孫恩江，張麗燕，王洪玲，陳海峰，肖發(fā)沂，齊艷君，朱紹輝**

（1. 山東齊河獸藥飼料研究所，山東 德州 251100；2. 青島菲優(yōu)特檢測(cè)有限公司，山東 青島 266100；3. 孟村縣畜牧局，河北 滄州 061000；4.安丘市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，山東 濰坊 262100；5. 山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東 濰坊 261061）

艾維因肉雞是白羽肉雞中飼養(yǎng)較多的品種，具有增重快、飼料轉(zhuǎn)化率高、成活率高、適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，已在全國大部分地區(qū)飼養(yǎng)。但因我國肉雞的飼養(yǎng)模式集約化程度高[1]，飼養(yǎng)密度大，常常導(dǎo)致雞只免疫力低下、抗病力差[2]，直接影響肉雞的生長性能和死淘率。生長性能是反映肉雞營養(yǎng)狀態(tài)最直接的指標(biāo)，死淘率直接影響?zhàn)B殖者的經(jīng)濟(jì)效益，二者是衡量肉雞養(yǎng)殖效益的最重要指標(biāo)[3]。為提高養(yǎng)殖效益，抗生素曾被大量應(yīng)用于家禽養(yǎng)殖中，但抗生素的過度使用造成藥物殘留、耐藥性增強(qiáng)、不良反應(yīng)等一系列問題，因此，我國已明令禁止使用飼用抗生素，而植物提取物等綠色功能性添加劑受到越來越多的關(guān)注[4-6]。苜蓿多糖（Alfalfa polysaccharides, APS）是一種從苜蓿中提取出來的天然酸性植物多糖[7]，主要由半乳糖酸、鼠李糖、葡萄糖、甘露糖等單糖聚合而成，具有改善動(dòng)物生長性能、提高機(jī)體免疫力、抗氧化、抗感染、改善腸道健康的作用，且成本低、毒副作用小，是一種極具應(yīng)用潛能的綠色、優(yōu)良飼料添加劑，在家禽養(yǎng)殖業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景[8-9]。短鏈脂肪酸（SCFAs）是由1~6 個(gè)碳原子組成的有機(jī)脂肪酸，常溫下易揮發(fā)，故又稱揮發(fā)性脂肪酸[10]，常見的短鏈脂肪酸有7 種，分別為乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸和己酸，其中乙酸、丙酸和丁酸占總量的90%以上[11]。短鏈脂肪酸主要由腸道內(nèi)有益菌群分解膳食纖維產(chǎn)生，因而在腸道食糜及糞便中含量尤為豐富[12]，其含量高低直接反映機(jī)體腸道健康狀態(tài)。本試驗(yàn)通過在飼糧中添加不同水平苜蓿多糖，研究其對(duì)艾維因肉雞生長性能和盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響，為苜蓿多糖在肉雞飼糧中的應(yīng)用提供參考[13]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1 日齡艾維因肉仔雞240 只購于山東濰坊某養(yǎng)殖場(chǎng)。苜蓿多糖（多糖含量22.71%）由青島某添加劑生產(chǎn)企業(yè)提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，將240 只體重相近且健康的艾維因肉仔雞分成4 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只（公母各半）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.5%、1%、2%的苜蓿多糖。試驗(yàn)期42 d。基礎(chǔ)飼糧為玉米－豆粕型飼糧，參照NY/T 33-2004 推薦營養(yǎng)水平配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（飼喂基礎(chǔ)） 單位：%

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)所有雞只飼養(yǎng)在同一雞舍內(nèi)，采用單層籠養(yǎng)，每籠為一個(gè)重復(fù)（10 只）。試驗(yàn)期間雞舍通風(fēng)良好，保持日常衛(wèi)生整潔，環(huán)境及器具定期消毒，按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。試驗(yàn)期間自由采食和飲水。每日巡查，記錄溫度、濕度變化，觀察雞群健康狀況、采食情況，記錄死淘情況。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能 在試驗(yàn)第21 天和第42 天空腹12 h 后，對(duì)所有重復(fù)的雞只進(jìn)行稱重、結(jié)料。計(jì)算平均體重、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）。

