蘇國明 ，張超 ，華悅 ，程世贊 ，廉婧 ，聶紫璇 ，史輯， ，賈天柱，

1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，遼寧 大連 116600； 2.遼寧省中藥炮制技術(shù)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新中心，遼寧 大連 116600

肉蓯蓉為列當(dāng)科植物肉蓯蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉肉質(zhì)莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，其性溫，味甘、咸，歸腎、大腸經(jīng)，有補(bǔ)腎陽、益精血、潤腸便功效?？捎糜谀I陽不足、精血虧虛所致陽痿、不孕、腰膝酸軟、筋骨無力、腸燥便秘等病癥[1]。肉蓯蓉含多種類型化學(xué)物質(zhì)，已從肉蓯蓉屬植物中分離鑒定出的成分包括苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜類、木脂素類、寡糖、多糖等，具有神經(jīng)保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老等藥理作用[2-5]。

肉蓯蓉的苯乙醇苷類成分為補(bǔ)腎陽、提高免疫功能、抗老年癡呆癥的活性成分[6]。肉蓯蓉總苷能顯著提高亞急性衰老小鼠超氧化物歧化酶（SOD）活性，并明顯降低小鼠腦、肝臟中脂質(zhì)過氧化物含量，具有抗氧化及延緩腎臟衰老、提高精子質(zhì)量等作用[7-8]。肉蓯蓉總苷可明顯降低正常小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間[9]。肉蓯蓉總苷對(duì)癡呆小鼠也具有明顯改善記憶功能的作用[10]。肉蓯蓉總苷能提高模型小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、NK細(xì)胞活性、并可明顯增強(qiáng)D-半乳糖致衰老小鼠的免疫功能[11]。肉蓯蓉多糖具有顯著的免疫活性作用，能夠促進(jìn)小鼠胸腺淋巴細(xì)胞增殖[12]。

腎陽虛證為中醫(yī)臨床常見證候，是多種病理、生理變化共同導(dǎo)致的功能紊亂狀態(tài)[13]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，腎陽虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)密切相關(guān)，由于介導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)平衡功能的相關(guān)物質(zhì)基因表達(dá)出現(xiàn)異常，導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)功能失衡，可用溫補(bǔ)、滋補(bǔ)、填補(bǔ)方法改善腎陽，增強(qiáng)患者的免疫力[14]。腎陽虛調(diào)控樞紐定位在下丘腦，下丘腦-垂體-腎上腺軸/甲狀腺軸/性腺軸功能障礙和功能低下是腎陽虛證的基礎(chǔ)。下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPA軸）是維持人體基本生命活動(dòng)的重要內(nèi)分泌功能軸之一，腎陽虛證常伴隨著下丘腦-垂體-靶腺軸的功能低下，體現(xiàn)在相應(yīng)腎上腺、甲狀腺及性腺內(nèi)分泌的激素類生物學(xué)指標(biāo)仍然是評(píng)價(jià)腎陽虛證的重要指標(biāo)[15]。甲狀腺是人體內(nèi)最大的內(nèi)分泌腺，主要受下丘腦與垂體調(diào)節(jié)，下丘腦釋放促甲狀腺素釋放激素（TRH），調(diào)節(jié)腺垂體分泌促甲狀腺激素（TSH），TSH進(jìn)一步引起甲狀腺激素釋放[16]，血液甲狀腺激素濃度變化通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)下丘腦TRH和垂體TSH的分泌，構(gòu)成下丘腦-垂體-甲狀腺軸（HPT軸）的自發(fā)性控制環(huán)路。三碘甲狀腺原氨酸（T3）是診斷甲狀腺功能亢進(jìn)癥的特異性指標(biāo)，甲狀腺素（T4）是甲狀腺分泌最豐富的激素，腎陽虛患者臨床通常表現(xiàn)為甲狀腺功能降低[17]，因此反映其功能下降的指標(biāo)是腎陽虛證較為特異的生理指標(biāo)[18]。本研究通過灌胃給予丙基硫氧嘧啶復(fù)制大鼠腎陽虛模型，比較肉蓯蓉不同提取部位總多糖、總寡糖、總苷對(duì)HPA軸及HPT軸相關(guān)指標(biāo)的調(diào)節(jié)作用，篩選肉蓯蓉補(bǔ)腎壯陽的有效部位，為后續(xù)肉蓯蓉酒蒸前后化學(xué)成分變化規(guī)律及藥效變化的作用機(jī)制研究提供依據(jù)。

