冶海珍

大腸桿菌病是威脅犢牛健康的一種重要疾病，其主要特征為敗血癥、腸炎和腦膜炎癥等。該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行，給養(yǎng)牛業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟(jì)損失。該病嚴(yán)重影響犢牛生長和健康發(fā)育，甚至?xí)?dǎo)致死亡。因此，對(duì)于犢牛大腸桿菌病進(jìn)行有效地預(yù)防和控制具有非常重要的意義。本文青海省海北州門源回族自治縣為例，對(duì)犢牛大腸桿菌診斷與防治展開分析，以供參考。

一、背景信息

通過對(duì)青海省某縣12 例犢牛大腸桿菌腹瀉藥敏試驗(yàn)的研究，我們發(fā)現(xiàn)該病毒主要存在于一家大型畜牧場。該病毒的潛伏期從2020 年11 月到2021 年2 月，一些牛沒有明顯的癥狀，但在24 小時(shí)之內(nèi)就會(huì)突然死亡。另一些患有慢性疾病的?？赡軙?huì)出現(xiàn)體溫升高、腹瀉、無法站立、情緒低落等情況，并且會(huì)排出黃色的稀糊狀糞便。這種疾病通常伴隨著酸性氣體，導(dǎo)致動(dòng)物經(jīng)歷昏迷。如果養(yǎng)殖戶沒有采取措施防止它傳播給其它動(dòng)物，它的傳播可能會(huì)變得更快。

二、實(shí)驗(yàn)室診斷

為了確保畜牧業(yè)的安全，養(yǎng)殖場的管理人員特意邀請(qǐng)了當(dāng)?shù)氐膭?dòng)物防疫檢疫專家，他們對(duì)養(yǎng)殖場進(jìn)行了徹底的檢查。在一個(gè)完全沒有污染的環(huán)境中，采用麥康凱瓊脂平板+TSA 平板，接種了死去的牛的肺部和肝臟，然后通過48h 的細(xì)菌分離培養(yǎng)，最終發(fā)現(xiàn)了玫紅色菌落和半透明菌落。隨后，他們把這些菌落放到伊紅美藍(lán)平板上，通過接種，菌落變成了紫黑色。最后，他們從這些菌落中篩選出一些有益的菌落，用于改善畜牧業(yè)的健康狀況。通過革蘭氏染色技術(shù)，我們可以準(zhǔn)確地鑒別出這種菌株的真實(shí)性。結(jié)果顯示，這種菌株的兩端呈鈍圓，而且其長度都低于3.0μm，沒有發(fā)現(xiàn)任何芽孢。經(jīng)過葡萄糖糖發(fā)酵、吲哚試驗(yàn)和甲基紅試驗(yàn)，均表明該菌株具有明顯的陽性反應(yīng)，與大腸桿菌的病理學(xué)特征相一致。

三、病原特征

犢牛大腸桿菌病是急性傳染病，其病原體是致病性大腸桿菌（Escherichia coli)。該菌對(duì)外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，一般常用消毒藥就能將其殺死。但如果犢牛免疫力低下或受到其他因素感染，則容易發(fā)生本病。大腸桿菌在自然界中廣泛存在，犢牛出生不久后即可從母體內(nèi)獲得一定量的抗體，可以抵御外界細(xì)菌的侵襲。然而，當(dāng)犢牛離開母體后，由于生活環(huán)境變化較大，加上飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)仍?，很容易被大腸桿菌侵入而引發(fā)發(fā)病。大腸桿菌會(huì)隨牛乳經(jīng)消化道達(dá)到腸道，成為腸道中的常在菌群。此外，犢牛還可能通過呼吸道、臍帶和受傷皮膚等途徑感染大腸桿菌。犢牛大腸桿菌病多發(fā)生在寒冷季節(jié)和氣候多變時(shí)節(jié)，如冬季氣溫驟降易引起感冒，此時(shí)也是犢牛患病率最高的時(shí)候。

