熊云霞 劉 帥 肖 昊 吳綺雯 易宏波 何冬生 李亞靜 蔣宗勇 王 麗*

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,畜禽育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室茂名分中心,廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510640;2.諸城市浩天藥業(yè)有限公司,諸城 262218)

甜葉菊是一類天然高倍甜味劑-甜菊糖苷的主要來源[1]。在中國,甜葉菊提取物(主要是甜菊糖苷)的總產(chǎn)量估計(jì)為每年1.5萬t,自2016年以來,每年的增長率在5%左右[2]。目前,我國是全球最大的甜葉菊種植國、甜菊糖苷生產(chǎn)及出口國。伴隨著甜葉菊的大量種植、提取,產(chǎn)生大量的甜葉菊廢渣,將甜葉菊廢渣進(jìn)行簡單粗暴的堆積、燃燒、填埋處理不僅造成環(huán)境污染,還造成資源的極大浪費(fèi)[3-4]。甜葉菊廢渣富含黃酮類、萜類、寡糖和揮發(fā)油等活性物質(zhì)[5-7]。研究發(fā)現(xiàn),將甜葉菊廢渣進(jìn)行再提取,可得富含綠原酸、異綠原酸及其他酚類物質(zhì)的提取物,具有良好的抗氧化活性[8],應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中具有巨大潛能。富含綠原酸的植物提取物如金銀花、杜仲等的提取物,在畜禽養(yǎng)殖中具有良好的促生長及改善肉品質(zhì)的作用[9-12]。其他植物(如金銀花、杜仲)來源的綠原酸類成分中新綠原酸是主要有效成分,而甜葉菊來源的綠原酸中異綠原酸的占比明顯高于其他來源,抗氧化活性更高[13]。但是,甜葉菊來源的綠原酸在畜禽飼料中的應(yīng)用還較少有研究者關(guān)注。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),飼喂添加富含綠原酸類物質(zhì)的甜葉菊廢渣提取物的飼糧,可改善肥育豬生長性能、抗氧化活性及腸道菌群,該甜葉菊廢渣提取物應(yīng)用于斷奶仔豬飼糧的有效劑量為400 mg/kg[14-15]。本研究以前期研究結(jié)果為基礎(chǔ),選用4 000 mg/kg添加量為多倍劑量組,檢測斷奶仔豬生長性能、血常規(guī)及生化指標(biāo)、抗氧化活性、臟器指數(shù)和內(nèi)臟組織病理變化等,旨在評價(jià)甜葉菊廢渣提取物在斷奶仔豬飼糧中的耐受劑量。

1 材料與方法

1.1 甜葉菊廢渣提取物的有效成分

本研究使用的甜葉菊廢渣提取物是甜菊糖苷提取后的殘?jiān)?jīng)甲醇萃取、聚酰胺吸附和樹脂解析、極性大孔樹脂富集、結(jié)晶和再結(jié)晶等步驟制備而成。本試驗(yàn)用的甜葉菊廢渣提取物外觀為深褐色粉末,該產(chǎn)品含有16.66%異綠原酸A、1.62%異綠原酸B、7.36%異綠原酸C、13.69%綠原酸、2.00%新綠酸、1.68%隱綠原酸、1.30%奎尼酸、0.30%咖啡酸、0.60%咖啡酸乙酯、1.50%蘆丁、0.50%槲皮素、19.50%β-葡聚糖、1.50%低聚木糖、3.50%水分、6.50%粗灰分、1.70%粗蛋白質(zhì)和0.10%粗脂肪。綠原酸類物質(zhì)含量采用高效液相色譜(HPLC)方法檢測,水分、粗灰分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量分別參考國標(biāo)GB/T 6435—2014、GB/T 6438—2007、GB/T 6432—2018及GB/T 6433—2006檢測。其他有效成分檢測采用基于Thermo Q Exactive HF高分辨率質(zhì)譜法的非靶向篩選方法,有效成分檢測均為課題組自行檢測,具體方法詳情參考本課題組前期文獻(xiàn)[14]。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和試驗(yàn)飼糧

