余佳妮，李立杰，葛 恒，馬永華，廖木蘭，尤德雨，譚鳳霞，柴 毅1，

(1.長江大學(xué)濕地生態(tài)與農(nóng)業(yè)利用教育部工程研究中心，湖北荊州 434025；2.長江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北荊州 434025；3.長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院，湖北荊州 434025)

重金屬脅迫是近年來引起環(huán)境污染的主要非生物脅迫之一，其中鉻(Cr)是重金屬污染物之一，工業(yè)發(fā)展中燃料燃燒的含鉻廢氣、廢水和廢渣是主要的污染源[1]。目前在水體，土壤，大氣等環(huán)境介質(zhì)中均檢測出Cr的存在。其中，水體是主要匯集和遠(yuǎn)距離傳輸?shù)妮d體[2]。據(jù)調(diào)查，珠江支流西江干流水體中Cr含量超三類水標(biāo)準(zhǔn)值0.92倍，高達(dá)96 μg/L[3]；寧波市城區(qū)地表水Cr污染超過地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(GB 3838-2002)IV類水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)值，導(dǎo)致致癌率增加[4]；滇池水體中Cr6+含量為(127.83±2.9)μg/L，超Ⅴ類水標(biāo)準(zhǔn)[5]。在水體環(huán)境中主要是以Cr3+和Cr6+這兩種形式最為常見，其中Cr6+具有難降解、致癌和致突變等特性[6]。已有研究表明，Cr6+在生理生化[7，8]、免疫[9]和遺傳[10]等各個(gè)層次上對(duì)水生生物產(chǎn)生毒性效應(yīng)，并可通過食物鏈富集最終進(jìn)入人體內(nèi)損害健康。目前，Cr6+化合物已被列入我國《優(yōu)先控制化學(xué)品名錄(第一批)》和《有毒有害水污染物名錄(第一批)》的危險(xiǎn)化學(xué)物質(zhì)。因此為保護(hù)生態(tài)環(huán)境和人類健康，探究水環(huán)境中Cr6+的污染特征是至關(guān)重要的。

普通小球藻(Chlorellavulgaris)屬于淡水綠藻，其適應(yīng)性強(qiáng)，繁殖迅速、對(duì)逆境敏感、并且能吸收和積累多種環(huán)境有機(jī)物，是水體污染的指示種，被廣泛應(yīng)用于污染物毒性評(píng)價(jià)和生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[11]。本實(shí)驗(yàn)通過研究不同脅迫濃度Cr6+對(duì)普通小球藻的藻密度、葉綠素、氧化應(yīng)激、多糖和重金屬吸附率等指標(biāo)的影響，來探究Cr6+對(duì)普通小球藻的毒性效應(yīng)機(jī)制，以期評(píng)估和預(yù)測重金屬Cr6+污染對(duì)水生生物的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)，為Cr6+對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

受試藻種：普通小球藻(Chlorellavulgaris)購自中科院水生生物研究所淡水藻種庫，編號(hào)為FACHB-2338。

試劑：重鉻酸鉀(K2Cr2O7)購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；其它試劑均為分析純。

1.2 藻種擴(kuò)培

普通小球藻采用改良后的BG11培養(yǎng)基(表1)培養(yǎng)，由于EDTA會(huì)和重金屬離子結(jié)合影響毒性效應(yīng)，在培養(yǎng)時(shí)將EDTA從培養(yǎng)基移除，將pH調(diào)至7.1，滅菌(121 ℃，30 min)，接種時(shí)需在無菌條件下轉(zhuǎn)接，于恒溫光照培養(yǎng)箱(GZX-250BSH-Ⅲ，中國上海新苗醫(yī)療器械制造公司)靜置培養(yǎng)，溫度為25 ℃，光照4 000～6 000 lux，光暗比為12 h∶12 h，每日定時(shí)人工搖勻3次。

表1 BG11培養(yǎng)基Tab.1 BG11(Blue-Green)Medium

1.3 六價(jià)鉻對(duì)普通小球藻的毒性效應(yīng)

