童 飛，楊志凱

（1.安徽省無為市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊，安徽 無為 238300；2.安徽省無為市鶴毛鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，安徽 無為 238361）

采集豬機(jī)體組織或血液樣本進(jìn)行檢測評估是做好生豬重大動物疫病監(jiān)測的重要手段。組織樣本采集適用于豬產(chǎn)品和病死豬，對于活豬更適合采用血液樣本采集。豬前腔靜脈采血具有采血量足、血樣質(zhì)量高等特點。

1 采血難點

1.1 人的因素 采血人員沒有掌握豬前腔靜脈采血技術(shù)或缺乏實際操作能力，存在畏難情緒；養(yǎng)殖場（戶）防疫意識淡泊，采血時會因豬的叫聲大、流血較多等，產(chǎn)生抵觸情緒，拒絕采樣而導(dǎo)致采樣失敗和免疫效果評估不準(zhǔn)確。

1.2 豬的因素 與其他畜禽相比較，豬的脂肪較多，前腔靜脈隱藏于體內(nèi)，摸不著、看不見，下針采血時很難精準(zhǔn)定位；成年豬體重大、性情暴躁、易嚎叫，保定很費力氣；豬舍內(nèi)采樣空間狹小和存在其他豬群的干擾等因素均可造成采血困難。

1.3 物的因素 采樣設(shè)備簡陋，沒有專用的大動物保定裝置，給大型家畜采樣存在安全隱患。對此可研發(fā)采樣保定架，確保保定大動物時，其產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)小、安定性好，并保障采樣人員或救治人員的安全，符合動物保護(hù)與職業(yè)安全的要求。

2 采血要點

2.1 采血前準(zhǔn)備 備好專用鋁鎂合金動物采樣箱（內(nèi)有：止血鉗、彎圓手術(shù)剪、直尖手術(shù)剪、手術(shù)刀、聽診器、棉球、鑷子、刀片、折疊放大鏡、標(biāo)簽紙、記號筆、碘酒、無菌密封采樣袋、酒精棉球、注射器、各型號不銹鋼針頭、口罩等）、保溫桶（內(nèi)有冰袋和試管架）、防護(hù)手套、豬套口器（金屬桿套繩、鋼絲套繩）、10 mL或20 mL一次性塑料注射器（采血器）、防護(hù)服、膠鞋等。

豬的采血器可選10 mL規(guī)格的一次性塑料注射器，因為豬的采血樣多在5 mL左右。不同體重豬的前腔靜脈深淺不同，采血針頭太長會刺穿前腔靜脈血管，太短又會采不到血，因此針頭型號要根據(jù)豬的體重做對應(yīng)選擇（見表1）。

表1 不同體重豬采血針頭型號選擇

采樣單填寫：詳細(xì)填寫?zhàn)B殖場名稱、地址，豬的品種、日齡、健康狀況，存欄數(shù)、抽樣數(shù)、抽樣人、采樣日期及養(yǎng)殖場主的聯(lián)系方式、簽字等信息。

2.2 采血保定 乳豬、小豬采用側(cè)臥或仰臥保定，最好由兩人進(jìn)行保定，一人固定豬的后肢，一人固定前肢，盡量使豬的頭部與前肢垂直，暴露出頸胸間兩側(cè)的“凹陷窩”。中、大豬采用站立保定，保定人員在兩人或兩人以上，一人站立用兩腿夾住豬的身體，另一人面對豬的頭部，用保定鋼絲套繩或桿狀套口器套住豬的上頜，向前上方用力牽拉，使豬頭抬起，頭頸與水平面呈30°以上的夾角，以完全露出豬胸前兩側(cè)的“凹陷窩”，并使豬兩前肢能輕微著地。

采樣人員可通過撫摸、撓癢等方法使豬保持安定，如果豬采血時出現(xiàn)躁動，采血下針時極易出現(xiàn)偏離，扎傷氣管等組織。大豬的保定很費力，最好讓養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)員參加保定，飼養(yǎng)員長期與豬接觸，豬對他們熟悉、不害怕，保定會更加順利。

2.3 采血位置 豬前腔靜脈分左右束，位于豬的頸部近身體中線。小豬前腔靜脈直徑約0.5 cm，成年豬在1 cm以上，由頸內(nèi)外靜脈、肩胛下靜脈、鎖骨下靜脈、胸內(nèi)靜脈匯集而成。

采血扎針部位在第一對肋骨與胸骨柄結(jié)合處的兩個“凹陷窩”（見圖1），豬前腔靜脈在此位置直徑最大，扎針比較容易成功。

圖1 豬前腔靜脈位置

2.4 采血操作 先用碘酒消毒被采血豬胸前右側(cè)“凹陷窩”處的皮膚，再用75%的酒精棉球?qū)υ撎庍M(jìn)行脫碘。

在10 mL 一次性注射器上安裝好與采樣豬體重相適應(yīng)的不銹鋼針頭，將注射器活塞多抽動幾次，以減小抽血時的阻力，也便于觀察針頭是否漏氣，最后讓注射器活塞靠近針頭部位，預(yù)留0.5 cm 左右的空隙，便于扎針后能產(chǎn)生負(fù)壓，血液能回流。

采樣人單手持注射器，手不抖動，大拇指、食指和中指固定注射器的后端，無名指和小指反方向推動注射器活塞拉桿完成抽血。下針部位在豬胸前右側(cè)“凹陷窩”最低處（因為左側(cè)有膈神經(jīng)，所以右側(cè)扎針），由下而上垂直于“凹陷窩”底，稍偏向豬頸中央及胸腔方向刺入，見有血回流入注射器后，穩(wěn)定住注射器，輕推活塞拉桿抽取血液。若下針后不見回血，可將針頭前后小范圍移動，直到見到有回血為止。豬前腔靜脈血管被刺穿，可能引起局部血腫，這時要立即停止抽血，給豬止血消毒，并換別的豬采血。

一頭豬采血3～5 mL 即可，采血后要快速拔掉針頭，用干棉球按壓采血部位止血1 min，再用碘酒棉球消毒，最后松掉套口器解除保定。

采血完成后用記號筆在標(biāo)簽紙上登記好樣品信息并貼在注射器外壁上，用止血鉗折彎注射器針頭（防止血液滲漏），倒立放于保溫桶中。

2.5 血清提取和保存 若環(huán)境溫度較低，可將注射器內(nèi)的血樣在實驗室過夜自然析出血清，再經(jīng)離心提純血清，最后編號保存于1.5 mL 的無菌離心管中備用。若環(huán)境溫度高，則要及時將采集的血樣帶回實驗室，將血樣從注射器擠入10 mL離心管中，以3 000 r/min離心2 min，分離出上層血清，最后編號保存?zhèn)溆谩?/p>

提取好的血清如在一個星期內(nèi)做檢測，可以放入冰箱的保鮮層（－2～8 ℃）中保存。若要較長時間保存血清，可以放入－20 ℃以下的冰柜中保存，有條件的可以放入－80 ℃冰箱中保存（可存1年以上）。