選用平均初始體重為(6.79±0.02) kg的21日齡健康杜×長×大斷奶仔豬108頭,采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),根據(jù)體重和性別隨機(jī)分為3組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6頭,公母各占1/2。試驗(yàn)采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加400、4 000 mg/kg甜葉菊廢渣提取物的試驗(yàn)飼糧。甜葉菊廢渣提取物有效成分按綠原酸類物質(zhì)當(dāng)量折算后,對照組為0,400 mg/kg甜葉菊廢渣提取物添加組為395.7 mg/kg,4 000 mg/kg甜葉菊廢渣提取物添加組為3 905.3 mg/kg?；A(chǔ)飼糧參照NRC(2012)營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)配制,制作成顆粒料后進(jìn)行飼喂?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1,試驗(yàn)期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content標(biāo)準(zhǔn)全消化道可消化磷 STTD P0.33標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化賴氨酸 SID Lys1.40標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化蛋氨酸 SID Met0.40標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化蘇氨酸 SID Thr0.82標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化色氨酸 SID Trp0.23標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化異亮氨酸 SID Ile0.72標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化纈氨酸 SID Val0.89

1.3 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所的白云動(dòng)物試驗(yàn)基地展開。試驗(yàn)豬舍內(nèi)安裝紅外保溫?zé)?將豬舍內(nèi)環(huán)境溫度維持在26～28 ℃。試驗(yàn)豬每天飼喂3次(07:00、12:00、17:00),添料量以料槽內(nèi)有少量剩料為準(zhǔn),每天準(zhǔn)確記錄每個(gè)重復(fù)的飼糧添加、剩余、損耗量及料槽內(nèi)清理的霉變料。試驗(yàn)前,清洗料槽和水槽,對豬舍進(jìn)行徹底消毒,對試驗(yàn)豬進(jìn)行常規(guī)免疫與驅(qū)蟲。所有試驗(yàn)豬自由飲水和采食。

1.4 檢測指標(biāo)

1.4.1 生長性能

分別于試驗(yàn)開始、第29天和結(jié)束時(shí)早上稱重,計(jì)算平均增重。試驗(yàn)過程中準(zhǔn)確記錄每個(gè)重復(fù)的采食量,記錄豬只的腹瀉情況,以計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比及腹瀉率。腹瀉率:每天早、晚2次觀察仔豬糞便情況,記錄每個(gè)重復(fù)腹瀉仔豬頭次。腹瀉評分參考表2,當(dāng)腹瀉評分為2或以上,認(rèn)為仔豬發(fā)生腹瀉,腹瀉率計(jì)算公式如下:

表2 腹瀉評分標(biāo)準(zhǔn)

腹瀉率(%)=[總腹瀉頭數(shù)/(仔豬頭數(shù)×

試驗(yàn)天數(shù))]×100。

1.4.2 血常規(guī)指標(biāo)

試驗(yàn)結(jié)束,每個(gè)重復(fù)挑選最接近該組平均體重的豬進(jìn)行前腔靜脈采血,采集1 mL血液于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管,并于24 h內(nèi)用BC-5000 Vet全自動(dòng)獸用血常規(guī)分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)采用五分類法分析血常規(guī)指標(biāo),包括白細(xì)胞數(shù)量(WBC)、紅細(xì)胞數(shù)量(RBC)、血紅蛋白(HGB)濃度、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞壓積(MCV)、平均血紅蛋白含量(MCH)、血小板數(shù)量(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板壓積(PVT)等。

1.4.3 血清生化指標(biāo)

前腔靜脈采集10 mL血液于非抗凝采血管,室溫靜置0.5 h后,4 ℃下3 000 r/min離心10 min,分離出血清,1.5 mL離心管分裝后液氮速凍,保存于-80 ℃。血清生化指標(biāo)采用VITAL全自動(dòng)生化分析儀(SELECTRA ProXL)檢測,均采用中生北控生物科技股份有限公司的試劑盒,參照試劑盒說明書測定。測定指標(biāo)包括總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(UREA)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TCHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽紅素(TBILI)含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)活性。

1.4.4 血清抗氧化指標(biāo)

血清總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及過氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒檢測,參照試劑盒說明書測定。

1.4.5 臟器指數(shù)

每個(gè)重復(fù)選取1頭最接近該組平均體重的仔豬進(jìn)行屠宰。屠宰豬注射戊巴比妥那麻醉后放血,處死后迅速打開腹腔,剝離內(nèi)臟,用吸水毛巾吸干血水稱重,記錄心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胰腺等的重量。

