張 瑩,高硯麗,任引剛

(空軍軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科,西安 710038;*通訊作者,E-mail:yingangr937@163.com)

肺動(dòng)脈高壓是一類常見(jiàn)的心血管疾病,預(yù)后極差,嚴(yán)重危害人類的健康[1]。肺動(dòng)脈高壓可導(dǎo)致右心室肥大和衰竭,最終引起死亡[2]。肺動(dòng)脈高壓的病理相當(dāng)復(fù)雜,血管重塑被認(rèn)為是肺動(dòng)脈高壓的主要病理特征[3]。平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖和肥大導(dǎo)致的中膜增厚,是血管重塑重要過(guò)程之一。在病理?xiàng)l件的刺激下,肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞由收縮型轉(zhuǎn)化為合成型,合成型的平滑肌細(xì)胞具有更強(qiáng)的增殖和遷移能力,從而導(dǎo)致肺動(dòng)脈中膜增厚,血管阻力增加,導(dǎo)致血管壓力持續(xù)升高[4]。目前臨床治療肺動(dòng)脈高壓的效果并不令人滿意,無(wú)法阻止和逆轉(zhuǎn)疾病的進(jìn)展過(guò)程[5]。肺動(dòng)脈高壓涉及多種基因的異常表達(dá)和信號(hào)通路的調(diào)控,發(fā)掘?qū)Ψ蝿?dòng)脈平滑肌增殖和遷移具有重要調(diào)控的基因,可為該疾病的臨床治療干預(yù)提供新的思路和治療靶標(biāo)。

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一個(gè)多能效的細(xì)胞因子,調(diào)控多種生物學(xué)過(guò)程,并參與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)展過(guò)程[6,7]。TGF-β1與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(transforming growth factor-β receptor Ⅰ,TβRⅠ)結(jié)合,引起細(xì)胞質(zhì)內(nèi)Smad2和Smad3的磷酸化,然后磷酸化的Smad2/3蛋白復(fù)合體入核,從而激活下游基因的表達(dá)[8]。激活后的TGF-β1/Smad信號(hào)通路可調(diào)控細(xì)胞增殖、遷移、細(xì)胞外基質(zhì)合成、細(xì)胞分化和細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化等生物學(xué)功能[9]。據(jù)報(bào)道,TGF-β1/Smad信號(hào)通路的過(guò)度激活與肺動(dòng)脈高壓的進(jìn)展密切相關(guān)[10]。TGF-β1/Smad信號(hào)通路通過(guò)促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的過(guò)度增殖和遷移,引起血管重塑,導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生[11]。靶向抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路已成為開(kāi)發(fā)肺動(dòng)脈高壓治療的新策略。因此,TGF-β1/Smad信號(hào)通路在肺動(dòng)脈高壓中的調(diào)控機(jī)制值得進(jìn)一步的研究,探尋對(duì)該信號(hào)通路具有重要調(diào)控作用的分子,對(duì)于開(kāi)發(fā)新的治療方法具有十分重要的意義。

沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關(guān)酶類7(silent information regulator 2 related enzyme 7,SIRT7)是SIRTs蛋白家族的重要一員,具有組蛋白去乙?；负腿ョ牾；傅幕钚訹12]。SIRT7參與多種生物學(xué)過(guò)程,包括細(xì)胞衰老、細(xì)胞應(yīng)激、代謝反應(yīng)和炎癥反應(yīng)等,在多種病理?xiàng)l件下發(fā)揮關(guān)鍵作用[13,14]。據(jù)報(bào)道,SIRT7過(guò)表達(dá)能夠促進(jìn)氣道平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移[15],表明SIRT7可能參與平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化。目前,關(guān)于SIRT7是否參與肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,還沒(méi)有相關(guān)研究。體外低氧培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)引起細(xì)胞的過(guò)度增殖和遷移,是體外模擬肺動(dòng)脈高壓研究的經(jīng)典模型。本文通過(guò)該模型研究SIRT7對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs增殖和遷移的調(diào)控作用,并探討其可能的分子作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

