魏赫,李曉鋒,李雪梅

(國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心,北京 100022)

仿制藥(generic drugs)是指具有與參比藥物(reference listed drugs,RLD)相同的活性成分、劑型、規(guī)格、適應(yīng)證、給藥途徑和用法用量,并證明質(zhì)量和療效與RLD相同的藥品[1-2]。仿制藥需要進(jìn)行藥學(xué)等效性評(píng)價(jià)(pharmaceutical equivalence,PE)和生物等效性(bioequivalence,BE)評(píng)價(jià),用以證明與參比藥物的治療等效性(therapeutic equivalence,TE)。

復(fù)雜仿制藥一般包括具有復(fù)雜活性成分的產(chǎn)品,具有復(fù)雜劑型或給藥途徑的產(chǎn)品,復(fù)雜的藥械組合產(chǎn)品等[3-4]。一般來(lái)說(shuō),結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單的小分子藥物比較容易通過(guò)藥學(xué)質(zhì)量研究和人體生物等效性試驗(yàn)進(jìn)行PE和BE評(píng)價(jià),而復(fù)雜仿制藥的研發(fā)和評(píng)價(jià)難度較大。對(duì)于具有復(fù)雜活性成分的一類仿制藥,如合成肽、復(fù)雜混合物等,由于其分子結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性需要進(jìn)行充分的研究來(lái)證明仿制藥與RLD活性成分(active pharmaceutical ingredient,API)的相同性,從而確證PE[5]。

BE是評(píng)價(jià)藥物是否具有可替換性的重要指標(biāo)。BE研究方法包括藥代動(dòng)力學(xué)研究、藥效動(dòng)力學(xué)研究、臨床研究和體外研究。以藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為終點(diǎn)的BE研究最為常用,但部分胃腸道局部作用的藥品,未進(jìn)入血液循環(huán),無(wú)法通過(guò)藥代動(dòng)力學(xué)終點(diǎn)指標(biāo)進(jìn)行BE評(píng)價(jià),而以藥效學(xué)參數(shù)為終點(diǎn)的BE研究和以臨床療效為終點(diǎn)的BE研究則具有較大的變異和較低的靈敏度。近年來(lái)隨著監(jiān)管理念的提升和藥物評(píng)價(jià)的發(fā)展,對(duì)于胃腸道局部作用藥物,可根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)、作用機(jī)制、體內(nèi)外相關(guān)性等以體外方法來(lái)評(píng)價(jià)BE[6]。

國(guó)家衛(wèi)生健康委聯(lián)合國(guó)家藥監(jiān)局和國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局等部門制定了兩批鼓勵(lì)仿制藥品目錄清單,2019年發(fā)布的第一批目錄中包括格拉替雷、鹽酸考來(lái)維侖復(fù)雜仿制藥,但截至目前尚無(wú)批準(zhǔn)。表1匯總了部分復(fù)雜仿制藥中美獲批情況對(duì)比,可以看出我國(guó)此類藥品的獲批情況與美國(guó)有一定的差距,上市時(shí)間較早的硫糖鋁則出現(xiàn)了過(guò)度仿制的情況[7]。

表1 中美部分復(fù)雜仿制藥獲批情況對(duì)比

本文主要以胃腸道局部作用的具有復(fù)雜活性成分的仿制藥為例,匯總了近年美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)發(fā)布的具體產(chǎn)品指南,以期為該類藥物的研發(fā)和等效性評(píng)價(jià)提供參考。

1 硫糖鋁

硫糖鋁為抗酸藥(結(jié)構(gòu)示意圖見圖1),用于治療胃、十二指腸潰瘍及胃炎。在酸性環(huán)境下,解離出硫酸蔗糖復(fù)合離子,復(fù)合離子聚合成不溶性的帶負(fù)電荷的膠體,能與潰瘍面帶正電荷的蛋白質(zhì)滲出物相結(jié)合,形成一層保護(hù)膜覆蓋于潰瘍面,促進(jìn)潰瘍愈合。還具有吸附胃蛋白酶和膽汁酸的作用。FDA 硫糖鋁口服混懸劑生物等效性研究指南首次發(fā)布于2014年,目前現(xiàn)行有效的版本為2023年2月發(fā)布[8]。推薦的研究?jī)?nèi)容包括1項(xiàng)API相同性研究,1項(xiàng)理化特性對(duì)比研究和4項(xiàng)生物學(xué)測(cè)定研究。受試制劑和RLD的Q1和Q2應(yīng)相同(具有相同的非活性成分,且用量差異在±5%以內(nèi)),BE應(yīng)建立在API相同性評(píng)估基礎(chǔ)上,并且受試制劑和RLD體外研究具有可比性。

