冀迅,梁慧,時(shí)洋凱,張瑜,任夢(mèng)嬌,余黎,魏凱峰,劉濤

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院·中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院,江蘇 南京 210023;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,江蘇 南京 210023)

藥食同源理論在我國(guó)歷史悠久,隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)高質(zhì)量發(fā)展,養(yǎng)生保健意識(shí)不斷增強(qiáng),藥食同源中藥因其安全性高而被越來(lái)越多地應(yīng)用于疾病的防治中。在各種損傷因素造成的心肌相關(guān)疾病中,如心肌梗死等往往預(yù)后不佳,需要較長(zhǎng)時(shí)間的調(diào)理,中醫(yī)藥特別是藥食兩用的品種在這方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),適合長(zhǎng)期應(yīng)用。心肌損傷究其病機(jī)本質(zhì)而言,主要涉及心陰心血虧耗,心體失于滋潤(rùn)濡養(yǎng)。魏凱峰在臨床中針對(duì)心陰血虧耗型心肌損傷常應(yīng)用酸甘化陰法指導(dǎo)用藥,多具顯著療效。故從酸甘化陰理論立法,以臟腑“體-用”關(guān)系為著眼點(diǎn),通過(guò)總結(jié)大量臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究成果,對(duì)藥食同源藥物進(jìn)行篩選并開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)山茱萸-炙甘草藥對(duì)能夠顯著保護(hù)心肌組織、改善心肌損傷,延長(zhǎng)模型動(dòng)物存活時(shí)間。故此文基于酸甘化陰理論,對(duì)藥食同源品種山茱萸-炙甘草保護(hù)心肌、緩解心肌損傷的作用進(jìn)行探討,以期更好地指導(dǎo)山茱萸-炙甘草在臨床中的使用,并為藥食同源品種的研究開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供參考。

1 藥食同源概述

中醫(yī)藥學(xué)自古就有“藥食同源”的概念,一般認(rèn)為是對(duì)藥物和食物起源上聯(lián)系的認(rèn)識(shí)[1]。在“神農(nóng)嘗百草”的典故中可以窺見(jiàn)藥物與食物被發(fā)現(xiàn)的淵源,藥食同源不僅意味著二者起源相同,當(dāng)前的一般看法也認(rèn)為藥食同源是指某一類(lèi)藥物和食物之間沒(méi)有明顯的界限,既可當(dāng)作食物日常食用,又可作為藥物防治疾病。且與傳統(tǒng)中藥相比,藥食同源類(lèi)中藥材更具性味平和、營(yíng)養(yǎng)豐富、無(wú)明顯毒副作用等顯著優(yōu)勢(shì)。《周禮·天官》中將“醫(yī)”分為食醫(yī)、疾醫(yī)、瘍醫(yī)、獸醫(yī)[2],食醫(yī)因其作用顯著且使用廣泛,被列為首位?！饵S帝內(nèi)經(jīng)太素》:“空腹食之為食物,患者食之為藥物?！盵3]這也體現(xiàn)了藥食同源的觀念。隨著傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,人們對(duì)藥食兩用食物的認(rèn)識(shí)更加詳盡,如山藥、粳米、紅棗、薏苡仁、飴糖、烏梅、蜂蜜、小茴香、赤小豆、山茱萸、炙甘草等既可以食用,又能發(fā)揮藥物的治療作用,可以有效調(diào)整人體機(jī)能狀態(tài),預(yù)防和治療疾病,相對(duì)更加安全平和,故應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。

2 中醫(yī)學(xué)對(duì)心肌損傷的認(rèn)識(shí)

心肌損傷是臨床中常見(jiàn)的一類(lèi)可由多種原因?qū)е碌男募〗Y(jié)構(gòu)或功能損傷的疾病,可有心肌纖維化、心肌壞死、冠狀動(dòng)脈微循環(huán)功能障礙、心包炎、心功能不全以及心肌炎等疾病表現(xiàn)形式。從西醫(yī)角度看,心肌損傷病理機(jī)制主要在于氧化應(yīng)激、凋亡、炎癥、鈣離子穩(wěn)態(tài)失衡、鐵死亡、自噬、內(nèi)皮功能障礙以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等方面,并往往伴隨著復(fù)雜的分子水平的生理生化過(guò)程改變[4]。

