桂海霞　梅朋飛　劉鴻艷　陳世堅(jiān)　吳文嬙

關(guān)鍵詞：毛薯；多糖；熱水提取法；工藝優(yōu)化；抗氧化活性

中圖分類號(hào)：Q539 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

毛薯（Dioscorea esculenta）又名甜薯、甘薯、小山藥、蔓眉（黎語(yǔ)）等，為薯蕷科薯蕷屬藤本植物。毛薯營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，口感粉香微甜，具有健脾止瀉，益肺滋腎，解毒斂瘡的功效[1]。毛薯抗旱耐肥、少病蟲害且長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，是很好的耐旱作物[2]，其全生育期很少施用農(nóng)藥，是健康的綠色食品，主要種植在海南、廣東南部和廣西南部，不耐低溫。

研究發(fā)現(xiàn)，多種植物多糖具有清除自由基、增強(qiáng)抗氧化酶活性、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、保護(hù)生物膜、延緩衰老的作用[3]。植物多糖還具有降血糖、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等生物活性[4-6]。毛薯富含植物多糖，且具有一定的藥用價(jià)值。國(guó)外研究表明，毛薯具有抗氧化活性，調(diào)節(jié)胃腸道功能。其乙醇提取物具有一定的生物活性，和阿霉素聯(lián)合使用能對(duì)抗乳腺癌細(xì)胞的發(fā)育周期[7]。長(zhǎng)期食用毛薯能誘導(dǎo)肌肉性類固醇激素水平的增加，從而有助于降低2 型糖尿病的胰島素抵抗[8]。

植物多糖提取的方法有熱水提取法、超聲波提法、酶水解法、醇沉法、微波提取和堿提法等[9-10]。不同提取方法獲得的多糖提取率有差異，各有優(yōu)缺點(diǎn)。何嬌等[11]采用3，5-二硝基水楊酸測(cè)定了毛薯干粉總還原糖含量，高達(dá)71.08%。黎丹等[12]收集了80 份毛薯種質(zhì)，采用醇沉法提取毛薯Ds96 粗多糖，其提取率為12.34%，研究還表明毛薯營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)不低于河南鐵棍山藥。熱水提取法提取成分完全，有利于后續(xù)從活性物質(zhì)中精制多糖[13]。

目前，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)對(duì)毛薯藥用成分的研究分析，也未見(jiàn)對(duì)毛薯多糖開展藥用價(jià)值的研究報(bào)道。為了研究毛薯多糖的功能以及進(jìn)一步開發(fā)利用，迫切需要優(yōu)化毛薯多糖提取工藝并獲得較好活性的精制多糖。本研究擬采用熱水提取法提取毛薯多糖，以溫度、料液比、提取時(shí)間為影響因素，優(yōu)化毛薯多糖提取的最佳工藝。經(jīng)過(guò)進(jìn)一步分離純化后， 采用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（2，2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl， DPPH）法、羥自由基法、超氧陰離子法和還原法檢測(cè)毛薯多糖抗氧化還原活性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料與試劑 毛薯Ds96（廣西博白）來(lái)自海南大學(xué)薯蕷種質(zhì)資源圃，鐵棍山藥來(lái)自河南焦作。

