董會民,孫妍秋
(1.周口市扶溝縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊,河南扶溝 461300;2.確山縣畜牧技術服務中心,河南確山 463200)
油脂是畜禽重要的能量來源,在調(diào)節(jié)多種生物學進程和功能中發(fā)揮著重要作用(于淇,2020)。有研究認為,日糧中添加植物油可顯著降低采食量(Sampelayo 等,2007),但也有研究發(fā)現(xiàn),在不影響育肥豬采食量的前提下,使用油脂替代育肥豬日糧中部分淀粉能顯著促進育肥豬增重,降低料重比(Brooke 等,2015)。劉則學等(2006)研究發(fā)現(xiàn),亞麻籽對80 ~110 日齡育肥豬生長性能無顯著影響。此外,侯嘉等(2017)結(jié)果表明,日糧中添加復合乳化劑可通過促進肉雞對日糧中脂溶性營養(yǎng)素的消化吸收提高肉雞生長性能。維生素D 是脂溶性維生素,是畜禽生長發(fā)育和健康必需的重要營養(yǎng)素,在調(diào)節(jié)鈣磷平衡、免疫機能、脂質(zhì)代謝和動物體炎癥反應中發(fā)揮了重要作用(吳曉靜,2022)。有研究認為,肝腎是維生素D 最重要的代謝器官,而脂肪組織是維生素D 最重要的儲存位置(Carrelli 等,2017)。張晶等(2021)使用4.5% 的菜籽油和4.5% 的混合植物油(2.25%菜籽油+2.25% 亞麻油)飼喂育肥豬,與對照組相比,飼喂菜籽油和混合植物油的育肥豬各組織間維生素D 沉積最少,同時相關代謝酶活性最高。
因此,本試驗以育肥豬為研究對象,探究日糧添加不同植物油對育肥豬生長性能及體內(nèi)維生素D 含量的影響。
1.1 試驗材料與設計 試驗將80 頭健康狀況良好的120 日齡杜長大三元雜交豬被隨機分為4 組,每組4 個重復,每個重復5 頭。按照NRC 建議配制基礎日糧,基礎日糧及營養(yǎng)組成見表1。分別使用菜籽油、亞麻油和葵花油替代基礎日糧中大豆油作為試驗日糧。
表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平
1.2 飼養(yǎng)管理 試驗前對豬舍進行徹底清掃和消毒,試驗共計63 d(其中預飼7 d,正試期56 d)。所有試驗豬在整個試驗期間自由采食和自由飲水,按照豬場規(guī)定進行免疫接種和飼養(yǎng)管理,每周帶豬消毒1 次,每日9 :00、14 :00 和19 :00 進行飼喂。
1.3 測定指標與方法
1.3.1 生長性能的測定 每天喂料時觀察試驗豬健康狀況,每周統(tǒng)計采食量,在正式試驗第1 和56 天對育肥豬(空腹)稱重,作為初始和終末體重。并據(jù)此計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
ADG=(初始體重-終末體重)/ 試驗天數(shù);
ADFI=(總采食量)/(試驗天數(shù)× 飼喂頭數(shù));
1.3.2 樣品采集 育肥豬屠宰前前腔靜脈采血10 mL 于EDTA 抗凝管中,充分混勻后室溫靜置20 min,常溫1000 rpm 離心10 min 制備血漿樣品,-20℃保存。正式試驗結(jié)束后,每組隨機選取5 頭育肥豬進行屠宰,迅速取下皮下脂肪組織、背腰最長肌肉組織、肝臟、腎臟組織,PBS 沖洗后轉(zhuǎn)移至液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.3 維生素D 含量測定 保存的血漿和組織樣本預處理后,干冰運輸至上海江萊生物科技有限公司。使用超高效液相色譜法檢測各樣本中維生素D 含量。
1.3.4 維生素D 代謝酶活性測定 將肝臟樣本與PBS 按照1 ∶19 的比例轉(zhuǎn)移至離心管中,并加入一顆研磨珠,低溫勻漿機破碎后,4℃離心機1000 rpm 離心10 min,取上清備用。按試劑盒說明(上海酶聯(lián)生物科技有限公司)分別檢測各樣本中維生素D 25 羥化酶(CYP2R1)、細胞色素P450家族成員27A1(CYP27A1)以及細胞色素P450家族成員24A1(CYP24A1)活性。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 所有數(shù)據(jù)使用Excel 2019進行預處理,使用SPSS(版本:25.0)進行方差分析,使用Duncan’s 法進行多重比較,結(jié)果以“平均值±標準差”表示,P<0.05 表示組間差異顯著。
