■ 趙祥民 李璐璐 張家瑋 張軍霞 趙宏杰 唐德富

（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅蘭州 730070）

近年來，許多國家已經(jīng)立法限制甚至禁止在飼料中添加抗生素；美國食品藥品監(jiān)督管理局于2017年1月制定了限制農(nóng)場動物抗生素使用的新規(guī)定[1]，中國自2020年7月1日起停止生產(chǎn)含有促生長藥物飼料添加劑（中藥除外）的商業(yè)飼料，因此替抗和減抗已經(jīng)成為養(yǎng)殖過程中必須面對的問題。近年來，越來越多的研究表明，植物中的活性物質(zhì)在促進(jìn)動物生長發(fā)育的同時還可以提高動物免疫性能，減少氧化應(yīng)激，保持腸道的完整性，促進(jìn)有益細(xì)菌的生長，并減少腸道感染的負(fù)面效果[2]。中草藥作為一種天然藥物，具有毒性小、無殘留等特點(diǎn)，在畜牧業(yè)中使用各種草藥作為天然抗生素的研究正在世界各地進(jìn)行。當(dāng)歸作為中國的傳統(tǒng)中藥材，具有補(bǔ)血、活血、止痛、潤腸等功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，當(dāng)歸作為一種天然藥物不僅安全無毒，而且其有效活性成分具有廣泛的藥理活性，包括抗癌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)和神經(jīng)保護(hù)等作用[3]。同時體外和體內(nèi)研究表明，當(dāng)歸中的活性物質(zhì)還可以保護(hù)心臟、抗心律失常、防止動脈粥樣硬化[4-6]。在現(xiàn)行的中醫(yī)藥典中，當(dāng)歸因為其廣泛的藥理作用，被應(yīng)用到80 多個中草藥復(fù)方中。當(dāng)歸的根部為藥用部分，而地上部分的莖葉總是被直接丟棄。由于當(dāng)歸莖葉產(chǎn)量是根的幾倍，這一過程導(dǎo)致了資源的嚴(yán)重浪費(fèi)。研究表明，當(dāng)歸莖葉具有與根部相似的生物活性物質(zhì)[7]，因此具有一定的開發(fā)價值，而目前暫無將當(dāng)歸莖葉作為飼料添加劑應(yīng)用的報道。試驗評價了當(dāng)歸莖葉作為飼料添加劑對肉雞生長性能、屠宰性能、血清生化指標(biāo)及抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用的當(dāng)歸莖葉于2021年10月在甘肅省臨夏州康樂縣采摘，在當(dāng)歸未收獲前，割取地上10～13 cm 處的植株作為原始樣品，平鋪于陽光房內(nèi)自然陰干，達(dá)到水分要求（≤10%）后粉碎備用；試驗地點(diǎn)為甘肅省武威市民勤縣勤峰灘。

1.2 試驗設(shè)計與試驗動物

試驗采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計，挑選432 只體重相近[（50±5） g]、健康無病、公母各半的1 日齡科寶505 白羽肉仔雞，隨機(jī)分為1 個對照組和5 個處理組，分別為基礎(chǔ)日糧（1 組）、基礎(chǔ)日糧+1%當(dāng)歸莖葉粉（2組）、基礎(chǔ)日糧+1.5%當(dāng)歸莖葉粉（3 組）、基礎(chǔ)日糧+2%當(dāng)歸莖葉粉（4 組）、基礎(chǔ)日糧+2.5%當(dāng)歸莖葉粉（5 組）和基礎(chǔ)日糧+3%當(dāng)歸莖葉粉（6 組）。每個處理組6 個重復(fù)，每個重復(fù)12 只雞?？傇囼炂跒?2 d，分為試驗前期（1～21 d）和試驗后期（22～42 d）。