中醫(yī)學(xué)沒(méi)有心肌損傷的病名,根據(jù)心肌損傷多有心悸、氣短、胸痛、水腫等癥狀特點(diǎn),可以將其歸于心悸、怔忡、胸痹、心痛、心衰等范疇。現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,勞逸失度、飲食失宜、七情內(nèi)傷、六淫侵襲、外傷以及藥毒等多為心肌損傷的常見(jiàn)病因。其中外傷侵襲可直接損傷心體,造成心體結(jié)構(gòu)損傷,七情過(guò)激也可直接損及心體,影響心神。勞逸、飲食、七情失常多通過(guò)引起精氣血津液等物質(zhì)基礎(chǔ)的失常而發(fā)生氣滯、血瘀、寒凝、痰飲等病理變化,從而間接損及心體。藥毒致病多因其本身藥性迅猛,服用后易傷及正氣,導(dǎo)致陰陽(yáng)失調(diào),損及心體?，F(xiàn)腫瘤疾病的臨床一線用藥蒽環(huán)類(lèi)藥物,如阿霉素導(dǎo)致的心肌損傷即屬于藥毒損傷,且阿霉素性質(zhì)陽(yáng)熱,可傷陰耗氣,使心陰心血虧耗,心脈失養(yǎng)[5]。六淫致病后多邪郁而化火,火毒具有燔灼之性,可煉血為瘀,煉津?yàn)樘?火毒之邪燔灼升騰可入于血分、聚于局部,易生腫毒,火毒壅滯也可造成臟腑實(shí)質(zhì)性損傷,導(dǎo)致心肌組織微結(jié)構(gòu)損傷;此外火毒陽(yáng)邪傷陰,直接消灼煎熬血脈中流動(dòng)陰血與濡養(yǎng)心體的陰血,造成心體心陰心血的耗傷。在不同的病因病機(jī)作用下,心肌損傷的證型也多有不同,但大多屬于本虛標(biāo)實(shí)證候[6],其病機(jī)本質(zhì)在于物質(zhì)基礎(chǔ)層面的心陰心血虧耗,失于滋潤(rùn)濡養(yǎng),也可進(jìn)一步導(dǎo)致陰損及陽(yáng),致使心氣心陽(yáng)推動(dòng)無(wú)力,引起心體功能活動(dòng)的衰退。故臨床中多通過(guò)滋陰養(yǎng)血、修復(fù)心肌組織以改善心肌損傷,并常運(yùn)用山茱萸、炙甘草、玉竹、黃芪、西洋參、黃精、五味子、人參以及麥冬等藥食同源中藥材配伍以保護(hù)心肌組織,緩解心肌損傷。

