李 艷

羊常見寄生蟲病包含類型較多而且比較復(fù)雜，這不僅對(duì)羊的生長(zhǎng)發(fā)育和生產(chǎn)性能產(chǎn)生不良影響，還會(huì)嚴(yán)重危害人體健康。因此，加強(qiáng)對(duì)羊常見寄生蟲病的防治具有重要意義。不過在實(shí)際工作中，由于各種原因?qū)е乱恍┑貐^(qū)或養(yǎng)殖場(chǎng)的羊群感染了寄生蟲病而沒有得到及時(shí)有效的診治，給養(yǎng)羊業(yè)造成了不小的經(jīng)濟(jì)損失。本文以青海省海北州門源回族自治縣為例，對(duì)羊常見寄生蟲病展開診斷，并提出相應(yīng)的治療措施。

一、材料與方法

1、試驗(yàn)材料

①調(diào)查對(duì)象

為了更好地了解當(dāng)前的養(yǎng)殖狀況，我們?cè)?018 年1 月到2019 年12 月期間，對(duì)一年內(nèi)沒有接受過驅(qū)蟲治療的30 只羊，以及其他60 只羊，分別進(jìn)行了編號(hào)標(biāo)記。此外，我們還在每月的10 日到15 日期間，通過直腸釆糞和靜脈采血的方法，對(duì)蟲卵的數(shù)量進(jìn)行了動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，并對(duì)其進(jìn)行了血清抗體檢測(cè)。

②試驗(yàn)器材

這些工具包括：玻璃容器、濾紙、滴管、離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、燒杯、培養(yǎng)皿、小木棍、銅篩或多層紗布、蟲卵計(jì)數(shù)儀、解剖刀、搪瓷盤、鑷子、手術(shù)剪、平皿和挑蟲針。

2、調(diào)查方法

①糞便檢查

在每個(gè)月的早晨，我們會(huì)收集羊的新鮮糞便，并將其標(biāo)記在紙上，然后運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。我們會(huì)使用沉淀法、飽和鹽水漂浮法、毛蚴孵化法和貝爾曼氏法來評(píng)估它們的健康狀況，并根據(jù)這些結(jié)果來決定評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。

將10g 的糞便樣本放入一個(gè)容器，加入適量的水，攪拌均勻，將容器的水加到10～20 倍，在室溫下靜置20min，然后將上層的清液傾掉，重復(fù)這一步驟，直到上層的清液變得透明，最后將一定數(shù)量的沉淀物滴在顯微鏡下，以檢測(cè)比重超過水的蟲卵。

將10g 的糞便樣本放入燒杯中，加入10～20 倍的飽和鹽水，混合均勻，然后把混合液過濾到漂浮瓶中，使其略微超出瓶口，然后把載玻片放在瓶口，確保沒有任何氣泡，在室溫下靜置20min，最后快速把載玻片拿起來，翻轉(zhuǎn)，以此來檢測(cè)比重超過飽和鹽水的蟲卵。

從糞便樣本中取出10g，放入燒杯中，按照上述沉淀方式，將其混合，然后倒入孵化瓶，再用30℃的溫水加到瓶頸處，放置在25～28℃的環(huán)境中，讓其受到充足的光照，每隔1h、3h、5h，對(duì)孵化過程的結(jié)果進(jìn)行觀察，為了更好地觀察，應(yīng)當(dāng)使用黑色背景，并朝著光源，檢查1cm 水域內(nèi)是否存在快速直線移動(dòng)的小白點(diǎn)（如針尖大小、菱形、乳白色或半透明）。通過這種方法，我們可以發(fā)現(xiàn)許多寄生蟲，如血吸蟲和毛蚴。使用乳膠管將漏斗和試管相連，在漏斗內(nèi)放置糞篩，然后將其懸掛在架子上，再倒入40℃的溫水，直到達(dá)到中心，然后把被檢測(cè)的糞樣放置1～3 小時(shí)，使得大多數(shù)的幼蟲能夠移動(dòng)到試管的底部，最后把試管的上層液體抽走，取出管底的沉淀物，進(jìn)行顯微鏡檢查，最終從糞便中分離出幼蟲。

