董浩云，賈彩霞，李 建

（常州檢驗檢測標準認證研究院，江蘇常州 213000）

近年來，食品安全已經(jīng)成了人們關注的重要話題。其中，蔬菜因其種類繁多、營養(yǎng)豐富、口感鮮爽而備受追捧，是人們餐桌上必不可少的佳肴。然而，在蔬菜的種植過程中，為了防治病蟲害，保證蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，使用農(nóng)藥是一種必要手段[1]。但是，若長期過量使用農(nóng)藥，會導致蔬菜中農(nóng)藥的殘留量超標，其對食品的安全性和人們的身體健康會造成嚴重影響，因此，國家出臺了《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021），對蔬菜中各類農(nóng)藥的殘留限量進行了規(guī)定限制[2]。

目前，常見的農(nóng)殘檢測技術包括分光光度法、酶抑制法、氣相色譜法、高效液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等[3]。氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的靈敏度較高，離子對選擇好，可以滿足日常的農(nóng)殘檢測。但是，隨著進樣的增加，樣品基質(zhì)會對進樣口和離子源造成污染，影響儀器的靈敏度和準確度。雖然可以通過更換襯管、切割色譜柱、清洗離子源等方法來維護儀器，但這些方法無疑會增加檢測成本，因此，前處理過程中需要對樣品進行凈化[4]。在《食品安全國家標準 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）中，選擇QuEChERs 前處理法，萃取包中的無水硫酸鎂脫水效率高，可提升農(nóng)藥提取率，PSA 能有效消除脂肪、有機酸等雜質(zhì)，凈化效果顯著[5]。通過參考不同蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測方法，對黃瓜基質(zhì)中多種農(nóng)藥分析的線性、定量限、精密度等進行了驗證分析。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

QuEChERs 萃取包（安捷倫）：4 g 硫酸鎂，1 g 氯化鈉，1 g 檸檬酸鈉，0.5 g 檸檬酸氫二鈉；QuEChERs凈化管（安捷倫）：900 mg 硫酸鎂，150 mg PSA；壇墨農(nóng)藥混標（100 μg·mL-1）和壇墨外環(huán)氧七氯B 內(nèi)標（100 μg·mL-1）；乙腈（色譜純，CNW）。

1.2 儀器與設備

GCMS-TQ 8040 NX氣相色譜儀-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（Shimadzu 島津）；AOC 20i Plus 自動進樣器（Shimadzu 島津）；TGL21 臺式高速冷凍離心機（長沙英泰儀器有限公司）；KQ-400KDE 數(shù)控超聲波清洗儀（昆山超聲儀器有限公司）；MS-3 渦旋振蕩器（德國IKA）。

1.3 實驗方法

1.3.1 標準溶液配制

（1）內(nèi)標使用液。準確移取外環(huán)氧七氯B 內(nèi)標溶液（100 μg·mL-1），乙腈稀釋定容為質(zhì)量濃度10 mg·L-1的內(nèi)標使用液。

（2）標準溶液。準確移取農(nóng)藥混標（100 μg·mL-1）1 mL，用乙腈稀釋配制成質(zhì)量濃度為10.0 mg·L-1的混合標準中間液備用，然后分別吸取適量10.0 mg·L-1的混合標準中間液，用空白基質(zhì)逐級稀釋配制成質(zhì)量濃度為0.005 mg·L-1、0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.100 mg·L-1、0.200 mg·L-1、0.500 mg·L-1的基質(zhì)標準工作溶液，在進樣小瓶中各加入20 μL 內(nèi)標使用液，分別加入1 mL 上述各濃度的基質(zhì)標準工作溶液，渦旋混勻后待上機測定。

1.3.2 樣品前處理

稱取10.00 g 樣品于50 mL 塑料離心管中，加入10 mL 乙腈、QuEChERs 萃取鹽包（內(nèi)含4 g 硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉）及1 顆陶瓷均質(zhì)子，振蕩1 min，6 000 r·min-1離心5 min。吸取5 mL 上清液至QuEChERs 凈化管（內(nèi)含900 mg 硫酸鎂及150 mg PSA）中，渦旋1 min，6 000 r·min-1離心10 min，上清液過0.22 μm 有機濾膜后，吸取1 mL 于2 mL 進樣小瓶中，加入20 μL的內(nèi)標使用液，渦旋混勻，待上機測定。