HPASMCs購(gòu)自美國(guó)菌種保藏中心ATCC;RNA提取試劑Trizol、CCK-8和EdU試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物科技有限公司;cDNA合成試劑盒和FastSYBR Mixture購(gòu)自江蘇康為世紀(jì)生物科技股份有限公司;蛋白提取試劑盒和蛋白濃度測(cè)定試劑盒購(gòu)自北京全式金生物科技有限公司;LV-sh-SIRT7購(gòu)自上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司;AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡試劑盒購(gòu)自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司;兔抗人SIRT7抗體、GAPDH抗體、TGF-β1抗體和HRP標(biāo)記的山羊抗兔二抗購(gòu)自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司;兔抗人TβRⅠ抗體購(gòu)自上海艾博抗貿(mào)易有限公司;兔抗人Smad2抗體、p-Smad2抗體、Smad3抗體和p-Smad3抗體購(gòu)自美國(guó)Cell Signaling Technology公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和慢病毒感染 將HPASMCs接種于含平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子的專屬培養(yǎng)基中,置于5% CO2的培養(yǎng)箱中37 ℃生長(zhǎng)。將HPASMCs接種于6孔板中(1×106個(gè)/孔),按感染復(fù)數(shù)(multiply of infection,MOI)為50加入慢病毒,并添加5 μg/ml Polybrene提高感染效率。將細(xì)胞板放回細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育,24 h后更換新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)3～4 d;中途更換細(xì)胞液,保持良好細(xì)胞狀態(tài)。收集細(xì)胞檢測(cè)靶基因表達(dá)變化,并進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 細(xì)胞分組和處理 將HPASMCs分為:常氧對(duì)照組、低氧組、低氧+LV-sh-Ctrl組和低氧+LV-sh-SIRT7組。常氧對(duì)照組HPASMCs置于常氧培養(yǎng)箱中(含5% CO2和95%空氣)孵育48 h。低氧組HPASMCs置于厭氧培養(yǎng)箱中(含3% O2、5% CO2和92% N2)孵育培養(yǎng)48 h,建立低氧誘導(dǎo)模型。低氧+LV-sh-Ctrl組HPASMCs感染對(duì)重組照腺病毒LV-sh-Ctrl,然后進(jìn)行低氧處理。低氧+LV-sh-SIRT7組HPASMCs感染表達(dá)SIRT7 shRNA的重組腺病毒LV-sh-SIRT7,然后進(jìn)行低氧處理。

1.2.3 RT-qPCR檢測(cè)SIRT7的mRNA表達(dá) 待細(xì)胞處理完成,收集細(xì)胞,加入Trizol充分裂解細(xì)胞,按試劑盒步驟抽提細(xì)胞總RNA。采用SuperRT cDNA合成試劑盒,根據(jù)試劑盒操作步驟,將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。將cDNA、FastSYBR Mixture和引物混合為20 μl反應(yīng)體系,采取預(yù)變性95 ℃,20 s;40個(gè)循環(huán)的熱循環(huán)程序(變性95 ℃,3 s;退火/延伸60℃,30 s)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。以GADPH為內(nèi)參基因,采用2-ΔΔCt公式分析RT-qPCR結(jié)果,計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)水平。

1.2.4 Western blotting檢測(cè)SIRT7、TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表達(dá) 待細(xì)胞處理完成,收集細(xì)胞,加入蛋白提取緩沖液和蛋白酶抑制劑,充分裂解細(xì)胞,提取細(xì)胞總蛋白。測(cè)定蛋白濃度后,按30 μg/孔將蛋白樣品加到配置好的濃縮膠孔中,進(jìn)行SDS-PAGE電泳。電泳完成,將蛋白從分離膠中轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。將膜放入5%脫脂奶粉中,室溫封閉1 h。將膜放入一抗稀釋液(SIRT7抗體稀釋度為1∶1 000;TGF-β1抗體稀釋度為1∶800;TβRⅠ抗體稀釋度為1∶1 000;Smad2抗體稀釋度為1∶1 000;p-Smad2抗體稀釋度為1∶500;Smad3抗體稀釋度為1∶1 000;p-Smad3抗體稀釋度為1∶500;GAPDH抗體稀釋度為1∶2 000),4 ℃搖床過(guò)夜。TBST洗膜,放入到二抗的稀釋液(稀釋度為1∶5 000)中,室溫孵育1 h。二抗孵育完成后,TBST洗膜。將ECL發(fā)光液均勻涂抹膜上,孵育2 min。將膜放入成像儀中,進(jìn)行成像和拍照。

