周洪磊，林國(guó)明，陳 志，李 鈞

(1.福建省洋澤海洋生物科技有限公司, 福建 福州 350603; 2.中國(guó)科學(xué)院海洋研究所, 山東 青島 266071; 3.福建省淡水水產(chǎn)研究所, 福建 福州 350025)

巖蟲隸屬環(huán)節(jié)動(dòng)物門Annelida、多毛綱Polychaeta、磯沙蠶科Eunicidae、巖蟲屬M(fèi)arphysa，俗稱“紅蟲”，主要棲息于潮間帶和潮下帶的泥沙、礫石底質(zhì)區(qū)域，是一種較為珍貴的海釣餌料之一，國(guó)內(nèi)價(jià)格高達(dá)到600元·kg-1。此外，巖蟲具有一定的生態(tài)修復(fù)功能，可有效改善泥沙底質(zhì)和促進(jìn)有機(jī)質(zhì)分解，同時(shí)巖蟲提取物還具有藥用價(jià)值可作為抗癌藥物研發(fā)的原材料。

近年來(lái)，由于價(jià)值高，過(guò)度采捕導(dǎo)致野生資源急劇減少，已影響到其資源的可持續(xù)利用和發(fā)展。目前，巖蟲規(guī)?；斯し庇难芯抗ぷ魃形慈〉猛黄菩赃M(jìn)展，相關(guān)研究主要集中在形態(tài)分類學(xué)[1-2]、組織學(xué)[3-4]、人工養(yǎng)殖[5-7]、生物醫(yī)藥[8]等方面，生長(zhǎng)和繁殖性能方面報(bào)道也較少，僅楊大佐等[9]開(kāi)展了室內(nèi)人工繁育的初步研究。因此，本研究開(kāi)展了3種生物餌料對(duì)巖蟲生長(zhǎng)及繁殖性能的試驗(yàn)研究，以期為開(kāi)展巖蟲人工繁育及增養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)參考資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用巖蟲于2022年12月取自福建洋澤海洋生物科技有限公司鑒江基地。試驗(yàn)前，選取該基地同一批同池、外觀完整無(wú)傷、攝食正常、體質(zhì)健壯、體重相當(dāng)?shù)膸r蟲為試驗(yàn)材料，平均體長(zhǎng)(28.5±1.2)cm，平均體質(zhì)量(2.7±0.7)g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與日常管理

試驗(yàn)在標(biāo)記為A、B、C的3口相鄰水泥池內(nèi)進(jìn)行，每口水泥池內(nèi)分別設(shè)置3個(gè)試驗(yàn)筐(平行試驗(yàn))，試驗(yàn)筐為底部和四周有孔的塑料筐，長(zhǎng)寬高為56 cm×38 cm×29 cm，筐內(nèi)底部和四周縫上60目尼龍網(wǎng)，筐內(nèi)鋪細(xì)沙20 cm。用紅磚將筐底部四角墊起懸空約30 cm。開(kāi)展3組生物餌料試驗(yàn)，分別為菲律賓蛤仔肉Ruditapesphilippinarum、牡蠣肉Perinereisaibuhitensis、南極磷蝦Perinereisaibuhitensis，營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1，設(shè)置3個(gè)平行，每天投喂150 g。每天投喂1次，下午17：00～18：00點(diǎn)投喂，投餌時(shí)水位控制在60 cm。為保持池內(nèi)水質(zhì)清新，每天早上7：00～8：00全部換水，清理池底及培養(yǎng)筐內(nèi)沙面殘餌和糞便。定期測(cè)定試驗(yàn)池溫度、pH等環(huán)境因子，觀察巖蟲攝食及排泄?fàn)顩r。

試驗(yàn)投喂的3種生物餌料首先切碎成2～5 mm大小的顆粒，每天傍晚均勻投喂到培養(yǎng)框中。試驗(yàn)期間日常水位控制90 cm，自然水溫為9.5℃～27.5℃，鹽度為22～28，水體溶氧為大于5.0 mg·L-1，pH 7.5～8.4，氨氮 ≤ 0.5 mg·L-1，亞硝酸鹽 ≤ 0.1 mg·L-1。每筐放養(yǎng)50條巖蟲，巖蟲穩(wěn)定鉆進(jìn)沙中后開(kāi)始試驗(yàn)，試驗(yàn)從2022年12月25日至2023年5月22日，合計(jì)180 d。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)前測(cè)定各試驗(yàn)組的巖蟲平均體質(zhì)量，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)再次測(cè)量巖蟲的平均體質(zhì)量，并按公式計(jì)算增重率、特定生長(zhǎng)率，記錄各試驗(yàn)組的產(chǎn)卵時(shí)間、產(chǎn)卵數(shù)、產(chǎn)卵次數(shù)。隨機(jī)挑選各組收集好的受精卵30個(gè)，在解剖鏡下測(cè)量平均卵徑；以出現(xiàn)三剛節(jié)疣足幼體為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算孵化率。

