方宇昕，李 育，劉寶姝，董國強(qiáng) （海軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系, 上海 200433）

全球癌癥統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明，肝癌是全球第二大癌癥死亡原因，因肝癌死亡的人口數(shù)占癌癥總死亡人數(shù)的8.2%。肝細(xì)胞癌是原發(fā)性肝癌最常見的形式[1]，手術(shù)是其首選的治療方法，然而只有5%～10%的肝細(xì)胞腫瘤適合切除，大多數(shù)患者（50%～70%）在手術(shù)后5 年內(nèi)發(fā)生腫瘤復(fù)發(fā)[2]。在小分子藥物治療方面，多激酶抑制劑索拉非尼能夠延長患者近3 個月中位生存期和進(jìn)展時間[3]，但仍無法滿足臨床治愈肝細(xì)胞癌的需求。因此，尋找新的肝細(xì)胞癌治療靶點，開發(fā)新的治療策略具有重要的臨床意義。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖（GPCs），屬于硫酸乙酰肝素蛋白多糖家族，通過糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定于細(xì)胞膜外，是細(xì)胞外基質(zhì)的主要組成部分[4]。磷脂酰肌醇蛋白聚糖由一個核心蛋白以及與其相連的兩條硫酸乙酰肝素（HS）鏈組成，該家族包括6 個成員（GPC1-6）[5]。其中GPC3 研究最為廣泛，其由580 個氨基酸組成，表達(dá)于胎兒的肝、肺、胎盤和腎器官，由于DNA 甲基化誘導(dǎo)的表觀遺傳沉默，其在成人器官中的表達(dá)明顯降低[6]。在臨床研究中，GPC3 與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，許多研究都報道了GPC3 在肝細(xì)胞癌中表達(dá)上調(diào)[7]。本文綜述了GPC3 在肝細(xì)胞癌相關(guān)信號通路中的作用以及基于GPC3 開發(fā)的肝癌靶向療法。

1 GPC3 與腫瘤信號通路

1.1 GPC3 與Wnt 信號通路

在肝細(xì)胞癌的發(fā)生與發(fā)展中，經(jīng)典Wnt 信號通路激活是常見的分子事件，與腫瘤細(xì)胞存活、增殖、遷移和侵襲密切相關(guān)[8]。經(jīng)典的Wnt 信號通路是一個依賴于β-catenin 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，由Wnt與兩種輔助受體結(jié)合而激活，分別是卷曲蛋白（FZD）以及低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6（LRP5/6）[9-10]。Wnt 結(jié)合到FZD 富含半胱氨酸的Wnt 結(jié)合結(jié)構(gòu)域，誘導(dǎo)了FZD 與LRP5/6 復(fù)合物的組裝[11]。FZD 和LRP5/6 構(gòu)象的改變，以及后續(xù)糖原合成酶激酶3、酪蛋白激酶1 的磷酸化，促進(jìn)了破壞復(fù)合物重要成分軸抑制蛋白（Axin）的募集。當(dāng)蓬亂蛋白（DVL）被募集并結(jié)合到FZD 蛋白的C 端尾部時，由DVL、Axin 和其他結(jié)合輔助因子組成的破壞復(fù)合物是穩(wěn)定的[12-13]。Axin 可以防止β-catenin降解，因此，β-catenin 在細(xì)胞質(zhì)中積累，進(jìn)入細(xì)胞核，驅(qū)動細(xì)胞增殖和存活基因的轉(zhuǎn)錄[14]。由于Wnt 信號通路對肝膽功能、細(xì)胞分化和修復(fù)等許多功能至關(guān)重要，其失調(diào)可導(dǎo)致肝細(xì)胞癌、肝母細(xì)胞瘤或其他肝臟疾病。

在肝細(xì)胞癌中，過表達(dá)的GPC3 作為Wnt 蛋白的輔助受體或儲存位點來調(diào)節(jié)細(xì)胞表面信號傳導(dǎo)（圖1）[15]。GPC3 可以潛在地激活Wnt 信號通路，增加細(xì)胞膜上Wnt 蛋白數(shù)量，或與Wnt 及其受體FZD 結(jié)合，穩(wěn)定其相互作用，促進(jìn)復(fù)合物的形成。當(dāng)包含GPC3、Wnt 和Frizzled 在內(nèi)的復(fù)合物被內(nèi)吞后，可激活下游信號通路。在上述信號傳遞過程中，GPC3 通過核心蛋白或HS 側(cè)鏈，以依賴于FZD 表達(dá)水平的方式促進(jìn)Wnt 的激活[16]。此外，GPC3 從細(xì)胞表面脫落也會影響Wnt 信號通路，其調(diào)控機(jī)制尚不明確，仍需進(jìn)一步研究。

