王陸軍

乙型肝炎（乙肝）是各國(guó)廣泛關(guān)注的傳染性疾病，已成為全世界高度重視的公共衛(wèi)生問(wèn)題［1］。作為一種傳染性疾病，乙肝的傳播途徑較多，可經(jīng)血液傳播、母嬰傳播、性傳播等，會(huì)極大地威脅人類(lèi)健康，若治療不及時(shí)或無(wú)效，易導(dǎo)致患者死亡，給患者的家庭和社會(huì)帶來(lái)負(fù)擔(dān)［2］。目前全世界在對(duì)乙肝的診療中指出接種疫苗是最有效的防治方法，針對(duì)已發(fā)病患者，抗病毒、保肝、免疫調(diào)節(jié)以及抗纖維化是常用的治療方法，可有效穩(wěn)定病情，緩解癥狀，促進(jìn)患者逐步恢復(fù)健康［3］。由于乙肝的傳播途徑多，傳播范圍較廣，極易引起大規(guī)模傳播，威脅人類(lèi)健康和生命安全，因此早期、及時(shí)、有效的檢測(cè)對(duì)控制乙肝感染的意義重大［4］?，F(xiàn)階段，乙肝感染的血清學(xué)標(biāo)志物以乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）為主，可選擇的檢測(cè)方法中化學(xué)發(fā)光免疫分析法較常見(jiàn)，該方法包括3 種檢測(cè)形式，即直接化學(xué)發(fā)光、酶促化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光，而不同化學(xué)發(fā)光免疫分析方法對(duì)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物的檢測(cè)價(jià)值如何鮮有報(bào)道，更多的是將化學(xué)發(fā)光分析免疫與其他檢測(cè)方法進(jìn)行比較［5］。在如今乙肝發(fā)病率和病死率不斷上升的背景下，人們對(duì)乙肝的防治要求不斷提高，如何實(shí)現(xiàn)對(duì)乙肝病毒的有效快速鑒定有著十分重要的意義。為此，本研究納入50 例乙肝患者標(biāo)本展開(kāi)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象與一般資料 納入本院2020年1月—12 月收治的50 例乙肝患者作為研究對(duì)象，采集血液標(biāo)本。其中男性28 例，女性22 例；年齡18～76 歲，平均（42.16±2.58）歲。排除藥物和酒精造成的肝損傷、脂肪肝以及肝腎綜合征患者，所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)。本研究已經(jīng)通過(guò)本院倫理審批（審批號(hào)：20230602），患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 標(biāo)本采集 采集標(biāo)本前一晚囑患者禁食禁飲8 h，注意休息。次日清晨使用真空抗凝管采集患者空腹靜脈血5 mL，充分混勻抗凝。采用A206A 臺(tái)式醫(yī)用離心機(jī)（德國(guó)賀默公司）離心處理10 min，靜置15 min后分離上層血清，保存于-80 ℃冰箱中，在2 h內(nèi)及時(shí)送檢。

1.3 標(biāo)本檢測(cè) 使用邁瑞B(yǎng)S 2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀及校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、乙肝五項(xiàng)指標(biāo)（HBV-M）試劑盒均購(gòu)自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。電化學(xué)發(fā)光法標(biāo)物為三聯(lián)吡啶釕，直接化學(xué)發(fā)光法標(biāo)志物為吖啶酯，酶促化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物為堿性磷酸酶。在檢測(cè)時(shí)需嚴(yán)格按照儀器和試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4 病理診斷 所有標(biāo)本均由本院病理科進(jìn)行檢測(cè)，在B 超引導(dǎo)下由專(zhuān)人操作1 s 快速穿刺。取長(zhǎng)度為1.5～2.5 cm 的肝組織，采用10%中性甲醛進(jìn)行固定以及病理檢查。病理診斷結(jié)果符合《慢性乙型肝炎防治指南（2019 年版）》［6］診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn) 不同乙肝血清學(xué)指標(biāo)的陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：HBsAg＞0.2 μg/L，HBsAb＞5.0 μg/L，HBeAg＞0.5 PEIU/mL，HBeAb＞0.2 PEIU/mL，HBcAb＞0.9 PEIU/mL，滿(mǎn)足上述標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，可判定為陽(yáng)性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，多組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測(cè)方法的陽(yáng)性檢出率比較 電化學(xué)發(fā)光免疫法的陽(yáng)性檢出率明顯高于直接化學(xué)發(fā)光免疫法和酶促化學(xué)發(fā)光免疫法（均P＜0.05），但直接化學(xué)發(fā)光免疫法和酶促化學(xué)發(fā)光免疫法的陽(yáng)性檢出率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)方法的陽(yáng)性檢出率比較

