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        黑順片-大黃對藥順勢給藥和逆勢給藥對健康大鼠生理指標的影響▲

        2023-11-07 12:13:06甘永金李羨筠梁丹玉黃艷妮凌健安藍保強盤葉花農(nóng)云開蔣盛軍
        廣西醫(yī)學 2023年16期
        關(guān)鍵詞:中藥

        甘永金 李羨筠 梁丹玉 黃艷妮 凌健安 藍保強 盤葉花 潘 東 農(nóng)云開 蔣盛軍

        (1 廣西壯族自治區(qū)職業(yè)病防治研究院職業(yè)衛(wèi)生與毒性評價所,廣西南寧市 530021; 2 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院制劑中心,廣西南寧市 530022)

        陰陽是自然界的一般規(guī)律,人體也隨著自然界的陰陽之氣存在陰陽變化,早上和中午人體氣血升發(fā)屬陽盛,晚上氣血降沉為陰盛。中醫(yī)認為,在治療疾病時,用藥應(yīng)順人體之氣[1-2]。陰陽五行理論是中醫(yī)理論的根基之一[3],而中藥亦有陰陽之分[4-5]。依此理論,蔣盛軍博士提出了中藥應(yīng)按陰陽分藥并分時服用的理論,根據(jù)該理論施藥見效快,用藥量少,毒副作用更輕[6-7]。黑順片(附子)辛溫,屬陽藥,易在人體一天中陽氣較盛的上午服用;大黃苦寒,屬陰藥,易在陰盛的下午服用[8-9]。本研究為進一步驗證中藥陰陽分藥并分時服用的理論,觀察黑順片和大黃順勢給藥和逆勢給藥對大鼠的影響。

        1 材料與方法

        1.1 藥物、試劑和儀器 黑順片中藥配方顆粒(每袋0.5 g,相當于飲片5.5 g)和大黃中藥配方顆粒(每袋0.4 g,相當于飲片2.8 g)購自四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司。血細胞分析儀(型號:BC-5000)、全自動生化分析儀(型號:BS-600)。所用檢測試劑盒購自北京邁瑞醫(yī)療器械有限公司。

        1.2 藥物配制 黑順片中藥配方顆粒溶液的配制:1 g黑順片中藥配方顆粒相當于11 g黑順片飲片劑量。將4.295 g黑順片中藥配方顆粒溶解于450 mL超純水中,配制成0.105 g/mL黑順片中藥配方顆粒溶液。大黃中藥配方顆粒溶液的配制:1 g大黃中藥配方顆粒相當于7 g大黃飲片劑量。將13.5 g大黃中藥配方顆粒溶解于450 mL超純水中,配制成0.21 g/mL大黃中藥配方顆粒溶液。黑順片中藥配方顆粒和大黃中藥配方顆?;旌先芤旱呐渲?將4.295 g黑順片中藥配方顆粒和13.5 g大黃中藥配方顆粒溶解于450 mL超純水中,配制成(0.105 g黑順片中藥配方顆粒+0.21 g大黃中藥配方顆粒)/mL混合溶液。上述藥物溶液均置于4 ℃冰箱保存。

        1.3 實驗動物及分組 48只無特定病原體級SD大鼠購自長沙市天勤生物技術(shù)有限公司,實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK(湘)2019-0014,檢疫觀察5 d。雌雄各半,鼠齡6~8周,體重170~190 g。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后,按體重(空腹)排序,采用計算機隨機法分為順勢飼喂組、逆勢飼喂組、混合飼喂組、對照組,各12只,每組雌雄各半,按組分籠飼養(yǎng)。

        1.4 干預(yù)方法 由于大鼠生活習慣為白天睡覺夜間活動,因此其陰陽規(guī)律與人類相反[10],即大鼠的順勢給藥是早上服用陰性藥物(大黃),晚上服用陽性藥物(黑順片),逆勢給藥則相反。大鼠以灌胃方式給藥,每周給藥5 d(周一至周五),連續(xù)給藥6周。(1)逆勢飼喂組:早上 9:00~9:30給予黑順片中藥配方顆粒溶液灌胃,下午16:30~17:00給予大黃中藥配方顆粒溶液灌胃,每次灌胃量為0.75 mL/100 g體重。(2)順勢飼喂組:早上 9:00~9:30給予大黃中藥配方顆粒溶液灌胃,下午16:30~17:00給予黑順片中藥配方顆粒溶液灌胃,每次灌胃量為0.75 mL/100 g體重。(3)混合飼喂組:給予黑順片中藥配方顆粒和大黃中藥配方顆?;旌先芤汗辔?每次灌胃量為0.75 mL/100 g 體重,分兩次給藥,時間為早上 9:00~9:30和下午16:30~17:00。(4)對照組: 早上 9:00~9:30和下午16:30~17:00均給予灌胃超純水,每次灌胃量為0.75 mL/100 g體重。