3 酸甘化陰治法及其在心肌損傷中的應(yīng)用

人體的生理結(jié)構(gòu)及其功能正常運(yùn)轉(zhuǎn),取決于陰陽(yáng)之間的平衡?！端貑?wèn)·陰陽(yáng)應(yīng)象大論》中提出“陽(yáng)化氣,陰成形”的理論,張介賓在《類(lèi)經(jīng)》中對(duì)“陽(yáng)化氣,陰成形”做了進(jìn)一步闡釋:“陽(yáng)動(dòng)而散,故化氣。陰?kù)o而凝,故成形?！比梭w臟腑陰陽(yáng)協(xié)調(diào)運(yùn)轉(zhuǎn)的實(shí)質(zhì)包括“體-用”關(guān)系,即物質(zhì)基礎(chǔ)與功能表現(xiàn)關(guān)系。體是本體、實(shí)體,強(qiáng)調(diào)人體的結(jié)構(gòu)實(shí)體;用為功用、效用,強(qiáng)調(diào)人體的功能表現(xiàn)。人體臟腑實(shí)質(zhì)為體,其各具功能為用。中醫(yī)整體觀指出人體作為一個(gè)整體,人體自身生理的整體統(tǒng)一性包括人體臟腑結(jié)構(gòu)的統(tǒng)一性、構(gòu)成人體的物質(zhì)基礎(chǔ)及其功能活動(dòng)的統(tǒng)一性和人體形神統(tǒng)一性[7]。其中構(gòu)成人體的物質(zhì)基礎(chǔ)及其功能活動(dòng)的統(tǒng)一性即為“體-用”關(guān)系。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為人體是由氣血陰陽(yáng)所構(gòu)成的,其中陰和血為物質(zhì)基礎(chǔ),陽(yáng)和氣主要發(fā)揮功能。即《黃帝內(nèi)經(jīng)》所謂“陰在內(nèi),陽(yáng)之守也;陽(yáng)在外,陰之使也”[3]。如心主血脈,心陰心血構(gòu)成心體,而心陽(yáng)心氣則發(fā)揮著心主血脈及主神明的功能,兩者相互配合、互根互用。人體陰陽(yáng)“體-用”的關(guān)系體現(xiàn)為陰陽(yáng)互根互用關(guān)系,生理狀態(tài)下,陽(yáng)氣“用”的功能有賴(lài)于“體”的物質(zhì)結(jié)構(gòu)正常,若邪傷陰血,心體受損,則心用出現(xiàn)異常。心肌損傷的病機(jī)本質(zhì)多在于心陰心血的虧耗導(dǎo)致心用異常,治療當(dāng)補(bǔ)心體以實(shí)心用。故重點(diǎn)從“陰成形”——物質(zhì)基礎(chǔ)層面,探討酸甘化陰治法在心肌損傷中的治療作用。

酸甘化陰法是指基于“五味合化”思想將具有收澀功效的酸味藥物與具有緩補(bǔ)功效的甘味藥物進(jìn)行配伍應(yīng)用,從而起到化生陰液,補(bǔ)養(yǎng)陰血,濡潤(rùn)臟腑,收斂浮陽(yáng),緩急止痛等作用的一類(lèi)治法[8]。酸甘化陰法萌芽于夏商,初步形成于《黃帝內(nèi)經(jīng)》:“辛甘發(fā)散為陽(yáng),酸苦涌泄為陰”[3],這是酸甘化陰理論的思想源頭。酸甘組合雖具備陰陽(yáng)兩個(gè)屬性,然甘主和化,助酸入陰,故二者配伍屬性偏陰[9]?！秱s病論》從多個(gè)角度明確運(yùn)用酸甘化陰法以配伍組方,芍藥甘草湯為其代表方。金元時(shí)期醫(yī)家常常在臨床上運(yùn)用酸甘化陰法治療各類(lèi)疾病,成無(wú)己首次從五味合化的角度提出酸甘味藥物配伍應(yīng)用,其作用偏向于滋陰養(yǎng)血。清代吳鞠通首次明確提出酸甘化陰的概念,提出酸味藥物與甘味藥物合用可治療陰虛諸癥[10-11]。酸甘相伍一斂一滋,不僅可養(yǎng)陰生津,益精補(bǔ)血,也可酸甘固澀,用于多種滑脫不禁病證,如咳嗽、泄瀉、遺尿、遺精等;可酸甘緩急,舒筋止痛,用于筋脈拘急、肌肉精神緊張等病證,如肢體、脘腹痙攣疼痛等[12]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明酸味藥物中的主要成分鞣質(zhì)以及有機(jī)酸類(lèi)等可以通過(guò)使蛋白質(zhì)沉淀凝團(tuán),最終成為不溶于水的化合物以及使分泌細(xì)胞干燥等,發(fā)揮收斂固澀作用;甘味藥物的主要成分氨基酸、糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、苷類(lèi)及維生素等,都可補(bǔ)充人體所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),故酸甘配伍可起到斂陰滋陰養(yǎng)血的作用[13]。