1 儀器、試藥與動(dòng)物

酶標(biāo)儀（型號(hào)3530911931），賽默飛世爾（上海）儀器有限公司；自動(dòng)洗板機(jī)（型號(hào)HBS-4009），南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；恒溫振蕩器（型號(hào)SHA-C），浙江明德儀器有限公司；精密電子天平（型號(hào)FA1004B），瑞士梅特勒-托利多公司；電子體溫計(jì)（型號(hào)MC-347），歐姆龍健康醫(yī)療（中國）有限公司；通用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（型號(hào)Sigma 3k15），湘儀離心機(jī)儀器有限公司；醫(yī)用離心機(jī)（型號(hào)TDZ5-WS），曦瑪離心機(jī)（揚(yáng)州）有限公司；水浴鍋（型號(hào)HH-S2），鄭州長城科工貿(mào)有限公司；電熱套（型號(hào)PTHW），北京亞歐德鵬科技有限公司；自動(dòng)包埋機(jī)（型號(hào)BM450A），湖北伯納醫(yī)療科技有限公司；切片機(jī)（型號(hào)DQ-100），德國Leica；顯微鏡（型號(hào)CX31RTSF），日本Olympus。

肉蓯蓉藥材于2019年5月采自內(nèi)蒙古阿拉善，批號(hào)20190508-1，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院李峰教授鑒定為列當(dāng)科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma的干燥帶鱗葉肉質(zhì)莖，標(biāo)本保存于遼寧省中藥炮制技術(shù)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新中心。丙基硫氧嘧啶（批號(hào)1102C021），北京索萊寶科技有限公司；桂附地黃丸（批號(hào)202104053），九芝堂股份有限公司；T3（批號(hào)211026）、T4（批號(hào)211026）、TSH（批號(hào)211026）、環(huán)磷酸腺苷（cAMP，批號(hào)211026）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP，批號(hào)211026）、皮質(zhì)醇（Cor，批號(hào)211026）、促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH，批號(hào)211026）、睪酮（T，批號(hào)211026）、雌二醇（E2，批號(hào)211026）ELISA試劑盒，上?？婆d生物科技有限公司。

SPF級(jí)SD雄性大鼠48只，體質(zhì)量180～220g，遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)SCXK（遼）2020-0001。飼養(yǎng)環(huán)境濕度50%～80%，溫度18～22 ℃。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵循遼寧中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用規(guī)定。

2 方法與結(jié)果

2.1 肉蓯蓉有效部位制備

取肉蓯蓉藥材1 kg，分別以10、8、8倍量水回流提取3次，每次1 h，合并濾液，適當(dāng)濃縮后加乙醇至體積分?jǐn)?shù)為40%，4 ℃靜置過夜，3 000 r/min 離心15 min，反復(fù)3次，收集沉淀，即為粗多糖，以Sevage法除蛋白，重復(fù)3次，冷凍干燥，得總多糖138.1 g。離心所得上清液，減壓濃縮至無醇味，上預(yù)處理好的D101大孔吸附樹脂柱，收集水洗脫部位和40%乙醇洗脫部位，濃縮，減壓干燥，得到總寡糖部分106.6 g和總苷部分79.6 g。計(jì)算總多糖、總寡糖、總苷得率分別為13.81%、10.46%、7.86%。

