氏鱘（Acipenser schrencki）飼料中添加復(fù)方中草藥發(fā)現(xiàn)，0.5%組肌肉粗蛋白含量顯著高于對照組、1%和2%組，試驗組粗灰分含量顯著高于對照組，這與本試驗結(jié)果相似。Tan 等[21]在鯧魚（Trachinotus ovatus）飼料中添加蒲公英根提取物發(fā)現(xiàn)，隨著添加水平的升高能夠提高全魚的粗蛋白含量和水分含量，降低粗脂肪含量。這與本試驗結(jié)果又有所出入，這也說明中草藥具有提高機體營養(yǎng)的作用，但其作用可能與中草藥添加量、試驗對象等因素相關(guān)。

3.3 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙血清非特異性免疫指標和腸道消化酶的影響

血清指標一定程度揭示了機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及營養(yǎng)代謝正常與否的綜合指標[22-23]。SOD 反映的是機體抗氧化能力的強弱，能夠消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)[24]。MDA 是膜脂過氧化的最終分解產(chǎn)物，可間接反映出細胞受氧化損傷的程度[25-26]。盧世杰等[5]研究表明，在日糧中添加復(fù)方中草藥劑可提高綠殼蛋雞抗氧化性能，降低脂質(zhì)過氧化損傷。且在添加量為1%效果最好。但胡斌[27]在研究大口黑鱸（Micropterus salmoides）幼魚時發(fā)現(xiàn)復(fù)方中草藥Ⅲ（辣蓼、青蒿、蒼耳草、赤小豆、苦杏仁、麥麩、面粉）降低了魚體抗氧化的能力，同時MDA 含量增加，加大肝臟病變風(fēng)險，推測是藥物之間相互作用使得氧自由基處于活躍狀態(tài)導(dǎo)致。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SOD 含量隨著復(fù)方中草藥的添加水平上升而上升，MDA 含量與之相反。這也說明了飼料中添加復(fù)方中草藥對牛蛙提高抗氧化能力和抵御細胞損傷有一定的作用。

Brovey變換可以提高多光譜影像的空間分辨率，同時也能保持影像的光譜特性，結(jié)果如圖3所示。這種方法融合后影像色調(diào)非常好，幾乎完整地保持了原始影像的色調(diào)信息，而且還可以增加影像直方圖高低部分的比率，提供城市中陰影、水體和高反射地物的對比，因此它可以產(chǎn)生一幅更高程度反映影像直方圖高低部分對比的RGB影像。雖然這種方法對多光譜影像的輻射信息有一定程度的改變，但經(jīng)融合后，分辨率得到大大提高，地物更為突出，融合后的影像的細節(jié)紋理得到了明顯增強，在顏色、色調(diào)上與原圖保持了較好的一致性，既有豐富的影像信息，又能滿足地理國情普查數(shù)據(jù)采集精度要求，還便于內(nèi)業(yè)人工判讀，減少外業(yè)核查工作量。

血清TG 和T-CHO 是機體脂質(zhì)代謝指標，反映動物血清中脂質(zhì)的含量[28-29]。牛小天等[29]研究發(fā)現(xiàn)蒲公英總黃酮能夠降低大口黑鱸血液中的TC、TG含量。本次試驗同樣發(fā)現(xiàn)，隨著飼料中復(fù)方中草藥添加水平增加，血清中TG 和T-CHO 含量表現(xiàn)為下降趨勢，說明通過復(fù)方中草藥改善了美國牛蛙肝臟脂質(zhì)代謝狀況。血清GOT、GPT 主要存在于機體的肝和腎等組織細胞，反映了肝細胞損傷程度[30-31]。本試驗發(fā)現(xiàn)，復(fù)方中草藥添加水平增高使得血清GOT 含量和GPT 含量呈下降的趨勢。證明復(fù)方中草藥在養(yǎng)殖過程中有效降低牛蛙的肝臟負擔(dān)，且添加量的增加并未導(dǎo)致肝臟負擔(dān)增加。但在齊茜等[32]對板藍根和甘草的復(fù)方研究出現(xiàn)相反的結(jié)果，同時也表明某些中藥會對肝功能產(chǎn)生負面影響。AKP 是參與磷酸基團的轉(zhuǎn)移和代謝，在免疫過程中發(fā)揮作用[33]。ACP 是巨噬細胞內(nèi)溶酶體的標志酶，與細胞的消化代謝免疫調(diào)節(jié)有關(guān)[34]。在本試驗中，AKP含量和ACP含量隨著蒲公英的添加水平上升而增加。相似的結(jié)果在牙鲆（Paralichthys olivaceus）[33]和虹鱒[34]上發(fā)現(xiàn)。這也證明復(fù)方中草藥在一定程度能促進美國牛蛙的免疫功能。

