馬煜磊 李詩(shī)函

(南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第一附屬醫(yī)院,河南 南陽(yáng) 473000)

子宮內(nèi)膜癌多發(fā)于圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后女性,在老年人群中發(fā)病率較高〔1〕。早期診治是改善子宮內(nèi)膜癌患者的主要途徑;研究報(bào)道,國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)分期Ⅰ～Ⅱ期的子宮內(nèi)膜癌患者5年生存率為75%～90%,Ⅲ期、Ⅳ期患者5年生存率降低至56%～68%、15%～24%〔2〕。老年子宮內(nèi)膜癌患者因身體功能下降,對(duì)治療耐受程度較差,術(shù)后復(fù)發(fā)率更高,因此早期診治更為關(guān)鍵〔3〕。甲殼質(zhì)酶蛋白(YKL)-40作為一種抗細(xì)胞凋亡蛋白,在卵巢癌細(xì)胞、非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的增殖、分化、凋亡中發(fā)揮促進(jìn)作用〔4,5〕。人第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因(PTEN)是近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因,在直腸癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中表達(dá)缺失〔6,7〕。半乳激素(Gal)-9可通過(guò)抑制人體免疫功能來(lái)誘發(fā)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸〔8〕。骨橋蛋白是一種非膠原蛋白,表達(dá)于多種惡性腫瘤組織中,能夠介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞黏附、轉(zhuǎn)移和侵襲過(guò)程〔9〕。目前關(guān)于YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白在老年子宮內(nèi)膜癌患者中表達(dá)特點(diǎn)的研究仍十分少見(jiàn)。本研究旨在探討老年子宮內(nèi)膜癌患者血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平變化及意義。

1 對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象 選取2018年2月至2019年5月南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等子科學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的老年子宮內(nèi)膜癌患者70例為子宮內(nèi)膜癌組。入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合2010年《臨床疾病診斷與療效判斷標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)子宮內(nèi)膜癌的診斷標(biāo)準(zhǔn);②年齡≥60歲,符合手術(shù)指征并接受手術(shù)治療,術(shù)后病理檢查確診為子宮內(nèi)膜癌;③溝通交流能力正常,配合完成3年隨訪研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前接受放化療或激素治療者;②存在自身免疫性疾病、血液疾病、嚴(yán)重感染性疾病者;③已出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者。平均年齡(71.64±6.90)歲;另收集同期健康體檢者40例為對(duì)照組,均為女性,無(wú)嚴(yán)重慢性病,平均年齡(70.28±4.21)歲。子宮內(nèi)膜癌組與對(duì)照組年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究符合本院倫理委員會(huì)相關(guān)要求,并通過(guò)倫理審批,患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2標(biāo)本采集 老年子宮內(nèi)膜癌患者分別于手術(shù)前1～2 d、手術(shù)后7 d,對(duì)照組健康體檢時(shí),采集肘靜脈血5 ml,置于無(wú)抗凝劑的真空采血管中,觀察并去除發(fā)生溶血的標(biāo)本,4 ℃冷藏保存,24 h內(nèi)2 500 r/min 4 ℃恒溫離心10 min,收集上層血清,室溫下分裝到聚丙烯EP管中,-80 ℃保存待測(cè)。

1.3血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平檢測(cè) 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。檢測(cè)原理：捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,加入標(biāo)本和參考品,白細(xì)胞介素與捕獲抗體特異性結(jié)合后洗滌;使未結(jié)合部分去除后加入抗人白細(xì)胞介素抗體,形成免疫復(fù)合物;將未結(jié)合部分洗滌去除,加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的親和素,生物素與親和素結(jié)合形成復(fù)合物,再次洗滌;將未結(jié)合部分去除后加入顯色劑,與樣品中的白細(xì)胞介素形成免疫復(fù)合物,加入終止液,藍(lán)色物質(zhì)變成黃色,使用酶標(biāo)儀測(cè)定450 nm處的吸光度值。

1.4隨訪 通過(guò)電話隨訪、委托代隨訪、門(mén)診復(fù)診、住院復(fù)診等方法,術(shù)后對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者進(jìn)行3年隨訪,記錄生存情況,分為預(yù)后良好組(生存)、預(yù)后不良組(死亡)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS23.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、單因素方差分析、Cox回歸分析受試者工作特征(ROC)曲線分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較 子宮內(nèi)膜癌組血清YKL-40、Gal-9、骨橋蛋白水平明顯高于對(duì)照組,PTEN水平明顯低于對(duì)照組(P<0.01);術(shù)后老年子宮內(nèi)膜癌患者血清YKL-40、Gal-9、骨橋蛋白水平明顯低于術(shù)前,PTEN水平明顯高于術(shù)前(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較

