王 鶴,王浩巖,李英夫

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科, 黑龍江 佳木斯 154003)

腦膜瘤是一種原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤,多為良性腫瘤,生長(zhǎng)較為緩慢,早期基本無(wú)明顯癥狀,隨著瘤體的不斷增大,壓迫周圍腦組織,會(huì)引起頭痛、惡心嘔吐等癥狀,并可伴隨局灶性神經(jīng)功能缺損等,影響患者工作及生活[1,2];少數(shù)為惡性,而惡性腦膜瘤臨床表現(xiàn)不典型,影像學(xué)檢查雖有一些特征性及相對(duì)特征性表現(xiàn),但有時(shí)候良惡性鑒別還是有一定難度,確診仍需要病理學(xué)檢查[3]。目前,手術(shù)是臨床治療該病的主要手段,通過(guò)切除顱內(nèi)的腦膜瘤組織,可解除顱內(nèi)占位,避免壓迫其他腦組織,從而減輕疾病癥狀,必要時(shí)還可輔助放射治療,最大限度破壞腦膜瘤細(xì)胞組織,改善患者預(yù)后[4,5]。雖然手術(shù)是主要治療手段,但手術(shù)同時(shí)也會(huì)給患者帶來(lái)很多并發(fā)癥,如:尿崩、下丘腦及垂體前葉功能障礙、精神癥狀、癲癇、嗅覺(jué)減退等[6]。此外,經(jīng)臨床長(zhǎng)期隨訪發(fā)現(xiàn),腦膜瘤仍存在較高的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn),尤其是世界衛(wèi)生組織(WHO)Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)患者,其腫瘤常呈侵襲性,手術(shù)易出現(xiàn)不完整切除現(xiàn)象,導(dǎo)致術(shù)后即使規(guī)范化放射治療,仍會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。因此,還需深入研究在腦膜瘤發(fā)生及發(fā)展中存在重要作用的分子標(biāo)志物,以尋找新的治療靶點(diǎn),降低遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。增殖細(xì)胞核抗原(Ki-67)蛋白是一種細(xì)胞增殖標(biāo)志物,可用于評(píng)估某一細(xì)胞群增殖比例,其常存在于乳腺癌、前列腺癌等多種惡性腫瘤中,且高表達(dá)會(huì)影響患者預(yù)后[7]。解聚素金屬蛋白酶癸蛋白1(ADAMDEC1)則為去整合素-金屬蛋白酶家族重要成員,具有參與細(xì)胞黏連、降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等多種作用,或可參與惡性腫瘤侵襲或轉(zhuǎn)移[8]。鑒于此,本研究分析腦膜瘤組織內(nèi)Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與臨床病理特征間的關(guān)系。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2021年1月本院的82例腦膜瘤患者作為觀察組,另選同期因外傷行顱腦手術(shù)的患者60例作為對(duì)照組。觀察組男39例,女43例;年齡24～65歲,平均(42.15±4.18)歲;體質(zhì)量指數(shù)18～28kg/m2,平均(24.15±1.47)kg/m2;WHO分級(jí):40例Ⅰ級(jí),32例Ⅱ級(jí),10例Ⅲ級(jí);文化程度:42例高中及以上,40例初中及以下。對(duì)照組男31例,女29例;年齡28～67歲,平均(42.23±4.21)歲;體質(zhì)量指數(shù)18～28kg/m2,平均(24.18±1.49)kg/m2;文化程度:32例高中及以上,28例初中及以下。經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。(1)納入標(biāo)準(zhǔn):腦膜瘤經(jīng)手術(shù)病理確診;均行手術(shù)治療;臨床資料完整;精神狀態(tài)良好;患者及家屬知情同意。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):術(shù)前接受放射治療;合并其他惡性腫瘤;存在急性腦血管疾病;既往有腦部手術(shù)史;中途隨訪失聯(lián)。