該病多見于14 日齡以下初生犢牛，尤其是3～6 個(gè)月齡的犢牛最易感。大腸桿菌格蘭仕陰性染色，兩端鈍圓，單個(gè)排列成短鏈狀。革蘭氏染色呈陽性，無芽孢、無莢膜。在動(dòng)物腸道內(nèi)能生存，正常狀態(tài)下不產(chǎn)生毒素。但在某些情況下，如營養(yǎng)不良、過度疲勞、天氣突變及繼發(fā)感染等都能促使其大量繁殖并釋放出毒素，造成機(jī)體損害。與不致病的大腸埃希氏菌相比，致病性大腸桿菌更加耐熱，且對(duì)多種抗菌藥物敏感。目前已發(fā)現(xiàn)有多種血清型的大腸桿菌，其中O78、K99 和H52 這三種血清型較為常見。不同地區(qū)、不同年齡、不同性別以及不同品種的犢牛均有感染發(fā)病的報(bào)道。

另外，環(huán)境、氣候等突然變化會(huì)導(dǎo)致犢牛免疫力下降，從而出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而誘發(fā)本病。某些傳染病、寄生蟲病危害也會(huì)促進(jìn)本病的傳播擴(kuò)散。例如牛結(jié)核病、布魯氏菌病、沙門氏菌病等都能夠引起犢牛腹瀉，增加犢牛大腸桿菌病的感染機(jī)會(huì)。另外，犢牛大腸桿菌病不僅與其他細(xì)菌性感染相關(guān)，同時(shí)還會(huì)受病毒感染的影響。

該病具有區(qū)域性或分散流行特點(diǎn)，常發(fā)于農(nóng)村散戶養(yǎng)殖場，規(guī)?；B(yǎng)殖場相對(duì)較少發(fā)生。主要通過消化系統(tǒng)傳播，即吃進(jìn)去含有病原體的食物而感染發(fā)病。犢牛因吮吸母乳或飲水時(shí)誤食感染源污染的飼料、水源等而引起發(fā)病。

四、臨床癥狀

犢牛出生7 天起開始發(fā)病，體溫上升至40℃以上，食欲廢絕，精神沉郁，不愿走動(dòng)，呼吸急促，心跳加快，腹痛不安，頻繁排尿，顏色變淺或灰白色，有時(shí)帶有血液。聽診心音亢進(jìn)，肝區(qū)叩擊濁音明顯，嚴(yán)重脫水，體重迅速減輕。

1、腹瀉

早期為黃斑狀大便，后期排稀薄水樣便，混有黏液和氣泡，惡臭難聞。肛門周圍粘著未消化的凝乳塊和糞污。病程長的犢牛會(huì)出現(xiàn)消瘦、貧血等全身癥狀。犢牛腹部疼痛，大便不暢，排便次數(shù)增多，甚至脫肛。體溫不穩(wěn)定，波動(dòng)在39℃左右。

2、敗血癥

犢牛感染后發(fā)熱，食欲減退，不吃乳制品，精神委頓，口渴喜喝涼水，眼結(jié)膜充血紅腫，呼吸困難，咳嗽，流涕，鼻腔分泌物增多，四肢關(guān)節(jié)腫大，站立不穩(wěn)，步態(tài)蹣跚，可視黏膜發(fā)紺，嚴(yán)重時(shí)昏迷抽搐，病死犢牛尸體僵硬，皮下組織水腫，腹腔內(nèi)有積液，肝臟充血腫大，表面有出血斑點(diǎn)。切開腹腔可見血液凝固不良，內(nèi)臟器官呈紅色或暗紫色，通常在發(fā)病后1 天內(nèi)造成死亡。

3、腸毒血癥

腸毒血癥比較罕見，主要表現(xiàn)為劇烈腹瀉、嘔吐、脫水、神經(jīng)癥狀等。病程較長，可達(dá)數(shù)周或更久。犢牛日漸消瘦，體弱無力，行走搖晃，共濟(jì)失調(diào)，最終衰竭致死。

五、病理變化

解剖發(fā)現(xiàn)胃壁腫脹，飽含食物糜爛，內(nèi)容物呈灰黃色或白色泡沫狀，小腸段臌氣，腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大，切面濕潤，腎臟稍微腫脹，膀胱充盈，切開腎盂流出渾濁液體，心臟擴(kuò)張，氯唑沙宗軟，色澤淡白，肺臟淤血、水腫，氣管內(nèi)有少量黏液附著。肺臟深紅色，實(shí)質(zhì)性病變主要位于肺泡間質(zhì)和肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞附近，淋巴管炎和壞死灶很少見。一般腎包膜下有大量血跡；小腸中有大量黏液和脫落的上皮細(xì)胞；脾臟腫大，邊緣鈍圓，被膜緊張，切面油膩，實(shí)質(zhì)性梗死少見；腦軟化，腦膜充血，大腦皮質(zhì)層和軟腦膜有小出血點(diǎn)；喉頭水腫，有膿性滲出；胸膜肥厚，堅(jiān)實(shí)不透明，胸腔內(nèi)含有纖維素絮片。