2.2不同臨床病理特征老年子宮內(nèi)膜癌患者術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較 術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平在不同組織分化程度、FIGO分期、肌層浸潤(rùn)、病灶范圍、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的老年子宮內(nèi)膜癌患者之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同臨床病理特征老年子宮內(nèi)膜癌患者術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較

2.3不同預(yù)后老年子宮內(nèi)膜癌患者術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較 預(yù)后不良組術(shù)前血清YKL-40、Gal-9、骨橋蛋白水平明顯高于預(yù)后良好組,PTEN水平明顯低于預(yù)后良好組(P<0.01)。見(jiàn)表3。

表3 不同預(yù)后老年子宮內(nèi)膜癌患者術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平比較

2.4老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的影響因素 以老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后為因變量,以血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白、組織分化程度、FIGO分期、肌層浸潤(rùn)、病灶范圍、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況為自變量,進(jìn)行Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析,結(jié)果顯示,YKL-40、PTEN、Gal-9、FIGO分期、肌層浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素(P<0.01)。見(jiàn)表4。

表4 老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后影響因素的Cox回歸分析

2.5術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析顯示,術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后均具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值(P<0.05);其中術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白聯(lián)合檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值最高,靈敏度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值明顯高于各指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表5,圖1。

圖1 術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值的ROC曲線

表5 術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病早期癥狀不明顯,多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期,在增加治療難度的同時(shí)也對(duì)預(yù)后產(chǎn)生不良影響。手術(shù)是當(dāng)前治療子宮內(nèi)膜癌最有效的手段,早期確診后根據(jù)美國(guó)腫瘤綜合協(xié)作網(wǎng)指南中推薦的全面分期手術(shù),能夠?qū)⒒颊?年生存率提升到80%以上〔10〕。超聲造影、磁共振成像、宮腔鏡檢測(cè)、子宮內(nèi)膜活檢是目前主要的診斷手段,但超聲造影對(duì)醫(yī)生技術(shù)要求高,操作負(fù)責(zé)且時(shí)間長(zhǎng)〔11〕;磁共振成像檢查費(fèi)用高;宮腔鏡無(wú)法判斷腫瘤浸潤(rùn)深度;子宮內(nèi)膜活檢屬于有創(chuàng)操作;上述檢查方法均存在一定局限性。血清學(xué)檢查具有操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉、可重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),適用于腫瘤的早期篩查和病情評(píng)估。

YKL-40屬于糖類(lèi)水解酶18家族成員,參與人體細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、轉(zhuǎn)移和凋亡過(guò)程。研究報(bào)道,YKL-40作為一種抗細(xì)胞凋亡蛋白,可激活白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-α、核因子-κB來(lái)促進(jìn)細(xì)胞增殖,分子機(jī)制可能通過(guò)PI3Ks和PKB磷酸化來(lái)實(shí)現(xiàn)〔12〕。PTEN可通過(guò)調(diào)控腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化來(lái)參與細(xì)胞增殖、遷移等過(guò)程;近年來(lái)研究者從細(xì)胞水平上證實(shí)了PTEN與腫瘤細(xì)胞凋亡的關(guān)系,與調(diào)控凋亡相關(guān)基因B淋巴細(xì)胞瘤-2、促凋亡基因Bax、半胱天冬酶-3基因表達(dá)有關(guān),具有抑癌基因活性〔13〕。Gal-9屬于半乳凝素,能夠特異性識(shí)別并結(jié)合人類(lèi)β-半乳糖苷,發(fā)揮調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、黏附的作用。研究顯示,Gal-9能夠抑制人體的免疫反應(yīng),降低對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視水平,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與發(fā)展〔14〕。骨橋蛋白是存在于人體組織和細(xì)胞中的分泌型磷酸化糖蛋白,參與腫瘤浸潤(rùn)、免疫調(diào)節(jié)等多種生理過(guò)程〔15〕。

本研究結(jié)果說(shuō)明血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平變化可作為評(píng)估老年子宮內(nèi)膜癌患者的臨床病理特征和預(yù)后的參考指標(biāo),有助于改善臨床預(yù)后。ROC曲線分析顯示,術(shù)前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白對(duì)老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后均具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值,聯(lián)合檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值最高。

綜上,老年患者身體功能均存在不同程度衰退,手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)術(shù)后康復(fù)和預(yù)后水平均造成不良影響,參考術(shù)前患者血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨橋蛋白水平來(lái)評(píng)估病情嚴(yán)重程度和治療預(yù)后,對(duì)手術(shù)方案選擇和術(shù)后綜合治療制定具有重要指導(dǎo)意義,在保證療效的同時(shí)將治療相關(guān)副作用降至最低,最大程度改善老年子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后和生存質(zhì)量。