1.2 方法

腦膜瘤患者均行手術(shù)治療,術(shù)中切除腦膜瘤標(biāo)本送檢;外傷行顱腦手術(shù)患者均切除外傷性腦組織作為正常標(biāo)本送檢。免疫組化染色法檢測(cè)Ki-67、ADAMDEC1表達(dá):所有標(biāo)本均經(jīng)甲醛溶液固定,石蠟包埋,常規(guī)切片、脫蠟、水化處理,之后在攤片機(jī)上烘烤后脫蠟處理,并開(kāi)展脫二甲苯處理;待30% H2O22mL與蒸餾水混勻后,室溫20min,阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,之后水洗;再使用高壓鍋進(jìn)行抗原修復(fù),快速冷卻,以PBS緩沖液沖洗3次,滴加正常血清,37℃下孵育30min,將多余血清甩去后,加入各自特異性抗體,并置于4℃環(huán)境內(nèi)過(guò)夜;再次以PBS沖洗,滴加二抗,37℃孵育30min,再以PBS沖洗3次;之后DAB顯色處理,再水洗,待蘇木素復(fù)染后,進(jìn)行返藍(lán)、脫水、透明及封片處理。結(jié)果判讀:以染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞百分比為判讀依據(jù),其中染色強(qiáng)度為0～3分,對(duì)應(yīng)無(wú)著色、淡黃色、棕黃色及棕褐色;陽(yáng)性細(xì)胞百分比為0～3分,對(duì)應(yīng)無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞、1%～10%、11%～50%、51%～100%;兩項(xiàng)得分相乘≥3分則為陽(yáng)性,反之則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá):比較腦膜瘤組織及正常組織中Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)差異。(2)Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與病理特征間關(guān)系:比較不同Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)患者年齡、性別、腫瘤大小、WHO分級(jí)、瘤周水腫、腦膜尾征、骨侵犯等病理特征方面差異。(3)Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與預(yù)后關(guān)系:所有腦膜瘤患者均隨訪兩年,記錄疾病復(fù)發(fā)情況,并分析疾病復(fù)發(fā)與Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)間的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)

觀察組Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

2.2 Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與病理特征間關(guān)系

Ki-67蛋白陽(yáng)性組、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性組WHO分級(jí)Ⅱ-Ⅲ級(jí)、瘤周水腫、骨侵犯占比高于Ki-67蛋白陰性組、ADAMDEC1蛋白陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與病理特征間關(guān)系[n(%)]

2.3 Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與預(yù)后間關(guān)系

82例患者隨訪2年,共出現(xiàn)11例復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)率為13.41%(11/82);Ki-67蛋白陽(yáng)性組、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性組復(fù)發(fā)率略高于Ki-67蛋白陰性組、ADAMDEC1蛋白陰性組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表3。

表3 Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與預(yù)后間關(guān)系[n(%)]

3 討論

人的顱骨及大腦組織間,存在三層膜,由外到內(nèi)依次為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜及軟腦膜,合稱為腦膜。腦膜瘤是起源于蛛網(wǎng)膜帽狀細(xì)胞的腦腫瘤,其好發(fā)于大腦半球的凸面、顱底及鞍旁區(qū)域,不同區(qū)域疾病癥狀存在一定差異性,但早期均無(wú)明顯癥狀,瘤體不斷增大壓迫腦組織會(huì)引起顱內(nèi)壓增高等癥狀[9-11]。目前,臨床對(duì)于腦膜瘤的病因尚未完全明確,普遍認(rèn)為在電離輻射、雌激素刺激、頭部創(chuàng)傷史等多種因素的作用下,引起蛛網(wǎng)膜細(xì)胞基因變異,致使蛛網(wǎng)膜帽狀細(xì)胞出現(xiàn)不受控的增殖現(xiàn)象,最終形成腦膜瘤組織[12-14]。手術(shù)為當(dāng)前治療腦膜瘤的重要手段,切除腦膜瘤后可解除占位性壓迫,減輕神經(jīng)功能損害,緩解疾病癥狀。但腦膜瘤依據(jù)WHO分級(jí)可分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí),分級(jí)越高則腫瘤侵襲性越強(qiáng),術(shù)后即使輔助放射治療后也易出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)情況,影響患者遠(yuǎn)期預(yù)后。因此,需尋找新的治療靶點(diǎn),以完善早期治療方案,降低遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