將適量重鉻酸鉀(K2Cr2O7)溶于蒸餾水中配制成Cr6+離子的母液。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置Cr6+濃度為0(即CK)、0.1、0.75、1.5、2.25和3 mg/L，設(shè)三組平行。選取處在對(duì)數(shù)生長期的普通小球藻藻液，離心(3 000 r/min，15 min)，蒸餾水重懸再次離心三次收集藻細(xì)胞。在無菌條件下加入BG11和不同濃度的Cr6+進(jìn)行脅迫處理。初始藻密度為1×106(初始OD680 nm=0.087)，溶液總體積200 mL，實(shí)驗(yàn)周期為96 h。

1.4 藻細(xì)胞密度的測定

將藻液搖勻后采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)藻細(xì)胞，并在OD680 nm測吸光度值，隨后繪制不同藻細(xì)胞密度和吸光度值的標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=18.986x-0.7991，R2=0.9994)。每24 h測定對(duì)照組和各脅迫組藻液的OD680 nm，生物量根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的藻密度來表示。

1.5 IC50的計(jì)算

于96 h測定培養(yǎng)的普通小球藻生物量，分別計(jì)算脅迫組普通小球藻生物量相對(duì)于對(duì)照培養(yǎng)的抑制率，并建立脅迫濃度和抑制率的線性關(guān)系，以此得出96 h-IC50。

其中：I表示抑制率；OD對(duì)照值、OD測定值分別為對(duì)照組和測定處理組在680 nm處的吸光值。

1.6 葉綠素a(Chl-a)質(zhì)量濃度測定

各濃度組取5 mL藻液離心(3 000 r/min，15 min，4 ℃)后去上清液收集藻體，加入5 mL 95%的乙醇在75 ℃水浴3 min，再次離心(3 000 r/min，15 min，4 ℃)后測定665 nm和649 nm的吸光度值根據(jù)公式算出葉綠素含量[12]。

Chl-a(mg/L)=13.95A665 nm-6.88A649 nm

1.7 抗氧化酶活系統(tǒng)測定

各濃度組取100 mL藻液離心(3000 r/min，15 min，4 ℃)棄上清液，PBS重懸離心三次，將藻體放入冷凍干燥機(jī)(FD-1A-50，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)干燥12 h，加入0.5 mL PBS緩沖溶液和0.2 g氧化鋯珠(R=0.05 mm)，低溫條件在混合型球磨儀(MM400，弗爾德上海儀器設(shè)備有限公司)破碎，5 000 r/min，3 min，低溫離心取上清液進(jìn)行測定?？偪寡趸芰?T-AOC，A015-2-1)，總超氧化物歧化酶(T-SOD，A001-3-2)活性、丙二醛(MDA，A003-2-2)含量、谷胱甘肽(GSH，A006-2-1)含量、非蛋白巰基(NPT，A063-4-1)含量和蛋白(TP，A045-4-2)含量均用南京建成公司試劑盒進(jìn)行測定。植物螯合肽(PCs)含量=非蛋白巰基含量(NPT)-谷胱甘肽含量(GSH)[13]。

1.8 胞內(nèi)多糖測定

采用蒽酮-硫酸法，提前做好葡萄糖溶液標(biāo)曲。分別吸取5 mL藻液，80 ℃水浴加熱30 min，離心(3 000 r/min，15 min)后收集藻細(xì)胞，加入6 mL蒽酮試劑(立即搖勻)加完后在沸水浴80 ℃，15 min后取出流水冷卻，室溫靜置10 min，在625 nm處讀取其吸光度值。

1.9 活性氧自由基(ROS)和藻細(xì)胞膜通透性測定

ROS測定采用DCFH-DA(2，7-Dichlorofuorescin Diacetate)探針法，使用南京建成生公司試劑盒(E004-1-1)進(jìn)行測定。激發(fā)波長[(500±15)nm]，發(fā)射波長[(530±20)nm]。細(xì)胞通透性采用二乙酸熒光素(Fluorescein Diacetate，F(xiàn)DA)法測定[14]。使用全自動(dòng)酶標(biāo)儀(SENSE 425-301，芬蘭HIDEX公司)檢測。