Al8(OH)16(C12H14O35S8)[Al(OH)3]x[H2O]y x=8 to 10,y=22 to 31

1.1 API相同性研究硫糖鋁結(jié)構(gòu)式和分子式如圖1所示。仿制藥申請(qǐng)人應(yīng)該對(duì)受試制劑的API進(jìn)行表征,并且要證明其組成和分子式與RLD標(biāo)簽中的結(jié)構(gòu)信息是一致的。結(jié)構(gòu)表征至少采用3批受試制劑,推薦的結(jié)構(gòu)表征包括但不限于:①API的組成:辛硫酸蔗糖和鋁的含量;②元素分析測(cè)定 C、H、S、Al的數(shù)據(jù),以及C/S比和C/Al比;③酸中和能力;④光譜學(xué)表征,例如傅立葉變換紅外光譜(FT-IR)、紫外光譜(UV)、固態(tài)27Al核磁共振、差式掃描量熱法(DSC)、熱重量分析法(TGA)、粉末X射線衍射法(PXRD)。

1.2 受試制劑和RLD的理化特性對(duì)比理化特性對(duì)比包括以下內(nèi)容:pH,比重,未處理制劑的黏度分布,表觀黏度隨酸度的變化情況,再分散性(再分散的時(shí)間、沉降時(shí)間和體積),酸中和能力,鋁在pH 1.2介質(zhì)中的釋放情況。

1.3 受試制劑和RLD的生物學(xué)測(cè)定在進(jìn)行生物學(xué)測(cè)定之前受試制劑和RLD均用酸預(yù)處理,如果可能,在與體內(nèi)生理?xiàng)l件相關(guān)的條件下進(jìn)行試驗(yàn)。應(yīng)提供生物學(xué)測(cè)定的方法開發(fā)和方法學(xué)驗(yàn)證資料。

1.3.1 體外膽鹽平衡結(jié)合研究該項(xiàng)研究是評(píng)估生物等效性的關(guān)鍵性研究。應(yīng)在至少8種不同濃度的膽鹽中進(jìn)行孵育,濃度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。每項(xiàng)結(jié)合研究應(yīng)至少重復(fù)12次。此外,研究數(shù)據(jù)應(yīng)該表明選擇的孵育時(shí)間長(zhǎng)度可以產(chǎn)生最大的結(jié)合。生物等效性評(píng)價(jià)指標(biāo)為 Langmuir結(jié)合常數(shù)k2的90%置信區(qū)間。

1.3.2 體外膽鹽動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究該項(xiàng)研究用以支持關(guān)鍵性的平衡結(jié)合研究。應(yīng)在2種不同濃度的膽鹽溶液中孵育至少8個(gè)不同的時(shí)間長(zhǎng)度,時(shí)間長(zhǎng)度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。每項(xiàng)結(jié)合研究應(yīng)至少重復(fù)12次。生物等效性評(píng)價(jià)指標(biāo)是受試制劑和RLD硫糖鋁與膽鹽結(jié)合率的比較。

1.3.3 體外人血白蛋白(HSA)或牛血清白蛋白(BSA)平衡結(jié)合研究該項(xiàng)研究試驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析可參考體外膽鹽平衡研究。

1.3.4 體外酶(胃蛋白酶)活性研究該項(xiàng)研究應(yīng)采用至少5種不同濃度的受試制劑和RLD進(jìn)行。生物等效性評(píng)價(jià)指標(biāo)是受試制劑和RLD關(guān)于胃蛋白酶活性降低百分比的比較。