六、常見的診斷方式

1、早期診治

用新鮮糞便制成接觸片，經(jīng)革蘭氏免疫學(xué)檢查，可檢出大腸桿菌。對(duì)疑似病例進(jìn)行分離培養(yǎng)鑒定，選擇適合本地區(qū)流行的優(yōu)勢菌株作藥敏試驗(yàn)，選取高效廣譜抗生素治療。根據(jù)發(fā)病情況、發(fā)病日齡、臨床癥狀及剖檢變化可以做出初步判斷，確診需要進(jìn)一步采集病料進(jìn)行病理學(xué)檢查。對(duì)分離菌株進(jìn)行血清學(xué)類型鑒別，可以做出診斷并指導(dǎo)用藥。常用的ELISA 法、PCR 法、酶聯(lián)免疫吸附測定等都可用于檢測抗體水平。ELISA 法是指將特異性抗原與已知的標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)合生成復(fù)合物，經(jīng)過一定時(shí)間后加入底物再顯色，通過測量吸光值來確定樣品中特定抗體水平的一種方法。PCR 法是指利用DNA 聚合酶催化反應(yīng)擴(kuò)增目的基因，然后進(jìn)行測序分析以確定是否存在目的基因。這兩種方法操作簡單快速，靈敏度高，適用于大規(guī)模篩查。

2、細(xì)菌培養(yǎng)

將病料原體接種在血瓊脂平板上，會(huì)生長出圓形凸起的露珠狀菌落，直徑大小約2～8mm 不等。分離可疑菌用麥康凱培養(yǎng)液在37℃下培養(yǎng)24h，觀察有無溶血環(huán)產(chǎn)生。同時(shí)還要進(jìn)行生化試驗(yàn)、藥物敏感試驗(yàn)以及分子生物學(xué)鑒定。其中分子生物學(xué)鑒定具有高度特異性和敏感性，能夠準(zhǔn)確地鑒定病原微生物的種類和亞型。如將其置于伊紅美藍(lán)培液中，37℃培養(yǎng)24h 后可產(chǎn)生具有金屬光澤的細(xì)菌菌落，且該菌落周圍呈現(xiàn)藍(lán)色暈圈。同時(shí)，該菌落形態(tài)特征、生理生化特性均符合大腸桿菌的特點(diǎn)。因此，可采用該方法進(jìn)行快速鑒定。

3、生化測試

該菌能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麥芽糖等物質(zhì)，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，氧化酶陽性，不分解尿素，硫化氫酶陰性。MR 試驗(yàn)、吲哚噪試驗(yàn)、V-P 試驗(yàn)、賴氨酸脫梭酶和脲酵解試驗(yàn)等有助于區(qū)分不同的致病菌。MR 試驗(yàn)是指利用磁共振技術(shù)獲取活體內(nèi)水分子自由基信號(hào)強(qiáng)度分布圖像的一種非侵入性技術(shù)。當(dāng)待測樣本中存在目標(biāo)菌時(shí)，由于某些代謝產(chǎn)物的影響，會(huì)使得自由基信號(hào)強(qiáng)度發(fā)生改變，進(jìn)而反映到MR 圖譜中。吲哚噪試驗(yàn)是指利用吲哚酚類化合物產(chǎn)生的變色效應(yīng)來區(qū)別不同的細(xì)菌。該方法簡便易行，不需特殊設(shè)備，但受其他因素干擾較大。V-P 試驗(yàn)是指利用過氧化氫酶活性差異來區(qū)別不同的細(xì)菌。當(dāng)待測樣本中存在目標(biāo)菌時(shí)，由于某些代謝產(chǎn)物的作用，會(huì)降低過氧化氫酶的活性，從而導(dǎo)致V-P 試驗(yàn)值升高。賴氨酸脫羧酶是指能分解賴氨酸殘基的酶，它廣泛存在于哺乳動(dòng)物的腸道黏膜上皮細(xì)胞中，參與合成維生素B12 和膠原蛋白等重要成分。脲酵解試驗(yàn)是指利用脲酶分解尿素產(chǎn)生氨和二氧化碳，從而間接證明是否存在尿素循環(huán)。