5%苯酚水溶液，購(gòu)自雷根生物試劑有限公司；濃硫酸，購(gòu)自廣州化學(xué)試劑廠；標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖、Vc 溶液，購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司；DPPH，購(gòu)自麥克林有限公司；二乙氨基乙基纖維素52（DEAE-52 纖維素）、葡聚糖凝膠G-100（SephadexG-100 葡聚糖），購(gòu)自西寶生物科技有限公司；水楊酸、鐵氰化鉀、鄰苯三酚、三氯乙酸等，均購(gòu)自西隴化工有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備 PL403 電子天平，購(gòu)自梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；UV-1899PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，購(gòu)自翱藝儀器（上海）有限公司；DHG-9013A 鼓風(fēng)干燥箱，購(gòu)自上海恒一科學(xué)儀器有限公司；HWS-26 電熱恒溫水浴鍋，購(gòu)自上海恒一科學(xué)儀器有限公司；LC-RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，購(gòu)自EYELA 公司；SCIENTZ-12N冷凍干燥機(jī)，購(gòu)自寧波新芝生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 準(zhǔn)確稱取105 ℃烘干至恒重的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖25 mg 定容于250 mL 容量瓶中，配制成1 mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9 mL 的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液于潔凈試管中，用水補(bǔ)足至1 mL，加入5%苯酚水溶液1 mL 及濃硫酸5 mL，震蕩均勻，靜置25 min，于490 nm 處檢測(cè)吸光度值，以蒸餾水為空白對(duì)照，以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)（x），以吸光度值為縱坐標(biāo)（y），繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)材料處理 將資源圃中采挖的新鮮毛薯和山藥塊莖洗凈后削皮，切成2 mm 左右的薄片。于105 ℃高溫殺青20 min，抑制酶促氧化，于60 ℃條件下烘干至恒重，粉碎機(jī)粉碎成粉末，過(guò)100 目篩，干燥密封保存。

1.2.3 毛薯多糖熱水提取法單因素實(shí)驗(yàn) 稱取干燥至恒重的毛薯塊莖粉末100～500 mg，溶于5 mL的蒸餾水中，在一定溫度的水浴中浸提，取出后以5000 r/min 離心15 min，取20 μL 上清液稀釋至5 mL，取1 mL 進(jìn)行多糖含量測(cè)定。對(duì)溫度、料液比、提取時(shí)間進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。溫度設(shè)置的處理水平為40、50、60、70、80 ℃；料液比設(shè)置的處理水平為1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30；提取時(shí)間設(shè)置的處理水平為1、2、3、4、5 h。

1.2.4 毛薯多糖提取正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以提取溫度（A）、料液比（B）、提取時(shí)間（C）為影響因素，以毛薯多糖吸光度值為評(píng)價(jià)指標(biāo)，設(shè)計(jì)三因素三水平L（3）正交實(shí)驗(yàn)表，確定毛薯多糖的最佳提取工藝。根據(jù)毛薯多糖正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，再進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn)，以驗(yàn)證最佳工藝的提取條件。

1.2.5 毛薯粗多糖的分離純化 （1）Sevag 法脫蛋白。取一定量的粗多糖溶液，向其中加入1/5體積的正丁醇-氯仿混合液（其體積比為1∶4），磁力攪拌器高速攪拌30 min 后，以8000 r/min 離心20 min，取上清，避免吸取中間蛋白層，重復(fù)2 次。

（2）透析。毛薯多糖經(jīng)Sevag 法脫蛋白后，須旋蒸去除氯仿，將脫蛋白后的毛薯多糖溶液倒入透析袋中，倒入2/3 的位置后將透析袋的另一端用夾子夾住，將透析袋放入裝有蒸餾水的容器中，水要沒(méi)過(guò)整個(gè)透析袋。多糖溶液于蒸餾水中透析72 h，中間隔斷換水，以除去單糖、低聚糖和鹽等小分子雜質(zhì)。

（ 3 ） DEAE-52 纖維素柱層析（ 4.5 cm×65 cm）。將經(jīng)過(guò)脫蛋白、透析后的毛薯多糖溶液濃縮至20 mL，上DEAE-52 纖維素柱進(jìn)行分級(jí)純化，先以20 mL 蒸餾水洗脫，然后以0.1～0.5 mol/LNaCl 溶液進(jìn)行線性洗脫，流速為2 mL/min，每2 min 收集1 管，于490 nm 處以苯酚-硫酸法測(cè)定吸光度，繪制洗脫曲線，橫坐標(biāo)（x）為接收管數(shù)，縱坐標(biāo)（y）為吸光度。

（4）SephadexG-100 凝膠柱層析（4.5 cm×65 cm）。經(jīng)DEAE-52 纖維素柱純化后的毛薯多糖溶液濃縮至50 mL。加20 mL 毛薯多糖濃縮液到預(yù)先用0.1 mol/L NaCl 溶液平衡的SephadexG-100 凝膠柱上，用0.1 mol/L NaCl 溶液進(jìn)行洗脫，流速為1 mL/min，每5 min 收集1 管。在490 nm處以苯酚-硫酸法測(cè)定吸光度，繪制洗脫曲線，橫坐標(biāo)（x）為接收管數(shù)，縱坐標(biāo)（y）為吸光度。