1.4 討論表2為FDA對(duì)硫糖鋁產(chǎn)品指南的修訂情況,可以看出近年來(lái)FDA對(duì)該藥的BE評(píng)價(jià)觀念逐漸轉(zhuǎn)變,由體外評(píng)價(jià)方法替代以臨床終點(diǎn)為指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法,更加體現(xiàn)科學(xué)性,同時(shí)也降低了仿制藥企業(yè)的研發(fā)成本和時(shí)間成本。根據(jù)硫糖鋁作用機(jī)制,設(shè)計(jì)4種體外研究方法,隨著監(jiān)管能力的提升,對(duì)體外BE研究的要求也越來(lái)越趨于完善。

表2 FDA硫糖鋁產(chǎn)品指南修訂情況

2 碳酸司維拉姆

碳酸司維拉姆(結(jié)構(gòu)示意圖見圖2)是丙烯胺化合物的交聯(lián)聚合體,用于治療控制正在接受透析治療的慢性腎病成人患者的高磷血癥?？诜笤谖改c道內(nèi)水合膨脹成數(shù)倍于原體積的凝膠,胺根以質(zhì)子化的形式存在,通過(guò)離子鍵和氫鍵與磷酸分子相互作用結(jié)合消化道中的磷酸根,降低血清中的磷酸根濃度,被聚合物結(jié)合的磷酸鹽不能吸收入體內(nèi),以糞便方式排出[9]。FDA碳酸司維拉姆片生物等效性研究指南首次發(fā)布于2008年,目前現(xiàn)行有效的版本為2015年9月發(fā)布[10]。推薦的研究?jī)?nèi)容包括1項(xiàng)API相同性研究,2項(xiàng)體外研究。

2.1 API相同性研究碳酸司維拉姆結(jié)構(gòu)如圖2所示。API相同性研究通過(guò)合成路線以及理化性質(zhì)對(duì)比研究建立。FDA鼓勵(lì)申請(qǐng)人采用與參比API相同的合成路線,即聚丙烯胺鹽酸鹽與環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)來(lái)生產(chǎn)碳酸司維拉姆,如果采用不同的合成路線,則需要聯(lián)系仿制藥辦公室取得同意,并且可能需要指南以外的特性研究來(lái)證明API的相同性。申請(qǐng)人應(yīng)該向監(jiān)管機(jī)構(gòu)提供生產(chǎn)工藝和工藝過(guò)程控制信息。應(yīng)將至少3批仿制API與至少3批從RLD中提取的API進(jìn)行背對(duì)背比較研究,用以評(píng)價(jià)API的相同性和生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性。RLD中API的提取方法應(yīng)該在申報(bào)資料中遞交。推薦的理化性質(zhì)對(duì)比研究?jī)?nèi)容包括:①交聯(lián)度(即交聯(lián)氨基與總氨基的比例):建議采用C13固態(tài)核磁共振光譜(13C SSNMR),通過(guò)定量峰面積分析API的交聯(lián)度;②質(zhì)子化程度(碳酸鹽含量):建議采用TGA;③總可滴定胺:建議采用滴定法;④粒徑分布;⑤元素分析:結(jié)果應(yīng)該包括C、H、N元素;⑥溶脹指數(shù);⑦鼓勵(lì)申請(qǐng)人進(jìn)行更多的理化性質(zhì)表征研究,包括但不限于FT-IR、拉曼光譜、PXRD和DSC等。

2.2 體外研究

2.2.1 體外平衡結(jié)合研究該項(xiàng)研究是評(píng)估生物等效性的關(guān)鍵性研究。應(yīng)將受試制劑和RLD整片樣品,在pH 4和pH 7條件下采用酸預(yù)處理或不處理的方式,于至少8種不同濃度的磷酸鹽溶液中進(jìn)行孵育,每種磷酸鹽溶液中應(yīng)包含80 mmol·L-1的氯化鈉和100 mmol·L-1的N,N-雙(羥乙基)-2-氨基乙磺酸(BES)。磷酸鹽濃度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。此外應(yīng)提供數(shù)據(jù),表明選擇的孵育時(shí)間長(zhǎng)度可使磷酸鹽產(chǎn)生最大結(jié)合。