臟器指數(shù)(%)=(臟器重/宰前活重)×100。

1.4.6 組織病理

屠宰豬處死后迅速打開腹腔,剝離內(nèi)臟,無菌結(jié)扎胃、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸置于冰盒內(nèi)備用。取胃大彎處、近端十二指腸、遠(yuǎn)端回腸、中端直腸腸段約1.5 cm組織樣品,直接置于4%多聚甲醛;心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胸腺、胰腺、腸系膜淋巴結(jié)于相同位置均取1 cm3樣置于4%多聚甲醛,室溫固定過夜。采用常規(guī)石蠟切片,蘇木精-伊紅(HE)染色后鏡檢。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2019整理后,用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。評估組間差異前,采用Shapiro-Wilk檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的正態(tài)性。當(dāng)變量數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布時(shí),采用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-Wallis one-way ANOVA分析并用FDR進(jìn)行多重校正,當(dāng)數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布時(shí),采用one-way ANOVA分析并用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。以P<0.05為差異顯著,0.05≤P<0.10表示有差異顯著趨勢。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬生長性能的影響

如表3所示,在試驗(yàn)第28天和第42天,各組間斷奶仔豬體重均無顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)第1～28天、第1～42天,與對照組相比,添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量、料重比及腹瀉率等均無顯著影響(P>0.05)。

2.2 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血常規(guī)指標(biāo)的影響

如表4所示,與對照組相比,添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血常規(guī)指標(biāo)如白細(xì)胞數(shù)量、紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積、平均紅細(xì)胞壓積、平均血紅蛋白含量、血小板數(shù)量、平均血小板體積及血小板壓積等均無顯著影響(P>0.05)。

2.3 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

如表5所示,與對照組相比,添加400 mg/kg甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬各血清生化指標(biāo)如總蛋白、白蛋白、尿素氮、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總膽紅素含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性均無顯著影響(P>0.05);但是,添加4 000 mg/kg甜葉菊廢渣提取物可顯著提高血清堿性磷酸酶活性(P<0.05)。

表5 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

2.4 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

如圖1所示,與對照組相比,添加400 mg/kg甜葉菊廢渣提取物可顯著降低斷奶仔豬血清MDA含量并顯著提高T-SOD、CAT、GSH-Px活性(P<0.05);同時(shí),添加4 000 mg/kg甜葉菊廢渣提取物可顯著降低斷奶仔豬血清MDA含量并顯著提高T-SOD活性(P<0.05)。

數(shù)據(jù)柱標(biāo)注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.5 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬臟器指數(shù)的影響

如表6所示,與對照組相比,添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及胰腺等臟器指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。

表6 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬臟器指數(shù)的影響

2.6 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬內(nèi)臟組織病理的影響

如圖2所示,各組試驗(yàn)仔豬心肌結(jié)構(gòu)清楚,心肌纖維排列整齊,未見細(xì)胞異常;肝臟中肝小葉輪廓清晰,肝細(xì)胞排序呈放射狀,細(xì)胞核大小一致,未見橋接或片狀壞死,未見肝纖維化,未見異常病理改變;脾小結(jié)清晰可見,脾臟組織結(jié)構(gòu)清楚,未見其他特殊改變;肺臟組織結(jié)構(gòu)清楚,未見纖維化、出血,小動(dòng)脈和細(xì)支氣管無重構(gòu),肺泡腔無肺泡隔增厚等異常病變;腎臟組織結(jié)構(gòu)清楚,腎小球和腎小管清晰可見,未見腎小球纖維化,未見腎小管、間質(zhì)血管等出現(xiàn)特殊改變;胸腺中央小體清晰可見,胸腺結(jié)構(gòu)清楚,未見其他特殊改變;胰腺組織內(nèi)外分泌腺結(jié)構(gòu)清楚,胰島清晰可見,未見增生;淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)清楚,可見皮質(zhì)內(nèi)淋巴濾泡生發(fā)中心,未見其他特殊改變;胃黏膜各層結(jié)構(gòu)清楚,黏膜上皮細(xì)胞完整,主細(xì)胞和壁細(xì)胞清晰可見,未見增生、萎縮或潰瘍等;十二指腸黏膜上皮正常,有指狀突起的腸絨毛,固有層小腸腺,腺泡正常,黏膜下層有十二指腸腺,其中對照組腸道絨毛斷裂倒伏較嚴(yán)重,且腸壁內(nèi)側(cè)存在較厚黏液層,其余組絨毛斷裂倒伏狀況有所改善,但是高劑量組亦觀察到較厚黏液層;回腸黏膜上皮正常,其中對照組腸道絨毛斷裂倒伏較嚴(yán)重;直腸結(jié)構(gòu)正常,4層結(jié)構(gòu)明顯,柱狀上皮細(xì)胞排列整齊,有大量的杯狀細(xì)胞,固有層有大腸腺。經(jīng)與對照組比對,未發(fā)現(xiàn)高劑量組斷奶仔豬內(nèi)臟細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)上的異常。