2.2 不同檢測(cè)方法對(duì)HBsAg 的靈敏度和特異度比較 電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)HBsAg 的靈敏度和特異度均明顯高于直接化學(xué)發(fā)光免疫法和酶促化學(xué)發(fā)光免疫法（均P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同檢測(cè)方法對(duì)HBsAg 的靈敏度和特異度比較

3 討論

乙肝在我國(guó)的發(fā)病率較高，隨著人們生活方式、飲食結(jié)構(gòu)等因素的變化，發(fā)病率逐年上升，患者數(shù)量不斷增加，且呈現(xiàn)出一定的年輕化趨勢(shì)，已引起全社會(huì)的廣泛關(guān)注［7］。乙肝作為一種傳染性疾病，傳播途徑較多，主要有血液傳播、母嬰傳播、性傳播等，會(huì)給人們的心理造成一定的壓力，嚴(yán)重影響患者身心健康，造成社會(huì)的不穩(wěn)定［8］。因此早期及時(shí)、準(zhǔn)確、有效地進(jìn)行診斷意義重大。

目前，化學(xué)發(fā)光免疫分析法是用于檢測(cè)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物的常用方法，該檢測(cè)法將化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)和免疫反應(yīng)相結(jié)合，對(duì)檢測(cè)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)和分析，既有化學(xué)發(fā)光的優(yōu)點(diǎn)，又有免疫反應(yīng)的優(yōu)勢(shì)［9］?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)常用于各種抗原、半抗原、抗體、脂肪酸等檢測(cè)分析技術(shù)，是繼酶聯(lián)免疫分析、熒光免疫分析、放射免疫分析和時(shí)間分辨熒光免疫分析后發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)用于免疫測(cè)定的新技術(shù)［10］?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法有較高的靈敏度和特異度［11］。根據(jù)標(biāo)記物的不同，化學(xué)發(fā)光免疫分析法可分為三種具體形式：① 直接化學(xué)發(fā)光法標(biāo)記物為吖啶酯或N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾；② 酶促化學(xué)發(fā)光法標(biāo)記物為堿性磷酸酶或者辣根過(guò)氧化物酶；③ 電化學(xué)發(fā)光法標(biāo)記物為三聯(lián)吡啶釕［12］。三種不同類(lèi)型的化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)法均已用于臨床，且取得了良好的反響，但三者應(yīng)用于乙肝血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)中的價(jià)值如何并未見(jiàn)太多比較性分析。本研究結(jié)果顯示，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的陽(yáng)性檢出率明顯高于直接化學(xué)發(fā)光法和酶促化學(xué)發(fā)光法，且HBsAg、HBeAb、HBcAb 的陽(yáng)性檢出率均達(dá)到90.00%以上，表明電化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物的準(zhǔn)確性較高，且效果優(yōu)于直接化學(xué)發(fā)光法和酶促化學(xué)發(fā)光法。電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學(xué)發(fā)光免疫后的新一代標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，不使用放射性物質(zhì)，且在靈敏度、快速檢測(cè)、自動(dòng)化等方面具有綜合優(yōu)勢(shì)和潛力，已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)，特別是臨床醫(yī)學(xué)的各領(lǐng)域中，促進(jìn)和提高了診斷水平［13］。血清中陽(yáng)性是感染的標(biāo)志物本身具有抗原性而無(wú)傳染性，若與HBeAg 同時(shí)存在，則通常被認(rèn)為具有傳染性，標(biāo)志物檢測(cè)是臨床診斷乙肝的重要依據(jù)，也是抗病毒治療的重要檢測(cè)指標(biāo)之一［14］。HBsAg 作為乙肝病毒感染的重要診斷指標(biāo)，在臨床實(shí)驗(yàn)室診斷乙肝病毒感染時(shí)發(fā)揮著重要作用［15-16］。本研究針對(duì)HBsAg 檢測(cè)的靈敏度和特異度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示電化學(xué)發(fā)光法均明顯高于直接化學(xué)發(fā)光法和酶促化學(xué)發(fā)光法，表明電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HBsAg 的靈敏度和特異度均較高。本研究納入的樣本數(shù)量偏少，可能影響研究數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性，因此需要在日后的研究中增加樣本數(shù)量并深入探究。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)中，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)乙肝血清學(xué)標(biāo)志物的陽(yáng)性檢出率較高，且有較高的靈敏度和特異度，具有較高的應(yīng)用與推廣價(jià)值。

利益沖突作者聲明不存在利益沖突