劉華之,孫穎芳,洪慧勤,李紅英,徐麗華,朱桂香（.贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,江西 贛州 4000;.贛南師范大學(xué)醫(yī)院,江西 贛州 4000;.江西省于都縣中醫(yī)院,江西 贛州 400）

新型冠狀病毒肺炎簡稱新冠肺炎，是于2019年末流行的一種傳染性疾病[1]。疫情期間，醫(yī)院住院患者病情重，傳染性強(qiáng)，尤其是新冠肺炎這樣大強(qiáng)度與大規(guī)模的全球流行性疾病，我國醫(yī)護(hù)人員的防護(hù)意識(shí)極高，防護(hù)措施及隔離病區(qū)的消毒隔離措施都極為嚴(yán)格[2]。終末消毒是阻斷傳染病傳播的一種有效方法，同時(shí)也是控制疾病流行的重要手段，在預(yù)防及控制院內(nèi)感染中，環(huán)境及物體表面的清潔消毒起到重要作用[3]。幾乎所有醫(yī)療環(huán)境包括新冠病區(qū)終末消毒空氣、物體表面等均可能成為病原微生物載體，如果常規(guī)消毒不夠仔細(xì)，極易產(chǎn)生交叉感染[4]。因此，加強(qiáng)新冠病區(qū)終末消毒對(duì)切斷傳染途徑、控制院內(nèi)感染有著重要意義。臨床常用消毒劑包括含氯消毒液、過氧化氫、過氧乙醇及二氧化氯等，國家最新頒布的規(guī)范指南中僅對(duì)消毒劑、消毒防范要求等作出系統(tǒng)要求，但并未明確消毒設(shè)備的使用方法及條件。本次選取我院2021年1月-2022年12月發(fā)熱門診14間隔離病房作為試驗(yàn)場所，研究汽化過氧化氫對(duì)發(fā)熱門診新冠病毒肺炎終末消毒的效果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2021年1月-2022年12月發(fā)熱門診14間隔離病房作為試驗(yàn)場所，共173個(gè)采樣點(diǎn)位，所選擇病房的房間格局一致，均有獨(dú)立衛(wèi)生間，采樣點(diǎn)位包括衛(wèi)生間扶手、窗臺(tái)及地面等。對(duì)樣本病房按單雙數(shù)分組，雙數(shù)病房作為對(duì)照組，采用含氯消毒液噴灑消毒+紫外線消毒，單數(shù)病房作為試驗(yàn)組，采用過氧化氫消毒機(jī)消毒，統(tǒng)一采樣點(diǎn)位、采樣人員及采樣方法。

1.2 儀器與材料 試驗(yàn)采用HPVS M200型汽化過氧化氫消毒機(jī)，消毒時(shí)可外接電腦自動(dòng)記錄消毒機(jī)無線傳輸?shù)氖覂?nèi)過氧化氫濃度數(shù)值，可導(dǎo)出數(shù)值，對(duì)消毒的峰值濃度、消毒時(shí)間等進(jìn)行觀察并記錄，確保使用者于消毒房間外對(duì)消毒機(jī)運(yùn)行情況、有效濃度進(jìn)行監(jiān)控，配套消毒劑為35%過氧化氫溶液，通過氣體噴霧原理使過氧化氫汽化，汽化顆粒為2-8nm，通過在密閉空間中形成消毒劑氣霧并擴(kuò)散起到殺菌效果，從而達(dá)到終末消毒目的。試驗(yàn)儀器還包括專用恢復(fù)培養(yǎng)基；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)平板；Merck MAS-100NT型微生物空氣采樣器等。