2.2 造模、給藥及取材

將48只大鼠隨機(jī)分為6組，分別為空白組、模型組、陽性藥組、肉蓯蓉總多糖組（多糖組）、肉蓯蓉總寡糖組（寡糖組）和肉蓯蓉總苷組（總苷組），每組8只?？瞻捉M使用純水灌胃，其余各組大鼠每日灌胃丙基硫氧嘧啶（10 mg/kg）連續(xù)15 d，制備腎陽虛模型。各給藥組按體表面積和人與動(dòng)物臨床劑量倍數(shù)直接換算法及肉蓯蓉各部位得率計(jì)算，將肉蓯蓉總多糖、總寡糖、總苷分別溶于水中，配制成濃度分別為總多糖14.5 mg/mL、總寡糖11 mg/mL、總苷8.2 mg/mL的溶液。從第16日開始，多糖組（145 mg/kg）、寡糖組（110 mg/kg）、總苷組（82 mg/kg）分別予相應(yīng)藥液灌胃，陽性藥組予原藥材0.936 g/kg桂附地黃丸混懸液（桂附地黃丸于研缽中研碎，溶于純水中），灌胃體積均為10 mL/kg，空白組和模型組予等量生理鹽水灌胃，每日1次，連續(xù)15 d。末次給藥后禁食不禁水，24 h后各組大鼠用20%烏拉坦溶液0.6 mL/100 g腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，采血管靜置30 min后，3 500 r/min離心15 min，分離血清，-20 ℃保存。大鼠斷頭取腦，冰上分離下丘腦，-80 ℃冰箱保存。

2.3 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)大鼠一般情況的影響

觀察各組大鼠造模前后及給藥后的一般狀態(tài)，包括體質(zhì)量、進(jìn)食量、活動(dòng)情況、精神狀態(tài)、排便及肛溫變化。給藥第15日各組大鼠均禁食，自由飲水，記錄末次給藥24 h后大鼠體質(zhì)量和肛溫。

與空白組比較，模型組大鼠表現(xiàn)為反應(yīng)遲鈍、畏冷蜷縮、飲食減少、小便頻數(shù)、大便稀溏等，各給藥組大鼠上述癥狀均有所改善。模型組大鼠體質(zhì)量增長速度明顯慢于空白組。陽性藥組大鼠體質(zhì)量在21 d后逐漸趨于穩(wěn)定，其余各給藥組大鼠體質(zhì)量持續(xù)增加。與空白組比較，其余各組大鼠肛溫在造模期間均明顯降低，各給藥組給藥后大鼠肛溫均不同程度升高。與模型組比較，總苷組和寡糖組大鼠肛溫有上升趨勢，其中總苷組回升較為明顯。見圖1。

圖1 各組大鼠平均體質(zhì)量、肛溫變化趨勢（每組8只）

2.4 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)臟器指數(shù)的影響

末次給藥后，各組大鼠禁食不禁水24 h，腹腔注射20%烏拉坦溶液0.6 mL/100 g麻醉，腹主動(dòng)脈取血后，摘取大鼠完整的腎臟、脾臟、睪丸、腎上腺，去掉筋膜及脂肪組織，用濾紙吸干臟器表面血污，分別稱定質(zhì)量，計(jì)算脾臟、胸腺、睪丸、腎上腺的臟器指數(shù)。臟器指數(shù)（%）=臟器質(zhì)量÷體質(zhì)量×100%。

與空白組比較，模型組大鼠腎臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、腎上腺指數(shù)均顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01），睪丸指數(shù)呈上升趨勢；與模型組比較，寡糖組大鼠腎臟指數(shù)呈上升趨勢，陽性藥組、多糖組、總苷組大鼠脾臟指數(shù)均呈上升趨勢，各給藥組大鼠腎上腺指數(shù)呈上升趨勢，睪丸指數(shù)呈下降趨勢，陽性藥組大鼠睪丸指數(shù)顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠腎臟、脾臟、睪丸、腎上腺指數(shù)比較（±s，%，每組8只）

表1 各組大鼠腎臟、脾臟、睪丸、腎上腺指數(shù)比較（±s，%，每組8只）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05