1.3 試驗日糧

試驗基礎(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型粉料，參照美國NRC（1994）肉雞的營養(yǎng)需要配合成粉狀飼料。試驗飼糧配方及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗開始前兩周，對雞舍及試驗用具進(jìn)行徹底的清洗和消毒，對照明系統(tǒng)和溫度控制系統(tǒng)進(jìn)行檢查和檢修。試驗開始前3 d，將舍內(nèi)溫度調(diào)整為35 ℃，之后每隔2 d 降低1 ℃，21 d 后舍內(nèi)溫度維持在24～26 ℃，直至試驗結(jié)束。整個試驗期舍內(nèi)濕度控制在65%左右，保持正常的通風(fēng)和連續(xù)24 h的照明。飼養(yǎng)管理參照《科寶肉雞飼養(yǎng)管理手冊》，采用三層立體式籠養(yǎng)，試驗雞自由采食和飲水，并在規(guī)定時間按免疫程序免疫。每天早晚打掃消毒，定期清理糞盤，保證雞舍內(nèi)外的清潔。

1.5 測定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能

試驗第1、21、42 天08：00，對所有試驗肉雞空腹稱重，稱重前12 h，禁食，自由飲水。以重復(fù)為單位，記錄肉仔雞的重量和余料量。測定其平均采食量（AFI）、平均體增重（AWG）和料重比（F/G）。

平均采食量（g）：試驗期內(nèi)雞只采食量/雞只數(shù)

平均體增重（g）：（試驗期內(nèi)雞期末體重-初始體重）/雞只數(shù)

料重比：試驗期內(nèi)總采食量/試驗期內(nèi)總體增重

1.5.2 屠宰性能

于試驗第42 天末，以組為單位抽取體重相近的6 只雞，記錄其活重，屠宰后記錄屠體重、全凈膛重、半凈膛重、腿肌重和胸肌重。

屠宰率（%）=屠體重/活重×100

全凈膛率（%）=全凈膛重/活重×100

半凈膛率（%）=半凈膛重/活重×100

胸肌率（%）=胸肌重/全凈膛重×100

腿肌率（%）=腿肌重/全凈膛重×100

1.5.3 血清生化指標(biāo)

① 樣品采集：于試驗第42天，以組為單位抽取體重相近的6只雞，翅下靜脈采血5 mL，置于10 mL離心管中，在室溫下傾斜放置30 min，4 ℃下 3 000 r/min離心10 min，分離血清，分裝后于-20 ℃保存。

② 測定指標(biāo)：總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、葡萄糖(GLU)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）。

③ 測定方法：測定指標(biāo)均使用北京中生北控生物科技有限公司提供試劑盒，具體方法按照說明書步驟進(jìn)行。

1.5.4 血清抗氧化指標(biāo)

① 樣品采集：飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，以組為單位抽取體重相近的6只雞，翅下靜脈采血5 mL，置于10 mL離心管中，在室溫下傾斜放置30 min，4 ℃下3 000 r/min離心10 min，分離血清分裝后于-20 ℃保存。

② 測定指標(biāo)：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）。

③ 測定方法：血清抗氧化指標(biāo)的測定使用北京華英生物科技有限公司供試劑盒，具體方法按照說明書步驟進(jìn)行。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)由Excel 2010 整理后，使用SPSS 20.0（IBM Corporation, USA）軟件中的one-way ANOVA 程序進(jìn)行方差分析，差異顯著時，采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較，所有試驗數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”來表示，以P＜0.05 作為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。圖片處理由GraphPad Prism 8完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能

由表2 可知，在1～21 日齡，與1 組相比，日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉仔雞平均采食量、平均體增重以及料重比無顯著影響（P＞0.05）；在22～42 日齡和1～42 日齡，與1組相比，3、4、5、6組平均采食量和平均體增重均顯著提高（P＜0.05），其中6組最高。

表2 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞生長性能的影響

2.2 屠宰性能

由表3 可知，1 組屠宰率顯著低于其余各組（P＜0.05）；半凈膛率6 組顯著高于1、2、3、4 組（P＜0.05），5 組則顯著高于1、2 組和3 組（P＜0.05）；5 組和6 組全凈膛率顯著高于1 組（P＜0.05）；6 組胸肌率顯著高于1、2、3 組（P＜0.05），4 組和5 組胸肌率顯著高于1 組和2 組（P＜0.05）；1 組腿肌率顯著低于4、5、6 組（P＜0.05）；5 組和6 組腹脂率顯著低于1、2、3、4 組，4 組顯著低于1組（P＜0.05）。