1.3 方法

1.3.1 消毒方法 試驗(yàn)組采用過氧化氫消毒機(jī)消毒，于消毒前對(duì)病區(qū)進(jìn)行清理后關(guān)閉門窗，密封空調(diào)新風(fēng)、排風(fēng)口及門縫，按說明書要求設(shè)置好參數(shù)，使用閃蒸方式將濃度為35%的過氧化氫溶液加熱形成蒸汽并擴(kuò)散至消毒空間，對(duì)空間及物體表面起到消毒滅菌作用；消毒結(jié)束后，空氣中殘留過氧化氫濃度降低至安全范圍后方可進(jìn)入。對(duì)照組采用含氯消毒液噴灑消毒+紫外線消毒，選擇于無人情況下，使用有效氯含量為1000mg/L的消毒溶液噴霧消毒1h后再使用紫外線照射1小時(shí)。

1.3.2 采樣方法 于各消毒方式消毒開始前、消毒完成1h時(shí)采樣。于病房對(duì)角線上設(shè)置高、中、低三點(diǎn)。高點(diǎn)：距天花板20cm；低點(diǎn)：距地面10cm；中點(diǎn)：距離機(jī)器10cm。對(duì)各采樣點(diǎn)位置采用自然菌沉降法進(jìn)行采樣。于采樣點(diǎn)采用營養(yǎng)瓊脂平板（9cm）揭蓋擱置，時(shí)間為5min，再蓋好培養(yǎng)皿，放置于溫度為37℃的恒溫箱中，經(jīng)46h后對(duì)培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察，并計(jì)算空氣中消毒后的細(xì)菌菌落數(shù)，并采用暴露平板法監(jiān)測空氣沉降菌的空氣消毒效果，再根據(jù)平皿中的霉菌菌落數(shù)，計(jì)算出平均菌落數(shù)。同時(shí)做真菌培養(yǎng)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)，計(jì)算消亡率。物體表面采樣：選擇桌面、床面、柜子、地面、墻壁、天花板等處物體表面，標(biāo)示出5cm×5cm面積，用無菌棉拭子涂抹采樣。然后將棉拭子頭置入含10ml采樣液試管內(nèi)（含采樣液10ml），充分振蕩混勻，最后吸取1ml洗脫液接種于配置的45℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)液中并混勻，導(dǎo)入無菌培養(yǎng)皿中，待凝固后置于37℃培養(yǎng)48h。

1.3.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)GB 15982-2012《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[5]進(jìn)行隔離病房消毒前后空氣采樣，消毒后空氣中自然菌的消亡率≥90%，可判為消毒合格；真菌控制標(biāo)準(zhǔn)，參考GB 15982《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》[5]規(guī)定，平板暴露法的標(biāo)準(zhǔn)：參考相應(yīng)的細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)，Ⅳ環(huán)境均為≤4.0cfu/cm3·5min。

1.4 觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組消毒方式的消毒效果，同時(shí)比較兩組采樣點(diǎn)位合格率；并比較兩組霉菌菌落數(shù)及消亡率，消亡率=（消毒前細(xì)菌菌落-消毒后細(xì)菌菌落）/消毒前細(xì)菌菌落×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS23.0軟件處理數(shù)據(jù)，以%表示計(jì)數(shù)資料，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組終末消毒效果對(duì)比 試驗(yàn)組共有96個(gè)采樣點(diǎn)位，合格率為94.79%；對(duì)照組共有77個(gè)采樣點(diǎn)位，合格率為94.81%。兩組采樣點(diǎn)位的表面細(xì)菌總數(shù)合格率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1、表2。

表1 14間隔離病房的采樣點(diǎn)位的合格情況

表2 兩組終末消毒效果比較[n(%)]

2.2 兩組霉菌菌落數(shù)及消亡率對(duì)比 14個(gè)隔離病房中7個(gè)病房空氣采樣查出霉菌問題，試驗(yàn)組消毒后細(xì)菌菌落總計(jì)8cfu/cm3，對(duì)照組消毒后細(xì)菌菌落總計(jì)11cfu/cm3。試驗(yàn)組空氣霉菌消亡率較之對(duì)照組更高（χ2=4.438，P＜0.05），見表3。