（5）紫外吸收光譜法。將凝膠柱層析后的毛薯多糖溶液的濃度調(diào)整為1 mg/mL 后， 于200～600 nm 范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，觀察在260、280 nm 波長(zhǎng)附近是否有特征吸收峰。

1.2.6 毛薯多糖抗氧化還原活性研究 以Vc 溶液作為陽(yáng)性對(duì)照，以山藥全粉多糖作為陰性對(duì)照，測(cè)定毛薯精多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖的DPPH 自由基清除能力、羥自由基（·OH）清除作用、超氧陰離子（·O）的清除作用和還原能力并進(jìn)行比較。

（1）DPPH 自由基清除能力測(cè)定。準(zhǔn)確稱取4 mg DPPH，用無(wú)水乙醇溶解定容到100 mL 的棕色容量瓶中，制得0.1 mmol/L DPPH 自由基溶液。移取濃度分別為1、2、3、4、5 mg/mL 毛薯精多糖、山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖、Vc 溶液2～10 mL 的離心管中，并分別加2 mLDPPH 溶液，混勻30 min 后于517 nm 測(cè)定吸光度值A(chǔ)i；用無(wú)水乙醇代替DPPH 自由基溶液測(cè)定吸光度值A(chǔ)j，空白對(duì)照用無(wú)水乙醇代替樣品溶液測(cè)定吸光度值A(chǔ)0，以上各離心管均做3 組平行試驗(yàn)。按下述公式計(jì)算多糖對(duì)DPPH 自由基的清除率：

DPPH 清除率=[1–（A–A）/A]×100%

（2）羥自由基（·OH）清除作用。分別配置不同濃度的毛薯精多糖、山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖、Vc 溶液，加入2 mL 濃度分別為1、2、3、4、5 mg/mL 的樣品溶液，然后分別加入2 mL 的FeSO（9 mmol/L）和H2O2溶液（9 mmol/L）混勻后靜置10 min，再加入2 mL的水楊酸（9 mmol/L）混勻，靜置30 min 于510 nm測(cè)定吸光度值A(chǔ)。用蒸餾水代替水楊酸測(cè)定吸光度值A(chǔ)，空白對(duì)照用蒸餾水代替樣品溶液測(cè)定吸光度值A(chǔ)，按下述公式計(jì)算多糖溶液對(duì)羥自由基的清除率：

羥自由基清除率=1–[（A–A）/A]×100%

（3）超氧陰離子（·O）的清除作用。分別配置不同濃度的毛薯精多糖、山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖、Vc 溶液，加入2 mL濃度為1、2、3、4、5 mg/mL 的樣品溶液于10 mL離心管中，再分別加入4.5 mL 的 Tris-HCl 緩沖液（1 mol/L，pH 8.2），于50 ℃水浴30 min，加入1 mL 鄰苯三酚（2 mmol/L）反應(yīng)10 min，于325 nm 處測(cè)定吸光度值A(chǔ)，用蒸餾水代替鄰苯三酚測(cè)定吸光度值A(chǔ)，空白對(duì)照用蒸餾水代替樣品溶液測(cè)定吸光度值A(chǔ)，按下述公式計(jì)算多糖溶液對(duì)超氧陰離子的清除率：

超氧陰離子清除率=[1–（A–A）/A]×100%

（4）還原能力測(cè)定。分別配置不同濃度的毛薯精多糖、山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖、Vc 溶液，移取濃度分別為1、2、3、4、5 mg/mL 1 mL 的樣品溶液分別置于10 mL 離心管中，依次加入2.5 mL 的磷酸鹽緩沖溶液（0.2 mol/L，pH 7.4）、2.5 mL 鐵氰化鉀（1% wt），搖勻后置于50 ℃水浴中30 min，流水冷卻，再加入2.5 mL 的三氯乙酸溶液（10% wt）搖勻，5000 r/min 離心10 min。移取2.5 mL 上清液于另一10 mL 離心管中，依次加入2.5 mL 去離子水、0.5 mL 三氯化鐵溶液（0.1% wt）搖勻，靜置10 min于700 nm 處測(cè)定樣品的吸光度值。吸光度值越高，表明其還原能力越強(qiáng)。