酸甘化陰治法中酸能收澀、甘可和緩,故有緩急止痛功效,可顯著緩解心肌損傷引起的心區(qū)痛癥;酸甘化陰有涼潤(rùn)之效,可改善心悸、胸痹等疾病急性期的胸部脹痛、刺痛以及心煩易惱等癥狀,可制約心胸過(guò)亢之邪熱,以存陰液[9];酸甘化陰法亦可化生陰津陰血,既可改善心血不足,亦可通過(guò)化生陰津以益陰制陽(yáng),滋陰降火,改善心悸、心衰等疾病中陰血虧虛,虛火擾心的病機(jī)。酸甘化陰治法在心肌損傷中,不僅可化生物質(zhì)之陰,也可兼補(bǔ)功能之陽(yáng),起到收斂心陰心陽(yáng)、滋補(bǔ)陰血等功用。有現(xiàn)代研究指出,酸甘化陰治法可加強(qiáng)心肌供血、增強(qiáng)心肌收縮力、改善微循環(huán)、改善心功能以及減輕西藥不良反應(yīng)等[14]。

4 山茱萸-炙甘草配伍對(duì)心肌損傷的保護(hù)作用

在酸甘化陰理論涵蓋的藥食同源中藥材中,山茱萸、炙甘草、玉竹、黃芪、西洋參、黃精、五味子、人參以及麥冬等諸多中藥都可有效改善多種原因?qū)е碌男募p傷。本課題組根據(jù)臨床實(shí)踐以及現(xiàn)代藥理學(xué)研究,通過(guò)對(duì)藥食同源中藥材進(jìn)行篩選并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)山茱萸-炙甘草藥對(duì)保護(hù)心肌組織、改善心肌損傷有顯著的療效,茲闡述如下。

4.1 山茱萸與炙甘草概況

山茱萸為山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉,又名山萸肉、蜀棗、石棗、肉棗、萸肉、棗皮、藥棗等,本品始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[15],2018年,山茱萸也被新增入衛(wèi)健委公布的藥食同源物質(zhì)名單。作為常見(jiàn)的藥食兩用中藥材,山茱萸成熟干燥果肉表面紫紅或黑紫色,肉厚,質(zhì)柔軟味微酸微苦[16],果實(shí)中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳水化合物、有機(jī)酸、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等,有利于機(jī)體加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)吸收,提高機(jī)體免疫力,并有抗衰老、降血糖等作用[17]。山茱萸藥性酸、澀、微溫,常用于眩暈耳鳴,陽(yáng)痿遺精,遺尿尿頻,崩漏帶下,大汗虛脫,內(nèi)熱消渴等虛損類(lèi)疾病。張錫純認(rèn)為“凡于元?dú)庵畬⒚撜?當(dāng)以萸肉為第一”。目前,較多研究表明山茱萸可用于防治高血壓、心臟病、腎病、婦科疾病、心臟病、皮膚病等疾病[18],可有效改善心率失常、心肌纖維化、減輕心肌缺血再灌注損傷等心臟疾病[19]。

甘草為豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)或脹果甘草(Glycyrrhiza inflata Bat.)的干燥根和根莖,以?xún)?nèi)蒙古伊克昭盟杭錦旗所產(chǎn)的甘草品質(zhì)最佳[20-21]。甘草在《神農(nóng)本草經(jīng)》被列為上品,因其可解百毒、調(diào)和諸藥,被列為百藥之首[22]。臨床上可用于脾胃虛弱,倦怠乏力,心動(dòng)悸、脈結(jié)代的治療。甘草在臨床中多生用或蜜炙用。炙甘草是甘草經(jīng)過(guò)蜜炙后的炮制品,其功能由原來(lái)的清熱解毒轉(zhuǎn)為補(bǔ)中緩急,具有補(bǔ)中緩急、益氣復(fù)脈的功效,在臨床方劑中也得到了更廣泛的使用[23]。在心血管疾病中,炙甘草常發(fā)揮重要的作用,使用頻率常常高于生甘草。炙甘草單味藥即具有補(bǔ)益心氣,益氣復(fù)脈,改善心悸、心律失常功用,臨床也常與人參、附子、丹參等藥配伍治療心臟疾病,如在炙甘草湯中,炙甘草與生地黃共為君藥,在臨床中廣泛用于心疾等病的治療?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明炙甘草具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒等作用,在心率失常、心房纖顫、心室重構(gòu)、心衰等疾病中發(fā)揮顯著的療效[24]。