平均日增重（g）=（試驗(yàn)期末平均體重-試驗(yàn)期初平均體重）/試驗(yàn)天數(shù)；

平均日采食量（g）=試驗(yàn)期間總采食量/試驗(yàn)天數(shù)/雞只數(shù)；

飼料轉(zhuǎn)化率=試驗(yàn)期間平均日采食量/試驗(yàn)期間平均日增重。

1.4.2 盲腸食糜短鏈脂肪酸 在試驗(yàn)第21 天和第42 天，從每個(gè)處理的每個(gè)重復(fù)中挑選1 只健康、體態(tài)正常的雞，活體稱重后屠宰。迅速剖開腹腔，采集盲腸末段內(nèi)的食糜于預(yù)冷的離心管內(nèi)，置于液氮瓶中運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

試驗(yàn)采用氣相色譜- 質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)SCFAs，用乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線，內(nèi)標(biāo)法定量。樣品處理：稱取0.2 g 食糜，加300 μL 50%硫酸，再加500 mg/L 的內(nèi)標(biāo)（環(huán)己酮）溶液100 μL 和乙醚2 mL 勻漿1 min，于4 ℃ 12 000 r/min 離心10 min，取上層乙醚溶液待測(cè)。色譜柱：Agilent DB-WAX 毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣：高純氦氣（純度≥99.999%）；載氣流速1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度：220 ℃；進(jìn)樣量：1 μL，不分流進(jìn)樣；升溫程序?yàn)椋?0 ℃，保持1 min，以30 ℃/min 升至210 ℃，保持3 min。離子源：EI，離子源溫度230 ℃，接口溫度220 ℃。試驗(yàn)結(jié)果表示為μg/g，即每克食糜中SCFAs 的微克數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2011 初步處理后，使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），組間均值進(jìn)行Duncan 氏法多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P ＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果分析

2.1 苜蓿多糖對(duì)肉雞生長性能的影響

苜蓿多糖對(duì)肉雞生長性能的影響結(jié)果見表2。由表2 可知，各處理組肉雞初始體重?zé)o顯著差異。在1~21 d，與對(duì)照組相比，添加1%、2%苜蓿多糖能顯著提高肉雞體重、平均日增重及平均日采食量（P<0.05）。此外，1%苜蓿多糖組的肉雞體重、平均日增重和平均日采食量以及2%苜蓿多糖組肉雞平均日采食量顯著高于0.5%苜蓿多糖組；而各處理組間料肉比無顯著差異。在1~42 d，1%苜蓿多糖組肉雞體重和平均日增重最高，0.5%、2%苜蓿多糖組次之，而對(duì)照組最低，且差異顯著（P<0.05）。2%苜蓿多糖組肉雞平均日采食量顯著高于其他三組（P<0.05），而1%苜蓿多糖組肉雞平均日采食量顯著高于對(duì)照組及0.5%苜蓿多糖組（P<0.05）。與其他三組相比，1%苜蓿多糖顯著降低肉雞飼料轉(zhuǎn)化率（P<0.05）。此外，0.5%苜蓿多糖組的肉雞飼料轉(zhuǎn)化率顯著低于對(duì)照組及2%苜蓿多糖組。由此可見，苜蓿多糖添加量為1%時(shí)促進(jìn)肉雞生長的效果最佳。

表2 苜蓿多糖對(duì)肉雞生長性能的影響

2.2 苜蓿多糖對(duì)肉雞盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響

表3 為苜蓿多糖對(duì)肉雞盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響結(jié)果。由表3 可知，在21 d，與對(duì)照組相比，添加苜蓿多糖顯著提高肉雞盲腸食糜中乙酸、丁酸、異丁酸、戊酸及總SCFAs 含量（P<0.05），而且1%組苜蓿多糖乙酸、丁酸、異丁酸、戊酸及總SCFAs 含量顯著高于其他三組（P<0.05）；但與對(duì)照組相比，添加0.5%苜蓿多糖顯著降低肉雞盲腸丙酸及異戊酸含量（P<0.05）。在42 d，苜蓿多糖組肉雞盲腸食糜中乙酸、丁酸、異戊酸含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。0.5%、1%苜蓿多糖組的肉雞盲腸食糜中丙酸及異丁酸含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。由此可見，苜蓿多糖可能會(huì)改善肉雞腸道菌群，從而產(chǎn)生更多的短鏈脂肪酸，且在添加量為1%時(shí)產(chǎn)生的短鏈脂肪酸含量最高。