1.2.7 多糖提取率計(jì)算方法 參照高英春[14]的計(jì)算方法。

式中，f：換算因子0.9；C：測(cè)得樣品的葡萄糖濃度（mg/mL）；V：測(cè)定液總量（mL）；D：稀釋倍數(shù)；W：樣品質(zhì)量（g）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行差異顯著性分析，正交實(shí)驗(yàn)采用方差分析，組內(nèi)比較采用t 檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

以葡萄糖濃度（mg/mL）為x 軸，以吸光度值為y 軸，建立葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程y=0.9746x+0.0065 ， R=0.9996 ， 在葡萄糖濃度0～1 mg/mL 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.2 毛薯多糖熱水提取法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 單因素實(shí)驗(yàn) 控制其他條件不變的前提下，分別對(duì)溫度、料液比和提取時(shí)間進(jìn)行熱水提取法單因素實(shí)驗(yàn)。由圖1 可知，當(dāng)溫度在40～70 ℃區(qū)間時(shí)，隨著溫度的升高，多糖提取率逐漸升高，當(dāng)溫度達(dá)到70 ℃時(shí)，多糖提取率最高，為1.29%；當(dāng)溫度達(dá)到80 ℃時(shí)，多糖提取率驟然降低，毛薯粉發(fā)生熱凝固，無(wú)法成為混懸液，多糖無(wú)法析出。當(dāng)料液比在1∶10～1∶30 區(qū)間時(shí)，1∶10 處理獲得的多糖提取率最高，為2.38%；隨著料液比的增加，多糖提取率逐漸降低。當(dāng)時(shí)間在1～5 h 區(qū)間時(shí)，2 h 處理獲得的多糖提取率最高，為3.29%。

2.2.2 正交實(shí)驗(yàn) 根據(jù)毛薯多糖熱水提取法單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置了三因素三水平L（3）正交實(shí)驗(yàn)的處理，其具體設(shè)計(jì)方案見(jiàn)表1。由表2 可知，毛薯多糖的提取率最高達(dá)1.94%，最佳提取工藝條件為ABC，即溫度為70 ℃，料液比為1∶15，時(shí)間為3 h。在極差分析中，溫度、料液比和時(shí)間的R 值分別為0.52、0.07、0.20，溫度的R 值最大，影響毛薯多糖提取的因素依次為溫度>時(shí)間>料液比。方差分析結(jié)果表明，溫度對(duì)熱水提取毛薯多糖的影響差異顯著（P<0.05），料液比和時(shí)間的影響均未達(dá)到差異顯著性水平（P>0.05）。

2.2.3 毛薯多糖提取工藝驗(yàn)證 對(duì)毛薯多糖優(yōu)化工藝進(jìn)行驗(yàn)證，3 次平行實(shí)驗(yàn)多糖提取率分別為1.97%、1.91%、1.93%，平均值為1.94%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.60%，所建立的毛薯多糖優(yōu)化提取工藝穩(wěn)定可行。

2.3 毛薯粗多糖的分離純化

2.3.1 DEAE-52 纖維素柱層析 通過(guò)DEAE-52纖維素柱，經(jīng)苯酚-硫酸法檢測(cè)得到1 個(gè)峰形明顯的洗脫峰，并無(wú)其他峰，表明毛薯多糖是一種中性多糖（圖2）。收集30～60 管的毛薯多糖洗脫液，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，通過(guò)冷凍干燥器進(jìn)行凍干，獲得純化的毛薯多糖，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.3.2 SephadexG-100 葡聚糖凝膠柱層析 通過(guò)SephadexG-100 葡聚糖凝膠柱層析柱，經(jīng)苯酚-硫酸法檢測(cè)得到1 個(gè)均一的洗脫峰，且峰形基本對(duì)稱，表明純化后獲得的毛薯多糖純度均一（圖3）。收集38～70 管的毛薯多糖洗脫液，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，通過(guò)冷凍干燥器進(jìn)行凍干，獲得毛薯精多糖。