七、治療方法

1、饑餓治療

饑餓可以減輕腸胃負(fù)荷，在8～12h 內(nèi)禁食，次日開始喂給適量溫?zé)犸嬎?，促進(jìn)瘤胃蠕動(dòng)，恢復(fù)胃腸功能。注意不可一次性攝入過量飼料，否則容易引起犢牛消化系統(tǒng)疾病。另外，也可選擇中藥制劑“復(fù)方黃連素”口服，每只犢牛每天0.1g/kg 體重，連服3 天。

2、抗菌消炎

使用鹽酸土霉素，第1 次口服使用劑量為30～50mg/kg·bw，以后逐漸增加至100～200mg/kg·bw，分3 次內(nèi)服，每日總劑量小于等于2000mg?；蛘咦⑸淝嗝顾剽c，按照每千克體重計(jì)算用量，肌注，隔天1 次，連續(xù)使用3d?；蚣∪庾⑸潲}酸土霉素注射液，每只犢牛每次用量為1mL/kg，每天1 次，連用3 天。

3、強(qiáng)化補(bǔ)液預(yù)防酸中毒

補(bǔ)液量取決于脫水的嚴(yán)重程度，原則上應(yīng)盡量補(bǔ)充機(jī)體所丟失的水份，防止出現(xiàn)低血容量性休克。如果患病犢牛有胃口或可自行飲水，可以服用補(bǔ)液鹽，每次使用量500mL，靜脈滴注，每天1 次，連用3 天。補(bǔ)液鹽是由氯化鈉、碳酸氫根離子、磷酸二氫鉀組成的復(fù)方電解質(zhì)溶液，可調(diào)節(jié)酸堿平衡，維持血液滲透壓穩(wěn)定，有效緩解脫水造成的組織器官損傷。如果不能自行吸奶，可以靜脈注入5%葡萄糖注射液，每次用量為500mL，每天1 次，連用3 天。葡萄糖是生物體內(nèi)能量代謝的基礎(chǔ)原料之一，不僅提供體能消耗，還是合成多種激素、神經(jīng)遞質(zhì)、肝糖原等的前體物質(zhì)。

4、調(diào)整胃腸道功能

使用貝那替秦5mL 可保護(hù)胃腸道黏膜屏障，增強(qiáng)腸黏膜血流供應(yīng)，抑制有害菌繁殖，促進(jìn)有益菌增殖，提高腸道免疫力?？诜樗峋苿?，每只犢牛每天1 袋，每袋含有雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，保持腸道健康狀態(tài)。還可以口服保護(hù)劑和吸著劑，由堿式硝酸鉍、硫代硫酸鈉、魚石脂等混合配制成散劑，灌服，每只犢牛每天100g，連用3 天。堿式硝酸鉍是一種白色晶體，可溶于水，遇熱釋放出氮氧化物氣體起消毒作用。