圖1 GPC3 介導(dǎo)的肝細(xì)胞癌相關(guān)信號通路示意圖

1.2 GPC3 與Hippo 信號通路

Hippo 信號通路在調(diào)節(jié)細(xì)胞大小、器官體積、組織再生和癌癥發(fā)展中起關(guān)鍵作用[17]。在哺乳動物中，Hippo 信號通路涉及兩個主要的激酶Mst1/2和Lats1/2。Lats1/2 可誘導(dǎo)yes 相關(guān)蛋白（YAP）磷酸化并使其失活，從而導(dǎo)致cyclin E、diap1 和bantam等一系列目標(biāo)基因下調(diào)（圖1）。YAP 已被證明是經(jīng)典Hippo 信號通路中關(guān)鍵的下游效應(yīng)分子[18]，因其在肝細(xì)胞癌中過表達(dá)，也被確定為一種致癌基因，可引發(fā)并促進(jìn)HCC 的發(fā)展。多項研究表明GPC3 可能是YAP 的靶基因之一，LI 等[19]觀察到Y(jié)AP 激活程度與肝細(xì)胞癌組織GPC3 表達(dá)呈正相關(guān)。此外，研究人員還證明了GPC3 敲除在mRNA和蛋白水平上抑制YAP 表達(dá)，誘導(dǎo)Huh7 細(xì)胞凋亡，證明GPC3 與YAP 存在互相調(diào)節(jié)的關(guān)系[20]。

1.3 GPC3 與Hedgehog 信號通路

Hedgehog（Hh）信號通路在胚胎發(fā)育中起著決定性作用，并且在物種間高度保守。Hh 信號通路與細(xì)胞的生長、分化，以及組織和血管的形成密切相關(guān)。經(jīng)典的Hh 信號通路涉及三種Hh 配體的募集，分別是：SonicHedgehog（SHH）、Indian Hedgehog（IHH）和Desert Hedgehog（DHH）。Hh 信號傳遞受Patched（PTCH）和Smoothened（SMO）的控制。在正常情況下，PTCH 通過抑制SMO 蛋白活性，從而抑制下游通路。當(dāng)PTCH 與Hh 結(jié)合以后，解除對SMO 的抑制作用，介導(dǎo)下游信號傳導(dǎo)（圖1）[21-22]。

當(dāng)Hh 信號通路失調(diào)時，可導(dǎo)致腫瘤生長、惡性轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)移[23-24]。研究人員發(fā)現(xiàn)GPC3 能以高親和力結(jié)合Shh 和Ihh，并與PTCH 競爭結(jié)合Hh，導(dǎo)致PTCH 失活、SMO 被持續(xù)性抑制，從而阻止Hh 信號傳導(dǎo)[25]。GPC3 可通過抑制Hh 信號通路促進(jìn)HepG2 細(xì)胞增殖[26]。后續(xù)研究還表明，轉(zhuǎn)化酶的切割、LRP1 對GPC3 抑制Hh 信號傳導(dǎo)發(fā)揮重要的作用[25-26]。

1.4 GPC3 與細(xì)胞生長因子通路

GPC3 可作為一種輔助受體，通過其HS 側(cè)鏈調(diào)節(jié)生長因子的活性，刺激細(xì)胞生長[27]。AKUTSU等[28]報道了利用小干擾RNA 敲低GPC3，導(dǎo)致肝癌細(xì)胞中一系列生長因子mRNA 和蛋白水平下調(diào)。FGFs 是一個能廣泛影響細(xì)胞活動的廣譜生長因子家族[29]。在肝癌細(xì)胞中，GPC3 通過HS 側(cè)鏈，作為FGF2 的輔助受體與其結(jié)合[30]。LAI 等[31]報道了一種肝素降解內(nèi)酯酶sulfatase 2，能夠在肝癌細(xì)胞中上調(diào)GPC3 的表達(dá)，并促進(jìn)FGF 信號傳導(dǎo)。遺傳學(xué)研究表明，肝細(xì)胞生長因子（HGF）/c-Met通路可調(diào)節(jié)肝細(xì)胞癌的進(jìn)展（圖1）[32]。GAO 等[32]證實GPC3 通過HS 側(cè)鏈介導(dǎo)的HGF/c-Met 通路可影響肝細(xì)胞癌的遷移和運動。TGF-β 激活素、BMP 等轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）超家族成員，可調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等多種細(xì)胞反應(yīng)。TGF-β 與其受體結(jié)合后可介導(dǎo)TGF-β 信號傳導(dǎo)，進(jìn)而激活下游SMADs 及相關(guān)復(fù)合物。SUN 等[33]發(fā)現(xiàn)在肝癌細(xì)胞中抑制GPC3 表達(dá)會導(dǎo)致TGF-β2 表達(dá)增強(qiáng)，從而抑制細(xì)胞增殖，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程，誘導(dǎo)復(fù)制性衰老。

