童 飛，楊志凱

（1.安徽省無為市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊，安徽 無為 238300；2.安徽省無為市鶴毛鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務中心，安徽 無為 238361）

采集豬機體組織或血液樣本進行檢測評估是做好生豬重大動物疫病監(jiān)測的重要手段。組織樣本采集適用于豬產(chǎn)品和病死豬，對于活豬更適合采用血液樣本采集。豬前腔靜脈采血具有采血量足、血樣質(zhì)量高等特點。

1 采血難點

1.1 人的因素 采血人員沒有掌握豬前腔靜脈采血技術(shù)或缺乏實際操作能力，存在畏難情緒；養(yǎng)殖場（戶）防疫意識淡泊，采血時會因豬的叫聲大、流血較多等，產(chǎn)生抵觸情緒，拒絕采樣而導致采樣失敗和免疫效果評估不準確。

1.2 豬的因素 與其他畜禽相比較，豬的脂肪較多，前腔靜脈隱藏于體內(nèi)，摸不著、看不見，下針采血時很難精準定位；成年豬體重大、性情暴躁、易嚎叫，保定很費力氣；豬舍內(nèi)采樣空間狹小和存在其他豬群的干擾等因素均可造成采血困難。

1.3 物的因素 采樣設備簡陋，沒有專用的大動物保定裝置，給大型家畜采樣存在安全隱患。對此可研發(fā)采樣保定架，確保保定大動物時，其產(chǎn)生的應激反應小、安定性好，并保障采樣人員或救治人員的安全，符合動物保護與職業(yè)安全的要求。

2 采血要點

2.1 采血前準備 備好專用鋁鎂合金動物采樣箱（內(nèi)有：止血鉗、彎圓手術(shù)剪、直尖手術(shù)剪、手術(shù)刀、聽診器、棉球、鑷子、刀片、折疊放大鏡、標簽紙、記號筆、碘酒、無菌密封采樣袋、酒精棉球、注射器、各型號不銹鋼針頭、口罩等）、保溫桶（內(nèi)有冰袋和試管架）、防護手套、豬套口器（金屬桿套繩、鋼絲套繩）、10 mL或20 mL一次性塑料注射器（采血器）、防護服、膠鞋等。

豬的采血器可選10 mL規(guī)格的一次性塑料注射器，因為豬的采血樣多在5 mL左右。不同體重豬的前腔靜脈深淺不同，采血針頭太長會刺穿前腔靜脈血管，太短又會采不到血，因此針頭型號要根據(jù)豬的體重做對應選擇（見表1）。

表1 不同體重豬采血針頭型號選擇

采樣單填寫：詳細填寫?zhàn)B殖場名稱、地址，豬的品種、日齡、健康狀況，存欄數(shù)、抽樣數(shù)、抽樣人、采樣日期及養(yǎng)殖場主的聯(lián)系方式、簽字等信息。

2.2 采血保定 乳豬、小豬采用側(cè)臥或仰臥保定，最好由兩人進行保定，一人固定豬的后肢，一人固定前肢，盡量使豬的頭部與前肢垂直，暴露出頸胸間兩側(cè)的“凹陷窩”。中、大豬采用站立保定，保定人員在兩人或兩人以上，一人站立用兩腿夾住豬的身體，另一人面對豬的頭部，用保定鋼絲套繩或桿狀套口器套住豬的上頜，向前上方用力牽拉，使豬頭抬起，頭頸與水平面呈30°以上的夾角，以完全露出豬胸前兩側(cè)的“凹陷窩”，并使豬兩前肢能輕微著地。

采樣人員可通過撫摸、撓癢等方法使豬保持安定，如果豬采血時出現(xiàn)躁動，采血下針時極易出現(xiàn)偏離，扎傷氣管等組織。大豬的保定很費力，最好讓養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)員參加保定，飼養(yǎng)員長期與豬接觸，豬對他們熟悉、不害怕，保定會更加順利。

2.3 采血位置 豬前腔靜脈分左右束，位于豬的頸部近身體中線。小豬前腔靜脈直徑約0.5 cm，成年豬在1 cm以上，由頸內(nèi)外靜脈、肩胛下靜脈、鎖骨下靜脈、胸內(nèi)靜脈匯集而成。

采血扎針部位在第一對肋骨與胸骨柄結(jié)合處的兩個“凹陷窩”（見圖1），豬前腔靜脈在此位置直徑最大，扎針比較容易成功。

圖1 豬前腔靜脈位置

2.4 采血操作 先用碘酒消毒被采血豬胸前右側(cè)“凹陷窩”處的皮膚，再用75%的酒精棉球?qū)υ撎庍M行脫碘。

在10 mL 一次性注射器上安裝好與采樣豬體重相適應的不銹鋼針頭，將注射器活塞多抽動幾次，以減小抽血時的阻力，也便于觀察針頭是否漏氣，最后讓注射器活塞靠近針頭部位，預留0.5 cm 左右的空隙，便于扎針后能產(chǎn)生負壓，血液能回流。

采樣人單手持注射器，手不抖動，大拇指、食指和中指固定注射器的后端，無名指和小指反方向推動注射器活塞拉桿完成抽血。下針部位在豬胸前右側(cè)“凹陷窩”最低處（因為左側(cè)有膈神經(jīng)，所以右側(cè)扎針），由下而上垂直于“凹陷窩”底，稍偏向豬頸中央及胸腔方向刺入，見有血回流入注射器后，穩(wěn)定住注射器，輕推活塞拉桿抽取血液。若下針后不見回血，可將針頭前后小范圍移動，直到見到有回血為止。豬前腔靜脈血管被刺穿，可能引起局部血腫，這時要立即停止抽血，給豬止血消毒，并換別的豬采血。

一頭豬采血3～5 mL 即可，采血后要快速拔掉針頭，用干棉球按壓采血部位止血1 min，再用碘酒棉球消毒，最后松掉套口器解除保定。

采血完成后用記號筆在標簽紙上登記好樣品信息并貼在注射器外壁上，用止血鉗折彎注射器針頭（防止血液滲漏），倒立放于保溫桶中。

2.5 血清提取和保存 若環(huán)境溫度較低，可將注射器內(nèi)的血樣在實驗室過夜自然析出血清，再經(jīng)離心提純血清，最后編號保存于1.5 mL 的無菌離心管中備用。若環(huán)境溫度高，則要及時將采集的血樣帶回實驗室，將血樣從注射器擠入10 mL離心管中，以3 000 r/min離心2 min，分離出上層血清，最后編號保存?zhèn)溆谩?/p>

提取好的血清如在一個星期內(nèi)做檢測，可以放入冰箱的保鮮層（－2～8 ℃）中保存。若要較長時間保存血清，可以放入－20 ℃以下的冰柜中保存，有條件的可以放入－80 ℃冰箱中保存（可存1年以上）。