張玉霞,董雯雯,李峰,袁小遠(yuǎn)

（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，山東 濟(jì)南 250100）

SPF 動(dòng)物是指飼養(yǎng)在隔離屏障內(nèi)，不攜帶主要潛在感染或條件致病及對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)有重大干擾的病原，并具有良好的遺傳性能及繁殖能力的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[1]。SPF 級(jí)動(dòng)物因其遺傳性質(zhì)穩(wěn)定、敏感性高[2]，在藥物和疫苗研制[3-4]，克隆技術(shù)[5]等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在我國(guó)生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中SPF 雞和雞胚已經(jīng)研究相對(duì)成熟，基本實(shí)現(xiàn)了規(guī)?；a(chǎn)，用于家禽疫苗生產(chǎn)與檢驗(yàn)、毒種制備等[6-9]，為我國(guó)家禽發(fā)展提供了先決條件和重要保證。

同時(shí)，隨著集約化養(yǎng)殖的發(fā)展，我國(guó)也成為全世界鴨、鵝等水禽出欄量最多的國(guó)家。隨之而來(lái)的鴨病來(lái)勢(shì)洶洶，有些病原可造成重大疫情，對(duì)水禽養(yǎng)殖業(yè)危害嚴(yán)重。標(biāo)準(zhǔn)化的SPF 鴨和鴨胚是農(nóng)業(yè)領(lǐng)域科學(xué)研究水禽疾病和多種水禽生物制品研發(fā)、生產(chǎn)與檢定等環(huán)節(jié)必不可少的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和原材料，因此，培育SPF 鴨為我國(guó)的水禽疫病研究防控提供技術(shù)保障。本文在對(duì)我國(guó)SPF 鴨產(chǎn)業(yè)發(fā)展成果總結(jié)的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)分析了產(chǎn)業(yè)發(fā)展存在的若干問(wèn)題和未來(lái)研究方向。

1 SPF 鴨生產(chǎn)的重要性和必要性

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，居民生活水平的提升，我國(guó)家禽相關(guān)產(chǎn)品的需求量大大提高。雖然我國(guó)肉鴨、蛋鴨產(chǎn)業(yè)規(guī)?；l(fā)展起步較晚，但是借鑒了雞、豬養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的經(jīng)驗(yàn)，產(chǎn)業(yè)化格局正在迅速形成。國(guó)家統(tǒng)計(jì)局、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，2022 年我國(guó)家禽出欄量達(dá)到161.4 億只，鴨出欄量占據(jù)家禽出欄總量近1/3 左右，鴨肉、鴨絨初級(jí)產(chǎn)品的總價(jià)值達(dá)到500 億元[10]。

養(yǎng)鴨業(yè)迅猛發(fā)展的同時(shí)，也遇到制約其健康發(fā)展的瓶頸問(wèn)題，其中之一是水禽疫病。目前國(guó)內(nèi)水禽專用的疫苗種類有限，水禽養(yǎng)殖多依賴水資源，消毒工作操作比較困難等因素均造成鴨病形勢(shì)復(fù)雜，除了傳統(tǒng)的鴨瘟、鴨肝炎、鴨疫里默氏菌外，禽流感、沙門氏菌、小鵝瘟、大腸桿菌等病原也對(duì)鴨養(yǎng)殖業(yè)造成一定的危害外，近年來(lái)流行的鴨坦布蘇病毒和鴨呼腸孤病毒等也進(jìn)一步增加了養(yǎng)鴨難度[11-12]。這些疫病不僅給水禽帶來(lái)了高昂的養(yǎng)殖成本，還污染了周圍環(huán)境并影響食品安全，成為阻礙了產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的一個(gè)重要因素[13]，也使得鴨病一度成為禽病研究的熱點(diǎn)。