增重率= (W終末-W初始)/W初始×100%；

特定生長(zhǎng)率=100%×(InW終末-InW初始)/180；

孵化率= 三剛節(jié)幼體數(shù)/受精卵數(shù)×100%。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用 SPSS25.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(One-wayANOVA)。當(dāng)達(dá)到顯著差異水平(P<0.05)，則進(jìn)行Tukey多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 巖蟲攝食3種餌料的行為表現(xiàn)

巖蟲的攝食過(guò)程可分為尋食、取食和吞食3個(gè)階段。洞口周圍無(wú)食物時(shí)，巖蟲躲避在砂質(zhì)洞中，洞口有食物時(shí)，快速將食物拖入洞中，食物于洞口較遠(yuǎn)距離時(shí)，巖蟲會(huì)延伸身體，用顎齒夾住食物，用顎齒夾碎食物后吞食。投喂食物1 min后，即有巖蟲試探出洞，30 min內(nèi)陸續(xù)有巖蟲出洞覓食。菲律賓蛤仔碎肉不會(huì)潰散，巖蟲會(huì)拖進(jìn)洞內(nèi)或在洞口攝食；南極磷蝦碎肉容易在水中漂動(dòng)，巖蟲攝食相對(duì)花費(fèi)時(shí)間；近江牡蠣肉更加細(xì)碎，巖蟲攝食碎屑更容易。

2.2 3種生物餌料對(duì)巖蟲生長(zhǎng)的影響

由表2可知，各試驗(yàn)組的巖蟲存活率均為100%，經(jīng)過(guò)180 d的投喂，各試驗(yàn)組的重量均有不同程度增加。其中A組增重率最高，其次為B組，C組增重率最低，其中B組和C組增重率較為接近。A組特定生長(zhǎng)率達(dá)0.475%，高于B、C兩組。

表2 3種生物餌料對(duì)巖蟲生長(zhǎng)的影響

2.3 3種生物餌料對(duì)巖蟲產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵次數(shù)和初次產(chǎn)卵時(shí)間的影響

由表3可知，平均產(chǎn)卵量B組最高，其次為C組，A組最低，B組和C組的平均產(chǎn)卵量較為接近。至試驗(yàn)結(jié)束止，各試驗(yàn)組的產(chǎn)卵次數(shù)均為3次，各組每次產(chǎn)卵的時(shí)間間隔期大致相同，均在6～8 d內(nèi)，差異較小。初次產(chǎn)卵時(shí)間B組早于A組和C組，其中C組最遲。

表3 3種生物餌料對(duì)巖蟲產(chǎn)卵數(shù)量、產(chǎn)卵次數(shù)及產(chǎn)卵間期的影響

2.4 3種生物餌料對(duì)巖蟲受精卵卵徑和孵化率的影響

由表4可知，各試驗(yàn)組間平均卵徑差異不顯著(P<0.05)，其中B組的最大，其次是A組，C組最??；平均孵化率各試驗(yàn)組間差異顯著(P>0.05)，B組最高，達(dá)90.67%，A組和B組較接近，分別為86.33%、76.00%。

表4 3種生物餌料對(duì)巖蟲卵徑和孵化率的影響

3 討論

3.1 投喂不同生物餌料巖蟲的攝食情況及生長(zhǎng)差異分析

巖蟲與我國(guó)分布較廣的沙蠶都屬于潮間帶的底棲生物，但生活習(xí)性與繁殖習(xí)性均有所差異，目前沙蠶的全人工育苗技術(shù)已趨于成熟，而巖蟲的規(guī)模化育苗技術(shù)還未取得突破。在繁殖方面，沙蠶是一年生的，且繁殖季節(jié)沙蠶會(huì)變態(tài)成異沙蠶體，有群舞現(xiàn)象，巖蟲與沙蠶最大差異是巖蟲親體產(chǎn)卵后不死亡，可多年重復(fù)利用親本資源，優(yōu)勢(shì)明顯。

