賈聿明，葉 增，鄧艷麗，李勝超，張志磊，王 超，徐曉武，秦 毅#，彭 利#

1. 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院肝膽外科，河北 石家莊 050000；

2. 復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院胰腺外科，復(fù)旦大學(xué)胰腺腫瘤研究所，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；

3. 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 050000

胰腺癌惡性程度極高，被稱為“癌中之王”［1］。由于多數(shù)患者就診時已處于晚期，從而失去了手術(shù)機(jī)會。對于這些患者，以化療為主的全身治療成為胰腺癌的重要治療方法，但效果不佳。多數(shù)化療藥物通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡起到抗腫瘤作用，但是腫瘤耐藥成為化療效果欠佳乃至治療失敗的主要原因。

細(xì)胞的死亡方式有多種，包括凋亡、鐵死亡、壞死、焦亡等，其中焦亡可能為腫瘤治療帶來新的突破［2-3］。焦亡是一種由焦孔素（gasdermin，GSDM）蛋白介導(dǎo)的程序性死亡方式，常伴有炎癥和免疫反應(yīng)［4］。GSDM蛋白家族包含GSDMD、GSDME等多種蛋白，GSDM蛋白家族是由C端和N端結(jié)構(gòu)域相連，C端與N端的結(jié)合可以抑制其活性，當(dāng)該蛋白被切割后，釋放的N末端可以誘導(dǎo)質(zhì)膜穿孔發(fā)生細(xì)胞焦亡［5］。在腫瘤細(xì)胞中，已有研究［6-9］證實(shí)，GSDME可以介導(dǎo)多種化療藥物以及免疫治療引起的腫瘤細(xì)胞焦亡。研究［10］發(fā)現(xiàn)，GSDME是抗腫瘤藥物誘導(dǎo)癌細(xì)胞發(fā)生焦亡或凋亡的“切換按鈕”，即在GSDME高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞中，化療藥物可誘導(dǎo)發(fā)生焦亡，否則只能發(fā)生凋亡。紫杉醇是治療胰腺癌的常用藥物，可以引起胰腺癌細(xì)胞的凋亡［11］，已有研究［7］證實(shí)，紫杉醇可以引起GSDME介導(dǎo)的肺癌細(xì)胞的焦亡，在胰腺癌中，紫杉醇是否可以誘導(dǎo)焦亡尚需進(jìn)一步研究。

FBW7基因是一種抑癌基因，該基因功能喪失會導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定和腫瘤發(fā)生［12］。FBW7通過促進(jìn)原癌基因的降解可以促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡并抑制增殖［12］。研究［13］發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)BW7可以通過鐵死亡方式增強(qiáng)胰腺癌的化療效果。

本研究旨在探索FBW7基因?qū)σ认侔┙雇龅挠绊懠捌錂C(jī)制，旨在為胰腺癌的綜合治療提供新的思路。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)試劑

人胰腺癌細(xì)胞系PANC-1獲自美國典型培養(yǎng)物保藏中心（American Type Culture Collection，ATCC），并于2015年通過DNA指紋鑒定，并在收到后6個月內(nèi)在本實(shí)驗(yàn)室傳代。DMEM培養(yǎng)基、10%胎牛血清、胰蛋白酶、青-鏈霉素和磷酸鹽緩沖生理鹽水（phosphate-buffered saline，PBS）均購自美國Gibco公司，紫杉醇（A601183-0100）購自生工生物工程（上海）有限公司，細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）購自日本同仁化學(xué)研究所，APC膜聯(lián)蛋白Ⅴ試劑盒購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司，CytoTox 96 NonRadioactive細(xì)胞毒性檢測試劑盒購自美國Promega公司，LipofectamineTM3000和TRIzol試劑購自美國Invitrogen公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒和實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）試劑盒購自日本TaKaRa公司，二辛可寧酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量試劑盒購自上海雅酶生物科技有限公司，F(xiàn)BW7抗體購自美國Proteintech公司，GSDME抗體購自英國Abcam公司，β-actin、caspase-3、活化的caspase-3（active-caspase-3）抗體及辣根過氧化物標(biāo)記二抗購自美國Abclonal公司，乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）檢測試劑盒購自生工生物工程（上海）有限公司。

1.2 臨床標(biāo)本

收集2017—2021年于復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院行手術(shù)切除或活檢的30例胰腺癌患者的癌組織（由復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院組織庫保存），其中男性17例，女性13例，年齡44 ～ 83歲。所有患者術(shù)前均未接受化療、放療或免疫治療。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染