1.10 普通小球藻對(duì)重金屬的吸附率

采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS，PerkinElmer)測量吸附后暴露液中的Cr6+濃度及空白對(duì)照組Cr6+重金屬濃度，采用下列公式求出吸附率P[15]。

其中：C0為初始時(shí)暴露液中Cr6+濃度(mg/L)，Ct為吸附后暴露液中Cr6+濃度(mg/L)。

1.11 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD，n=3)表示，采用GraphPad Prism 8.0進(jìn)行非線性曲線-最小二乘法回歸分析、普通單向方差分析和多重比較并作圖。處理組與對(duì)照組(CK)相比，P<0.05為顯著性差異，P<0.01為極顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻生物量的影響

不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻生長的影響如圖1所示，CK為空白對(duì)照組即0 mg/L處理組。隨暴露時(shí)間的延長和濃度的增加，抑制率逐漸增強(qiáng)。普通小球藻在96h時(shí)生長抑制最嚴(yán)重，0.1、0.75、1.5、2.25和3 mg/L濃度組抑制率分別達(dá)到了9.15%、28.03%、42.96%、53.10%、57.32%。通過非線性曲線-最小二乘法進(jìn)行擬合得到擬合效應(yīng)曲線，Cr6+對(duì)普通小球藻96 h-IC50為2.067 mg/L。

圖1 Cr6+對(duì)普通小球藻生長的影響及96 h抑制率曲線擬合Fig.1 Effects of Cr6+on the growth of C.vulgaris and 96 h in hibitionrate curve fitting

2.2 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻葉綠素a含量的影響

由圖2可知，暴露96 h時(shí)隨著Cr6+濃度的增加葉綠素a受到的抑制作用也逐漸增強(qiáng)，0.1 mg/L濃度組葉綠素為0.95 mg/L，與對(duì)照組相比顯著下降了25.46%，其他各濃度組葉綠素分別為0.78、0.69、0.37和0.34 mg/L，與對(duì)照組相比分別下降了39.33%、45.75%、71.03%和73.40%。

圖2 Cr6+對(duì)普通小球藻葉綠素a含量的影響Fig.2 Effects of Cr6+on chlorophyll a content of C.vulgaris

2.3 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻胞內(nèi)多糖及蛋白質(zhì)(TP)濃度的影響

隨著Cr6+脅迫濃度的升高，普通小球藻細(xì)胞中多糖和TP的濃度均呈下降趨勢。如圖3所示，0.1～1.5 mg/L處理組胞內(nèi)多糖及TP濃度均無顯著性影響，但是2.25 mg/L和3 mg/L處理組多糖和TP的質(zhì)量濃度與對(duì)照組相比均顯著下降，胞內(nèi)多糖含量分別為0.219 mg/L和0.213 mg/L，降低了15.08%和17.28%；TP含量降低了60%和76.92%。

圖3 Cr6+對(duì)普通小球藻胞內(nèi)多糖和蛋白含量的影響Fig.3 Effects of Cr6+ on intracellular polysaccharide and TP contents of C.vulgaris

2.4 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻ROS和MDA含量的影響

由圖4可知，Cr6+脅迫誘導(dǎo)普通小球藻體內(nèi)ROS的產(chǎn)生及積累且隨著脅迫的加強(qiáng)誘導(dǎo)作用增加。0.1～2.25 mg/L處理組與對(duì)照組相比，ROS無顯著性變化；3 mg/L濃度組ROS水平為對(duì)照組的6.0倍。并且MDA含量變化與ROS呈相同趨勢，3 mg/L處理組MDA含量為對(duì)照組的4.7倍。

圖4 Cr6+對(duì)普通小球藻ROS和MDA含量的影響Fig.4 Effects of Cr6+ on ROS and MDA contents of C.vulgaris

2.5 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻膜通透性的影響

如圖5所示，不同濃度的Cr6+處理后，單個(gè)藻細(xì)胞通透性水平隨著Cr6+濃度的增加呈上升趨勢，0.1～1.5 mg/L與對(duì)照組相比無顯著差異，2.25和3 mg/L處理組通透性顯著增加，分別為對(duì)照組的1.77和1.79倍。