表3 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞屠宰性能的影響（%）

2.3 血清生化指標(biāo)

由表4可知，各組間總蛋白、白蛋白和高密度脂蛋白含量均無顯著差異（P＞0.05）。與1組相比，4、5、6組總膽固醇含量和葡萄糖含量顯著降低（P＜0.05）；6組三酰甘油含量顯著降低（P＜0.05），5、6組低密度脂蛋白含量顯著降低（P＜0.05），谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著降低（P＜0.05）；4、5、6組谷草轉(zhuǎn)氨酶含量顯著降低（P＜0.05）。

表4 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

2.4 血清抗氧化指標(biāo)

日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞血清中SOD 的水平和MDA 的含量均無顯著影響（P＞0.05）[圖1（A）、（D）]。與1 組相比，4、5、6 組顯著提高了肉雞血清中GSH-Px活性（P＜0.05），6組含量最高[圖1（B）]。與1組相比，其余各組均顯著提高了肉雞的T-AOC（P＜0.05），6組T-AOC最高[圖1（C）]。

圖1 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞血清抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞生長性能的影響

研究表明，中草藥的非藥用部分中的活性成分也存在一定的藥用價值，如果合理利用也有一定的開發(fā)潛力[8-11]。中草藥在畜禽飼料中常作為飼料添加劑使用，但對其非藥用部分的利用鮮有報道。當(dāng)歸莖葉具有與根部類似的生物活性物質(zhì)，其主要含有黃酮類、多糖類、有機(jī)酸類和萜類等化合物[7]，這些化合物都能有效改善肉雞的生長性能，但目前暫無當(dāng)歸莖葉在畜禽生產(chǎn)中應(yīng)用的報道。Guo 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在鵪鶉的日糧中3%添加黃芪莖葉可提高鵪鶉的采食量和體增重；Abdulsalam 等[13]發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞飼糧中添加辣木葉粕可以提高育肥期的生長性能。本試驗中，添加當(dāng)歸莖葉的處理組對肉雞的生長性能也有顯著的提升作用，且3% ASL效果最好，通過對比當(dāng)歸、黃芪、辣木三者有效活性成分發(fā)現(xiàn)，三者都富含黃酮類化合物和多糖類化合物[14-15]，而在畜禽生產(chǎn)中，黃酮類化合物和多糖類化合物已被證實對畜禽的生長有促進(jìn)作用[16-17]；此外，Greene 等[18]發(fā)現(xiàn)，植物飼料添加劑作用溫和，可改善肉雞下丘腦中HSP70 的表達(dá)，降低肉雞的核心溫度，從而提高肉雞的采食量和體重。但在本試驗研究結(jié)果中，料重比隨著ASL 添加劑量的增加卻沒有顯著變化，造成這一結(jié)果的原因可能是當(dāng)歸莖葉中的纖維含量較高，導(dǎo)致相同采食量的情況下，體增重降低，造成了料重比的升高，也有可能是當(dāng)歸莖葉中存在一些抗?fàn)I養(yǎng)因子造成了肉雞體重的下降，從而影響了料重比[19-22]。