采用含10%胎牛血清、青-鏈霉素的DMEM高糖培養(yǎng)基，將細(xì)胞置于37 ℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞貼壁生長融合度達(dá)80%時，加入胰蛋白酶消化并傳代。取對數(shù)生長期的PANC-1細(xì)胞，消化后接種于6孔板中培養(yǎng)過夜，加入過表達(dá)FBW7WT和FBW7T205A慢病毒載體pCDH-CMV-MCS-EF1-puro及其對照病毒（LVNC）轉(zhuǎn)染細(xì)胞，并用嘌呤霉素篩選1周，構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。同時，將轉(zhuǎn)染對照病毒的細(xì)胞設(shè)置空載體（empty vector，EV）組。

1.3.2 RTFQ-PCR檢測

采用TRIzol試劑提取總RNA。使用TaKaRa P r i m e S c r i p t 反轉(zhuǎn)錄試劑盒通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。RTFQ-PCR由ABI 7900HT RTFQ-PCR系統(tǒng)進(jìn)行。使用引物：FBW7基因有義鏈為5’-CCACTGGGCTTGTACCATGTT-3’，反義鏈為5’-CAGATGTAATTCGGCGTCGTT-3’；GSDME基因有義鏈為5’-GATCTCTGAGCAC ATGCAGGTC-3’，反義鏈為5’-GTTGGAGTCC TTGGTGACATTCC-3’；β-actin基因有義鏈為5’-CTACGTCGCCCTGGACTTCGAGC-3’，反義鏈為5’-GATGGAGCCGCCGATCCACACGG-3’。

1.3.3 CCK-8實(shí)驗(yàn)

將處于對數(shù)生長期的細(xì)胞按照1h 103個/孔的密度接種于96孔板，加入100 μL含有不同濃度的紫杉醇的培養(yǎng)基分別培養(yǎng)24 h后加入10 μL CCK-8試劑，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中避光溫育2 h，檢測450 nm波長處各孔的吸光度（D）值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.3.4 免疫組織化學(xué)檢測

收集組織標(biāo)本，常規(guī)采用4%甲醛溶液固定，經(jīng)脫水、浸蠟包埋、切片后使用山羊血清溫育30 min封閉，4 ℃溫育一抗過夜。次日用PBS清洗3次，室溫溫育二抗30 min，PBS清洗3次。滴加辣根過氧化物酶溶液，室溫溫育30 min，PBS清洗3次，滴加DAB顯色液，當(dāng)顯微鏡下可見染色區(qū)域發(fā)黃即可使用蒸餾水沖洗，蘇木精復(fù)染1 min。使用梯度乙醇進(jìn)行脫水處理，二甲苯浸泡，最后滴加中性樹膠，蓋玻片封片，顯微鏡下觀察并拍照。通過染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞比例進(jìn)行免疫組織化學(xué)評分。染色強(qiáng)度評分標(biāo)準(zhǔn)為0分（陰性）、1分（弱陽性）、2分（中等強(qiáng)度）、3分（強(qiáng)陽性）。陽性細(xì)胞比例的評分標(biāo)準(zhǔn)為0分（＜5%）、1分（5% ～ 25%）、2分（26% ～ 50%）、3分（51% ～ 75%）、4分（＞ 75%）。將染色強(qiáng)度評分與陽性細(xì)胞比例評分相乘計(jì)算總分。

1.3.5 流式細(xì)胞術(shù)

采用APC膜聯(lián)蛋白Ⅴ試劑盒檢測細(xì)胞死亡。經(jīng)含或不含紫杉醇處理48 h后，收集細(xì)胞，并在室溫下與膜聯(lián)蛋白Ⅴ和PI一起在黑暗中溫育15 min。染色后，將300 μL 1h 結(jié)合緩沖液添加到每個樣品中，并立即采用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞（BD Biosciences，CA，USA）。

1.3.6 LDH釋放實(shí)驗(yàn)

采用CytoTox 96 NonRadioactive細(xì)胞毒性檢測試劑盒測量LDH釋放。將50 mL 9%（重量/體積）的Triton?X-100溶液添加到細(xì)胞中并在室溫下溫育30 min，進(jìn)而測量總LDH裂解。之后在450 nm處測量D值。