2.3.3 紫外全波長(zhǎng)掃描 1 mg/mL 的毛薯精多糖溶液在180～600 nm 紫外掃描顯示為末端吸收，在260 nm 和280 nm 處無(wú)明顯的紫外吸收，曲線平滑，表明毛薯精多糖中無(wú)蛋白、核酸及多肽等雜質(zhì)（圖4）。

2.4 毛薯多糖抗氧化還原活性結(jié)果

2.4.1 DPPH 自由基清除能力 由圖5 可知，Vc濃度為1～5 mg/mL 時(shí)，DPPH 自由基清除率基本維持在90% 以上， 山藥全粉多糖清除率為30%～50%，且有濃度梯度效應(yīng)。毛薯表皮多糖的清除能力強(qiáng)于山藥全粉多糖、毛薯全粉多糖和毛薯精多糖，清除率為40%～70%。而毛薯全粉多糖和毛薯精多糖的清除能力較弱，清除率在10%左右。毛薯精多糖清除率最高為15.33%，清除率隨濃度的升高逐漸下降。毛薯表皮多糖的DPPH 清除能力高于山藥全粉多糖、毛薯全粉多糖和毛薯精多糖。

2.4.2 羥自由基清除能力 由圖6 可知，Vc 濃度為1～5 mg/mL 時(shí)，清除能力隨著濃度的升高而升高，清除率最高可達(dá)到99.01%。山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖和毛薯精多糖均具有濃度梯度效應(yīng)，在濃度為5 mg/mL 時(shí)，清除率均最高，分別為48.08%、44.66%、33.06%和34.74%。毛薯表皮多糖和山藥全粉多糖的羥自由基的清除能力高于毛薯全粉多糖和毛薯精多糖。

2.4.3 超氧陰離子自由基清除能力 由圖7 可知，Vc 的超氧陰離子清除能力較高，清除率基本維持在80%以上。毛薯精多糖在1 mg/mL 時(shí)，清除率為67.35%。山藥全粉多糖、毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖和毛薯精多糖的清除能力隨著多糖濃度的升高而逐漸降低， 山藥全粉多糖在5 mg/mL 時(shí)，清除率低至4.12%。毛薯表皮多糖的清除能力降低速率僅次于山藥全粉多糖，在5 mg/mL 時(shí)，清除率為18.97%，而毛薯全粉多糖和毛薯精多糖的清除能力降低速率較緩， 在5 mg/mL 時(shí)，清除率分別為57.20%和48.53%。毛薯全粉多糖的超氧陰離子清除能力高于毛薯精多糖、毛薯表皮多糖和山藥全粉多糖。

2.4.4 還原能力 由圖8可知，Vc濃度為1～5 mg/mL時(shí)， 還原力基本維持在2.5 以上。在濃度為1～5 mg/mL 時(shí)，山藥全粉多糖和毛薯表皮多糖的還原能力隨著多糖濃度的升高而增強(qiáng)，具有梯度濃度效應(yīng)，在5 mg/mL 時(shí)還原力分別為0.98 和0.77。而毛薯全粉多糖和毛薯精多糖的還原能力較弱，還原力為0.1～0.2；毛薯精多糖濃度為1～5 mg/mL 時(shí)，還原能力最高為0.17。山藥全粉多糖的還原能力高于毛薯表皮多糖、毛薯全粉多糖和毛薯精多糖。