Ki-67是反映細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖活性的標(biāo)志物,其在多種惡性腫瘤中均存在較高表達(dá),可參與腫瘤的增殖及侵襲[15-17]。當(dāng)Ki-67處于高表達(dá)狀態(tài)時(shí),腫瘤細(xì)胞DNA擴(kuò)增速度更快,能夠加快腫瘤細(xì)胞組蛋白的翻譯及合成,使腫瘤細(xì)胞迅速增殖,并提高腫瘤的浸潤(rùn)能力,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[18-19]。在腦膜瘤中亦是如此,當(dāng)Ki-67高表達(dá)時(shí),則提示腫瘤細(xì)胞處于增殖活躍狀態(tài)。同時(shí),腫瘤的發(fā)展過(guò)程包括惡性增殖、侵襲生長(zhǎng)、細(xì)胞突破基底膜、細(xì)胞外基質(zhì)黏附等多個(gè)過(guò)程。而去整合素-金屬蛋白酶家族在上述過(guò)程中均發(fā)揮重要作用。該家族是一種鋅蛋白酶類的跨膜蛋白,具有金屬蛋白酶及去整合素功能的結(jié)構(gòu)域,可參與細(xì)胞間的黏連,并能影響細(xì)胞及基底膜間的相互作用,從而參與細(xì)胞遷移、增殖、分化等多方面的調(diào)節(jié)。而ADAMDEC1是該家族的重要成員,具有整聯(lián)蛋白、金屬內(nèi)肽酶結(jié)合的活性,可介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,參與蛋白水平,并能負(fù)調(diào)控細(xì)胞附著。在惡性腫瘤中,ADAMDEC1處于高表達(dá)狀態(tài)時(shí),會(huì)降低細(xì)胞膜內(nèi)的多種蛋白成分,破壞阻止腫瘤細(xì)胞侵襲的組織學(xué)屏障,為腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利條件[20-22]。本研究結(jié)果顯示,觀察組Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組;Ki-67蛋白陽(yáng)性組、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性組WHO分級(jí)Ⅱ-Ⅲ級(jí)、瘤周水腫、骨侵犯占比高于Ki-67蛋白陰性組、ADAMDEC1蛋白陰性組;提示腦膜瘤組織內(nèi)Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率高,且與臨床病理特征存在密切關(guān)系。分析原因,Ki-67、ADAMDEC1蛋白處于高表達(dá)狀態(tài)時(shí),可提高腫瘤細(xì)胞的增殖及侵襲能力,故WHO分期更高,且在腦膜瘤的持續(xù)進(jìn)展過(guò)程中會(huì)累及周圍組織,引起瘤周水腫、骨侵犯等現(xiàn)象,加重患者病情。本研究結(jié)果顯示, 82例患者隨訪兩年,共出現(xiàn)11例復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)率為13.41%(11/82);Ki-67蛋白陽(yáng)性組、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性組復(fù)發(fā)率略高于Ki-67蛋白陰性組、ADAMDEC1蛋白陰性組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);提示Ki-67、ADAMDEC1蛋白表達(dá)與腫瘤復(fù)發(fā)存在一定關(guān)系。本研究中腫瘤復(fù)發(fā)患者均伴有Ki-67、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性表達(dá),但受限于樣本量小等因素影響,未能夠出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的差異,后續(xù)還需擴(kuò)大樣本量,并延長(zhǎng)隨訪時(shí)間,進(jìn)一步論證Ki-67、ADAMDEC1蛋白陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤復(fù)發(fā)的相關(guān)性。

綜上所述,Ki-67蛋白、ADAMDEC1蛋白在腦膜瘤中存在較高陽(yáng)性表達(dá)率,其高表達(dá)與腫瘤WHO分級(jí)、瘤周水腫、骨侵犯關(guān)系密切,臨床應(yīng)高度重視,以此開(kāi)展針對(duì)性治療,改善遠(yuǎn)期預(yù)后。