1.3.7 顯微鏡成像

將細(xì)胞在6孔板中處理。使用Olympus Ⅸ71顯微鏡捕獲靜態(tài)明場圖像，檢查焦亡細(xì)胞的形 態(tài)。

1.3.8 蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測

收集各組細(xì)胞，提取總蛋白，用B C A試劑盒測定蛋白濃度，取5 0 μ g 蛋白進(jìn)行1 0%十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecylsulphate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）分離，將分離的蛋白電轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜上。用5%脫脂奶粉封閉2 h，采用吐溫-20三羥甲基氨基甲烷緩沖生理鹽水（tris-buffered saline Tween，TBST）洗膜3次，每次10 min，加入稀釋的FBW7、GSDME、caspase-3、active-caspase-3或β-actin一抗，4 ℃溫育過夜。TBST洗膜3次，加入辣根過氧化物酶偶聯(lián)二抗，室溫溫育2 h，TBST洗膜3次，用ECL化學(xué)發(fā)光試劑顯色。

1.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以表示，正態(tài)分布的兩組計(jì)量資料比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，等級資料相關(guān)性分析采用spearman相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 RTFQ-PCR和Western blot檢測FBW7過表達(dá)胰腺癌細(xì)胞株中GSDME的表達(dá)

RTFQ-PCR結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染野生型FBW7WT和磷酸缺陷FBW7T205A基因的PANC-1細(xì)胞的FBW7 mRNA水平較EV組PANC-1細(xì)胞明顯升高（圖1A）。Western blot結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染FBW7WT和FBW7T205A基因的PANC-1細(xì)胞的FBW7蛋白水平較NC組PANC-1細(xì)胞明顯升高（圖1B、C），說明過表達(dá)FBW7基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株構(gòu)建成功。RTFQ-PCR和Western blot檢測結(jié)果還顯示，過表達(dá)FBW7基因的PANC-1細(xì)胞中GSDME的mRNA和蛋白水平均升高（圖1D、E、F），表明FBW7基因過表達(dá)上調(diào)了GSDME的表達(dá)。

圖1 FBW7基因過表達(dá)可以上調(diào)GSDME表達(dá)Fig. 1 Overexpression of FBW7 gene up-regulates GSDME expression

2.2 免疫組化檢測FBW7和GSDME表達(dá)的相關(guān)性

本研究隨機(jī)選擇復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院組織庫中保存的曾在本院診治為胰腺癌且經(jīng)手術(shù)切除的30例胰腺癌患者的腫瘤組織，探討患者組織中FBW7和GSDME表達(dá)之間的關(guān)系。在石蠟包埋的組織中用FBW7和GSDME抗體進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色。通過比例分?jǐn)?shù)和強(qiáng)度分?jǐn)?shù)相乘計(jì)算FBW7和GSDME的免疫組織化學(xué)評分。對FBW7與GSDME之間相關(guān)性進(jìn)行的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，胰腺癌患者的FBW7與GSDME基因表達(dá)呈正相關(guān)（圖2A）。FBW7和GSDME表達(dá)情況的兩個典型示例見圖2B。

圖2 FBW7與GSDME基因表達(dá)在患者腫瘤組織中呈正相關(guān)Fig. 2 The expression of FBW7 and GSDME genes was positively correlated in tumor tissues of patients

2.3 胰腺癌細(xì)胞對紫杉醇的敏感性

焦亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹的特征，細(xì)胞膜上出現(xiàn)大氣泡［9］，該形態(tài)不同于經(jīng)典的凋亡細(xì)胞形態(tài)。本研究采用0.5 μmol/L紫杉醇處理后，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。鏡下可見PANC-1細(xì)胞發(fā)生了符合焦亡形態(tài)的變化，而在FBW7基因過表達(dá)的細(xì)胞系中，發(fā)生這些形態(tài)變化的細(xì)胞的數(shù)量要顯著多于EV組（圖3A）。

圖3 FBW基因過表達(dá)增強(qiáng)了PANC-1細(xì)胞對紫杉醇化療的敏感性Fig. 3 FBW gene overexpression enhances the sensitivity of PANC-1 cells to paclitaxel chemotherapy