圖2 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬內(nèi)臟組織病理的影響

3 討 論

3.1 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬生長性能的影響

本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),飼糧添加100 mg/kg的甜葉菊廢渣提取物有提高生長育肥豬平均日增重、平均日采食量的趨勢,并且可顯著提高生長育肥豬胴體重[14];而在飼糧中添加100～400 mg/kg甜葉菊廢渣提取物不影響斷奶仔豬生長性能,但是400 mg/kg添加量可顯著改善其抗氧化活性及腸道菌群[15]。本試驗(yàn)的展開以本課題組前期研究結(jié)果為基礎(chǔ),以400 mg/kg為有效組,以4 000 mg/kg添加組為多倍劑量組,本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),飼糧中甜葉菊廢渣提取物添加量提高至4 000 mg/kg對斷奶仔豬生長性能亦無顯著影響。但是有研究指出,在飼糧中添加1 000 mg/kg綠原酸可提高仔豬的平均日增重,降低料重比[17],此文獻(xiàn)中使用的綠原酸產(chǎn)品為綠原酸純品,而本研究中使用的甜葉菊廢渣提取物是一個(gè)混合物,雖然綠原酸類物質(zhì)的總量高達(dá)43.28%,但是以異綠原酸A為主,含量為16.66%,綠原酸含量僅為13.69%,這可能是本研究結(jié)果與前人研究結(jié)果存在差異的原因之一。也有研究指出,飼糧中添加杜仲葉提取物(主要成分為多糖、黃酮類化合物和綠原酸)對仔豬生長性能無顯著影響[18]。由于有效成分組成不同,機(jī)體代謝途徑會(huì)有差異,例如綠原酸經(jīng)口服后小部分在胃和小腸中被吸收,在小腸中綠原酸被糖苷酶和酯酶分解生成咖啡酸和奎寧酸,其中部分咖啡酸經(jīng)肝腸循環(huán)進(jìn)入肝臟被轉(zhuǎn)化為阿魏酸、異阿魏酸和二氫阿魏酸,最終形成相應(yīng)的硫酸鹽代謝產(chǎn)物;大部分綠原酸未被胃和小腸吸收,直接進(jìn)入大腸,在腸道菌群作用下生成咖啡酸和奎寧酸,其中咖啡酸或者經(jīng)肝腸循環(huán)代謝,或者在腸道中發(fā)生葡萄糖苷酸化代謝,而奎寧酸則在腸道菌群代謝下形成馬尿酸和香豆素[19-22]。異綠原酸A在機(jī)體內(nèi)主要經(jīng)由水解、氫化、脫氫、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化等途徑代謝,異綠原酸A在腸道中可發(fā)生葡萄糖苷酸化反應(yīng)生成異綠原酸A葡萄糖醛酸結(jié)合物,或者經(jīng)水解脫去1分子咖啡?；纬蓡慰Х弱；鼘幩?單咖啡?；鼘幩峥蛇M(jìn)一步發(fā)生氫化、脫氫及甲基化形成相應(yīng)的氫化、脫氫及甲基化產(chǎn)物,單咖啡?；鼘幩徇€可進(jìn)行進(jìn)一步水解脫去1分子咖啡酰基形成咖啡酸和奎寧酸,形成的咖啡酸和奎寧酸代謝與前述的綠原酸代謝路徑相同[23-24]。由于植物提取物來源不同,有效成分組成各異、動(dòng)物所處生長階段不同等,都會(huì)造成植物提取物在提高動(dòng)物生長性能方面的作用存在爭議。

3.2 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血常規(guī)及生化指標(biāo)的影響

血液常規(guī)和生化指標(biāo)對豬的疾病診斷和生長性能有重要的參考價(jià)值。血常規(guī)指標(biāo)與機(jī)體新陳代謝、健康狀況密切相關(guān),血液中各類細(xì)胞組分的變化可用于診斷動(dòng)物的健康狀況[25]。本研究發(fā)現(xiàn),添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血常規(guī)指標(biāo)均無顯著影響,說明試驗(yàn)豬只均健康,且添加高劑量甜葉菊廢渣提取物也并未對豬只健康狀況產(chǎn)生負(fù)面影響。血清中堿性磷酸酶的活性反映了脂類的代謝效率,動(dòng)物生長性能受堿性磷酸酶活性的影響,有報(bào)道稱,動(dòng)物日增重與血清堿性磷酸酶活性呈正相關(guān)[26]。飼糧中添加甘草黃酮粉可以提高斷奶仔豬血清堿性磷酸酶活性[27]。而本研究也發(fā)現(xiàn),添加高劑量甜葉菊廢渣提取物可顯著提高斷奶仔豬血清堿性磷酸酶活性,可能與其促生長潛力有關(guān)。