②體外檢查法

采用綜合的臨床表現(xiàn)、觸覺感受以及局部顯微鏡檢查，我們可以有效地檢測(cè)出羊只身上的寄生蟲，如螨、蠅蛆等。

③剖檢法

對(duì)待剖羊只進(jìn)行詳細(xì)的編號(hào)，并對(duì)它們的全身進(jìn)行蠕蟲學(xué)剖檢，以確定每個(gè)器官內(nèi)的蟲體和數(shù)量，然后將樣本浸泡在75%的酒精溶液中，對(duì)吸蟲和絳蟲進(jìn)行染色，對(duì)其他的則采用正確的方式處理，最終對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

④血清學(xué)檢測(cè)

每月，我們都會(huì)使用Dot-ELISA 三聯(lián)診斷試劑盒（羊肝片吸蟲、東畢吸蟲和捻轉(zhuǎn)血矛線蟲）對(duì)每只羊進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，以確保它們的健康狀況。

二、結(jié)果與分析

羊的寄生蟲種類繁多，包括體內(nèi)寄生蟲、體外寄生蟲以及絳蟲34 種，其中以牦牛莫尼茨絳蟲、仰口裂頭蚴、班氏絲蟲三種為常見種類，而且還可能出現(xiàn)其他種類的寄生蟲，如捻轉(zhuǎn)血矛線蟲、細(xì)頸囊尾蚴等。羊的健康受到了寄生蟲的嚴(yán)重威脅，它們會(huì)侵入人體的腸道，造成腹瀉和消化不良，并且會(huì)影響它們的攝食量和飼料的使用效率。此外，它們還會(huì)侵入人體的肌肉組織，造成貧血、消瘦甚至死亡。寄生蟲病在當(dāng)?shù)匮虻娘曫B(yǎng)管理水平相對(duì)落后，加上當(dāng)?shù)剞r(nóng)牧民群眾缺乏科學(xué)知識(shí)和技術(shù)指導(dǎo)，使得寄生蟲病在當(dāng)?shù)匮虻膫鞑ヂ痈友杆?，從而?dǎo)致肝炎、肝硬化等癥狀的發(fā)生。因此，加強(qiáng)對(duì)該地區(qū)羊寄生蟲病的監(jiān)測(cè)和預(yù)防工作至關(guān)重要，以確保羊群健康。

三、羊寄生蟲病的診斷

1、寄生蟲的PCR 檢測(cè)

PCR 檢測(cè)可以準(zhǔn)確地識(shí)別寄生蟲的種類和感染程度，操作簡(jiǎn)單方便，具有極高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。然而，它也存在一些局限性，比如無法直接從糞便中提取蟲卵，應(yīng)通過離心處理才能獲得更加純凈的蟲體。核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（ITS）具有極高的靈敏度和快速性，它不僅可以取代傳統(tǒng)的PCR，而且還可以用于定性分析蟲卵，從而提供更加準(zhǔn)確的結(jié)果。例如，通過利用hda、remax 和pcr 三種不同的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，如利用解旋酶、限制性內(nèi)切酶和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，能夠有效地檢測(cè)出蟲卵的存在。通過使用特定的酶，可以在特定的溫度條件下對(duì)待測(cè)樣品中的基因組進(jìn)行分析，并使用合適的引物和探針對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增，以實(shí)現(xiàn)研究目標(biāo)。

另外，高通量測(cè)序技術(shù)的快速發(fā)展也為寄生蟲的快速和高效檢測(cè)提供了新思路。目前，已經(jīng)有多種方法被應(yīng)用到寄生蟲的快速檢測(cè)上。其中包括：第一，通過使用特定的核酸提取試劑盒，可以從樣本中提取出基因組DNA。第二，通過巢式擴(kuò)增技術(shù)來獲得這些DNA。第三，通過實(shí)時(shí)熒光定量擴(kuò)增技術(shù)來獲得這些DNA。第四，通過多重?cái)U(kuò)增技術(shù)來獲得這些DNA。雖然這些方法各有其優(yōu)勢(shì)和不足，但它們都可以滿足寄生蟲檢測(cè)的需求。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，多通量測(cè)序（Multiplex Sequencing）已成為一種先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)，它的優(yōu)勢(shì)在于靈敏度極高、特異性極強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單易行，使其成為一種理想的病原體檢測(cè)手段?；贛LVA 技術(shù)，可以有效地利用16S、gyrB、rpoE 和ITS 序列作為擴(kuò)增位點(diǎn)，結(jié)合合理的引物配置和精確的反應(yīng)條件，提升了它們的特異性和靈敏度。