2.2.2 體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究該項(xiàng)研究用以支持關(guān)鍵性的平衡結(jié)合研究。應(yīng)將受試制劑和RLD整片樣品,在pH 4和pH 7條件下采用酸預(yù)處理或不處理的方式,于2種不同濃度的磷酸鹽溶液中孵育至少8個(gè)不同的時(shí)間長(zhǎng)度。磷酸鹽的濃度應(yīng)選擇相應(yīng)平衡結(jié)合研究中的最高和最低濃度。時(shí)間長(zhǎng)度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。

2.2.3 數(shù)據(jù)分析檢測(cè)濾液中未結(jié)合的磷酸鹽,間接計(jì)算出與碳酸司維拉姆結(jié)合的磷酸鹽量。在體外平衡結(jié)合研究中,計(jì)算Langmuir結(jié)合常數(shù)k1和k2,受試制劑與RLD k1比值、k2的90%置信區(qū)間。體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究中,比較不同時(shí)間受試制劑與RLD的磷酸鹽結(jié)合率,但可不計(jì)算90%置信區(qū)間。生物等效性的評(píng)價(jià)指標(biāo)為平衡結(jié)合研究中k2的90%置信區(qū)間應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)。

2.3 討論仿制藥與RLD具有相同的活性成分是研發(fā)的第一步,也是能夠發(fā)揮相同治療作用的重要前提。碳酸司維拉姆是高度交聯(lián)的聚合物,不是單一分子,證明仿制藥與RLD API的相同性較為復(fù)雜,不僅需要進(jìn)行API理化特性對(duì)比,更需要從合成路線、工藝控制等方面入手,利用質(zhì)量源于設(shè)計(jì)的理念使API的質(zhì)量從源頭得到保證。體外研究方面,根據(jù)隨餐服用的特點(diǎn),建議在pH 4和pH 7條件下進(jìn)行磷結(jié)合試驗(yàn),能夠反映體內(nèi)生理?xiàng)l件。對(duì)于選用的磷酸鹽濃度,孵育時(shí)間長(zhǎng)度等應(yīng)進(jìn)行合理優(yōu)化,提供確定依據(jù)。采用的檢測(cè)方法應(yīng)具有較高的專屬性和靈敏度,并開展完整的方法學(xué)驗(yàn)證[11]。

3 鹽酸考來(lái)維侖

鹽酸考來(lái)維侖(結(jié)構(gòu)示意圖見圖3)是一種膽汁酸螯合劑,用于治療原發(fā)性高脂血癥。非吸收性的聚合物鹽酸考來(lái)維侖在腸道中能與膽汁酸結(jié)合,阻滯膽汁酸的重吸收,從而加速肝內(nèi)膽固醇經(jīng)7-α-羥化酶向膽汁酸的轉(zhuǎn)化。肝細(xì)胞對(duì)膽固醇的需求增加,使膽固醇生物合成酶羥甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-CoA)的轉(zhuǎn)錄和活性增加,肝臟低密度脂蛋白受體數(shù)量增加。這些代償作用導(dǎo)致血液中的低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)清除率增加,從而降低血清LDL-C水平[12]。FDA鹽酸考來(lái)維侖口服混懸劑生物等效性研究指南首次發(fā)布于2010年,目前現(xiàn)行有效的版本為2021年9月發(fā)布[13]。推薦的研究?jī)?nèi)容包括1項(xiàng)API相同性研究,4項(xiàng)體外研究。

A+a′=2;b=1;c+c′=7;d+d′=6;m=聚合物網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的數(shù)量;基本聚合物單元的分子式為(C3H8NCl)2(C9H20N2OCl2)1(C13H28NCl)7(C12H28N2Cl2)6

3.1 API相同性研究鹽酸考來(lái)維侖結(jié)構(gòu)如圖3所示。API相同性研究可以通過(guò)基本反應(yīng)方案的相同性、化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成的相同性、理化性質(zhì)相同性3方面進(jìn)行確證。應(yīng)將至少3批仿制API與至少3批從RLD中提取的API進(jìn)行背對(duì)背比較研究,用以評(píng)價(jià)API的相同性和生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性。RLD中API的提取方法應(yīng)該在申報(bào)資料中遞交。