本研究采用膜聯(lián)蛋白Ⅴ-FITC/碘化丙啶（propidium iodide，PI）凋亡檢測試劑盒檢測細(xì)胞的死亡情況。經(jīng)紫杉醇處理后，可觀測到大量的膜聯(lián)蛋白Ⅴ-FITC/PI雙陽性細(xì)胞，而且在FBW7過表達(dá)的細(xì)胞系中，膜聯(lián)蛋白Ⅴ-FITC/PI雙陽性細(xì)胞比EV組細(xì)胞更高（圖3B、C）。LDH釋放實(shí)驗(yàn)可以反映細(xì)胞損傷的情況，細(xì)胞損傷時，LDH會被釋放出來。本研究檢測了細(xì)胞上清液中的LDH含量，紫杉醇藥物處理過的PANC-1細(xì)胞上清液中LDH明顯上升，且FBW7過表達(dá)明顯促進(jìn)了這一情況的發(fā)生（圖3D）。CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)BW7過表達(dá)的細(xì)胞系，經(jīng)過24 h不同濃度的紫杉醇處理后，細(xì)胞活力低于EV組細(xì)胞（圖3E）。上述結(jié)果表明，紫杉醇可以引起胰腺癌細(xì)胞系PANC-1的死亡，而FBW7基因過表達(dá)顯著增強(qiáng)了細(xì)胞對紫杉醇處理的敏感性。

2.4 Western blot檢測紫杉醇處理后胰腺癌細(xì)胞中caspase-3和GSDME蛋白的表達(dá)

GSDME可以被active-caspase-3切割，所產(chǎn)生的GSDME-N結(jié)構(gòu)域具有使細(xì)胞膜成孔活性，從而誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡［9］。此前的研究［9］已證實(shí)FBW7過表達(dá)可以增加GSDME在PANC-1細(xì)胞中的表達(dá)，同時也增加了細(xì)胞對紫杉醇藥物刺激的敏感性。為了進(jìn)一步探討FBW7過表達(dá)細(xì)胞對紫杉醇敏感性的影響是否由GSDME表達(dá)增加和細(xì)胞焦亡水平增加所引起，本研究采用紫杉醇處理PANC-1細(xì)胞及其FBW7過表達(dá)細(xì)胞株，對蛋白質(zhì)成分進(jìn)行Western blot檢測。結(jié)果顯示，F(xiàn)BW7過表達(dá)并未顯著上調(diào)caspase-3的表達(dá)，但是促使其活化，未經(jīng)紫杉醇處理的細(xì)胞active-caspase-3和GSDME的N端結(jié)構(gòu)域Western blot信號很弱或幾乎檢測不到，但經(jīng)紫杉醇藥物處理后可見caspase-3活化，并且GSDME被切割，即GSDME的N端結(jié)構(gòu)域表達(dá)，且FBW7過表達(dá)的細(xì)胞株的caspase-3以及GSDME的活化更加明顯（圖4A、B、C）。表明FBW7過表達(dá)增強(qiáng)了caspase-3/GSDME信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活性，從而促進(jìn)了細(xì)胞焦亡的發(fā)生。

圖4 FBW7基因通過caspase-3/GSDME信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路增加PANC-1細(xì)胞對紫杉醇的敏感性Fig. 4 The FBW7 gene increases the sensitivity of PANC-1 cells to paclitaxel through the caspase-3/GSDME pathway

3 討 論

紫杉醇是常用的化療藥物，可以誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮抗腫瘤作用［14］。本研究發(fā)現(xiàn)了紫杉醇誘導(dǎo)胰腺癌死亡的機(jī)制——焦亡。

細(xì)胞焦亡是一種細(xì)胞程序性死亡，不同于細(xì)胞凋亡，焦亡是由GSDM家族蛋白介導(dǎo)的一種炎癥性死亡方式。近年來對焦亡的研究主要集中在兩條焦亡分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。① GSDMD蛋白介導(dǎo)的，主要是由各種炎癥體介導(dǎo)的經(jīng)典模式或脂多糖LPS誘導(dǎo)的caspase-1、caspase-4、caspase-5、caspase-11切割GSDMD引起的非經(jīng)典模式［15-16］。② GSDME介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡。在化療藥物作用下，可以引起線粒體損傷釋放細(xì)胞色素C，進(jìn)而激活caspase-9、caspase-3，當(dāng)腫瘤細(xì)胞中GSDME高表達(dá)時，下游的GSDME被活性caspase-3切割產(chǎn)生GSDME的N端結(jié)構(gòu)域，GSDME也可被顆粒酶B直接切割。與GSDMDNT相似，GSDME-NT也具有質(zhì)膜穿孔活性，可以誘導(dǎo)焦亡［10］（圖5）。