2、體液游離寄生蟲DNA 在診斷中的應(yīng)用

DNA 分子在人體內(nèi)可以通過血液、尿液或其他方式被檢測(cè)到，這些分子包括血型抗原、抗凝血因子、補(bǔ)體系統(tǒng)和免疫球蛋白。此外，人類和動(dòng)物的身體也可以檢測(cè)到一些寄生蟲的核酸，但這些數(shù)量非常有限。由于其高度的保守性，DNA 基因在診斷寄生蟲感染方面發(fā)揮著重要的作用，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種不同種類的寄生蟲，包括弓形蟲、隱孢子蟲、蛔蟲、鞭毛蟲、阿米巴原蟲等，這些基因都可以用來進(jìn)行檢測(cè)?！跋x源性”（parasitic）DNA是指從昆蟲的身上分泌出來的“蟲源性”DNA，它們是昆蟲的身體內(nèi)部的組成部分，經(jīng)過昆蟲的消化和吸收，最終形成的“內(nèi)源性”（endogenous）DNA 是昆蟲的身體內(nèi)部的組成部分。這項(xiàng)先進(jìn)的技術(shù)能夠迅速、精準(zhǔn)地識(shí)別出宿主體內(nèi)的寄生蟲，并且能夠根據(jù)患者的血液、血清、尿液等樣本，準(zhǔn)確評(píng)估宿主的感染情況，為臨床提供更加精準(zhǔn)的治療建議。這種先進(jìn)的技術(shù)擁有極強(qiáng)的特異性和靈敏性，可以準(zhǔn)確地檢測(cè)各種寄生蟲，如瘧原蟲、弓形蟲、蛔蟲，并且已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于臨床實(shí)踐和流行病學(xué)研究。

四、羊寄生蟲病治療方法

1、體內(nèi)寄生蟲病

在治療體內(nèi)寄生蟲時(shí)，首先需要確定病原體的種類，然后根據(jù)病原體的特性選擇合適的驅(qū)蟲藥物。常見的驅(qū)蟲藥物包括ABZ、LEM、IPM 和PYD，其中阿苯達(dá)唑的效果最佳。例如，鼻蠅蛆病可能會(huì)在鼻腔內(nèi)繁殖，因此可以使用阿苯達(dá)唑來控制它。如果它在口腔中繁殖，則需要使用左旋咪唑或阿苯達(dá)唑。如果它在肺部繁殖，則需要使用吡喹酮來控制它。當(dāng)羊患上嚴(yán)重疾病時(shí)，它們可能會(huì)出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽和流眼淚等癥狀。在這種情況下，注射伊維菌素和地塞米松是一種緩解方法。為了有效地治療這種疾病，建議采取兩種不同的方法：肌肉注射和靜脈滴注。建議將注射點(diǎn)放置在羊的后臀部，最佳的注射時(shí)機(jī)是傍晚或清晨，每次注射的劑量建議控制在0.5mL，并且要持續(xù)注射3d。靜脈滴注是一種有效的治療方式，它需要將藥劑注射到血管內(nèi)，通常在一次注射的1～2mg 的劑量?jī)?nèi)，持續(xù)滴注4 小時(shí)。此外，還有其他的治療方法，如使用口服藥物，如敵百蟲，按照0.6%的濃度進(jìn)行配制，每天兩次，連續(xù)使用7 天。