GPC3 在肝癌相關(guān)信號通路中發(fā)揮著廣泛且重要的作用，因此，進(jìn)一步闡明GPC3 在這些信號通路中所發(fā)揮的作用、肝癌相關(guān)信號通路是如何通過GPC3 產(chǎn)生密切聯(lián)系以調(diào)控基本細(xì)胞過程等問題，對后續(xù)開發(fā)靶向治療策略有著重要意義。

2 靶向GPC3 的肝癌治療策略

2.1 單克隆抗體

GC33（Codrituzumab）是一種重組人源化單克隆抗體，以高親和力結(jié)合GPC3 的近膜結(jié)構(gòu)域（圖2）。GC33 可誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體依賴性細(xì)胞毒性（ADCC）、補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性（CDC）以抑制腫瘤生長。GC33 能抑制小鼠異種移植瘤生長，其抑制程度與細(xì)胞表面抗原水平近似相關(guān)[34]。在臨床研究中，GC33 治療晚期肝細(xì)胞患者的I 期劑量遞增研究，已分別在美國和日本進(jìn)行。兩項研究都表明，GC33 耐受性良好，在最高計劃劑量下未檢測到劑量限制性毒性[35-36]。然而，在121 例肝細(xì)胞癌患者的隨機(jī)II 期臨床試驗中，GC33 的治療并沒有獲得顯著的臨床收益。使用GC33 與安慰劑相比，中位無進(jìn)展生存時間分別為2.6 個月和1.5 個月，中位總生存期分別為8.7 個月和10 個月[37]。盡管應(yīng)用更大劑量的GC33，或選擇GPC3 高表達(dá)的患者進(jìn)行治療可能會改善治療結(jié)果，但這些假設(shè)還需要進(jìn)一步的臨床研究來驗證。

圖2 靶向GPC3 的肝癌治療策略示意圖

針對GPC3 這一靶點，研究人員還開展了其他抗體相關(guān)研究工作。LIU 等[38]報道了一種特異性靶向GPC3 中間結(jié)構(gòu)域的單克隆抗體32A9，可抑制小鼠肝細(xì)胞癌的生長。FENG 等[39]報道了一種抗體HN3，能以高親和力識別完整的GPC3 蛋白，該抗體能夠使細(xì)胞周期阻滯于G1 期，抑制GPC3陽性細(xì)胞的增殖，抑制小鼠異種移植瘤的生長。GAO 等[40]開發(fā)了一種人源抗GPC3 單克隆抗體HS20，可識別GPC3 蛋白中的HS 側(cè)鏈，通過阻斷Wnt 信號傳導(dǎo)抑制腫瘤生長，該抗體對小鼠未顯示出毒性，安全性較好。盡管GPC3 是一種特異性良好的肝癌相關(guān)抗原，上述靶向GPC3 的抗體在臨床前研究工作中展現(xiàn)出了一定的療效，但仍需開展進(jìn)一步的臨床研究以考察這些抗體的治療作用與安全性。