表3 兩組霉菌菌落數(shù)及消亡率比較

3 討論

此前，新冠肺炎被稱為2019冠狀病毒?。–OVID-19），在我國該病按甲類傳染病標(biāo)準(zhǔn)管理，納入乙類傳染病范疇[6]。新冠肺炎確診患者是疾病的主要傳染源之一，對(duì)于處在恢復(fù)期或潛伏期的患者，其傳染性并未完全明確，且對(duì)于無癥狀感染者，臨床也尚未明確其傳染性，該病主要傳播途徑包括密切接觸傳播、經(jīng)呼吸道飛沫傳播等。此外，于相對(duì)封閉的環(huán)境中，若患者長時(shí)間處于高濃度的氣溶膠情況下，也可能導(dǎo)致疾病傳播[7]。由于傳染病在人群中發(fā)生、流行所表現(xiàn)出的生物學(xué)基礎(chǔ)在于傳染途徑、傳染源及易感人群，只要切斷任一環(huán)節(jié)，就可有效阻斷疾病傳播及流行[8]。由此，為避免醫(yī)院成為疫源地，需開展終末消毒，并實(shí)施科學(xué)防護(hù)，以阻斷傳染病傳播。在疫情期間，我國多數(shù)醫(yī)院為患者提供醫(yī)療服務(wù)的病區(qū)大多為一般病房改造而來，在疫情過后需恢復(fù)正常的醫(yī)療活動(dòng)，因此，終末消毒意義重大。終末消毒指傳染源離開場所后，為確保場所及物品不再有病原體存在，需進(jìn)行徹底的消毒處理[9]。雖然終末消毒已成為切斷傳染病傳播途徑的重要環(huán)節(jié)，但如何正確使用消毒劑，以提高消毒效果，仍需進(jìn)一步明確。根據(jù)新冠肺炎防控方案中相關(guān)要求，針對(duì)室內(nèi)空氣的終末消毒僅可使用超低容量的噴霧法消毒，但考慮到基層醫(yī)院的條件有限，可推廣二氧化氯、過氧乙酸及過氧化氫等消毒劑汽化的消毒方式，但對(duì)于消毒劑的選擇，汽化過氧化氫為常用消毒劑之一，其通過改變過氧化氫形態(tài)，使其迅速由液體發(fā)生汽化變?yōu)闅鈶B(tài)，可促使消毒劑擴(kuò)散于空氣中達(dá)到消毒目的[10]。研究發(fā)現(xiàn)，汽化過氧化氫用于消毒滅菌工作中，其生物殺滅量高達(dá)1.0×106，同時(shí)，相較于液態(tài)的過氧化氫，汽化過氧化氫對(duì)細(xì)胞芽孢的殺滅能力增加了100倍[11]。既往常用消毒滅菌方法包括臭氧熏蒸、甲醛熏蒸及二氧化氯熏蒸等，相比較而言，汽化過氧化氫技術(shù)用于消毒滅菌，其條件更為溫和，不僅對(duì)環(huán)境無毒性作用，且對(duì)人體同樣無毒性作用，可基本實(shí)現(xiàn)無殘留。