圖5 Caspase-3/GSDME分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路示意圖Fig. 5 Schematic diagram of caspase-3/GSDME signal transduction pathway

很多化療藥物可引起腫瘤細(xì)胞焦亡，本研究證實(shí)了紫杉醇具備誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞焦亡的能力。

本研究發(fā)現(xiàn)，紫杉醇處理后，腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)焦亡的典型表現(xiàn)，即細(xì)胞膜出現(xiàn)的大泡結(jié)構(gòu)。本研究采用Western blot對caspase-3和GSDME的蛋白水平進(jìn)行了檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，紫杉醇處理后，腫瘤細(xì)胞中出現(xiàn)了caspase-3和GSDME的切割活化，說明caspas-3/GSDME信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了PANC-1細(xì)胞的焦亡過程。Caspase-3是一種與凋亡相關(guān)的蛋白，以往認(rèn)為其活化與細(xì)胞凋亡相關(guān)，然而在多種腫瘤中都已發(fā)現(xiàn)其活化切割GSDME蛋白誘導(dǎo)焦亡的現(xiàn)象。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)［6，9-10］報(bào)道結(jié)果相似。

Caspase-3也許可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的焦亡并受GSDME表達(dá)情況影響。Wang等［17］發(fā)現(xiàn)，GSDME是化療藥物誘導(dǎo)癌細(xì)胞發(fā)生凋亡還是焦亡的必要條件，應(yīng)用化療藥物時，只有在GSDME高表達(dá)時才能發(fā)生焦亡，而低表達(dá)時發(fā)生凋亡。

GSDME在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞中低表達(dá)，原因是其啟動子的超甲基化導(dǎo)致基因沉默［18-19］。所以在多數(shù)腫瘤細(xì)胞中，化療藥物可能并不能通過GSDME的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生焦亡，而提高GSDME的表達(dá)是促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生焦亡的關(guān)鍵。有研究［19］證實(shí)，地西他濱（一種DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑）可以提高GSDME的表達(dá)，從而可以通過增強(qiáng)化療引起視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的焦亡水平而提高其療效。本研究結(jié)果證實(shí)了GSDME的表達(dá)與FBW7基因之間的關(guān)系。在PANC-1細(xì)胞中，GSDME的表達(dá)和FBW7的表達(dá)呈正相關(guān)，這反映出GSDME的表達(dá)受FBW7的正向調(diào)控，但是FBW7基因如何調(diào)節(jié)GSDME的表達(dá)仍需要進(jìn)一步研究。當(dāng)FBW7表達(dá)上調(diào)時，GSDME的表達(dá)也相應(yīng)升高。GSDME的表達(dá)水平升高為紫杉醇誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞焦亡創(chuàng)造了條件，這是FBW7基因過表達(dá)的PANC-1細(xì)胞對紫杉醇敏感性增加的分子基礎(chǔ)。

FBW7基因促使GSDME表達(dá)上調(diào)，使腫瘤細(xì)胞在化療藥物的作用下發(fā)生更高水平的焦亡。本研究結(jié)果表明，F(xiàn)BW7基因過表達(dá)的PANC-1細(xì)胞株使化療藥物的敏感性提高表現(xiàn)在IC50的下降、流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)死亡細(xì)胞的比例增加、光鏡下具有焦亡形態(tài)的細(xì)胞增加等。GSDME基因被認(rèn)為是抑癌基因，其表達(dá)與腫瘤惡性程度及患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)［20］。FBW7基因可以增強(qiáng)化療藥物對腫瘤的敏感性已經(jīng)得到證實(shí)，既往研究［13，21］主要集中在其通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和鐵死亡等形式。本研究發(fā)現(xiàn)FBW7基因通過增加caspase-3激活和上調(diào)GSDME的表達(dá)增強(qiáng)細(xì)胞焦亡，從而增加化療敏感性，這可能成為抗腫瘤的潛在靶點(diǎn)。

細(xì)胞焦亡的意義不僅在于增加化療藥物對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。焦亡作為一種炎性的細(xì)胞死亡方式，腫瘤細(xì)胞膜被破壞，使細(xì)胞因子和內(nèi)容物釋放，造成的炎性環(huán)境可增加腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的募集并激活抗腫瘤免疫反應(yīng)［22］。從多種意義上來說，腫瘤細(xì)胞焦亡可能對抗腫瘤的治療產(chǎn)生重要的影響。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。