2.2 雙特異性抗體

鑒于靶向GPC3 的單克隆抗體有限的臨床治療作用，以及新型免疫治療藥物雙特異性抗體的興起，研究人員針對GPC3 開發(fā)了雙特異性抗體ERY974，一種人源化IgG 結(jié)構(gòu)的T 細(xì)胞重定向抗體（TRAB），具有兩條不同的重鏈和一條共同的輕鏈，重鏈可分別識別GPC3 和CD3（圖2）[41]。ERY974以GPC3 依賴的方式激活T 細(xì)胞，對包括肝細(xì)胞癌在內(nèi)的多種表達(dá)GPC3 的實體瘤表現(xiàn)出抗腫瘤作用，并對免疫檢查點抑制劑治療無效的腫瘤，也顯示出顯著的非免疫原性抗腫瘤作用[42]。進(jìn)一步的研究表明，在異種移植瘤模型中，ERY974 和化療藥物的聯(lián)合使用顯著增強(qiáng)了抗腫瘤作用。該雙特異性抗體正在進(jìn)行一項針對GPC3 陽性實體瘤患者的臨床I 期試驗（NCT02748837）。DU 等[43]報道了一種靶向GPC3 和CD47 的雙特異性抗體，通過識別兩種抗原，有效阻止腫瘤生長。與抗CD47單抗相比，雙特異性抗體具有較長的血清半衰期，無全身不良反應(yīng)，且療效更優(yōu)。這些結(jié)果提示，針對GPC3 開發(fā)雙特異性抗體可能是未來肝癌治療的熱門研究方向。

2.3 GPC3 衍生肽/DNA 疫苗

除了開發(fā)靶向GPC3 的抗體外，研究GPC3 衍生肽/DNA 疫苗也是一種針對肝癌有價值的治療策略（圖2）。NAKATSURA 等[44-45]在肝細(xì)胞癌患者中，發(fā)現(xiàn)了人類白細(xì)胞抗原HLA-A24 限制性細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞（CTL）表位GPC3298-306肽（EYILSLEEL）以及HLA-A2 限制性表位GPC3144-152肽（FVGEFFTDV）。在一項針對晚期肝細(xì)胞癌患者的I 期臨床試驗中，GPC3 疫苗表現(xiàn)出良好的耐受性，疫苗誘導(dǎo)了高比例的GPC3 特異性CTL 反應(yīng)。在33 例患者中，1 例患者表現(xiàn)出部分緩解（PR），19 例疾病穩(wěn)定（SD）患者中有4 例出現(xiàn)腫瘤消退，并超出PR 標(biāo)準(zhǔn)。持續(xù)治療2 個月后，疾病控制率（PR+SD）為60.6%[46]。一項II 期、非盲、單臂試驗（UMIN-CTR: 000002614）招募了40 名接受手術(shù)或射頻消融的肝癌患者。在治愈后的1 年中，進(jìn)行了10 次疫苗接種，結(jié)果表明，接受手術(shù)/射頻消融與疫苗治療的患者，腫瘤復(fù)發(fā)率明顯低于僅接受手術(shù)治療的患者（1 年復(fù)發(fā)率：28.6%vs54.3%，P=0.346）[47]。研究人員還鑒定了5 種GPC3 衍生的長肽，它們可以誘導(dǎo)HLA II 型限制性th1 細(xì)胞的應(yīng)答，這些經(jīng)肽誘導(dǎo)的th1 細(xì)胞的響應(yīng)與總生存期的延長密切相關(guān)[48]。

除了這些肽疫苗外，GPC3 DNA 疫苗也可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對肝癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞，抑制同質(zhì)性腫瘤生長，并提高異種移植瘤小鼠的存活率[49]。然而，盡管多肽疫苗具有潛在的吸引力，但其對于晚期肝癌的治療作用太弱。瘤內(nèi)注射多肽疫苗或?qū)⑵渑c抗PD-1 抗體聯(lián)用，可通過增加疫苗誘導(dǎo)的CTL 免疫應(yīng)答來增強(qiáng)GPC3 衍生肽疫苗的抗腫瘤效果[50]。