腎上腺指數(shù)0.006 1±0.001 4 0.004 7±0.000 9*0.005 2±0.001 3 0.005 6±0.001 0 0.005 1±0.000 6 0.005 5±0.000 9組別空白組模型組陽性藥組多糖組寡糖組總苷組劑量/（g/kg）0.936 0.145 0.110 0.082腎臟指數(shù)0.319 3±0.026 7 0.271 3±0.012 4**0.256 7±0.017 3 0.276 8±0.027 4 0.282 6±0.020 4 0.263 7±0.027 9脾臟指數(shù)0.177 3±0.020 7 0.140 3±0.018 7**0.155 2±0.020 5 0.158 2±0.017 6 0.135 8±0.012 1 0.143 6±0.010 3睪丸指數(shù)0.545 1±0.046 5 0.579 0±0.035 8 0.521 2±0.071 0#0.541 8±0.054 0 0.564 6±0.038 1 0.568 5±0.026 1

2.5 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)甲狀腺激素水平的影響

取凍存血清樣品放至室溫，檢測血清T3、T4、TSH含量，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

與空白組比較，模型組大鼠血清T3、TSH含量顯著升高，血清T4含量下降（P＜0.05）。與模型組比較，各給藥組血清T3含量顯著降低（P＜0.01）；陽性藥組、多糖組大鼠血清TSH含量呈下降趨勢，寡糖組、總苷組血清TSH含量顯著下降（P＜0.01）；陽性藥組、寡糖組及總苷組大鼠血清T4含量上升（P＜0.05，P＜0.01）。見表2。

表2 各組大鼠血清T3、T4、TSH含量比較（±s，每組8只）

表2 各組大鼠血清T3、T4、TSH含量比較（±s，每組8只）

注：與空白組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別空白組模型組陽性藥組多糖組寡糖組總苷組T4/（mU/L）241.75±20.79 239.42±26.42*253.99± 7.46##232.61±16.41 251.28±28.08#256.41± 5.21##劑量/（g/kg）0.936 0.145 0.110 0.082 T3/（ng/mL）6.74±0.67 7.26±0.93*6.44±0.40##6.50±0.28##6.39±0.23##6.51±0.39##TSH/（ng/mL）13.40±0.84 14.18±0.62*13.71±0.32 14.11±1.09 13.10±1.59##13.03±0.63##

2.6 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺軸相關(guān)指標(biāo)的影響

取凍存血清樣品放至室溫，檢測血清T、E2、ACTH、Cor含量，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。

與空白組比較，模型組大鼠血清T含量顯著降低（P＜0.05），血清E2含量呈下降趨勢，血清Cor含量呈上升趨勢。與模型組比較，陽性藥組和寡糖組大鼠血清T含量顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）；各給藥組大鼠血清E2含量均呈上升趨勢；陽性藥組、寡糖組和總苷組大鼠血清ACTH含量顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）；陽性藥組和總苷組大鼠血清Cor含量顯著降低（P＜0.01）。見表3。

表3 各組大鼠血清T、E2、ACTH、Cor含量比較（±s，每組8只）

注：與空白組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別空白組模型組陽性藥組多糖組寡糖組總苷組Cor/（ng/mL）106.73±2.55 108.62±2.34 116.81±2.32##106.81±2.67 108.43±1.63 76.25±2.30##劑量/（g/kg）E2/0.936 0.145 0.110 0.082 T/（ng/mL）120.62±4.24 113.58±5.56*120.70±5.60#116.53±4.31 122.33±3.44##112.67±4.43（pg/mL）50.18±1.49 49.48±2.52 51.89±2.79 50.11±1.56 51.43±2.28 51.64±1.64 ACTH/（pg/mL）91.96±1.61 91.23±1.55 98.78±2.91##90.92±1.86 94.44±1.35#94.88±1.95#

2.7 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)環(huán)磷酸腺苷、環(huán)磷酸鳥苷含量和cAMP/cGMP比值的影響

檢測各組大鼠血清cAMP、cGMP含量，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作，并計(jì)算cAMP/cGMP比值。

與空白組比較，模型組大鼠cAMP含量無顯著變化，cGMP含量顯著升高（P＜0.01），cAMP/cGMP比值呈降低趨勢；與模型組比較，陽性藥組cAMP含量顯著升高，寡糖組cAMP含量顯著降低，多糖組、寡糖組、總苷組cGMP 含量均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。與模型組比較，陽性藥組和多糖組cAMP/cGMP比值顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）。見表4。