1.2.5 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)活性 將HPAMSCs集中到96孔中,置于5% CO2的培養(yǎng)箱中37 ℃過(guò)夜培養(yǎng),使細(xì)胞貼壁。待細(xì)胞處理完成,加入CCK-8溶液(10 μl/孔),繼續(xù)培養(yǎng)2 h。采用酶標(biāo)儀測(cè)定細(xì)胞溶液在450 nm波長(zhǎng)處的吸光度。

1.2.6 EdU檢測(cè)細(xì)胞增殖 將HPAMSCs接種在蓋玻片上,待細(xì)胞處理完成,將EdU溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)孔中,使終濃度達(dá)到20 μmol/L,細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)2 h。吸去培養(yǎng)液,加入4%多聚甲醛,室溫固定15 min。洗滌細(xì)胞,然后加入含0.3% Triton X-100的PBS,室溫避光孵育30 min。洗滌細(xì)胞后,加入DAPI溶液,室溫避光孵育10 min,對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。采用抗熒光淬滅封片液封片,熒光顯微鏡檢測(cè)和拍照,選取固定視野對(duì)EdU陽(yáng)性細(xì)胞(綠色熒光)數(shù)量和細(xì)胞核(藍(lán)色)數(shù)量計(jì)數(shù),計(jì)算細(xì)胞增殖率。

1.2.7 Annexin Ⅴ-FITC/PI凋亡實(shí)驗(yàn) 待細(xì)胞處理完成后,采用胰酶消化細(xì)胞,PBS洗滌和重懸細(xì)胞,進(jìn)行計(jì)數(shù)。收集2×105個(gè)細(xì)胞,重懸在500 μl的1×Annexin Ⅴ Binding Buffer緩沖液中,并加入5 μl的Annexin Ⅴ-FITC和5 μl的PI染色液。室溫避光孵育20 min,反應(yīng)完成后,立即采用式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡比例。

1.2.8 Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn) 收集HPASMCs重懸在不含血清生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基中,并加入到Transwell小室(200 μl/孔)。將500 μl含血清生長(zhǎng)因子的完全培養(yǎng)基加入到下室。將細(xì)胞放入?yún)捬跖囵B(yǎng)中,低氧誘導(dǎo)48 h。取出小室,用棉簽擦除上層殘留的細(xì)胞,加入4%多聚甲醛溶液固定30 min;洗滌后,加入0.1%結(jié)晶紫溶液染色20 min。洗滌并干燥后,采用倒置顯微鏡觀察和拍照。隨機(jī)選取3個(gè)固定大小的視野,進(jìn)行計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 低氧處理HPAMSCs對(duì)SIRT7表達(dá)的影響

RT-qPCR結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組SIRT7的mRNA表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,見(jiàn)圖1A)。Western blotting結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組SIRT7的蛋白表達(dá)量顯著增加(P<0.01,見(jiàn)圖1B),與SIRT7的mRNA表達(dá)水平變化一致。

A.RT-qPCR檢測(cè)SIRT7 mRNA表達(dá)變化 B. Western blotting檢測(cè)SIRT7蛋白表達(dá)變化

2.2 感染慢病毒LV-sh-SIRT7對(duì)HPAMSCs中SIRT7表達(dá)的影響

RT-qPCR結(jié)果顯示,與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組SIRT7的mRNA表達(dá)水水平顯著降低(P<0.01,見(jiàn)圖2A)。Western blotting結(jié)果顯示,與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組SIRT7的蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.01,見(jiàn)圖2B)。