2.4 免疫毒素

免疫毒素是抗體片段與毒素片段融合產(chǎn)生的嵌合結(jié)構(gòu)。假單胞菌外毒素（PE）是一種常見的用于免疫毒素的毒素片段，PE 從嵌合分子分離后可誘導(dǎo)蛋白質(zhì)合成暫停，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，免疫毒素被認(rèn)為能通過兩種機(jī)制觸發(fā)腫瘤消退：抗體誘導(dǎo)的細(xì)胞信號失活，以及毒素誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)合成抑制（圖2）[51]。GAO 等[52]構(gòu)建了免疫毒素HN3-PE38 和YP7-PE38，后者通過抑制Wnt/β-catenin 信號通路以及YAP 信號通路，在HepG2 細(xì)胞中發(fā)揮有效的抗腫瘤作用。然而，免疫毒素潛在的脫靶效應(yīng)和PE38 誘導(dǎo)產(chǎn)生的中和抗體毒性不容忽視，這也導(dǎo)致其只能在低劑量下使用（＜0.8 mg/kg）。第二代PE 片段mPE24 顯示出較低的脫靶效應(yīng)和較強(qiáng)的腫瘤抑制作用。Wang 等[53]構(gòu)建了HN3-mPE24和HN3-HN3-mPE24，前者具有更高的GPC3 結(jié)合能力、更優(yōu)的細(xì)胞毒性和更高的最大耐受劑量。在肝癌異種移植小鼠模型中，靜脈注射HN3-mPE24可誘導(dǎo)腫瘤明顯消退，延長生存期。然而，免疫毒素的免疫原性作用和相對較短的半衰期限制了其進(jìn)一步的臨床應(yīng)用。為了克服這一缺點，F(xiàn)LEMING等[54]利用添加白蛋白結(jié)合域（ABD）的策略以延長免疫毒素半衰期，得到HN3-ABD-T20、HN3-ALB1-T20。與HN3-T20 相比，HN3-ABD-T20 血清保留時間延長了45 倍（半衰期：5.5 hvs7 min），僅需HN3-T20 劑量的十分之一即可有效消退腫瘤。靶向GPC3 的免疫毒素，在治療肝癌方面顯示出一定的作用，具有進(jìn)一步研究的價值。

2.5 CAR-T/NK 細(xì)胞

CAR-T 細(xì)胞由患者來源的T 細(xì)胞產(chǎn)生，經(jīng)基因工程改造的T 細(xì)胞擴(kuò)增后，再輸注到患者體內(nèi)[55]。GPC3 作為一種有潛在價值的細(xì)胞表面抗原，近年來被用于開發(fā)CAR-T 細(xì)胞（圖2）。WU 等[56]報道了一種靶向GPC3 的CAR-T 細(xì)胞，能夠在體外殺死GPC3 陽性肝癌細(xì)胞，并在小鼠肝癌異種移植瘤模型中誘導(dǎo)腫瘤消退。與此同時，聯(lián)合使用索拉非尼和靶向GPC3 的CAR-T 細(xì)胞也被證明是具有療效的治療策略。LI 等[57]開發(fā)了能夠同時靶向GPC3 與表皮生長因子受體（EGFR）的CAR-T 細(xì)胞，其在抑制肝癌生長方面顯示出了更強(qiáng)的治療效果?；谏鲜雠R床前研究成果，多項臨床試驗探索了GPC3 CAR-T 細(xì)胞在肝癌治療中的應(yīng)用。一項I 期臨床研究（NCT02395250）報道了GPC3 CART 細(xì)胞在13 例難治性或復(fù)發(fā)性GPC3 陽性的中國肝細(xì)胞癌患者中應(yīng)用，患者對CAR-T 細(xì)胞治療表現(xiàn)出較好的耐受性，初步分析表明，經(jīng)清除淋巴細(xì)胞的預(yù)處理后，靶向GPC3 的CAR-T 細(xì)胞展現(xiàn)出一定的療效。

然而，使用CAR-T 細(xì)胞同樣會產(chǎn)生副作用，包括腫瘤溶解綜合征、細(xì)胞因子釋放綜合征、以及非腫瘤組織的在靶效應(yīng)。這些副作用而非腫瘤本身，可能同樣致命。目前，NK-92 細(xì)胞已經(jīng)發(fā)展到能以最小的毒性實現(xiàn)較優(yōu)的療效。基因修飾NK-92 細(xì)胞的安全性和細(xì)胞毒性特異性已在臨床前試驗中得到證實，這些細(xì)胞有潛力成為CAR 的理想載體[58]?；贕PC3 的CAR-T/NK 細(xì)胞治療策略有望為肝細(xì)胞癌免疫治療提供新的手段。

2.6 基因治療

在過去的幾年中，研究人員開發(fā)了許多基于GPC3 的基因治療策略，包括使用miRNAs、短發(fā)卡樣RNAs（shRNAs）和siRNAs 等分子干預(yù)GPC3 表達(dá)水平進(jìn)行治療（圖2）。靶向GPC3 的miRNA 能以GPC3 依賴的方式抑制肝癌細(xì)胞的生長，并誘導(dǎo)其凋亡[59]。使用GPC3 shRNAs 進(jìn)行RNA 干擾，可以抑制肝癌細(xì)胞、肝癌異種移植瘤的增殖、侵襲[60]；誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯于G1 期并引發(fā)細(xì)胞凋亡[61]。此外，利用siRNA 敲低GPC3 表達(dá)水平，可通過下調(diào)YAP，抑制肝癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[62]。然而，盡管siRNA 技術(shù)能實現(xiàn)單個基因的特異性沉默，但該技術(shù)因依賴于高特異性、低毒性的遞送策略而很難應(yīng)用于臨床環(huán)境。為了克服siRNA 的遞送問題，WANG等[63]構(gòu)建了一種納米載體（NPsiRNA-GPC3 Ab），該載體在體外顯示出抗腫瘤功效，未顯示出明顯的細(xì)胞毒性，并顯著抑制小鼠原位肝癌異種移植腫瘤的生長。雖然這些基于基因治療的技術(shù)在體外和體內(nèi)顯示出了一定的療效，但在應(yīng)用于臨床研究前仍需進(jìn)一步的探索。