巖蟲具有極發(fā)達(dá)的消化盲囊，其黏膜突起形成了指狀絨毛，這極大地提高了消化吸收的功能[10]。在自然界中一般攝食小型底棲生物物和有機(jī)碎屑，人工養(yǎng)殖條件下一般投喂蛋白含量較高的蝦料，但投喂量控制不好容易污染水質(zhì)。菲律賓蛤仔肉、牡蠣肉和南極磷蝦均是巖蟲適宜的生物餌料，本試驗(yàn)中巖蟲對(duì)菲律賓蛤仔肉的攝食較快，投喂無(wú)剩余，牡蠣肉和南極磷蝦偶爾少量剩余，另外南極磷蝦破碎后，部分在水中漂浮，不利于巖蟲攝食。投喂菲律賓蛤仔肉(A組)巖蟲的增重率和特定生長(zhǎng)率均最高，分別為135%和0.475%，其次為B組，C組最低。特定生長(zhǎng)率越大代表其體質(zhì)量增加越快，質(zhì)量增加率越高。這與朱文博等[11]研究有所差異，其認(rèn)為在促進(jìn)短蛸Octopusocellatus生長(zhǎng)方面菲律賓蛤仔肉不如蟹類。

3.2 投喂不同生物餌料對(duì)巖蟲繁殖性能的影響

由于不同餌料營(yíng)養(yǎng)的組成及含量通常不同，因此，不同生物餌料對(duì)巖蟲繁殖性能的影響實(shí)質(zhì)上是不同餌料營(yíng)養(yǎng)對(duì)性腺發(fā)育的影響。餌料中對(duì)性腺發(fā)育密切相關(guān)的營(yíng)養(yǎng)主要是脂類、氨基酸、維生素和其他一些微量元素，對(duì)性腺發(fā)育的質(zhì)量起決定作用[12]。投喂的3種生物餌料營(yíng)養(yǎng)成分[13-19]也存在一定的差異，粗蛋白含量及氨基酸種類等均存在一定的差異。南極磷蝦和菲律賓蛤仔的EPA+DHA含量較為接近，氨基酸含量也是甲殼動(dòng)物南極磷蝦較多。產(chǎn)卵結(jié)果也表明，3種生物餌料對(duì)巖蟲繁殖性能影響有所差異，投喂牡蠣(B組)在2023年4月就開(kāi)始陸續(xù)產(chǎn)卵，且平均產(chǎn)卵量最高。牡蠣具有較高的蛋白質(zhì)和膽固醇，氨基酸組成與巖蟲相近，其營(yíng)養(yǎng)也比較有利于巖蟲卵巢發(fā)育，在產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率方面都有明顯優(yōu)勢(shì)。各試驗(yàn)組平均卵徑差異不顯著，卵徑的大致范圍在275～285 μm，可能與其親本的種質(zhì)資源有關(guān)，投喂牡蠣組的孵化率最高，達(dá)到了90.67%，說(shuō)明前期的投喂餌料種類對(duì)孵化率影響較大，可以進(jìn)一步研究餌料中具體成分的影響。研究也發(fā)現(xiàn)，水生動(dòng)物的繁殖和生殖細(xì)胞的生長(zhǎng)都需要相當(dāng)數(shù)量的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，例如高度不飽和脂肪酸(DHA、EPA)、磷脂等。巖蟲一般在冬季水溫7℃～8℃性腺細(xì)胞即開(kāi)始發(fā)育，在福建地區(qū)一般4月份的水溫會(huì)陸續(xù)達(dá)到20℃以上，所以在育苗工作開(kāi)展前，性腺培育工作不可或缺。樊曉旭等[20]研究了4種餌料曼氏無(wú)針烏賊Sepiellamaindroni繁殖性能的影響，姚衛(wèi)軍等[21]也指出，以混合投喂，比單一用烏賊或牡蠣投喂，親蝦性腺發(fā)育、受精卵孵化率和幼體變態(tài)率的效果更好。