表4 各組大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值比較（±s，每組8只）

表4 各組大鼠血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值比較（±s，每組8只）

注：與空白組比較，**P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

組別cAMP/cGMP 劑量/（g/kg）cAMP cGMP空白組模型組陽性藥組多糖組寡糖組總苷組0.062±0.005 0.057±0.004 0.064±0.002#0.068±0.002##0.057±0.002 0.061±0.003 0.936 0.145 0.110 0.082 0.78±0.03 0.80±0.04 0.88±0.03#0.84±0.03 0.68±0.03##0.79±0.04 12.55±0.54 13.93±0.61**13.68±0.09 12.25±0.15##12.01±0.68##12.89±0.35#

2.8 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)下丘腦激素mRNA表達(dá)的影響

采用RT-PCR檢測大鼠下丘腦TRH、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）mRNA表達(dá)。每組大鼠取下丘腦組織4～5個(gè)，用TRIZOL試劑盒提取總RNA，進(jìn)行基因組DNA去除反應(yīng)、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，合成cDNA。取反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物2 μL，加入18 μL擴(kuò)增反應(yīng)體系（上下游引物各0.4 μL，反轉(zhuǎn)錄試劑10 μL，DEPC水補(bǔ)足），進(jìn)行PCR。反應(yīng)條件：95 ℃、30 s，95 ℃、5 s，60 ℃、30 min，40個(gè)循環(huán)。大鼠基因引物購自艾科瑞生物工程有限公司，引物序列見表5。以β-actin為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

表5 各基因PCR引物序列

與空白組比較，模型組大鼠下丘腦TRH、CRH mRNA表達(dá)顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較，總苷組大鼠下丘腦TRH、CRH mRNA表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.05），總寡糖組與總多糖組CRH mRNA表達(dá)呈上調(diào)趨勢。見表6。

表6 各組大鼠下丘腦TRH、CRH mRNA表達(dá)比較（±s）

表6 各組大鼠下丘腦TRH、CRH mRNA表達(dá)比較（±s）

注：與空白組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05

CRH 1.00±0.31 0.78±0.19*1.06±0.14 0.77±0.07 0.83±0.14 0.89±0.18#組別空白組模型組陽性藥組多糖組寡糖組總苷組劑量/（g/kg）只數(shù)0.936 0.145 0.110 0.082 8 8 8 8 8 8 TRH 1.00±0.27 0.82±0.17*1.84±0.14 0.95±0.18 0.96±0.12 1.04±0.09#

2.9 肉蓯蓉不同提取部位對(duì)腎組織形態(tài)的影響

取大鼠右腎組織，用10%多聚甲醛固定過夜、脫水、石蠟包埋，切片（厚度4 μm），HE染色后，晾干封片，于光鏡下觀察腎組織形態(tài)，見圖2。

圖2 各組大鼠腎組織形態(tài)（HE染色，×200）

空白組大鼠腎小管結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞排列整齊；模型組腎間質(zhì)充血，腎小球腫脹，可見炎性細(xì)胞浸潤，腎小球囊腔內(nèi)出現(xiàn)紅染，腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死；與模型組比較，各給藥組腎小管損傷明顯改善，其中總苷組腎小球腫脹不明顯，囊腔內(nèi)界限清晰，且腎小管腫脹減輕，改善水腫能力最為明顯。