3.1.1 基本反應(yīng)方案相同性研究FDA建議仿制藥申請(qǐng)人根據(jù)RLD標(biāo)簽信息,采用聚丙烯胺鹽酸鹽與環(huán)氧氯丙烷交聯(lián),與1-溴癸烷和(6-溴己基)-三甲基溴化銨烷基化的工藝生產(chǎn)鹽酸考來(lái)維侖。如果采用替代合成工藝,應(yīng)該聯(lián)系FDA取得同意,并且可能需要指南以外的表征來(lái)證明API的相同性。

3.1.2 化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成相同性研究仿制藥申請(qǐng)人應(yīng)定義API的結(jié)構(gòu),如a + a′,b,c + c′,d + d′的數(shù)值等,受試API和參比API應(yīng)具有相同的化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成。僅從理化性質(zhì)表征可能不足以確證API的化學(xué)組成,因此建議仿制藥申請(qǐng)人對(duì)交聯(lián)中間體進(jìn)行表征,推薦的研究包括13C SSNMR和玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg),具體可參照司維拉姆產(chǎn)品指南;此外,應(yīng)對(duì)烷基化試劑隨反應(yīng)進(jìn)行的消耗程度進(jìn)行研究。

3.1.3 理化性質(zhì)相同性研究API理化性質(zhì)相同性研究包括以下內(nèi)容:①13C SSNMR;②元素分析測(cè)定C、H、N、Cl和Br含量;③滴定法測(cè)定氯含量,確定質(zhì)子化程度;④滴定法測(cè)定總可滴定胺;⑤滴定法測(cè)定溴含量;⑥粒徑分布;⑦溶脹指數(shù);⑧FT-IR和拉曼光譜;⑨DSC法測(cè)定玻璃化轉(zhuǎn)變溫度;⑩TGA。

3.2 體外研究

3.2.1 體外平衡結(jié)合研究該項(xiàng)研究是評(píng)估生物等效性的關(guān)鍵性研究。應(yīng)將受試制劑和RLD在pH 6.8條件下采用酸預(yù)處理或不處理的方式,于至少8種不同濃度的總膽鹽溶液中進(jìn)行孵育,孵育介質(zhì)總膽鹽中應(yīng)含有甘氨膽酸(GCA)、甘氨鵝去氧膽酸(GCDA)和牛磺脫氧膽酸(TDCA)?？偰扄}濃度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。此外應(yīng)提供數(shù)據(jù)表明選擇的孵育時(shí)間長(zhǎng)度可使總膽鹽產(chǎn)生最大結(jié)合。

3.2.2 體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究該項(xiàng)研究用以支持關(guān)鍵性的平衡結(jié)合研究。應(yīng)將不經(jīng)酸預(yù)處理的受試制劑和RLD,于2種不同濃度(0.3 mmol·L-1和3.0 mmol·L-1)的總膽鹽溶液中孵育至少8個(gè)不同的時(shí)間長(zhǎng)度。時(shí)間長(zhǎng)度應(yīng)分布合理直到達(dá)到最大結(jié)合。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。

3.2.3 水和飲料條件下的體外平衡結(jié)合研究在37 ℃條件下將樣品采用水、3種無(wú)糖軟飲、3種弱酸性或中性果汁(葡萄柚汁除外)處理后,離心棄去上清液,然后對(duì)樣品酸預(yù)處理或不處理,進(jìn)行平衡結(jié)合研究,試驗(yàn)設(shè)計(jì)與“3.2.1”項(xiàng)下一致。

3.2.4 水和飲料條件下的體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究在37 ℃條件下將樣品采用水、3種無(wú)糖軟飲、3種弱酸性或中性果汁(葡萄柚汁除外)處理后,離心棄去上清液,進(jìn)行動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究,試驗(yàn)設(shè)計(jì)與“3.2.2”項(xiàng)下一致。

3.2.5 數(shù)據(jù)分析檢測(cè)濾液中未結(jié)合的膽鹽,間接計(jì)算出與鹽酸考來(lái)維侖結(jié)合的膽鹽量。體外平衡結(jié)合研究及體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究需要進(jìn)行數(shù)據(jù)分析的內(nèi)容,以及生物等效性評(píng)價(jià)指標(biāo)與碳酸司維拉姆相同(見“2.2.3”項(xiàng)下)。