鴨病病原的基礎(chǔ)性研究，鴨類疫苗和診斷試劑的開發(fā)研制，鴨胚都是必備的原材料。普通級(jí)鴨胚可能污染細(xì)菌和病毒，如白血病、支原體、呼腸孤病毒等都可通過(guò)鴨胚傳播[14-15]，用普通鴨胚制作的疫苗接種有散毒的風(fēng)險(xiǎn)；此外，普通鴨胚中可能含有母原抗體等影響病毒增殖等，對(duì)疫病敏感性低，獲得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)性差、準(zhǔn)確率低[16]；另外，普通鴨制備的血清“陰而不陰，陽(yáng)而不強(qiáng)”，不具備充當(dāng)診斷試劑的條件，嚴(yán)重阻礙了鴨疫病研究及防控工作進(jìn)展。因此生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化的SPF 鴨和鴨胚成為研究水禽疾病和多種水禽生物制品研發(fā)、生產(chǎn)與檢定的迫切需要。

此外，乙型肝炎病毒（HBV）感染是影響人類健康的重要問(wèn)題[17]，據(jù)WHO 報(bào)道，全球約2.4 億人為慢性HBV 感染者。鴨肝炎模型是目前使用較多的乙肝研究動(dòng)物模型[18-19]，對(duì)于了解病毒感染的病理生理學(xué)、病毒復(fù)制及藥物療效評(píng)價(jià)等有重要意義。另外由于鴨生活能力強(qiáng)，對(duì)家禽常見傳染病，鴨比雞少1/3 左右，適合人類疫苗的生產(chǎn)和檢驗(yàn)。因此，開展SPF鴨和鴨胚的培育不僅為農(nóng)業(yè)健康發(fā)展提供保障，而且能為保障人類生命健康提供重要材料，在病毒分離、生物制品開發(fā)和疫苗評(píng)價(jià)等多個(gè)方面具有良好的應(yīng)用前景[20-21]。

2 SPF 鴨培育現(xiàn)狀

2.1 SPF 鴨及鴨胚生產(chǎn)數(shù)量和質(zhì)量還有一定的上升空間

動(dòng)物增量是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技發(fā)展的核心任務(wù)，是對(duì)生命科學(xué)研究提供支撐和服務(wù)的基礎(chǔ)。張曉娜等[22]對(duì)臺(tái)灣及日本MHC 單倍型SPF 鴨進(jìn)行了報(bào)道，但未見培育成功，哈爾濱獸醫(yī)研究所研究團(tuán)隊(duì)建立的SPF 鴨生產(chǎn)中心是目前國(guó)內(nèi)唯一的SPF 種鴨群。通過(guò)對(duì)地方品種紹興麻鴨、金定鴨鴨群通過(guò)正壓隔離器種飼養(yǎng)、種卵滅活疫苗免疫、阻斷物流/人流污染、鈷60 輻照飼料和酸化飲水等多種措施凈化了包括禽呼腸孤、禽流感H5、H7、H9 亞型、新城疫、減蛋綜合癥、鴨肝炎、鴨腸炎、鴨圓環(huán)、鴨細(xì)小病毒病在內(nèi)的10 種常見鴨病病原。育成HBK-B、HBK-Q、HB/Bn 三個(gè)品種6 個(gè)品系[23-24]，建成了基礎(chǔ)核心群，數(shù)據(jù)顯示鴨胚產(chǎn)量累計(jì)達(dá)到2 萬(wàn)枚，用于保障部分科學(xué)研究，相對(duì)于SPF 雞胚4 千萬(wàn)枚的年產(chǎn)量和巨大的應(yīng)用需求，SPF 鴨及鴨胚生產(chǎn)數(shù)量還有一定的差距，還未形成產(chǎn)業(yè)化，對(duì)于遺傳學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、環(huán)境檢測(cè)以及病原學(xué)檢測(cè)指標(biāo)還未形成完善的控制體系。另外該中心位于中國(guó)東北部，物流成本和運(yùn)輸質(zhì)量也增加了各生物制品公司對(duì)SPF 鴨及鴨胚廣泛應(yīng)用的難度系數(shù)和成本。