3 討論

肉蓯蓉為常用補(bǔ)陽藥，治療腎陽不足、精血虧虛、陽痿不孕、腰膝酸軟、筋骨無力等癥，且補(bǔ)而不峻。腎陽虛可見畏寒肢冷、夜尿頻多、舌淡苔白、脈沉遲無力等虛寒征象[19]。下丘腦-垂體-靶腺軸不同環(huán)節(jié)和不同程度的功能失調(diào)是腎陽虛的主要病理基礎(chǔ)[20]，關(guān)鍵環(huán)節(jié)是下丘腦損傷和功能紊亂。內(nèi)分泌功能紊亂、激素水平異常是引起腎陽虛的重要因素，大腦垂體分泌的TSH和ACTH調(diào)節(jié)甲狀腺和腎上腺功能，促進(jìn)T3、T4和Cor合成釋放[21]。HPA軸下丘腦室旁核分泌CRH，與ACTH細(xì)胞膜上的CRH-R1結(jié)合，促進(jìn)腺垂體分泌ACTH及腎上腺合成和分泌Cor。HPT軸下丘腦釋放TRH刺激腺垂體細(xì)胞分泌TSH，TSH又可促進(jìn)T3和T4的合成及分泌，參與機(jī)體生長發(fā)育、基礎(chǔ)代謝等多種功能活動(dòng)。改善腎功能和下丘腦-垂體-靶腺軸相關(guān)激素紊亂[22]對(duì)腎陽虛大鼠癥狀體征、相關(guān)激素水平的調(diào)節(jié)、腎功能的改善均有較好效果。

肉蓯蓉主要含苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜苷類、多糖、寡糖等成分，其中苯乙醇苷類成分，如松果菊苷、毛蕊花糖苷為2020年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的肉蓯蓉指標(biāo)性成分，此外還有異毛蕊花糖苷、肉蓯蓉苷F、2-乙酰毛蕊化糖苷等苯乙醇苷類成分；苯乙醇苷類成分具有抗疲勞、抗衰老[23]、抗老年癡呆、抗神經(jīng)退行性疾病等，以及改善生殖功能、抗骨質(zhì)疏松、保護(hù)缺血和保護(hù)肝臟等藥理作用[24]。環(huán)烯醚萜苷類主要有梓醇、益母草苷、6-去氧梓醇、8-表脫氧馬錢子酸、京尼平苷酸等，具有內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗腫瘤、調(diào)節(jié)性腺軸激素水平[25]、保護(hù)肝臟活性等方面的藥理作用。

本實(shí)驗(yàn)采用灌胃給予丙基硫氧嘧啶致大鼠腎陽虛模型，正常大鼠皮毛柔順干爽、有光澤且行動(dòng)較為活潑，造模后大鼠體毛顏色黯淡，且較為稀疏，反應(yīng)遲鈍，畏冷蜷縮，飲食減少，抱團(tuán)少動(dòng)。模型組大鼠體質(zhì)量、肛溫明顯下降，腎臟、脾臟、腎上腺指數(shù)明顯下降，睪丸指數(shù)上升，出現(xiàn)明顯的腎陽虛癥狀。模型組大鼠血清T4含量下降，T3、TSH含量上升，cAMP含量無明顯變化、cGMP 含量顯著升高。下丘腦TRH、CRH mRNA表達(dá)顯著降低。各給藥組對(duì)TSH有回調(diào)作用，總苷組對(duì)TSH回調(diào)效果顯著；寡糖組和總苷組下丘腦CRH mRNA表達(dá)水平上升，總苷組上升最為明顯；多糖組、寡糖組和總苷組TRH mRNA表達(dá)水平均升高，總苷組升高最為明顯。表明肉蓯蓉對(duì)腎陽虛大鼠的HPT軸穩(wěn)態(tài)有很好的調(diào)節(jié)作用。

HPA 軸相關(guān)指標(biāo)測定顯示，模型組大鼠血清ACTH、T、E2含量下降，Cor含量上升?？傑战M、多糖組和總寡糖組T、E2含量升高，寡糖組和總苷組ACTH含量上升，多糖組和總苷組Cor含量下降。其中總苷組對(duì)T、E2、T4、ACTH和Cor的調(diào)節(jié)作用最明顯，表明肉蓯蓉總苷對(duì)HPA軸功能穩(wěn)態(tài)有很好的調(diào)節(jié)作用。

綜上，肉蓯蓉的總苷類成分、總多糖和總寡糖均可有效改善脾臟、睪丸、腎上腺臟器指數(shù)，以及HPA軸和HPT軸相關(guān)指標(biāo)，其中總苷組表現(xiàn)最佳。后續(xù)將對(duì)總苷成分和總多糖物質(zhì)在炮制過程中的變化規(guī)律進(jìn)行深入研究。