表3 苜蓿多糖對(duì)肉雞盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響 單位：μg/g

3 討論

3.1 苜蓿多糖對(duì)肉雞生長性能的影響

肉雞養(yǎng)殖的生產(chǎn)效益與其生長性能的高低息息相關(guān)。在無抗養(yǎng)殖的背景下，如何提高肉雞的生長性能受到大家的日益關(guān)注。目前已有研究表明，飼料中添加植物多糖具有提高動(dòng)物生長性能、降低生產(chǎn)成本的作用。李靜[14]在櫻桃谷鴨飼糧中添加苜蓿多糖和甜葉菊多糖，發(fā)現(xiàn)肉鴨的平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率均顯著提高。劉大林等[15]在肉雞飼糧添加1%、2%苜蓿多糖，發(fā)現(xiàn)苜蓿多糖能提高肉雞出欄重和日增重。王朝棟等[16]報(bào)道飼料中添加1 000 mg/kg 苜蓿多糖顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率，降低料蛋比。本試驗(yàn)同樣發(fā)現(xiàn)苜蓿多糖可以提高21 日齡肉雞體重、平均日增重及平均日采食量，但對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率無顯著影響，說明苜蓿多糖可能會(huì)通過增加飼料的適口性提高采食量，進(jìn)而提高日增重及體重。而在42 d 時(shí)，苜蓿多糖組肉雞生長性能依舊具有優(yōu)勢(shì)，且0.5%、1%組苜蓿多糖顯著降低飼料轉(zhuǎn)化率，這可能是長期飼喂苜蓿多糖改善肉雞腸道健康進(jìn)而提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率的結(jié)果。綜合這些指標(biāo)來看，苜蓿多糖添加量為1%時(shí)，肉雞生長速度快，飼料轉(zhuǎn)化率好，養(yǎng)殖者能獲取最大的生產(chǎn)效益。

3.2 苜蓿多糖對(duì)肉雞盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響

短鏈脂肪酸是腸道微生物的代謝產(chǎn)物，能夠調(diào)節(jié)腸道內(nèi)環(huán)境，為腸道上皮細(xì)胞直接供能，還參與多種機(jī)體營養(yǎng)代謝過程，調(diào)節(jié)機(jī)體健康[17]。研究表明，盲腸食糜中的短鏈脂肪酸含量是衡量機(jī)體健康狀況的重要指標(biāo)。適當(dāng)濃度的短鏈脂肪酸有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，維持腸道內(nèi)電解質(zhì)平衡，但過量的短鏈脂肪酸會(huì)干擾腸道物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能，不利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收[18]。通過添加高含量纖維來促進(jìn)腸道細(xì)菌產(chǎn)生較高濃度的短鏈脂肪酸，是目前最適合大面積推廣且行而有效的方法[19]。毛金菊等[5]發(fā)現(xiàn)飼料中添加1 000 mg/kg 蒲公英顯著提高肉雞盲腸食糜中丙酸、丁酸及戊酸含量。鄭雅文等[4]報(bào)道飼糧中添加250 mg/kg 果寡糖顯著提高22 d 肉雞盲腸食糜中戊酸含量。Júskiewicz等[20]在火雞飼糧中分別添加0.5%、1%、2%果寡糖，發(fā)現(xiàn)2%添加組盲腸中丁酸和短鏈脂肪酸總量顯著升高，而低劑量組對(duì)盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量沒有顯著影響，說明果寡糖具有劑量效應(yīng)。曹兵海等[21]在飼料里添加0.4%茶多酚和果寡糖，發(fā)現(xiàn)肉雞盲腸中戊酸含量顯著提高，但短鏈脂肪酸總量無顯著差異，推測(cè)可能的原因是添加量太低不足以產(chǎn)生效果。本研究中，添加不同劑量的苜蓿多糖對(duì)試驗(yàn)組肉雞盲腸食糜內(nèi)短鏈脂肪酸含量的影響存在差異?？傮w來說，乙酸、丙酸、丁酸含量顯著提高，異丁酸、戊酸、異戊酸含量基本影響不大。從總SCFAs 上來看，1%添加組總SCFAs 含量最高，顯著高于其他三組，而0.5%、2%添加組盲腸食糜中總SCFAs 無顯著差異，但均顯著高于對(duì)照組。根據(jù)上述結(jié)果可推測(cè)，苜蓿多糖對(duì)盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量的影響存在劑量效應(yīng)。在低劑量時(shí)，隨著添加量的增加，短鏈脂肪酸含量隨之增高；但當(dāng)超過最適劑量后，短鏈脂肪酸含量反而出現(xiàn)下降趨勢(shì)，說明過高劑量的苜蓿多糖可能對(duì)腸道菌群產(chǎn)生負(fù)面影響，從而降低短鏈脂肪酸含量。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加苜蓿多糖可改善肉雞生長性能，提高盲腸食糜中短鏈脂肪酸含量，但呈劑量依賴性，其中苜蓿多糖添加量為1%時(shí)的效果最佳。