4.2 山茱萸-炙甘草藥對(duì)配伍對(duì)心肌損傷的緩解作用

山茱萸藥性酸、澀,炙甘草其味甘、平,酸味藥物主收斂,可酸收心氣津液,甘味藥物主補(bǔ)益,可補(bǔ)益心氣陰陽(yáng)[10]。山茱萸-炙甘草酸甘相合,一斂一滋,酸得甘助而生陰,可有效改善心肌損傷中心陰虧損、衰竭,滋補(bǔ)心陰心血,保護(hù)心肌組織。山茱萸-炙甘草配伍雖重在滋養(yǎng)陰液,其中炙甘草尚能溫補(bǔ)心氣陰陽(yáng)。山茱萸-炙甘草配伍的酸甘化陰功效不僅能滋陰血而補(bǔ)心體,并能斂心氣以助心用。在配伍形式上,臨床中多以山茱萸為主、炙甘草為輔,山茱萸用量常大于炙甘草用量,即以酸味藥物為君藥,甘味藥物為臣藥,這類(lèi)配伍功效重在斂陰滋陰,可顯著改善心肌損傷重,心陰耗損,心陽(yáng)衰微欲脫的病證[9]。在臨床實(shí)際治療中也可根據(jù)心肌損傷病證表現(xiàn)的不同加辛味藥物等為輔助,共同達(dá)到收斂心陰心氣,溫補(bǔ)陰血的目的,顯著改善心肌損傷中的陰陽(yáng)氣血不和。

山茱萸-炙甘草作為藥食同源品種,相對(duì)于臨床一般用藥,在治療心肌損傷方面另有著顯著的優(yōu)勢(shì):臨床常用的治療心肌損傷的藥物多用于急癥且不能久用,如硝酸甘油,長(zhǎng)期應(yīng)用多具有明顯的不良反應(yīng);而山茱萸和炙甘草作為藥食同源品種,不僅對(duì)于心肌損傷具有治療作用,且安全性相對(duì)較高。臨床應(yīng)用中,性味平緩的山茱萸與炙甘草,相對(duì)于藥性峻烈的中藥更易于長(zhǎng)期使用。此外,山茱萸與炙甘草的食物特性使其不僅在生活中便于獲得,在色香味等感官性狀上更易讓人接受,可做成藥膳等方便使用。

4.3 山茱萸-炙甘草緩解心肌損傷的現(xiàn)代藥理學(xué)基礎(chǔ)

山茱萸和炙甘草均有較強(qiáng)的生物活性和藥理學(xué)作用,其化學(xué)活性成分豐富,二者均有有機(jī)酸、黃酮類(lèi)、苷類(lèi)、多糖、氨基酸等活性成分[25-26]。其中有機(jī)酸具有抗氧化、降壓和保肝等功效;多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)、心肌保護(hù)、生殖保護(hù)等作用;黃酮類(lèi)具有較強(qiáng)的自由基清除能力、抗炎抑菌能力及體外抗氧化活性,苷類(lèi)則多具有較強(qiáng)的抗炎能力[26-28]。此外山茱萸中主要活性成分環(huán)烯醚萜及其總苷具有降血糖、抗炎、調(diào)節(jié)骨代謝、神經(jīng)元保護(hù)、肝細(xì)胞保護(hù)、心肌保護(hù)等藥理活性。甘草蜜炙后黃酮類(lèi)成分含量明顯提高[29],其中的異甘草素具有明顯的抗炎、抗氧化能力。這些活性成分及其藥理作用復(fù)雜多樣,分子間聯(lián)系密切,可通過(guò)多通路多靶點(diǎn)互相作用,從而使山茱萸-炙甘草可通過(guò)抗炎、抑制凋亡、抗氧化等多種途徑減輕心肌耗氧量、改善心肌收縮舒張能力、緩解心肌損傷,起到心臟血管保護(hù)作用。

4.3.1 抗炎作用 現(xiàn)有研究表明,山茱萸總苷、山茱萸多糖等成分可以通過(guò)調(diào)控炎癥因子水平,抑制一系列炎癥反應(yīng),降低梗死心肌中炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)水平,緩解心肌損傷[30];異甘草素可通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路發(fā)揮抗炎作用,起到改善心肌損傷,減輕心肌纖維化,改善心肌重構(gòu)的保護(hù)作用[31]。