2.1 日糧添加不同植物油對育肥豬生長性能的影響 由表2 可知,在初始體重無顯著差異的前提下(P>0.05),日糧中添加菜籽油有增加育肥豬背膘厚度的趨勢(P=0.0579);此外,日糧添加不同植物油對育肥豬終末體重、平均日增重、平均日采食量、料重比、胴體重和眼肌面積均無顯著影響(P>0.05)。
2.2 日糧添加不同植物油對育肥豬不同部位維生素D 含量的影響 由表3 可知,與其他組相比,日糧添加菜籽油顯著增加皮下脂肪和肝臟中維生素D 含量(P<0.05);日糧添加不同植物油對育肥豬血漿、背腰最長肌和腎臟維生素D 含量無顯著影響(P>0.05)。
表3 日糧添加不同植物油對育肥豬不同部位維生素D 含量的影響
2.3 日糧添加不同植物油對育肥豬肝臟維生素D 代謝酶活性的影響 由表4 可知,日糧中添加菜籽油的育肥豬肝臟CYP2R1 活性顯著高于其他各組(P<0.05);日糧中添加不同植物油對育肥豬肝臟CYP27A1 和CYP24A1 活性無顯著影響(P>0.05)。
表4 日糧添加不同植物油對育肥豬肝臟維生素D 代謝酶活性的影響 U/mg prot
日糧中的植物油可在不同程度調(diào)節(jié)畜禽脂肪沉積,改變其脂肪酸組成(徐彬和李紹鈺,2008)。但關于植物油促生長作用的研究結(jié)果并不統(tǒng)一。在大黃魚上的研究結(jié)果表明,使用高劑量菜籽油替代日糧魚油可顯著抑制其生長,而低劑量菜籽油能有效提高大黃魚的生長性能(Mu 等,2020);張哲等(2010)研究發(fā)現(xiàn),日糧添加多不飽和脂肪酸能顯著改善肉雞生長性能、減少飼料消耗;李榮剛等(2011)使用不同水平亞油酸飼喂肉兔可以發(fā)現(xiàn),日糧添加不同水平亞油酸對肉兔生長性能無顯著影響。這與本試驗結(jié)果基本一致,大豆油、菜籽油、葵花油和亞麻油對育肥豬生長性能均無顯著影響,僅菜籽油有提高育肥豬背膘厚度的趨勢,表明菜籽油對脂質(zhì)沉積可能有調(diào)控作用。
維生素D 是一組脂溶性、具有相似結(jié)構(gòu)的類固醇類物質(zhì)的總稱,維生素D2和D3是其最重要的兩種形式。研究表明,維生素D3在調(diào)節(jié)炎癥反應和氧化還原穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用,Berridge 等(2018)研究發(fā)現(xiàn),維生素D3可通過調(diào)節(jié)Nrf2 間接發(fā)揮其抗氧化功能。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),菜籽油顯著增加育肥豬皮下脂肪和肝臟維生素D 含量,對血漿、背腰最長肌和腎臟維生素D 含量均無顯著影響。這與張晶等(2021)報道的結(jié)果并不一致,推測可能與其使用植物油替代日糧中的淀粉有關。
肝臟和腎臟是維生素D 代謝和活化的主要器官,經(jīng)腸道吸收的維生素D 被轉(zhuǎn)運至肝臟后,在CYP2R1 和CYP27A1 兩種酶的作用下首先生成25(OH)D3,隨后在腎臟中,在CYP27B1 的調(diào)控作用下進一步羥化生成維生素D 的活性形式——骨三醇(Li 等,2008)。張晶等(2021)研究發(fā)現(xiàn),不同植物油對育肥豬皮下脂肪組織和背腰最長肌CYP2R1 酶活性影響不顯著。這與本試驗結(jié)果不一致,本試驗檢測育肥豬肝臟維生素D 相關代謝酶活性發(fā)現(xiàn),菜籽油組CYP2R1 活性顯著高于其他組,但對CYP24A1 和CYP27A1 活性無顯著影響。推測日糧中添加菜籽油可能通過調(diào)節(jié)CYP2R1 活性增強維生素D 的活化。
本試驗結(jié)果表明,盡管不同植物油對育肥豬生長性能無顯著影響,但日糧添加菜籽油可顯著增加育肥豬皮下脂肪維生素D 含量,此外,需進一步探究菜籽油是否通過維生素D 調(diào)節(jié)育肥豬皮下脂肪沉積。