八、預(yù)防措施

1、注重養(yǎng)殖的科學(xué)化

為了確保犢牛獲得充足的營養(yǎng)，飼養(yǎng)管理者應(yīng)當(dāng)采取多種飼料的混合，并且精確控制飼喂量和飼喂速度，以避免過度饑餓和暴飲暴食，從而保證犢牛獲得足夠的蛋白質(zhì)、能量、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)，從而提高它們的健康水平。為了確保犢牛的健康，“自繁自養(yǎng)”原則必須得到嚴(yán)格遵守。在必要的情況下，應(yīng)盡量避免從外地引進(jìn)犢牛，而如果必須引進(jìn)，應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格執(zhí)行檢疫制度，并且嚴(yán)厲打擊任何可能引入傳染性疾病的犢牛。為了保證動(dòng)物的健康和安全，必須加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。定期清潔圈舍和設(shè)施設(shè)備，保持清潔衛(wèi)生，確保通風(fēng)干燥，溫度濕度適宜。飼喂時(shí)應(yīng)定時(shí)定量，嚴(yán)禁飲用冷水和食用變質(zhì)的食物。在夏季炎熱的天氣里，必須采取有效措施來抵抗酷熱。在冬季寒冷的氣候中，更要注重保暖和抵抗寒冷。為了滿足犢牛瘤胃微生物的營養(yǎng)需求，應(yīng)該增加對(duì)精飼料的攝入，如胡蘿卜、甜菜根、玉米面、麩皮等，這些食物富含纖維素，可以刺激反芻動(dòng)物的咀嚼運(yùn)動(dòng)，促進(jìn)食欲，提高消化系統(tǒng)的功能。為了確保動(dòng)物的健康，建議每天提供充足的優(yōu)質(zhì)飼料，以促進(jìn)其生長發(fā)育。重量在0.3kg 到0.5kg 到0.3kg 到0.5kg 之間，優(yōu)質(zhì)干草重量在2kg 到3kg 之間，新鮮的瓜果類蔬菜重量在2kg 到3kg 之間，豆餅重量在1kg 到2kg 之間，骨粉重量在1kg 到2kg 之間，食鹽重量在0.5kg 到2kg 之間，液狀石蠟重量在1kg 到2kg 之間，預(yù)混料重量在0.5kg～1kg 到1kg 之間，并讓它們?cè)谒壑凶杂商蚴场?/p>

2、強(qiáng)化疫苗免疫接種

疫苗的使用對(duì)于抵御疾病的發(fā)生和蔓延起著不可或缺的作用。目前，我們廣泛使用的疫苗包括三聯(lián)四聯(lián)疫苗、口蹄疫滅活疫苗、輪狀病毒疫苗和小型反芻動(dòng)物疫苗。尤其值得一提的是，三聯(lián)四聯(lián)疫苗已成為大多數(shù)養(yǎng)殖場的首選，因?yàn)樗粌H能夠有效地抵御疾病，而且還能夠?yàn)轲B(yǎng)殖者帶來更多的健康保障。為了獲得最佳的抗病毒能力，我們強(qiáng)烈建議采用多種有效的抗病毒措施，以盡快獲得最佳的抗病毒療效。比如，為了獲得最佳的抗體水平，建議在春季和秋季的第18d 至第29d 期間接受免疫，這樣不僅能夠減少由于應(yīng)激反應(yīng)引起的傷害，還能夠確保免疫的有效性。為了確保接受免疫的安全，需要對(duì)接受免疫的器械、針頭及注射器等進(jìn)行嚴(yán)格的清潔消毒。

3、做好日常保健工作

除了上述措施之外，還需要通過日常保健來維護(hù)犢牛的健康狀況。具體來說，應(yīng)當(dāng)做好以下幾方面的工作：一是定期檢查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常癥狀，及早隔離治療；例如，觀察精神狀態(tài)、食欲、糞便形態(tài)、呼吸頻率、體溫變化等指標(biāo)，一旦發(fā)現(xiàn)異常，立即報(bào)告獸醫(yī)部門進(jìn)行處理；二是精心護(hù)理，供給舒適的生活環(huán)境，保證飲水和飼料的質(zhì)量，適當(dāng)添加一些輔助藥物，如VC、多維元素片等，增強(qiáng)抵抗力；三是定期驅(qū)蟲，防止寄生蟲感染；四是定期檢測血清學(xué)指標(biāo)，監(jiān)測免疫效果，及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免；五是適時(shí)配種，避免近親交配，減少遺傳缺陷。例如，對(duì)于初產(chǎn)母牛，應(yīng)該在產(chǎn)后6 個(gè)月以上再考慮受孕；六是妥善處置病死牛只，做到無害化處理。例如，深埋或焚燒，不得隨意拋棄或銷售給不相關(guān)的人員或單位。

綜上所述，犢牛大腸桿菌病是當(dāng)前危害我國奶牛業(yè)發(fā)展的主要疾病之一。針對(duì)這一疾病，我們應(yīng)該制定相應(yīng)的綜合防控措施，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，重視疫苗免疫接種，做好日常保健工作，以期最大限度地保障畜牧業(yè)生產(chǎn)效益和公共衛(wèi)生安全。不過，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和研究深入，相信未來會(huì)有更多新技術(shù)和新手段應(yīng)用于犢牛大腸桿菌病的防治工作中，這將有助于進(jìn)一步提高其防治效果，推動(dòng)我國現(xiàn)代畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。