3.3 討論FDA鹽酸考來(lái)維侖產(chǎn)品指南在2016年以后增加了API相同性研究要求,此前僅有體外結(jié)合研究要求。與碳酸司維拉姆類似,需要與從RLD中提取出來(lái)的API進(jìn)行理化特性對(duì)比研究,除此之外還建議對(duì)交聯(lián)中間體進(jìn)行研究,從工藝過(guò)程控制方面對(duì)API相同性研究提出了更高的要求,同時(shí)也更能保證物質(zhì)基礎(chǔ)的一致性。鹽酸考來(lái)維侖混懸劑可以水、果汁或無(wú)糖軟飲送服,因此體外研究較片劑增加了水、3種無(wú)糖軟飲、3種弱酸性或中性果汁(葡萄柚汁除外)前處理?xiàng)l件下的體外平衡結(jié)合研究和體外動(dòng)力學(xué)研究。模擬臨床應(yīng)用條件,使得體外研究更加充分。

4 環(huán)硅酸鋯鈉

環(huán)硅酸鋯鈉(結(jié)構(gòu)示意圖見圖4)用于治療成人高鉀血癥。環(huán)硅酸鋯鈉是一種不可吸收的非聚合物無(wú)機(jī)粉末,具有均勻的微孔結(jié)構(gòu),優(yōu)先捕獲鉀,置換出氫和鈉。體外試驗(yàn)中,即便存在鈣和鎂等其他陽(yáng)離子,環(huán)硅酸鋯鈉仍對(duì)鉀離子具有高度選擇性。環(huán)硅酸鋯鈉可在整個(gè)胃腸道中捕獲鉀離子,并降低胃腸腔中游離鉀的濃度,從而降低血清鉀濃度并促進(jìn)糞便鉀排泄以緩解高鉀血癥[14]。FDA 環(huán)硅酸鋯鈉口服混懸劑生物等效性指南首次發(fā)布于2020年,目前現(xiàn)行有效的版本為2021年8月發(fā)布[15]。推薦的研究?jī)?nèi)容包括一項(xiàng)API相同性研究,兩項(xiàng)體外研究。

分子式:Na～1.5H～0.5ZrSi3O9·2-3H2O

4.1 API相同性研究環(huán)硅酸鋯鈉的結(jié)構(gòu)如圖4所示。API表征應(yīng)包括范不限于化學(xué)組成、晶體結(jié)構(gòu)、孔徑、粒徑分布、FT-IR、密度、TGA、DSC、鉀交換能力。仿制藥申請(qǐng)人應(yīng)采用至少3批受試制劑與3批對(duì)照藥進(jìn)行背對(duì)背比較研究。

4.2 體外研究

4.2.1 體外平衡結(jié)合研究該項(xiàng)研究是評(píng)估生物等效性的關(guān)鍵性研究。應(yīng)將受試制劑和RLD在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8條件下,于至少8種不同濃度的鉀鹽溶液中進(jìn)行孵育。每個(gè)研究中應(yīng)選擇合適的鉀鹽濃度,以描繪吸附曲線,包括最大結(jié)合(即達(dá)到吸附平臺(tái))。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。此外應(yīng)提供數(shù)據(jù)表明選擇的孵育時(shí)間長(zhǎng)度能夠滿足吸附平衡條件。

4.2.2 體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究該項(xiàng)研究用以支持關(guān)鍵性的平衡結(jié)合研究。應(yīng)將受試制劑和RLD在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8條件下,于至少3種濃度的鉀鹽溶液中孵育,包括平衡結(jié)合研究中的最高濃度、最低濃度、中間濃度(約50%最高濃度),每種條件下應(yīng)該選擇8個(gè)時(shí)間點(diǎn)直至24 h,包括達(dá)到結(jié)合平衡的時(shí)間,以充分描繪結(jié)合率曲線。試驗(yàn)應(yīng)該在37 ℃條件下進(jìn)行,并持續(xù)輕微振搖。每一項(xiàng)結(jié)合試驗(yàn)應(yīng)重復(fù)至少12次。