3.2 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞屠宰性能的影響

畜禽生長發(fā)育的過程中，體增重的變化可以直觀地反映生產(chǎn)性能的優(yōu)劣，但畜禽的生產(chǎn)性能不僅僅只是體重的增長，而是產(chǎn)肉量的高低，與其相關(guān)的指標(biāo)就是屠宰性能。其中，屠宰率和全凈膛率是衡量畜禽產(chǎn)肉率的重要指標(biāo)。李苗苗等[23]在鵝飼料中添加辣木莖粉發(fā)現(xiàn)，辣木莖粉提高了鵝的胸肌率和腿肌率，并降低了鵝的腹脂率。本試驗研究中，日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉顯著改善了肉雞的屠宰性能，且以2%、2.5%、3%的添加量的效果較好，與上述報道研究一致。植物生長成熟的過程中，莖葉作為養(yǎng)分運(yùn)輸?shù)钠鞴僖灿幸欢ǖ臓I養(yǎng)價值，這些營養(yǎng)物質(zhì)被動物消化吸收，促進(jìn)動物生長的同時對動物的屠宰性能也有一定的改善作用；而屠宰性能作為動物生產(chǎn)性能的一部分，其表現(xiàn)的好壞可能與影響生產(chǎn)性能的因素相似，經(jīng)與上述研究中的有效成分比對發(fā)現(xiàn)，其與當(dāng)歸莖葉均含有黃酮類和多糖類物質(zhì)，雖劃分不同，但可能發(fā)揮了相同的生物學(xué)功能[24-25]。但也有學(xué)者將中草藥的非藥用部分作為家禽飼料添加劑時發(fā)現(xiàn)其對家禽的屠宰性能沒有顯著影響[26]。導(dǎo)致此結(jié)果的原因可能是動物間的個體差異、添加劑量和飼料的加工處理等方面的原因造成的，但具體原因還需進(jìn)一步探究。

3.3 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞血清生化的影響

動物的新陳代謝是一個持續(xù)變化的動態(tài)過程，由機(jī)體的內(nèi)分泌系統(tǒng)調(diào)控，并在相關(guān)酶的催化下有序進(jìn)行，以此來保障動物體內(nèi)生理和生化指標(biāo)的正常，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)代謝出現(xiàn)紊亂時，原有的代謝平衡被打破，血清生化指標(biāo)就會大致反映出機(jī)體的損傷情況。研究表明，血清生化指標(biāo)不僅反映了營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝情況，而且與機(jī)體的組織、器官和生理狀態(tài)息息相關(guān)[27-28]。動物血清中的總蛋白包括白蛋白和球蛋白，肝臟作為白蛋白合成的主要器官，一定程度上反映了肝臟的健康狀況。本試驗結(jié)果表明，日糧中當(dāng)歸莖葉粉的添加并未對肉雞血清的總蛋白和白蛋白含量有顯著影響，試驗結(jié)果證明當(dāng)歸莖葉粉在作為飼料添加劑使用時并未對肉雞的肝臟產(chǎn)生負(fù)面效果。動物體內(nèi)脂肪的合成和分解也主要在肝臟中進(jìn)行，三酰甘油和總膽固醇的含量反映了機(jī)體的血脂水平，高密度脂蛋白是將機(jī)體中的膽固醇和三酰甘油轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟中水解，隨后通過腸道排出體外；低密度脂蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)方向與高密度脂蛋白不同，它是將三酰甘油和膽固醇經(jīng)肝臟細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到其他組織細(xì)胞中水解。目前已有大量研究證明，中草藥可以調(diào)節(jié)機(jī)體的脂質(zhì)代謝，從而預(yù)防高血脂引發(fā)的疾病。Hyun 等[29]發(fā)現(xiàn)黃芪根提取物中黃酮類物質(zhì)顯著降低了患有酒精肝大鼠血清中三酰甘油和膽固醇的水平。還有研究報道稱，枸杞中的多糖類物質(zhì)顯著改善了小鼠的血脂代謝[30]。中草藥對血脂的改善作用可能是中草藥中富含天然的有機(jī)類黃酮化合物，類黃酮可以在消化道中與膽固醇形成不溶性復(fù)合物，從而抑制內(nèi)源性和外源性膽固醇的腸道吸收[31]；此外，多糖類物質(zhì)對血脂代謝的調(diào)節(jié)也有積極作用，其作用機(jī)制可能是多糖作為益生元調(diào)節(jié)了脂肪酸合成酶的活性[32]。當(dāng)歸莖葉同樣也存在黃酮類和多糖類化合物，在本研究中，日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉可降低肉雞血清中的三酰甘油、總膽固醇和低密度脂蛋白，同時增加血清中高密度脂蛋白的含量，且以3 %的添加組最優(yōu)，與以上研究結(jié)果一致。此外，血脂水平的降低，減少了機(jī)體內(nèi)糖異生途徑，從而使血清中葡萄糖含量也顯著下降。血清中AST 和ALT 含量反映了肝臟的健康狀況。本試驗中，肉雞日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉顯著降低了血清中AST和ALT 水平，其中3%的試驗組AST 最低，2%試驗組ALT 最低。血清ALT 和AST 水平的任何異常升高都可能意味著肝損傷（肝細(xì)胞變性），因此AST和ALT水平的降低可能是因為中草藥中的某些活性物質(zhì)具有保肝作用。然而，由于中草藥對家禽或其他動物血液參數(shù)影響的研究非常有限，仍需進(jìn)一步研究其對動物的影響。