3 討論

3.1 毛薯多糖的提取工藝優(yōu)化

本研究采用熱水提取法對(duì)毛薯多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。根據(jù)單因素和正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，熱水提取法提取毛薯多糖的提取率最高為1.94%，其最佳工藝條件為：溫度70 ℃，料液比1∶15，提取時(shí)間3 h。目前尚未見(jiàn)毛薯多糖提取工藝優(yōu)化的報(bào)道，黎丹等[12]采用醇沉法獲得的毛薯粗多糖提取率高達(dá)12.34%，表明毛薯中不少種質(zhì)多糖的含量不低于鐵棍山藥。在薯蕷科薯蕷屬近緣物種多糖提取的研究中，孫峰[15]采用熱水提取法在料液比1∶9、溫度50 ℃、提取時(shí)間2.5 h和75%乙醇沉淀的處理時(shí)，鮮山藥多糖的提取率為0.2449%。王珊珊[16]采用水提醇沉法提取鐵棍山藥多糖，在料液比1∶9、溫度71 ℃、提取時(shí)間2.3 h 和pH 為7.16 時(shí)，其多糖提取率為9.57%。鄧寒霜[17]采用熱水提取法提取穿山龍薯蕷多糖，在料液比1∶25、溫度95 ℃和提取時(shí)間106 min的處理時(shí)，其多糖提取率為2.115%。溫度過(guò)高、過(guò)堿會(huì)影響多糖的抗氧化活性[18]。智文莉[19]采用超聲-微波法在料液比1∶10、提取時(shí)間360 s 和功率380 W 時(shí)，鐵棍山藥多糖提取率僅為1.39%?？梢?jiàn)，不同的提取方法獲得的提取率不同，醇沉法的提取率普遍高于熱水提取法，這與醇沉法多次離心收集有關(guān)。與薯蕷屬其他近緣物種相比，經(jīng)本研究條件優(yōu)化后獲得的毛薯多糖提取率較好，可用于后續(xù)開發(fā)。

3.2 毛薯多糖的抗氧化活性

通過(guò)對(duì)經(jīng)分離純化得到的純度均一中性多糖的毛薯多糖進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，毛薯精多糖DPPH法、羥自由基法、超氧陰離子法和還原法的抗氧化活性分別為15.33%、34.74%、67.35%和0.17。毛薯多糖抗氧化活性尚未見(jiàn)報(bào)道，有學(xué)者對(duì)薯蕷屬其他物種開展了多糖的氧化還原功能研究。陳樹俊等[20]比較不同濃度的佛手山藥中性多糖的抗氧化活性中發(fā)現(xiàn)，在濃度為2.0 mg/mL 時(shí)，其DPPH 自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基的清除率分別為35.6%、38.3%和31.9%。毛薯精多糖的超氧陰離子清除率優(yōu)于佛手山藥多糖。單承鶯等[21]采用毛膠薯蕷（D. subcalva）多糖檢測(cè)雙氧水、超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除活力，結(jié)果表明毛膠薯蕷具有體外抗氧化活性，抗氧化活性大小和濃度與毛薯多糖的羥自由基和超氧陰離子具有量效關(guān)系。王珊珊[16]提取鐵棍山藥多糖進(jìn)行抗氧化活性檢測(cè)，結(jié)果表明以常用抗氧化劑VE 為陽(yáng)性對(duì)照，在300 μg/mL 時(shí)，其DPPH、羥自由基和超氧陰離子的清除率分別為81%、88%和68%。而本研究提取的鐵棍山藥全粉多糖的最高清除率分別為57.75%、48.08%和77.96%，其抗氧化活性的差異可能是由于提取條件中pH 的不同而導(dǎo)致，也可能是多糖的單糖組成有差異。本研究結(jié)果表明鐵棍山藥全粉水提多糖抗氧化還原活性數(shù)值均優(yōu)于經(jīng)過(guò)分離純化后的毛薯精多糖。

毛薯精多糖和毛薯全粉多糖的抗氧化還原活性基本一致，而毛薯表皮多糖的抗氧化還原活性除了羥自由基清除活性外，均比毛薯精多糖清除率高，可能是毛薯表皮提取物未純化徹底，表皮中可能含有單寧、植酸和其他一些抗氧化活性物質(zhì)[22]。毛薯精多糖在多次除雜和純化后可能丟失了某些活性物質(zhì)，或者毛薯的抗氧化還原活性物質(zhì)存在于表皮中，有待進(jìn)一步研究證實(shí)。