2.7 針對GPC3 的抗體協(xié)同治療

抗GPC3 抗體和免疫檢查點抑制劑的聯(lián)用，也是一種針對肝細(xì)胞癌的有效治療方案（圖2）。在過表達(dá)GPC3 的小鼠肝臟腫瘤模型中，抗小鼠GPC3單克隆抗體與抗小鼠PD-L1 抗體聯(lián)用時，顯示出更強(qiáng)的抗腫瘤活性[64]。與此同時，聯(lián)合治療的I 期臨床試驗?zāi)壳罢谶M(jìn)行中，GC33 和atezolizumab 聯(lián)合治療顯示出良好的耐受性，并在晚期、高表達(dá)GPC3、經(jīng)既往治療的肝細(xì)胞癌患者中顯示出有效的腫瘤抑制作用[65]。因此，該策略較其他治療方案可能具有更高的抗腫瘤療效與安全性，可能具有治愈HCC 患者的潛力。

2.8 光動力治療

光動力療法（PDT）是一種治療腫瘤的新方法，這種方法依賴于光敏劑產(chǎn)生活性氧，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，這種凋亡作用與腫瘤血管關(guān)閉和免疫活性增強(qiáng)有關(guān)，但其應(yīng)用受到可見光組織穿透力差的限制，使用近紅外（NIR）光敏劑可以解決這些限制（圖2）[38]。例如，F(xiàn)ENG 等人將單克隆抗體與光敏性酞菁苷染料IR700 偶聯(lián)，通過近紅外光照射靶向癌細(xì)胞。使用IR700-YP7 和IR700-HN3 進(jìn)行的光免疫治療在荷瘤小鼠中顯示出治療效果。此外，IR700-YP7 聯(lián)合蛋白結(jié)合型紫杉醇進(jìn)行光免疫治療，可顯著增加蛋白結(jié)合型紫杉醇的遞送量，提高治 療 效 果[66]。UCNPs@mSiO2-Ce6-GPC3 納 米 顆粒具有較好的生物相容性，毒性低，產(chǎn)生抗腫瘤作用的同時還可實現(xiàn)細(xì)胞成像[67]。半乳糖-金納米棒是一種新型的多功能納米結(jié)構(gòu)，其包載GPC3 siRNA（siGPC3），可以同時實現(xiàn)GPC3 基因沉默效應(yīng)和光熱治療作用，并且能用于癌癥的協(xié)同治療[68]。

3 展望

經(jīng)過20 多年的研究，GPC3 因與Wnt、Hh、YAP 等肝癌相關(guān)信號通路的密切關(guān)系，使其從單純的肝細(xì)胞癌生物標(biāo)志物，逐漸演變?yōu)榭垢伟┲委煹臒衢T研究靶點。研究人員圍繞GPC3 這一靶點開發(fā)了單克隆抗體、雙特異性抗體、腫瘤疫苗、CAR-T 細(xì)胞等一系列治療策略，其在臨床前及臨床研究中都顯示出了一定的價值，但仍存在著療效不佳、特異性不夠或毒副作用等缺陷。同時，針對GPC3 的蛋白功能、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后修飾等方面的研究仍存在著許多未解之謎。因此，進(jìn)一步闡明GPC3 在肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中所發(fā)揮的功能，并結(jié)合其它抗腫瘤藥物研究策略：例如開發(fā)針對GPC3 的小分子抑制劑，調(diào)控GPC3 蛋白活性，或利用近年來較為熱門的靶向蛋白降解技術(shù)，對GPC3 表達(dá)水平進(jìn)行高效干預(yù)，獲得比目前可用的GPC3 靶向藥物，具有更強(qiáng)腫瘤抑制活性的藥物，仍將是未來極具價值的研究方向。