3.4 日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞抗氧化性能的影響

畜禽在生長發(fā)育的過程中，由于與外界的持續(xù)接觸，包括呼吸、外界污染、放射線照射等因素，使得畜禽體內(nèi)不斷產(chǎn)生自由基，而畜禽體內(nèi)也會對產(chǎn)生的自由基進(jìn)行清除，從而保證機(jī)體的正常代謝，但是機(jī)體內(nèi)對自由基清除能力有限，當(dāng)自由基的產(chǎn)生速率超過機(jī)體清除速率時，自由基在體內(nèi)開始大量積累，使機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體功能障礙。由于肉仔雞消化道生理構(gòu)造的特殊性以及集約化飼養(yǎng)模式，造成肉雞體內(nèi)脂肪易于積累，因此相比于其他動物，肉雞發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)概率更高。MDA 是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，因此可作為機(jī)體抗氧化能力評價指標(biāo)[33]。SOD 是機(jī)體內(nèi)部保護(hù)的第一道防線，它可以清除超氧陰離子自由基保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷[34]。GSH-Px 是機(jī)體內(nèi)一種廣泛存在的過氧化物分解酶，且僅對還原性GSH有專一性，使有毒的過氧化物變?yōu)闊o毒的羥基化合物，從而保護(hù)細(xì)胞膜的功能不受過氧化物的干擾及損害。T-AOC 代表機(jī)體體內(nèi)酶類和非酶類抗氧化物的總體水平，能全面反映動物機(jī)體的抗氧化狀態(tài)[35]。先前的研究證實，植物中的多糖類物質(zhì)、黃酮類物質(zhì)和有機(jī)酸類物質(zhì)能增強(qiáng)動物的抗氧化能力[36-38]。Xue 等[39]表明牛膝多糖降低鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的大鼠血清MDA 含量，并提高GSH-Px 和SOD 活性；Hao 等[40]的研究表明在小鼠飼糧中添加杜仲綠原酸能提高GSH-Px、SOD 的水平，并降低了小鼠機(jī)體的MDA 含量；此外，對四氯化碳誘導(dǎo)的肝損傷小鼠給予黃芪多糖可增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力，提高GSH-Px 和SOD 水平，同時降低MDA 含量[41]。當(dāng)歸莖葉不僅含有多種多糖類和黃酮類化合物，同時也富含綠原酸。本試驗結(jié)果表明，日糧中添加當(dāng)歸莖葉粉對肉雞血清中的SOD 水平和MDA 含量無顯著影響，但T-AOC 和GSH-Px 活性明顯增加，說明當(dāng)歸莖葉粉對改善肉雞的抗氧化狀態(tài)具有積極作用。試驗結(jié)果與Wang 等[42]和Guo等[12]的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

飼糧中添加ASL可以提高肉雞的生產(chǎn)性能、屠宰性能。改善肉雞的血脂代謝水平，降低血清中的血糖含量，提高肉雞的抗氧化能力，飼糧中ASL 的推薦添加量為3%。