2.2 SPF 鴨質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和監(jiān)測(cè)體系需進(jìn)一步完善

SPF 鴨和鴨胚是生命科學(xué)研究的高標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，是對(duì)病毒學(xué)研究及生物制品生產(chǎn)和鑒定的標(biāo)準(zhǔn)化原材料，其質(zhì)量好壞，直接關(guān)系到科研成果的質(zhì)量。目前，對(duì)SPF 鴨微生物學(xué)檢測(cè)目前搜索到的標(biāo)準(zhǔn)有兩個(gè)：黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)[25]和中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)[26]全國(guó)信息與文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì).文獻(xiàn)著錄:第4 部分 非書資料:T/CALAS 18-2017[S] .北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2017:3] ] ，農(nóng)業(yè)部尚無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)公布。主要監(jiān)測(cè)的病原包括6 種病毒?。壕W(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥、禽腺病毒三群（EDS-76）、鴨肝炎病毒、鴨腸炎病毒（鴨瘟）、禽流感病毒、新城疫病毒；3 種細(xì)菌?。荷抽T菌、鴨疫里默氏桿菌、巴氏桿菌，1 種衣原體。對(duì)我國(guó)新流行的危害較嚴(yán)重其他的傳染性疾病如：呼腸孤病毒、鴨坦布蘇病毒、鴨圓環(huán)病毒、番鴨細(xì)小病毒、細(xì)小病毒（短喙綜合癥）、禽白血病、鴨支原體、鴨腺病毒感染（除EDS-76 以外）、鴨大腸桿菌病等沒有涉及，凈化病原的數(shù)目低于OIE 公布的可感染鴨的 15 種病原數(shù)。

SPF 鴨配合飼料（T/CALAS 17-2017)，規(guī)定了SPF 鴨育雛期、育成期、產(chǎn)蛋前期及產(chǎn)蛋高峰期配合飼料的質(zhì)量要求、營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定要求、衛(wèi)生要求、檢測(cè)規(guī)則以及標(biāo)簽、包裝、貯存和運(yùn)輸要求。SPF 鴨飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)（T/CALAS 38-2017）與SPF 雞飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)一起被寫入管理指南，無(wú)專門的飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)。

綜上，SPF 鴨飼養(yǎng)管理及微生物控制多采用地方標(biāo)準(zhǔn)或團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，制定符合我國(guó)實(shí)際的SPF鴨病原微生物控制標(biāo)準(zhǔn)，及時(shí)把這些疾病檢測(cè)納入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中，進(jìn)一步提高SPF 鴨的病原學(xué)檢測(cè)、質(zhì)量管理及營(yíng)養(yǎng)學(xué)等監(jiān)測(cè)體系是SPF鴨行業(yè)發(fā)展的基本要求。

3 待解決的主要問(wèn)題和研究方向

3.1 加強(qiáng)SPF 鴨育種、飼養(yǎng)和標(biāo)準(zhǔn)化管理

中國(guó)是世界第一養(yǎng)鴨大國(guó)，但由于歷史和經(jīng)濟(jì)發(fā)展制約，我國(guó)在鴨的育種方面進(jìn)展遲緩，種源問(wèn)題一直制約中國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展。目前，我國(guó)種鴨基本依賴國(guó)外進(jìn)口，約占國(guó)內(nèi)種鴨市場(chǎng)的70%[27]。SPF 雞目前也是從國(guó)外引進(jìn)種蛋，許多老牌的SPF 雞場(chǎng)多存在遺傳標(biāo)記不清，遺傳背景不明、近交退化的現(xiàn)象。為了盡快避免這種SPF鴨再重蹈覆轍，從我國(guó)優(yōu)質(zhì)地方鴨種選育生產(chǎn)性能良好、遺傳穩(wěn)定性，無(wú)烈性傳染病和垂直傳染病的基礎(chǔ)種鴨群，開展飼料利用率、肉品質(zhì)性狀、繁殖性能、抗病性能等相關(guān)性遺傳機(jī)制研究，通過(guò)種質(zhì)特性評(píng)定和篩選，建立各品系基礎(chǔ)群，以逐漸達(dá)到SPF 標(biāo)準(zhǔn)，并實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)是SPF 鴨產(chǎn)業(yè)化的重中之重。