3.3 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

Zhao等[8]發(fā)現(xiàn),甜葉菊廢渣提取物富含綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、槲皮苷和槲皮素等抗氧化活性良好的一類酚類及黃酮類物質(zhì),占比達(dá)到39.83%,其中以異綠原酸C含量最高[(126.7±1.27) mg/g],隨后是咖啡酸[(97.2±0.36) mg/g]和綠原酸[(46.5±0.29) mg/g][28],可通過激活蛋白激酶B(Akt)/核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)/血紅素加氧酶-1(HO-1)通路,清除機(jī)體多種自由基,顯著提高氧化應(yīng)激小鼠血清中T-AOC和T-SOD活性,降低MDA含量[29]。由于提取工藝不同,本研究中使用的甜葉菊廢渣提取物所含綠原酸類組成與含量與其略有不同。本研究中使用的甜葉菊廢渣提取物主要有效成分也是綠原酸類物質(zhì),所含綠原酸類物質(zhì)含量為43.28%,其中以異綠原酸A含量最高,含量為16.66%。酚類物質(zhì)所含的酚羥基與自由基發(fā)生反應(yīng),從而發(fā)揮其清除自由基和抗氧化的生物活性,且抗氧化活性強(qiáng)弱由羥基位置和數(shù)量決定,從這個(gè)角度出發(fā),異綠原酸A的抗氧化活性會(huì)優(yōu)于綠原酸[30]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),添加甜葉菊廢渣提取物于生長育肥豬或者斷奶仔豬,均可提高其機(jī)體抗氧化活性,降低MDA含量,并提高SOD、CAT、GSH-Px等抗氧化酶的活性[14-15]。同樣的,本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高劑量甜葉菊廢渣提取物亦可改善斷奶仔豬血液抗氧化性能,顯著降低血清MDA含量和提高T-SOD活性。

3.4 飼糧添加甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬臟器指數(shù)及組織病理的影響

器官指數(shù)對健康動(dòng)物來說相對穩(wěn)定,其大小的變化能反映器官充血、增生或萎縮及退行性變化等。此外,器官指數(shù)也可旁證組織形態(tài)學(xué)改變的可能性。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),生長育肥豬飼糧添加100～800 mg/kg甜葉菊廢渣提取物未對心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟等臟器指數(shù)造成顯著影響[14]。同樣的,本研究也發(fā)現(xiàn),添加甜葉菊廢渣提取物對心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和胰腺等的臟器指數(shù)無顯著影響,說明即使添加高劑量甜葉菊廢渣提取物也未對斷奶仔豬內(nèi)臟器官的正常發(fā)育產(chǎn)生影響。并且,添加甜葉菊廢渣提取物組的斷奶仔豬各器官的組織病理切片與對照組差異不大,并無細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)上的異常,因此添加高劑量甜葉菊廢渣提取物對組織病理特征無明顯影響。斷奶應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致仔豬腸道絨毛倒伏、斷裂[31],綠原酸可以改善斷奶仔豬腸道形態(tài)[32-33],提高腸道緊密連接蛋白表達(dá),降低腸道滲透性,改善腸道菌群,增加有益菌如乳桿菌的豐度,降低有害菌如大腸桿菌的豐度[32]。與前人研究結(jié)果一致,本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn),飼糧中添加甜葉菊廢渣提取物顯著提高了腸道有益菌普氏菌屬及薔薇菌屬的相對豐度[15]。而本研究發(fā)現(xiàn),添加高劑量甜葉菊廢渣提取物對斷奶仔豬腸道形態(tài)有一定的改善作用。本課題組前期試驗(yàn)中甜葉菊廢渣提取物的添加范圍為100～400 mg/kg,可能是由于添加量不同導(dǎo)致對腸道損傷緩解效果的不同。

4 結(jié) 論

綜上所述,飼糧中添加甜葉菊廢渣提取物可改善斷奶仔豬抗氧化性能,且對斷奶仔豬生長性能、血常規(guī)指標(biāo)、臟器指數(shù)等均無顯著影響,組織病理學(xué)觀測未發(fā)現(xiàn)心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟等有明顯病理變化。因此,斷奶仔豬可耐受飼糧中4 000 mg/kg甜葉菊廢渣提取物。