消化酶是指所有參與消化過程酶的總稱。它能夠?qū)⒋蠓肿游镔|(zhì)分解成小分子物質(zhì)從而有利于吸收，能反映機體消化能力的一項指標[35-36]。研究發(fā)現(xiàn)，飼料添加4%的刺五加超微粉可以顯著提高吉富羅非魚（Genetically improved farmed tilapia,GIFT）腸道消化酶(淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶)含量。飼料中添加1%復(fù)方中草藥也能對雜交鱘腸道消化酶活性具有促進作用[26]。同樣的結(jié)果，在大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus）[37]、白 點 鮭（Salvelinus pluvius）和 亞 東 鮭（Salmo trutta fario）均有發(fā)現(xiàn)[38]。本試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加復(fù)方中草藥能夠顯著提高美國牛蛙的腸道消化酶活性，增強美國牛蛙的消化功能。

良好的問題情境一起學(xué)生的情感體驗，促使學(xué)生主動的構(gòu)建知識，充分發(fā)揮學(xué)生的積極性、主動性和創(chuàng)造性，提高課堂教學(xué)效率。本案例以求的值的問題引入，情境簡單、起點不高，但能有效的溝通學(xué)生的新舊經(jīng)驗，能夠使學(xué)生產(chǎn)生興趣，迅速地把精力集中到對重點問題——“如何求大角的三角函數(shù)值”的深入研究。

3.4 飼料中添加復(fù)方中草藥對美國牛蛙腸道形態(tài)的影響

腸道是機體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要器官之一，其結(jié)構(gòu)和功能的完整性與營養(yǎng)物質(zhì)消化、吸收和轉(zhuǎn)運密切相關(guān)[39-40]。一般認為腸絨毛高度和腸絨毛寬度增加有利于增大腸黏膜與食糜接觸面積，有助于對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，而肌層厚度則是影響著營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運速度[41-42]。Hu 等[43]在給肉雞（Gallus domesticus）口服豬源抗菌肽發(fā)現(xiàn)，十二指腸和空腸絨毛高度均顯著提高。陳福艷等[42]在羅非魚（Oreochromis mossambicus）飼料中添加酵母多糖-中草藥復(fù)合制劑，發(fā)現(xiàn)試驗組腸道的絨毛高度和肌層厚度顯著高于對照組。同樣的，黃芪多糖也能提高雛雞空腸絨毛高度/隱窩深度值[43]。本試驗結(jié)果表明，試驗組腸絨毛高度、腸絨毛寬度和肌層厚度相對于對照組具有不同程度的提升，與其在草魚（Ctenopharyngodon idella）[44]、鯉 魚（Cyprinus carpio）[45]、南亞野鯪（Labeo rohita）[46]上研究一致，也進一步說明中草藥能夠提高腸絨毛的高度與寬度、肌層厚度等。本研究還顯示，添加量為0.75%的試驗組最好，也得出復(fù)方中草藥一定程度上增加小腸絨毛的表面積，更有助于美國牛蛙腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

4 結(jié)論

綜上所述，在飼料中添加復(fù)方中草藥飼喂美國牛蛙90 d后不同程度提高了美國牛蛙特定生長率、增重率和存活率。提高了血清中SOD、ACP 和AKP 的含量，降低MDA、GOP、GPT、T-CHO 和TG 含量，提高了腸道消化酶的活性。通過腸道形態(tài)學(xué)發(fā)現(xiàn)，能夠增加腸絨毛的表面積，增強機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。綜合生長、血清免疫指標、腸道消化酶和腸道形態(tài)學(xué)的變化以及飼料系數(shù)考慮，建議美國牛蛙最適復(fù)方中草藥添加量水平0.75%。