營(yíng)養(yǎng)對(duì)確保鴨健康生長(zhǎng)，生產(chǎn)性能的發(fā)揮具有重要的作用，我們建立的SPF 鴨飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)仍采用SPF 雞的飼料配方與標(biāo)準(zhǔn)，二者生理特點(diǎn)存在較大差異，需要對(duì)其科學(xué)性與實(shí)用性進(jìn)一步檢驗(yàn)，確保既能發(fā)揮SPF鴨最佳生產(chǎn)性能又不造成浪費(fèi)。目前我們已對(duì)鴨的飼料及營(yíng)養(yǎng)科學(xué)有了一定的積累，但缺乏不同日齡、特定品種、不同性別營(yíng)養(yǎng)與代謝的系統(tǒng)性研究數(shù)據(jù)，不同滅菌方式對(duì)營(yíng)養(yǎng)和飼料利用率的影響、維生素對(duì)種蛋受精率、孵化率和活性等的影響等均缺乏系統(tǒng)研究，因此，加強(qiáng)SPF 鴨營(yíng)養(yǎng)代謝、飼料及滅菌標(biāo)準(zhǔn)的研究，對(duì)SPF 鴨的培育至關(guān)重要。

3.2 SPF 鴨診斷試劑和生物制品學(xué)研究

我國(guó)SPF 鴨行業(yè)尚處于初期發(fā)展階段，病原衛(wèi)生的監(jiān)測(cè)種類和程序還不是很健全，相對(duì)于發(fā)達(dá)國(guó)家診斷方法標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，診斷試劑商品化標(biāo)準(zhǔn)化程度較低，我國(guó)對(duì)于疫病的監(jiān)測(cè)主要采用傳統(tǒng)的血清學(xué)方法，如瓊擴(kuò)實(shí)驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、平板凝集實(shí)驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），或者敏感性特異性不強(qiáng)，或者成本高昂，影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢測(cè)數(shù)量和檢測(cè)頻率，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的凈化品質(zhì)。商品化的ELISA 試劑盒，一般是檢測(cè)雞的病原或抗體，而針對(duì)鴨疫病診斷一般需再更換特異的二抗，因此研發(fā)快速、準(zhǔn)確、高通量的檢測(cè)方法和檢測(cè)試劑盒，建立便于復(fù)核的針對(duì)一種病原微生物的幾種監(jiān)測(cè)方法，是我國(guó)SPF 鴨行業(yè)走向正規(guī)化、國(guó)際化的必由之路。另外，除了SPF 鴨和鴨胚外，開發(fā)形式多樣的生物制品和技術(shù)服務(wù)如SPF 鴨血（全血、抗凝血、血細(xì)胞、血清、血漿）、SPF 鴨胚細(xì)胞和飼料等也可成為SPF 鴨行業(yè)提高附加值的方向之一[28-29]。

SPF 鴨和鴨胚被主要用于病毒的分離、鑒定，以及病原微生物的致病分子機(jī)制等方面的研究，為多項(xiàng)重大課題順利進(jìn)行提供了必需的實(shí)驗(yàn)材料和支撐，取得了豐碩的成果。21 世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì)，SPF 鴨也將面臨前所未有的發(fā)展機(jī)遇，相信隨著品種品系數(shù)量不斷增加和質(zhì)量提高，將在家禽領(lǐng)域扮演更重要的角色。