A.RT-qPCR檢測(cè)SIRT7 mRNA表達(dá)變化 B.Western blotting檢測(cè)SIRT7蛋白表達(dá)變化

2.3 基因沉默SIRT7對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs生長(zhǎng)和增殖的影響

CCK-8結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組HPASMCs的生長(zhǎng)活性升高(P<0.01);與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組HPASMCs的生長(zhǎng)活性顯著降低(P<0.01,見(jiàn)圖3)。EdU結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組HPASMCs的增殖率顯著增加(P<0.01);與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組HPASMCs的增殖率顯著降低(P<0.01,見(jiàn)圖3)。

2.4 基因沉默SIRT7對(duì)低氧處理的HPASMCs凋亡的影響

細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組HPASMCs的凋亡率降低(P<0.05);與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組HPASMCs的凋亡率顯著升高(P<0.01,見(jiàn)圖4)。

圖4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)基因沉默SIRT7對(duì)低氧處理的HPASMCs凋亡的影響

2.5 基因沉默SIRT7對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs遷移的影響

Transwell結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組HPASMCs的遷移水平升高(P<0.01);與低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組HPASMCs的遷移水平顯著降低(P<0.01,見(jiàn)圖5)。

圖5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)基因沉默SIRT7對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs遷移的影響 (×200)

2.6 基因沉默SIRT7對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs中TGF-β1/Smad信號(hào)通路的影響

Western blotting結(jié)果顯示,與常氧對(duì)照組比較,低氧組和低氧+LV-sh-Ctrl組TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3蛋白表達(dá)量增加(P<0.01);與低氧和低氧+LV-sh-Ctrl組比較,低氧+LV-sh-SIRT7組TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.01,見(jiàn)圖6)。

3 討論

肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病機(jī)制涉及多種基因的異常表達(dá)和信號(hào)通路的異常調(diào)控。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞介導(dǎo)的血管重塑是肺動(dòng)脈高壓發(fā)病的重要因素。鑒定對(duì)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞異常增殖和遷移具有調(diào)控作用的基因,對(duì)于了解肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病機(jī)制,具有十分重要的意義。本文通過(guò)低氧處理HPASMCs建立肺動(dòng)脈高壓研究的一個(gè)常用細(xì)胞模型,發(fā)現(xiàn)基因敲除SIRT7有效抑制低氧誘導(dǎo)的HPASMCs過(guò)度增殖和遷移,并且抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路的激活。本研究表明SIRT7可能通過(guò)調(diào)控TGF-β1/Smad信號(hào)通路在肺動(dòng)脈高壓的血管重塑過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

SIRT7對(duì)于細(xì)胞的存活和增殖具有重要的調(diào)控作用。SIRT7在代謝活躍的細(xì)胞中高表達(dá),并且通過(guò)調(diào)控rDNA的轉(zhuǎn)錄來(lái)促進(jìn)細(xì)胞周期的進(jìn)展[16,17]。在一些壓力應(yīng)激條件下,SIRT7能夠抑制細(xì)胞凋亡和損傷,提高細(xì)胞的存活[18]。但是,細(xì)胞過(guò)度的增殖和存活會(huì)導(dǎo)致其他疾病發(fā)生,例如腫瘤。據(jù)報(bào)道,SIRT7在多種腫瘤組織中高表達(dá),并且促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移[19-21]。目前,關(guān)于SIRT7是否參與調(diào)控肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,尚未有研究報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn),SIRT7在低氧處理的HPAMSCs中表達(dá)水平升高。通過(guò)基因沉默技術(shù)敲低SIRT7在HPAMSCs中的表達(dá)水平,則可抑制低氧誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖和遷移,同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞的凋亡發(fā)生。本研究結(jié)果與過(guò)往研究發(fā)現(xiàn)一致,表明SIRT7對(duì)細(xì)胞增殖、遷移和凋亡具有重要調(diào)控作用,其介導(dǎo)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移可能在肺動(dòng)脈高壓發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