        1.5 觀察指標

        1.5.1 行為狀態(tài)觀察:分別于飼喂第1天、第10天、第20天、第30天、第45天(給藥6周后再觀察3 d)時觀察各組大鼠的皮膚毛發(fā)、行為狀態(tài)、興奮程度、激怒反應(yīng)、睡眠狀態(tài)、大便狀態(tài)。

        1.5.2 采食量測定:分別于開始飼喂后第2周、第4周、第6周的周一、周三、周五測定一次采食量。早上 9:00~9:30在每個籠內(nèi)放置稱量過的飼料,次日早上9:00~9:30稱量剩余飼料。計算每只大鼠日均采食量,即每組大鼠每日的采食總量/該組大鼠例數(shù)。

        1.5.3 體重測定:分別于飼喂后第2周、第4周、第6周的周一、周三、周五定時稱量大鼠體重一次。

        1.5.4 血常規(guī)分析和檢測:飼喂后第45天采集各組大鼠腹主動脈血7 mL, 其中2 mL血標本用于血常規(guī)檢測,剩余的5 mL血標本以2 000 r/min離心10 min,獲取血清用于生化指標的檢測,包括堿性磷酸酶、三酰甘油、 總膽固醇、 尿素、 空腹血糖、白蛋白、AST。

        1.5.5 臟器外觀及臟器指數(shù):飼喂后第45天用20 mL/L異氟烷麻醉大鼠后,取各組大鼠的心、肝、脾、肺、腎、胃組織,觀察其是否有充血、水腫及其他器質(zhì)性病變等,計算臟器系數(shù),臟器系數(shù)(%)=臟器重量/動物體重×100%。臟器系數(shù)增大,表示臟器充血、水腫或增生肥大,臟器系數(shù)減小,表示臟器萎縮及其他退行性改變。

        1.6 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計學分析。正態(tài)分布的計量資料以(x±s)表示,多組間比較采用方差分析,進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 4組大鼠行為狀態(tài)的情況 實驗期間,各組大鼠的皮膚毛發(fā)、行為狀態(tài)、興奮程度、激怒反應(yīng)、睡眠狀態(tài)、大便狀態(tài)均未見明顯改變。

        2.2 不同時間點4組大鼠日均采食量的比較 4組大鼠在各個時間段的日均采食量差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。

        表1 不同時間點4組大鼠日均采食量的比較(x±s,g)

        2.3 不同時間點4組大鼠體重的比較 飼喂第2周、第4周,4組大鼠體重差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。飼喂第6周,4組大鼠體重差異具有統(tǒng)計學意義,其中,順勢飼喂組、混合飼喂組雌性大鼠體重低于逆勢飼喂組,逆勢飼喂組、順勢飼喂組和混合飼喂組雄性大鼠的體重高于對照組(P<0.05),見表2。

        表2 不同時間點4組大鼠體重的比較(x±s,g)

        2.4 4組大鼠臟器系數(shù)的比較 飼喂后第45天,4組雌性、雄性大鼠心、肝、肺、腎、胃臟器系數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);4組雌性大鼠脾臟臟器系數(shù)差異具有統(tǒng)計學意義,其中逆勢飼喂組雌性大鼠脾臟臟器系數(shù)高于對照組(P<0.05),見表3。

        表3 4組大鼠臟器系數(shù)的比較(x±s,%)

        2.5 4組大鼠血常規(guī)指標的比較 飼喂后第45天,4組大鼠的白細胞計數(shù)、中性粒細胞計數(shù)、淋巴細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);飼喂后第45天,4組雌性大鼠的單核細胞計數(shù),雌性、雄性大鼠的嗜酸性粒細胞計數(shù)差異具有統(tǒng)計學意義,其中,順勢飼喂組和混合飼喂組雌性大鼠的單核細胞計數(shù)和嗜酸性粒細胞計數(shù)高于對照組,逆勢飼喂組雌性大鼠嗜酸性粒細胞計數(shù)高于對照組,順勢飼喂組和混合飼喂組雄性大鼠的嗜酸性粒細胞計數(shù)低于對照組(P<0.05),見表4。

        表4 4組大鼠血常規(guī)指標的比較(x±s)

        2.6 4組大鼠血生化指標的比較 飼喂后第45天,4組大鼠血清堿性磷酸酶、三酰甘油、尿素、空腹血糖、白蛋白、AST水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);但4組雄性大鼠血清總膽固醇水平差異具有統(tǒng)計學意義,混合飼喂組雄性大鼠的血清總膽固醇水平高于對照組(P<0.05),見表5。