圖5 Cr6+對(duì)普通小球藻膜通透性的影響Fig. Effects of Cr6+ on membrane permeability of C.vulgaris

2.6 不同濃度Cr6+脅迫對(duì)普通小球藻抗氧化系統(tǒng)的影響

Cr6+脅迫處理96 h后，T-AOC、T-SOD、GSH和PCs活性變化如圖6所示。T-AOC和T-SOD活性除1.5 mg/L濃度組略微下降外，其他濃度組大體上均表現(xiàn)為上升的趨勢。T-AOC和T-SOD活性在0.1～2.25 mg/L處理組與對(duì)照組相比無顯著性差異，3 mg/L處理組差異顯著，分別為對(duì)照組的2.89倍和3.4倍。

圖6 Cr6+脅迫對(duì)普通小球藻T-AOC、T-SOD、PCs和GSH含量的影響Fig.6 Effects of Cr6+ on the contents of T-AOC，T-SOD，PCs and GSH in C.vulgaris

隨著脅迫濃度的升高，普通小球藻藻細(xì)胞內(nèi)的GSH和PCs量均高于對(duì)照組。當(dāng)2.25 mg/L暴露時(shí)，PCs含量顯著高于對(duì)照組，相較于對(duì)照組上升了4倍。在最高脅迫濃度3 mg/L時(shí)，PCs和GSH含量達(dá)到最大值，為對(duì)照組的6.37倍和2.35倍。

2.7 普通小球藻對(duì)不同濃度Cr6+吸附效率的影響

不同濃度Cr6+暴露96 h后對(duì)普通小球藻吸附效率的影響如表2和圖7所示，在不同濃度的Cr6+處理下藻細(xì)胞體內(nèi)均富集了一定濃度的Cr6+。其中0.1 mg/L處理組暴露液Cr6+含量為(0.024±0.02)mg/L，Cr6+的吸附率最高，高達(dá)76.00%；3 mg/L處理組Cr6+的吸附率最低為21.40%。

圖7 普通小球藻對(duì)不同濃度Cr6+吸附率的影響Fig.7 Effects of different concentrations Cr6+ on the adsorption rate of C.vulgaris

表2 測定暴露液濃度Tab.2 The concentration of the exposed solution was determined

3 討論

3.1 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻生長的影響

研究發(fā)現(xiàn)Cr6+對(duì)普通小球藻的生長表現(xiàn)出明顯的抑制作用，本實(shí)驗(yàn)Cr6+對(duì)普通小球藻96 h-IC50為2.067 mg/L，魏群等[16]研究發(fā)現(xiàn)蛋白核小球藻(C.pyrenoidosa)在Cr6+濃度為5.66 mg/L時(shí)生長開始受到抑制；當(dāng)Cr6+濃度大于2.08 mg/L時(shí)，萊茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)的藻密度才開始下降[17]。此次實(shí)驗(yàn)中普通小球藻在Cr6+最低濃度0.1 mg/L時(shí)便受到抑制，并且與上述研究相比普通小球藻對(duì)Cr6+更為敏感，抑制了普通小球藻藻細(xì)胞的生長和葉綠素a的合成。在Cr6+毒性實(shí)驗(yàn)的研究中，發(fā)現(xiàn)，Cr6+對(duì)水綿(Spirogyracommunis)生長及光合活性均有抑制作用，且高濃度抑制作用更明顯[18]。李印霞等[19]發(fā)現(xiàn)Cr6+質(zhì)量濃度越大，銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa)藻細(xì)胞數(shù)量明顯降低，葉綠素a也受到抑制，兩者均呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)中普通小球藻的生長與葉綠素的變化與前人研究結(jié)果一致。

3.2 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻胞內(nèi)多糖及蛋白質(zhì)含量的影響