既往研究表明,SIRT7高度參與平滑肌細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)換,而平滑肌細(xì)胞表型的轉(zhuǎn)換是多種疾病發(fā)生的基礎(chǔ)。Fang等[15]報(bào)道SIRT7能夠促進(jìn)氣道平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,與哮喘中的氣道重塑密切相關(guān)。在體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞中,基因沉默SIRT7顯著抑制細(xì)胞的增殖和遷移能力[22]。另外,在小鼠股動(dòng)脈損傷模型中,敲除SIRT7可以減輕內(nèi)膜的增生,與抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖密切相關(guān)[22]。這些研究表明,SIRT7與平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖和遷移密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,基因沉默SIRT7有效抑制低氧誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,表明SIRT7是肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的促進(jìn)調(diào)控因子。然而,有一些研究也表明SIRT7對(duì)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移具有抑制作用。在氧化型低密度脂蛋白刺激的血管平滑肌細(xì)胞中,過(guò)表達(dá)SIRT7可以抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移[23]。因此,SIRT7可能在不同的病理?xiàng)l件下對(duì)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移發(fā)揮不同的調(diào)控作用。本研究結(jié)果支持SIRT7對(duì)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移發(fā)揮促進(jìn)作用。鑒于此,SIRT7在不同病理?xiàng)l件下對(duì)不同類型的平滑肌細(xì)胞的調(diào)控作用,值得進(jìn)一步研究和探討。

TGF-β1/Smad信號(hào)通路是調(diào)控肺動(dòng)脈高壓中血管重塑的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)通路[10]。TGF-β1通過(guò)與細(xì)胞膜受體TβRⅠ結(jié)合,引起Smad2/3的磷酸化,引起下游通路的激活,從而促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生和進(jìn)展[24]。鑒定對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)通路具有調(diào)控作用的分子,對(duì)于開(kāi)發(fā)靶向抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路治療肺動(dòng)脈高壓具有十分重要的意義。目前,多項(xiàng)研究已表明,SIRT7對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)通路調(diào)控具有重要的調(diào)控作用。在心肌纖維細(xì)胞中,基因沉默SIRT7抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路的激活,從而減輕心肌纖維化的發(fā)生[25]?；虺聊琒IRT7通過(guò)抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路的激活,降低瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖水平,并且促進(jìn)細(xì)胞凋亡的發(fā)生[26]。在氣道平滑肌細(xì)胞中,基因沉默SIRT7通過(guò)抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路的激活來(lái)減弱細(xì)胞的增殖和遷移能力[15]。這些研究表明,SIRT7對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)通路的激活發(fā)揮促進(jìn)作用。本研究發(fā)現(xiàn),基因沉默SIRT7可降低TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3在低氧處理的HPASMCs中的表達(dá)水平。因此,本研究結(jié)果與過(guò)往報(bào)道一致,進(jìn)一步證明了SIRT7是TGF-β1/Smad信號(hào)通路激活的關(guān)鍵調(diào)控分子。

綜上所述,基因沉默SIRT7抑制低氧誘導(dǎo)的HPASMCs的增殖和遷移,其作用機(jī)制可能與抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路密切相關(guān)。本研究表明SIRT7通過(guò)調(diào)控肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移介導(dǎo)血管重塑的發(fā)生,在肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用。本研究為解釋肺動(dòng)脈高壓的分子發(fā)病機(jī)制提供了新的思路,為臨床治療方法的研發(fā)提供了新的靶標(biāo)和理論基礎(chǔ)。但是,肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜,僅憑體外細(xì)胞研究數(shù)據(jù),還不能說(shuō)明SIRT7在肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病過(guò)程中的重要性。因此,關(guān)于SIRT7在肺動(dòng)脈高壓發(fā)病中的明確作用和分子機(jī)制還需通過(guò)開(kāi)展動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)進(jìn)行更深入的研究和驗(yàn)證。