2、體外寄生蟲病

與體內(nèi)寄生蟲病相比，體外寄生蟲病更加普遍，它們的種類多樣，從螨、虱子、蜱蟲等，都能夠侵入人體，給人們帶來極大的威脅。雖然體外寄生蟲的治療效果可以被直接觀測(cè)，但它們的病因仍有待進(jìn)一步研究，只有經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，才能夠準(zhǔn)確地診斷出病因，從而采取有針對(duì)性的治療措施。體外寄生蟲的種類眾多，每個(gè)物種都有自己獨(dú)特的特征，這就決定了它們的治療方式各不相同。比如，羊蜱屬于節(jié)肢動(dòng)物門蛛形綱蜱目，而羊螨屬于蛛形綱蜱科，這兩者之間的區(qū)別就顯得尤為明顯。這兩種寄生蟲都能夠?qū)е卵蛑怀霈F(xiàn)瘙癢癥狀，如果不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)，可能引發(fā)更為嚴(yán)重的后果。由于這種寄生蟲的傳播速度極快，一旦發(fā)現(xiàn)，就會(huì)導(dǎo)致整個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的羊群受到嚴(yán)重的危害，甚至危及人類的健康。因此，為了防止病毒的蔓延，最佳的治療方法就是采用滅蟲丁粉藥物，它既可以有效地消滅寄生蟲，又不會(huì)給周邊的環(huán)境帶來任何污染。根據(jù)羊的體重，藥物的使用量應(yīng)恰當(dāng)，一般建議10mg/kg，并且至少要持續(xù)噴灑3 次，以獲得最佳療效。

五、羊寄生蟲病預(yù)防措施

1、早期驅(qū)除病蟲害

首先，對(duì)羊體內(nèi)寄生蟲進(jìn)行預(yù)防性驅(qū)蟲，這是一種比較經(jīng)濟(jì)實(shí)惠而又行之有效的方法。其主要包括以下幾個(gè)方面：為了保護(hù)羊的健康，建議在春秋兩季分別對(duì)它們進(jìn)行驅(qū)蟲。此外，在春末夏初季節(jié)，還建議給它們投放阿苯達(dá)唑、吡喹酮等驅(qū)蟲藥。另外，定期清理圈舍內(nèi)的糞便，并將其統(tǒng)一發(fā)酵，然后放入農(nóng)田中，以減少糞便中的蟲卵數(shù)量。其次，為了保證放牧的安全，建議不要去那些容易受蜱叮咬的地方。同時(shí)，也需要密切關(guān)注羊的健康情況，如果出現(xiàn)問題，立即采取適當(dāng)?shù)拇胧﹣斫鉀Q。最好將驅(qū)蟲工作集中在下半年，這樣能夠更好地達(dá)到預(yù)期的效果。再次，為了防止寄生蟲疾病的發(fā)生，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理，并且要改善它們的環(huán)境條件，以便在根本上阻止它們的繁殖。最后，還需要重視藥物使用問題，嚴(yán)格按照說明書規(guī)定劑量用藥，切不可盲目加大用量或增加服藥次數(shù)。

2、水源管理

羊的大多數(shù)寄生蟲都是通過外部環(huán)境感染的，因此做好水源管理工作至關(guān)重要。首先，為了確保飲用水的安全性，應(yīng)確保它是干凈、衛(wèi)生的，沒有任何雜質(zhì)或污染物。此外，還需要定期更換水槽中的水，以防止細(xì)菌、病毒等微生物的滋生，從而避免寄生蟲病的發(fā)生。為了確保飲用水的安全性，相關(guān)人員應(yīng)定期進(jìn)行檢測(cè)。特別是在夏季高溫季節(jié)，應(yīng)特別注意飲用水的溫度，以防止寄生蟲卵的死亡。同時(shí)，也要注意飲用水是否被糞便所污染，如果有，會(huì)使得幼蟲發(fā)育速度加快，進(jìn)而引起疾病暴發(fā)。最后，為了保護(hù)水質(zhì)，相關(guān)人員應(yīng)定期更換水源，以防止寄生蟲對(duì)水質(zhì)造成影響，降低發(fā)病率。此外，還應(yīng)定期對(duì)水源進(jìn)行消毒處理，以殺滅水中可能存在的病原體，減少疾病傳播途徑。具體來說，可以使用漂白粉或生石灰水浸泡水源，然后將其倒入池塘內(nèi)，這樣既可以殺死水中的寄生蟲，又不會(huì)給人們帶來危害，一舉兩得。