普通小球藻細(xì)胞含有豐富的藻多糖和TP。已有研究發(fā)現(xiàn)，小球藻多糖具有抗氧化和免疫抗病毒[20]等功能。低濃度組小球藻多糖相比對(duì)照組無顯著性差異，但隨著Cr6+濃度的增加，2.25 mg/L和3 mg/L濃度組多糖含量均顯著降低，此現(xiàn)象與葸玉琴等[21]研究一致。另外郭宏實(shí)等[22]在研究銅(Cu)脅迫杜氏鹽藻(Dunaliellasalina)時(shí)也發(fā)現(xiàn)Cu會(huì)抑制光合色素、蛋白和多糖的合成。表明藻細(xì)胞在受到脅迫時(shí)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能遭到破壞，使得內(nèi)容物外流影響了多糖的合成，所以導(dǎo)致多糖含量明顯降低。

普通小球藻細(xì)胞具有豐富的TP，受到脅迫時(shí)機(jī)體受損傷嚴(yán)重，藻細(xì)胞生長受抑制，細(xì)胞內(nèi)活性物質(zhì)減少，TP合成途徑受到影響。其TP含量與可溶性多糖含量趨勢呈一致性，均是2.25 mg/L和3 mg/L濃度組與對(duì)照組相比差異顯著。孫正等[23]發(fā)現(xiàn)隨著Cr6+濃度的增加杜氏鹽藻(Dunaliellasalina)密度、光合色素和TP含量持續(xù)降低。這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本一致。

3.3 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻ROS、MDA含量和細(xì)胞膜通透性的影響

活性氧(ROS)作為信號(hào)分子是植物正常生長的代謝產(chǎn)物，也是有氧代謝的有毒副產(chǎn)物[24]，其含量的不正常增加意味著機(jī)體抗氧化水平已被打破。通過本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Cr6+誘導(dǎo)藻細(xì)胞體內(nèi)ROS的產(chǎn)生及積累，低濃度組與對(duì)照組相比無顯著性差異，表明細(xì)胞受到刺激后，自身能夠激活一些抗氧化酶來清除一部分活性氧自由基；3 mg/L濃度組ROS水平為對(duì)照組的6倍，表明此時(shí)藻細(xì)胞自身合成的抗氧化酶達(dá)上限后無法完全清除全部的ROS，導(dǎo)致氧化損傷加劇。WEI等[25]發(fā)現(xiàn)Cr6+誘導(dǎo)萊茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)時(shí)光合活性降低，ROS和MDA含量顯著增加。還有在研究汞(Hg)的毒性實(shí)驗(yàn)中，汞暴露也引起ROS的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致藻細(xì)胞的減少[26]。

MDA含量的多少表示膜脂過氧化和膜受損傷的程度[27]，本實(shí)驗(yàn)中MDA含量和細(xì)胞膜通透性呈上升趨勢，最高濃度組3 mg/L MDA含量為對(duì)照組的4.7倍，2.25 mg/L和3 mg/L處理組通透性分別為對(duì)照組的1.77和1.79倍。在逆境脅迫下，藻細(xì)胞內(nèi)氧自由基含量增加導(dǎo)致膜脂過氧化進(jìn)而阻礙藻細(xì)胞膜的合成[28]，使膜的流動(dòng)性降低，通透性增大進(jìn)而抑制生長。楊國遠(yuǎn)等[29]研究表示，斜生柵藻(Scenedesmusobliquus)在Cr6+的脅迫下MDA含量均高于對(duì)照組，T-AOC和T-SOD活性升高，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈一致性。

3.4 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻抗氧化能力的影響

重金屬脅迫誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生大量的ROS，藻細(xì)胞通過提高多種抗氧化酶活性減輕氧化損傷保護(hù)機(jī)體。T-AOC是由抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶組成的機(jī)體總抗氧化水平，決定著機(jī)體清除氧自由基的能力強(qiáng)弱。在本實(shí)驗(yàn)中，Cr6+脅迫使得藻細(xì)胞T-AOC和T-SOD活性升高，和MDA含量的變化相似，在高濃度組3 mg/L與對(duì)照組相比差異顯著，結(jié)果表明受脅迫時(shí)最高濃度組與其他組相比產(chǎn)生了更多的ROS，導(dǎo)致了機(jī)體更顯著的氧化應(yīng)激。Zn2+處理下米氏凱倫藻(Kareniamikimotoi)的T-AOC、SOD和MDA含量均高于對(duì)照組[30]。鄧祥元等[31]研究Hg脅迫蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidosa)時(shí)，抑制了藻細(xì)胞生長和可溶性糖的合成，ROS、MDA和SOD活力顯著增加。綜合分析得出，藻細(xì)胞能及時(shí)調(diào)節(jié)抗氧化酶的活性來維持機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的平衡，減少損傷。