4.3.2 抗氧化作用 山茱萸中活性成分山茱萸新苷可通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB和Nrf2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮抗氧化作用,顯著提高細(xì)胞中活性氧(ROS)水平,從而減輕心肌氧化應(yīng)激損傷,起到明顯的心臟保護(hù)作用[30];山茱萸多糖可通過(guò)干預(yù)過(guò)度氧化應(yīng)激,抑制促炎因子與減輕細(xì)胞內(nèi)鈣超載而保護(hù)心肌缺血再灌注損傷[32];異甘草素可作用于Nrf2/HO-1信號(hào)通路以抗氧化應(yīng)激,改善心肌損傷[33]。

4.3.3 抗凋亡作用 山茱萸中成分莫羅苷可作用于Bcl-2/Bax信號(hào)通路減輕心肌細(xì)胞氧化,抑制凋亡反應(yīng),從而達(dá)到緩解心肌損傷、延緩心力衰竭的作用[34];山茱萸總苷可通過(guò)抑制心肌細(xì)胞凋亡、下調(diào)TGF-β的表達(dá)起到抗凋亡作用,從而改善心肌細(xì)胞損傷[35];甘草酸和甘草次酸可以通過(guò)保護(hù)線粒體,有效改善細(xì)胞凋亡[36]。

4.3.4 心肌保護(hù)作用 山茱萸中有效成分山茱萸多糖、莫諾苷和馬錢(qián)苷等在心臟缺血再灌注與糖尿病小鼠模型中均可對(duì)心肌細(xì)胞起到明顯的保護(hù)作用,緩解心肌損傷[31]。炙甘草中活性成分異甘草素能夠增加心肌GLUT-4表達(dá)、減少心肌TNF-α蛋白表達(dá),減輕心肌損害,且對(duì)心肌組織有保護(hù)作用[37]。甘草總黃酮能夠顯著保護(hù)心肌收縮,具有明顯的抗心肌缺血作用[29]。甘草苷能夠降低心肌細(xì)胞乳酸脫氫酶的釋放,可以拮抗Kv4.3基因的mRNA表達(dá)降低和CavL2基因的mRNA表達(dá)升高,緩解心肌細(xì)胞的損傷[33]。

4.4 山茱萸-炙甘草緩解心肌損傷的大數(shù)據(jù)與實(shí)驗(yàn)研究

通過(guò)TCMSP平臺(tái)檢索、獲取山茱萸、炙甘草2味中藥的主要活性成分的作用靶點(diǎn)。并在OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.omim.org/)、Therapeutic Target Database數(shù)據(jù)庫(kù)(http://db.idrblab.net/web/)、GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/)檢索獲取心肌損傷的相關(guān)靶點(diǎn),將活性化合物作用靶點(diǎn)基因與疾病基因進(jìn)行映射,可得110個(gè)交集基因,即為二者的共同靶點(diǎn)。可知這些靶點(diǎn)可能是山茱萸-炙甘草緩解心肌損傷的主要靶點(diǎn)。通過(guò)計(jì)算上述110個(gè)主要靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵傩?可獲得其中關(guān)聯(lián)度值較高的20個(gè)核心靶點(diǎn)(圖1),表明這些靶點(diǎn)可能在山茱萸-炙甘草緩解心肌損傷中發(fā)揮了重要作用。其中AKT1、IL-6、TNF、IL-1β、TP53、VEGFA等靶點(diǎn)度值較高,說(shuō)明這些靶點(diǎn)是山茱萸-炙甘草緩解心肌損傷的核心靶點(diǎn)。AKT也稱(chēng)為磷酸激酶B,在涉及細(xì)胞凋亡和血管生成的多種級(jí)聯(lián)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制中發(fā)揮著重要作用,其上下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)失調(diào)與心血管疾病關(guān)系密切。IL-6、IL-1β都是典型的炎癥相關(guān)細(xì)胞因子,主要參與調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥反應(yīng)。TNF也是參與全身炎癥的細(xì)胞信號(hào)蛋白,可通過(guò)其受體激活NF-κB等通路,引起多種促炎細(xì)胞因子的表達(dá)。VEGFA屬于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族,可促進(jìn)新生血管形成和使血管通透性增加。將山茱萸-炙甘草的成分及靶點(diǎn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入至cytoscape3.7.2軟件,計(jì)算網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵傩?最后構(gòu)建藥物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。度值排序居前10位的活性成分為槲皮素(Quercetin)、山柰酚(Kaempferol)、7-甲氧基-2-甲基異黃酮(7-Methoxy-2-methyl isoflavone)、柚皮素(Naringenin)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、芒柄花黃素(Formononetin)、光果甘草酮(Glabrone)、光甘草寧(Glabranin)、甘草查爾酮A(Licochalcone A)、豆甾醇(Stigmasterol)。故可以預(yù)測(cè)上述10個(gè)活性成分是山茱萸-炙甘草的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。其中β-sitosterol與Stigmasterol屬于植物甾醇類(lèi)化合物,其余成分都屬于黃酮類(lèi)化合物。黃酮類(lèi)化合物是酸甘味中藥的共有主要活性成分,這表明山茱萸-炙甘草藥對(duì)在治療心肌損傷時(shí)通過(guò)黃酮類(lèi)化學(xué)成分發(fā)揮抗氧化、抗炎以及抗凋亡等作用可能是其主要基礎(chǔ)。

