陳榮杰,姜芳超,劉 琳,劉圣龍,孫萬輝

(萊州市海洋發(fā)展和漁業(yè)服務(wù)中心,山東萊州 261400)

養(yǎng)殖密度決定著魚類的生長速度、產(chǎn)量及經(jīng)濟效益,對于目前集約化的養(yǎng)殖系統(tǒng),養(yǎng)殖者往往是盡可能的提高放養(yǎng)密度,以為這樣就可以獲得高產(chǎn)量和經(jīng)濟收益,但是卻忽略了過高的放養(yǎng)密度造成的空間、餌料競爭等方面帶來的應(yīng)激造成的魚類生長緩慢及死亡的危害[1-2];目前已經(jīng)有相關(guān)研究表明不同的養(yǎng)殖條件和不同的魚類品種對魚所造成的負(fù)面影響也不同[3];因此對于養(yǎng)殖的不同魚類品種探討其適宜的養(yǎng)殖密度顯得十分有必要;血液是動物機體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的重要組成部分,起著重要的作用,如物質(zhì)運輸、防御及生理調(diào)節(jié)等作用,血液指標(biāo)是研究動物生理、病理的主要依據(jù)[4-5];草魚(Ctenopharyngodonidella)是目前中國淡水魚養(yǎng)殖的主要魚類品種之一,是典型的草食魚類,探討?zhàn)B殖密度對其血清生化指標(biāo)的影響,旨在為漁業(yè)的集約化養(yǎng)殖提供合理的養(yǎng)殖密度作理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗草魚購自某草魚養(yǎng)殖基地,共購買了4860尾規(guī)格統(tǒng)一為(5.50±0.50)g且體表健康的草魚;試驗草魚運回后先放入池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)25d。

1.2 試驗方法

試驗草魚分為4個養(yǎng)殖密度組,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組,每個組的養(yǎng)殖密度分別為10.0kg/m3、18.0kg/m3、26.0kg/m3、34.0kg/m3,每個養(yǎng)殖密度組分別飼養(yǎng)草魚180尾/箱、330尾/箱、480尾/箱和630尾/箱,網(wǎng)箱規(guī)格為1.0m×1.5m×1.0m,每個密度組各有3個重復(fù)小組;試驗草魚均飼喂配方飼料,配方飼料組分及營養(yǎng)成分參見表1。整個試驗為期8周。

表1 基礎(chǔ)飼糧組分及營養(yǎng)成分

表2 養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗過程對每個網(wǎng)箱進(jìn)行連續(xù)曝氣;對水下25cm處的水溫、pH值及溶解氧進(jìn)行監(jiān)測,保持水溫在26℃～28℃,pH值在6.6～7.0之間,溶解氧≥3mg/L,同時保證水質(zhì)中的氨氮濃度≤0.05mg/L;每個網(wǎng)箱中設(shè)置一個圓形懸浮框掛有圓形網(wǎng)盤,用于飼料投喂,試驗草魚每天上午8:00和下午17:00進(jìn)行投喂,投喂量為草魚總體質(zhì)量的3%,以每20d進(jìn)行一次體質(zhì)量的稱量,根據(jù)體質(zhì)量對投喂量進(jìn)行調(diào)整。

1.4 試驗樣品的采集及指標(biāo)的測定

試驗結(jié)束后,對飼養(yǎng)的草魚進(jìn)行24hrs饑餓處理,然后在每個網(wǎng)箱中隨機挑選5尾草魚,利用75mg/L的MS222麻醉處理,然后尾靜脈采集5mL血液,采集的血液于常溫下靜置2hrs,然后3000rmp/min進(jìn)行離心10mins,分離血清置于4℃冷藏待用。

分離的血清利用全自動生化分析儀測定:谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、人血白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)和總膽固醇(T-CHO)。

1.5 試驗數(shù)據(jù)分析

檢測的血清生化指標(biāo)數(shù)據(jù)利用Excel表格初步整理后,采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)以3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示;最后采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,P<0.05表示組間差異顯著,P<0.01表示組間差異極顯著。

2 結(jié)果

由2數(shù)據(jù)可以看出,4個試驗組的堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、甘油三酯、總膽固醇指標(biāo)沒有顯著性差異(P>0.05);I組、Ⅱ組、Ⅲ組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、膽固醇、葡萄糖呈上升趨勢;I組、Ⅱ組、Ⅲ組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶組間升高對比達(dá)到顯著性水平(P<0.05);Ⅳ組谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶極顯著地高于I組、Ⅱ組、Ⅲ組(P<0.01);Ⅳ組的甘油三酯、總膽固醇極顯著的高于I組(P<0.01),顯著的高于Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05);Ⅳ組葡萄糖極顯著高于I組、Ⅱ組(P<0.01),顯著地高于Ⅲ組(P<0.05)。試驗結(jié)果說明,養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響主要集中于谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、總膽固醇和葡萄糖。

3 討論

已有相關(guān)研究表明高密度的養(yǎng)殖環(huán)境會造成擁擠,引起魚體應(yīng)激反應(yīng),從而引起血清生化指標(biāo)的變化[7];ALT和AST是兩種反應(yīng)動物機體肝臟功能的代謝酶,是干細(xì)胞正常的重要指標(biāo),當(dāng)肝臟受損時,這兩種轉(zhuǎn)氨酶釋放到血液中,造成血清中ALT和AST濃度升高;林琳等[8]人研究發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高豹紋鰓棘鱸血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高;董立學(xué)等[9]人在研究不同飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對草魚血清生化指標(biāo)的影響中也證明了隨著養(yǎng)殖密度的升高草魚血清中的ALT、AST活性顯著升高。該研究利用10.0kg/m3、18.0kg/m3、26.0kg/m3、34.0kg/m3,的養(yǎng)殖密度養(yǎng)殖草魚,發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高,高密度養(yǎng)殖草魚血清中的ALT、AST活性顯著升高,說明了高密度應(yīng)激導(dǎo)致肝細(xì)胞受損,從而導(dǎo)致了血清中ALT和AST活性升高。血清中的GLU水平可以作為魚類處于應(yīng)激狀態(tài)的一個重要指標(biāo)。GLU水平越高,說明魚所處的環(huán)境應(yīng)激越大。該研究結(jié)果表明,隨著養(yǎng)殖密度的升高,GLU水平也隨之升高,說明密度越高對魚的應(yīng)激也隨著升高。該研究還發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高,TG和T-CHO也隨著升高,這可能和應(yīng)激條件下GLU水平升高增加了糖原分解途徑的糖異生和能量代謝有關(guān)[10]。

綜上所述,隨著養(yǎng)殖密度的升高,對草魚的應(yīng)激反應(yīng)隨著升高,進(jìn)而導(dǎo)致血清生化指標(biāo)中的ALT、AST、GLU、TG和T-CHO的升高。