3.5 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻GSH和PCs含量的影響

在應(yīng)對(duì)重金屬脅迫時(shí)還會(huì)在細(xì)胞內(nèi)合成巰基化合物和抗氧化酶共同抵御毒害，其中GSH和PCs為主要螯合肽，其濃度的大小決定了解毒作用的強(qiáng)弱。PCs是以GSH為底物的在植物螯合肽合成酶(PCS)的催化下合成的產(chǎn)物[32]。本研究發(fā)現(xiàn)Cr6+脅迫誘導(dǎo)PCs大量合成的同時(shí)，也刺激了普通小球藻體內(nèi)GSH含量的增加，在3 mg/L濃度組高達(dá)72.32 μmol/gprot，與對(duì)照組相比差異顯著。表明在Cr6+脅迫下，普通小球藻合成大量巰基化合物來螯合重金屬，降低對(duì)機(jī)體的損害，從而提高普通小球藻對(duì)Cr6+的自我修復(fù)和調(diào)節(jié)能力。并且在整個(gè)脅迫期間，GSH的含量增長幅度較緩，這可能是GSH既是細(xì)胞內(nèi)的抗氧化劑又是PCs合成的底物的原因。劉媛等[33]研究在Cd脅迫下植物的葉片和根系中的巰基肽總量均顯著高于對(duì)照組，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

3.6 不同濃度Cr6+對(duì)普通小球藻吸附率的影響

已有研究表明藻類具有高金屬結(jié)合能力，藻細(xì)胞表面含有化學(xué)基團(tuán)如羧基、羥基、氨基和硫酸鹽作為金屬的結(jié)合位點(diǎn)[34]。通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)普通小球藻對(duì)Cr6+有一定的吸附效果，可用于工業(yè)廢水的處理。0.1 mg/L處理組吸附率最高，推測是因?yàn)樵寮?xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期時(shí)，藻細(xì)胞增殖產(chǎn)生新細(xì)胞使得大量基團(tuán)對(duì)重金屬離子進(jìn)行物理吸附，因而吸附率達(dá)76%；而在高濃度Cr6+環(huán)境條件下，普通小球藻細(xì)胞膜受損傷嚴(yán)重，TP和多糖含量降低，用來和重金屬結(jié)合的化學(xué)基團(tuán)受到影響，進(jìn)而影響藻細(xì)胞對(duì)Cr6+的吸附，導(dǎo)致吸附率下降。這種情況與劉冬梅等[15]研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明普通小球藻在重金屬Cr6+的脅迫下，0.1 mg/L時(shí)藻細(xì)胞生長便會(huì)受到抑制。隨著重金屬離子濃度的增加，藻細(xì)胞生物量、Chl-a含量、TP和胞內(nèi)多糖含量下降；ROS和MDA含量上升，膜脂過氧化導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性的增強(qiáng)。為應(yīng)對(duì)重金屬脅迫造成的氧化應(yīng)激，T-AOC、T-SOD、GSH和PCs以活性升高的方式來抵御重金屬離子的毒害，但超過一定范圍其耐受性就會(huì)減弱。另外研究表明普通小球藻能夠富集一定的重金屬離子，這為普通小球藻應(yīng)用于工業(yè)化污水處理提供一定的理論參考。

但是在自然水體生態(tài)環(huán)境中污染物并不是單一存在的，而是會(huì)與其他污染物相結(jié)合產(chǎn)生復(fù)合污染。因此，還需進(jìn)一步深入研究重金屬和其他污染物復(fù)合對(duì)水生生物的毒性效應(yīng)和耐受性，為水環(huán)境污染生態(tài)毒理提供科學(xué)依據(jù)。