3、治理糞污

糞便污染嚴(yán)重，它們包括寄生蟲、細(xì)菌、病毒、真菌等，這些污染物可能會(huì)對(duì)動(dòng)物的健康造成嚴(yán)重的危害。因此，養(yǎng)殖戶應(yīng)采取措施，加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物糞便的管控，防止它們滋生出傳染性疾病。首先，為了保證養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，養(yǎng)殖戶應(yīng)在每天早晨喂食前清理糞便，并將剩余的飼料殘?jiān)M(jìn)行發(fā)酵處理。這樣不僅可以消除飼料中可能攜帶的寄生蟲，還能提高飼料的利用率。其次，為了保證動(dòng)物的健康，養(yǎng)殖戶應(yīng)定期清理和消毒圈內(nèi)的環(huán)境。這包括及時(shí)處理糞便和垃圾，避免蚊蠅繁衍。在一些特殊的區(qū)域，比如角落，可以使用殺蟲劑來控制它們的活動(dòng)，或者使用蒼蠅拍來驅(qū)散它們。最后，如果環(huán)境允許，養(yǎng)殖戶應(yīng)盡量選擇一種有效、安全的除臭劑，因?yàn)檫@種產(chǎn)品可以有效防止氣體污染，避免引發(fā)呼吸道疾病。此外，還可以采取一些有效的化學(xué)處理措施，比如利用氧化反應(yīng)來消滅害蟲卵和幼蟲，從而達(dá)到有效控制害蟲的目的。

4、抗性基因篩查

研究寄生蟲耐藥性基因的熱點(diǎn)已經(jīng)變得越來越明顯，目前已經(jīng)有多種方法可以用來檢測(cè)和鑒定蟲體是否攜帶耐藥基因，其中包括PCR 技術(shù)、DNA 測(cè)序法以及蛋白質(zhì)印跡法等，這些技術(shù)可以有效地幫助更好地防控寄生蟲。然而，這些方法存在一些缺陷，例如成本高昂、耗時(shí)較長(zhǎng)、操作繁瑣等。相比之下，基于核酸擴(kuò)增的Sanger 雙脫氧末端終止法則克服了這些缺陷，具有簡(jiǎn)單快捷、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，可以用于多種寄生蟲的檢測(cè)。Pfcrt 基因在惡性瘧原蟲的分離株中表現(xiàn)出穩(wěn)定的表達(dá)，并且可以作為一種有效的標(biāo)記，用來區(qū)分感染者和未感染者。在帶科絳蟲六鉤蚴宿主細(xì)胞染色體上，pfcrt 基因的表達(dá)可以通過三種方式實(shí)現(xiàn)：一是由5 段非編碼區(qū)組成的保守區(qū)域，另一個(gè)是由10 個(gè)核苷酸堿基構(gòu)成的開放閱讀框，第三個(gè)是由48 個(gè)核苷酸堿基構(gòu)成的開放閱讀框，這些基因的表達(dá)可以幫助更好地了解瘧原蟲的特征和功能。“CON”（Contig）、“RELATIVED”（Repeat）和“FUNGUM(Fragment)”是三個(gè)開放閱讀框，它們涵蓋了多種寄生蟲的基因組信息，包括線粒體基因組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等，為Sub-I 提供了豐富的資料。通過對(duì)寄生蟲特征及其與宿主間的關(guān)系的全面研究，可以制定出更加科學(xué)合理的防控措施，以有效地防治寄生蟲病害。研究表明，盡管宿主的免疫系統(tǒng)可以抵御某些寄生蟲的侵害，但是這種抵抗能力會(huì)因地域、氣候等因素而發(fā)生變化。為了更好地了解這種變化，研究了三種常見的寄生蟲（肝片吸蟲、細(xì)頸囊尾蚴及捻轉(zhuǎn)血矛線蟲），并進(jìn)行了比較，以探究它們的差異。通過對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)在不同的季節(jié)，綿羊體內(nèi)三種寄生蟲的感染率會(huì)發(fā)生顯著的變化，這將為當(dāng)?shù)鼐d羊寄生蟲病的防治提供重要的科學(xué)支持。

綜上所述，羊寄生蟲病的防治一直是畜牧業(yè)發(fā)展中亟待解決的難題之一。只有充分認(rèn)識(shí)到寄生蟲病的危害性，才能采取有效的綜合防治措施，保障羊群健康生長(zhǎng)。