        表5 4組大鼠血生化指標的比較(x±s)

        3 討 論

        陰陽五行是中醫(yī)理論的核心之一,體現(xiàn)中醫(yī)的辨證論治思想。中醫(yī)認為,男為陽,女為陰;氣為陽,血為陰;疾病亦分陰陽,如發(fā)熱和惡寒同時并存屬陽,不發(fā)熱,只是惡寒屬陰[3]。中藥的藥性和用藥時辰也有陰陽之分,《素問·疏五過論》[1]:“圣人之治病也,必知天地陰陽四時經(jīng)紀?!奔粗尾⌒枰勒贞庩査臅r。目前,陰陽五行理論在現(xiàn)代醫(yī)學領(lǐng)域研究中逐步得到了印證[11-15]。本文采用中醫(yī)理論中經(jīng)典的寒熱配伍藥對黑順片和大黃[16],以大鼠為研究對象,分陽時(上午)和陰時(下午)給藥,探究順勢給藥和逆勢給藥對大鼠的影響。

        本研究結(jié)果顯示,給藥第6周,逆勢飼喂組雌性大鼠體重高于順勢飼喂組,而逆勢飼喂組和順勢飼喂組雄性大鼠體重均高于對照組(P<0.05)。中醫(yī)認為,肥胖多由痰濕引起,逆勢給藥可能導(dǎo)致大鼠的陰陽失衡,氣血運行不暢,痰濕阻絡(luò),血行不暢,進而引起體重增加。而順勢飼喂組中,雖然分藥分時飼喂黑順片中藥配方顆粒溶液和大黃中藥配方顆粒溶液,黑順片的溫熱藥效可以抵消大黃部分寒冷藥效,但無法抵消大黃導(dǎo)致的脾胃虛寒,氣滯血瘀而引起的體重升高,因此順勢飼喂組體重高于對照組。本研究結(jié)果還顯示,逆勢飼喂組雌性大鼠脾臟臟器系數(shù)高于對照組(P<0.05),表明逆勢給藥可造成大鼠的脾臟瘀血,脾虛濕困的病機。而本研究中不同性別大鼠結(jié)果的差異可能與不同性別大鼠對藥物的敏感性不同有關(guān),因中藥起效緩慢,我們認為,在延長用藥時間后,不同性別大鼠對藥物的反應(yīng)可能表現(xiàn)出更為相似的變化。以上結(jié)果可以初步推測出黑順片中藥配方顆粒和大黃中藥配方顆粒的分藥分時給藥可影響大鼠的氣血運行,逆勢給藥可造成一定的氣滯血瘀而增加體重,該結(jié)果可以初步驗證中醫(yī)陰陽理論中,分藥分時給藥的理論。

        本研究結(jié)果顯示,順勢飼喂組和混合飼喂組雌性大鼠的單核細胞計數(shù)和嗜酸性粒細胞計數(shù)高于對照組,順勢飼喂組和混合飼喂組雄性大鼠的嗜酸性粒細胞計數(shù)低于對照組(P<0.05),提示順勢給予黑順片中藥配方顆粒和大黃中藥配方顆??梢蕴岣叽笫蟮拿庖吡?這也與相關(guān)文獻[17]報告結(jié)果相符。本研究還發(fā)現(xiàn),混合飼喂組雄性大鼠的血清總膽固醇水平高于對照組(P<0.05),提示混合給藥可能導(dǎo)致一定的氣滯血瘀,從而導(dǎo)致體內(nèi)膽固醇的累積,但逆勢給藥對膽固醇影響不明顯的原因有待進一步研究。而不同性別大鼠研究結(jié)果的差異可能與研究過程中大鼠的性成熟,性激素水平變化,以及所選動物種類的習性有關(guān)。未來可選擇月齡較小的大鼠或延長用藥時間來進一步驗證該結(jié)果。

        綜上所述,逆勢給藥可引起大鼠脾臟淤血,混合給藥可引起大鼠血清總膽固醇水平升高,兩者均可影響大鼠的體重,存在一定弊端,而順勢給藥可以增加大鼠免疫系統(tǒng)的活力。本研究結(jié)果可為陰陽嚴重分離的慢性疾病如慢性肺炎、慢性腎炎、慢性肝炎、慢性心衰及慢性胃腸炎等患者提供用藥指導(dǎo)。但本研究采用的是健康大鼠,而臨床上的患者多為陰陽失衡,其對藥物的分時給藥反應(yīng)可能會有差異,相關(guān)結(jié)果與結(jié)論還需進一步研究。將來可選擇有一定中醫(yī)證型的大鼠作為研究對象,觀察基于陰陽理論進行分藥分時給藥對疾病的治療效果。

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