1.3.3 儀器條件

（1）氣相色譜條件。色譜柱：Agilent DB-5ms（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純氦氣；載氣流速：1 mL·min-1；進樣方式：不分流進樣；進樣口溫度：280 ℃；進樣量：1 μL；程序升溫：初始柱溫80 ℃，保持1 min，以40 ℃·min-1升溫至120 ℃，再以6 ℃·min-1升溫到280 ℃，再以12 ℃·min-1升溫到300℃，保持3 min。

（2）質(zhì)譜條件。電子轟擊源：80 eV；離子源溫度：280 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；溶劑延遲：3 min；多反應監(jiān)測模式，參考《食品安全國家標準 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018），每種化合物選擇一對定性離子對和一對定量離子對，每組所需要檢測離子對按出峰順序，分時段分別檢測。

2 結果與分析

2.1 方法優(yōu)化

乙腈是強極性的溶劑，穿透性強，能有效提取樣品中的農(nóng)殘，且不會像丙酮等試劑溶解過多的雜質(zhì)，因此本方法選擇乙腈作為最終溶劑。同時，省略了氮吹后乙酸乙酯復溶的過程，可避免氮吹和復溶過程中造成的農(nóng)殘損失，也使得前處理更簡單快速。通過分析40 種農(nóng)殘的出峰時間，以6 ℃·min-1升溫到280 ℃可保證一些菊酯類農(nóng)殘的分離度，而300 ℃保持3 min 可以對檢測器高溫烘烤，保證一些高沸點雜質(zhì)快速流出色譜柱。此升溫程序分離效果理想，比GB 23200.113—2018 中縮短10 min 的分析時間。

2.2 標準曲線與定量限

按1.3.1 配制的多種農(nóng)藥混合基質(zhì)標準曲線上機檢測，最終結果表明，40 種農(nóng)藥殘留在0.005 ～0.500 mg·L-1線性關系良好，相關系數(shù)R2在0.990 0 ～0.999 9，同時，以S/N≥10 確定方法定量限均低于GB 23200.113—2018 中10 μg·kg-1的要求，具備檢測可行性。為檢測中篩選方便，所以統(tǒng)一將定量限定為10 μg·kg-1。詳細結果見表1。

表1 40 種農(nóng)藥的線性方程、相關系數(shù)、定量限

2.3 精密度和回收率

本方法用內(nèi)標法定量，以黃瓜為空白基質(zhì)進行加標回收實驗，添加水平分別為0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1，每 個 質(zhì) 量 分 數(shù) 水 平 均以相同方法處理6 份，以其相對標準偏差（Relative Standard Deviation，RSD）驗證方法精密度，以平均回收率驗證方法準確度，回收率見表2。3 個水平加標回收率范圍在60%～130%，精密度RSD 均小于15%，添加水平較低時，農(nóng)殘易受基質(zhì)影響，回收率跟精密度也會相對偏高，需單獨優(yōu)化方法[2]。

表2 40 種農(nóng)藥殘留加標回收率及精密度表

3 結論

本文采用QuEChERs 前處理法，結合GC-MS/MS 對黃瓜基質(zhì)中40 種農(nóng)藥殘留進行分析，優(yōu)化了國標中現(xiàn)有方法和儀器條件，從線性、回收率、精密度等方面展開驗證，證實了本方法在日常農(nóng)殘檢測中的可行性。該方法具有前處理簡單快速，分析準確度高、重復性好等優(yōu)點，通過PSA 凈化樣品，可減少儀器污染，節(jié)約儀器維護成本。但是，各種農(nóng)藥性質(zhì)存在差異，仍需在實際檢測過程中不斷調(diào)整優(yōu)化。