圖1 山茱萸-炙甘草-心肌損傷共同靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)

團(tuán)隊(duì)前期通過(guò)腹腔注射阿霉素誘導(dǎo)小鼠心肌損傷,并用辛甘化陽(yáng)藥味與酸甘化陰藥味進(jìn)行干預(yù)治療,結(jié)果可見(jiàn)辛甘化陽(yáng)藥味在短期內(nèi)雖可顯著增強(qiáng)心功能,但小鼠存活期較短;而酸甘化陰藥味可明顯延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活期等。這表明辛甘化陽(yáng)治法可以通過(guò)“陽(yáng)化氣”改善功能活動(dòng),但心肌損傷的病機(jī)重在心陰心血的虧耗,陰損及陽(yáng)進(jìn)而損傷心氣心陽(yáng)。故短期功能過(guò)度強(qiáng)化,壯火食氣,反而會(huì)進(jìn)一步加劇心陰心血的虧耗,加重心體損害。而酸甘化陰治法可以通過(guò)“陰成形”促進(jìn)機(jī)體物質(zhì)基礎(chǔ)的修復(fù),進(jìn)而改善心肌損傷。

后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究表明酸甘化陰藥味山茱萸-炙甘草可顯著延長(zhǎng)心肌損傷小鼠存活期,改善心肌損傷小鼠心臟萎縮,改善小鼠心臟功能等,可有效緩解小鼠心肌損傷。這進(jìn)一步證明了酸甘化陰治法可以有效改善心體損傷,且從“體-用”關(guān)系來(lái)看,酸甘化陰治法不僅改善了物質(zhì)基礎(chǔ)層面的心體損傷,更能通過(guò)物質(zhì)基礎(chǔ)與功能活動(dòng)之間的陰陽(yáng)互根互用,協(xié)調(diào)共濟(jì),進(jìn)一步改善心體的功能活動(dòng)。

5 展望

藥食同源中藥因其安全性較高越來(lái)越多地被應(yīng)用于臨床疾病的防治中。在酸甘化陰理論指導(dǎo)下的藥食同源品種山茱萸-炙甘草藥對(duì)可顯著保護(hù)心肌組織,緩解心肌損傷,其機(jī)制研究大多聚焦于減輕心肌損傷,對(duì)心肌損傷后的修復(fù)與心肌保護(hù)研究較少。后期可利用山茱萸和炙甘草的安全、有效性,深入研究其長(zhǎng)期應(yīng)用后緩解心肌損傷的作用和機(jī)制,特別是心肌損傷后的修復(fù)作用,將實(shí)驗(yàn)研究與臨床實(shí)踐相結(jié)合,加大對(duì)藥食同源藥對(duì)山茱萸-炙甘草的研究開(kāi)發(fā)與應(yīng)用,并更好地指導(dǎo)臨床。