3.3 影響巖蟲繁殖性能的其他因素分析

除了攝食餌料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)巖蟲繁殖性能有顯著影響外，水溫、光照和水質(zhì)也能影響巖蟲的繁育效果。例如，Perez-Velazquez M等[22]研究了溫度對(duì)野生凡納濱對(duì)蝦Litopenaeusvannamei精子質(zhì)量的影響；曹昆[23]認(rèn)為鹽度和光照能有效誘導(dǎo)雌性克氏原螯蝦Procambarusclarkii性腺快速發(fā)育，鹽度和光照促進(jìn)克氏原螯蝦性腺發(fā)育，其中光照影響較大；祝斐等[24]研究了光周期對(duì)松江鱸魚Preliminary生長(zhǎng)和性腺發(fā)育的影響；王賽賽等[25]研究了復(fù)合益生菌對(duì)大口黑鱸Micropterussalmoides延后繁殖性能的影響。水質(zhì)也是影響巖蟲繁殖的重要因素之一，在規(guī)?；a(chǎn)過(guò)程中，巖蟲的育苗用水須經(jīng)過(guò)24 h的沉淀和砂濾、二次消毒處理，同時(shí)要對(duì)育苗池、沙層、使用工具和場(chǎng)地進(jìn)行全面清洗和消毒；親本引進(jìn)前也需要進(jìn)行消毒處理，同時(shí)從水中收集的受精卵要進(jìn)行選優(yōu)和消毒清洗，提高孵化率。靳曉敏等[26]開(kāi)展了日本對(duì)蝦(Penaeusjaponicus)的育苗，認(rèn)為水質(zhì)在很大程度上決定了蝦苗的成功率。近年來(lái)，種質(zhì)退化問(wèn)題日益嚴(yán)重，不合時(shí)宜的催產(chǎn)育苗、多代持續(xù)的近親交配繁殖，尤其是出自同一父、母本的小群體親本，造成優(yōu)良性狀出現(xiàn)衰退，這也是影響水產(chǎn)動(dòng)物繁殖性能的主要因素之一。

3.4 巖蟲生物餌料的開(kāi)發(fā)和利用

巖蟲幼體在浮游期主要攝食海洋微藻，附底后則攝食一些動(dòng)物性的生物餌料，是肉食性種類，目前養(yǎng)殖過(guò)程中主要是以冰鮮雜魚為主，存在儲(chǔ)存不便、營(yíng)養(yǎng)單一、供應(yīng)不穩(wěn)定等弊端；部分投喂蝦料，但蝦料的營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)法完全滿足巖蟲的營(yíng)養(yǎng)需求，因此有必要尋求替代的專用的配合餌料。目前市場(chǎng)上暫無(wú)商品化的巖蟲餌料，主要原因：一是巖蟲養(yǎng)殖規(guī)模較小，目前無(wú)法形成一定的產(chǎn)業(yè)規(guī)模。二是投喂蝦料因長(zhǎng)時(shí)間被海水浸泡或無(wú)攝食容易導(dǎo)致水質(zhì)和底質(zhì)惡化。李石磊等[10]研究表明，添加動(dòng)物蛋白組飼料優(yōu)于投喂添加植物蛋白和單胞藻的組，投喂添加魚粉和蝦粉含量為30%～70%的配合飼料可以取得較好的巖蟲養(yǎng)殖效果。本研究中菲律賓蛤仔肉較適作為巖蟲日常投喂餌料，近江牡蠣肉適宜開(kāi)發(fā)為巖蟲親本強(qiáng)化的生物餌料。下一步可探索巖蟲人工配合飼料中使用貝類蛋白來(lái)源原料的可行性。

4 結(jié)論

經(jīng)過(guò)6個(gè)月投喂，結(jié)果表明：各餌料組的成活率均為100%；增重率：A組 (135%)>B 組(112%)>C組 (106%)；特定生長(zhǎng)率：A組 (0.475%)>B組 (0.417%)>C組 (0.401%)；B組開(kāi)始產(chǎn)卵時(shí)間最早，平均產(chǎn)卵量最高。各試驗(yàn)組平均卵徑差異不顯著，卵徑范圍：278～280 μm，各試驗(yàn)組平均孵化率：B (90.67%)>A (86.33%)>C (76.00%)。試驗(yàn)結(jié)果表明，菲律賓蛤仔肉較適作為巖蟲日常投喂餌料，近江牡蠣肉適宜開(kāi)發(fā)為巖蟲親本強(qiáng)化的生物餌料。