本研究中試驗(yàn)組采用汽化過氧化氫消毒，結(jié)果顯示，兩組采樣點(diǎn)位的表面細(xì)菌總數(shù)合格率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；試驗(yàn)組空氣霉菌消亡率較對(duì)照組更高；提示汽化過氧化氫用于發(fā)熱門診新冠肺炎終末消毒可取得良好的消毒效果。分析原因?yàn)?，?duì)照組采用傳統(tǒng)消毒方法，即采用含氯消毒劑進(jìn)行噴灑擦拭消毒，同時(shí)采用紫外線進(jìn)行照射消毒，該種消毒方法不僅只作用于物體表面，工作效率還不高，難以實(shí)現(xiàn)對(duì)所有物體表面的覆蓋，特別是管腔類物體，無法對(duì)其內(nèi)表面進(jìn)行消毒[12]。此外，傳統(tǒng)消毒方法具有一定腐蝕性。報(bào)道[13]顯示，噴灑2000mg/L含氯消毒液對(duì)嚴(yán)重污染物進(jìn)行消毒處理，不僅腐蝕性較強(qiáng)，還無法達(dá)到徹底消毒效果。此外，集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)（具有空氣凈化消毒裝置）、紫外線照射消毒法及空氣消毒器等也是常用的空氣消毒方法。一般來說，化學(xué)消毒法在終末消毒中應(yīng)用較少，對(duì)于呼吸道傳染病等嚴(yán)重病原微生物污染的室內(nèi)空氣，若想達(dá)到終末消毒效果，常需采用高效消毒劑，如過氧化氫、過氧乙酸等，并進(jìn)行氣溶膠噴霧消毒。過氧化氫具有較強(qiáng)氧化性，其分解產(chǎn)物如活性氧、羥基等自由基團(tuán)，可對(duì)細(xì)胞重要結(jié)構(gòu)如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)及脫氧核糖核酸（DNA）等產(chǎn)生破壞，同時(shí)可破壞通透性屏障，以促使細(xì)胞死亡而達(dá)到滅菌目的[14]。過氧化氫用于消毒滅菌工作，常用方法包括等離子體、液體、汽化及氣溶膠噴霧等。近年來，過氧化氫在消毒滅菌設(shè)備、技術(shù)等研究領(lǐng)域取得新進(jìn)展，包括“干霧”滅菌技術(shù)、汽化過氧化氫技術(shù)等[15]。本研究采用汽化過氧化氫技術(shù)，原理在于通過閃蒸技術(shù)，瞬間使得高濃度過氧化氫溶液發(fā)生汽化，消毒效果與過氧化氫溶液濃度、汽化狀態(tài)、用量、氣流擴(kuò)散、溫濕度、裝載條件、空間差異性及材料等因素密切相關(guān)。汽化過氧化氫對(duì)很多種類的微生物均可實(shí)現(xiàn)消毒技術(shù)規(guī)范中所規(guī)定的滅菌水平，即殺菌對(duì)數(shù)值＞6，包括豬霍亂沙門氏菌、綠膿桿菌及肉毒桿菌芽孢等。醫(yī)院是最易發(fā)生交叉感染的地方，特別是新冠病毒不易被殺滅。本研究采用暴露平板法對(duì)空氣沉降菌監(jiān)測的空氣消毒效果進(jìn)行測定，結(jié)果并未很高，即便殺滅率未能達(dá)到100.0%，但于消毒前可在標(biāo)本中分離出的病原微生物，在汽化過氧化氫技術(shù)消毒后均未檢出。因此，采用汽化過氧化氫進(jìn)行終末消毒，可有效減少霉菌等常見病原微生物引起的醫(yī)院感染情況。本研究以現(xiàn)場實(shí)際工作情況對(duì)輸出裝置進(jìn)行改裝，通過加長管道輸送汽化過氧化氫，可讓工作人員操作處于外部安全地帶即可進(jìn)行，并對(duì)流量進(jìn)行監(jiān)控，可避免消毒人員進(jìn)入受污染場所，以達(dá)到降低感染風(fēng)險(xiǎn)目的。此外，汽化過氧化氫消毒后，過氧化氫消毒機(jī)自帶程序可將殘留的過氧化氫蒸汽徹底分解，且分解速度快，對(duì)室內(nèi)物品基本無損壞[16]。

綜上所述，通過對(duì)收治新型冠狀病毒肺炎患者7個(gè)隔離病室的采樣檢測，采用汽化過氧化氫消毒設(shè)備和含氯消毒液加紫外線照射兩種方法消除空氣中的霉菌，兩種方法對(duì)空氣霉菌的清除效果相近，空氣細(xì)菌數(shù)也可達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。兩種消毒方法均不可在有人條件下進(jìn)行操作，但相比較而言，汽化過氧化氫消毒設(shè)備在消毒工作過程中，滅菌效果更為徹底，且起效時(shí)間更短，是新型冠狀病毒肺炎患者出院后病區(qū)終末消毒首選，更適用于病區(qū)細(xì)菌、真菌（霉菌）等微生物空氣、物表的一體化消毒，醫(yī)院感染防控中可以積極應(yīng)用。