4.2.3 數(shù)據(jù)分析檢測(cè)濾液中未結(jié)合的鉀鹽,間接計(jì)算出與環(huán)硅酸鋯鈉結(jié)合的鉀鹽量。體外平衡結(jié)合研究及體外動(dòng)力學(xué)結(jié)合研究需要進(jìn)行數(shù)據(jù)分析的內(nèi)容,以及生物等效性評(píng)價(jià)指標(biāo)與碳酸司維拉姆相同(見“2.2.3”項(xiàng)下)。

4.3 討論環(huán)硅酸鋯鈉通過(guò)與胃腸道中的鉀結(jié)合而局部發(fā)揮其作用,不被全身吸收,從而使全身毒性的風(fēng)險(xiǎn)最小化或消除。采用離子阱技術(shù),與現(xiàn)有高鉀血癥治療方案相比,提高了捕獲過(guò)量鉀離子的能力、選擇性和速度[16]。具有較明顯的臨床優(yōu)勢(shì)。環(huán)硅酸鋯鈉口服混懸劑為2018年FDA批準(zhǔn)的新藥,雖然上市時(shí)間較短,但推薦的體外BE研究方法已在多種藥物指南中應(yīng)用,FDA對(duì)于此類研究的評(píng)價(jià)具有較為豐富的經(jīng)驗(yàn)。由于數(shù)據(jù)保護(hù)問(wèn)題,國(guó)內(nèi)外尚無(wú)仿制藥上市。

5 總結(jié)

不同于一般小分子化合物,復(fù)雜仿制藥需要進(jìn)行API相同性研究,只有在滿足API一致的前提下進(jìn)行的BE研究才有意義。FDA硫糖鋁產(chǎn)品指南在2019年修訂時(shí)增加了API相同性要求,鹽酸考來(lái)維侖產(chǎn)品指南在2016年修訂時(shí)增加了API相同性要求,2022年發(fā)布了仿制藥API相同性評(píng)估指南,FDA對(duì)API相同性研究的要求越來(lái)越明確。國(guó)內(nèi)在此類藥品研發(fā)和評(píng)價(jià)時(shí)也應(yīng)給予足夠重視。不同復(fù)雜仿制藥對(duì)于API相同性評(píng)估的要求不同,根據(jù)復(fù)雜程度和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)等,可能需要從工藝路線和過(guò)程控制入手,并采用不同的結(jié)構(gòu)確證分析手段與RLD進(jìn)行多批次對(duì)比研究,使API的相同性得到保證。

對(duì)于胃腸道局部作用的藥物,例如表3列舉的11種藥物,與磷酸鹽、鉀鹽、膽鹽等結(jié)合形成不溶性復(fù)合物隨糞便排出以產(chǎn)生治療效果,體外結(jié)合研究可以反映作用機(jī)制,已成為FDA比較成熟的體外BE研究方法。本文提及的胃腸道局部作用制劑硫糖鋁,國(guó)內(nèi)仿制藥批準(zhǔn)時(shí)間均約在2005年以前,推測(cè)未采用體外BE研究獲得批準(zhǔn)。2020年以后,國(guó)內(nèi)已有采用體外BE試驗(yàn)獲批的碳酸司維拉姆片,目前仍有多家仿制藥在審。盡管如此,國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)和監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)于此類體外BE研究和評(píng)價(jià)的經(jīng)驗(yàn)仍有限,需要進(jìn)行更深入的探討,具體案例具體分析,科學(xué)地進(jìn)行更多的探索和實(shí)踐。

表3 FDA推薦采用體外結(jié)合研究的胃腸道局部作用藥物[17]

復(fù)雜仿制藥的研發(fā)面臨較大的挑戰(zhàn),一方面由于仿制藥企業(yè)缺乏相關(guān)經(jīng)驗(yàn),另一方面我國(guó)藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)復(fù)雜仿制藥的研發(fā)缺少激勵(lì)政策,且相關(guān)的技術(shù)要求和法規(guī)文件等發(fā)布滯后,使得國(guó)產(chǎn)復(fù)雜仿制藥的可及性處于比較被動(dòng)的狀態(tài)。建議相關(guān)部門及時(shí)發(fā)布具有較大臨床價(jià)值或?qū)＠磳⒌狡诘葟?fù)雜仿制藥清單,并制定和發(fā)布與之相應(yīng)的特定產(chǎn)品指南,加強(qiáng)行業(yè)指導(dǎo),體現(xiàn)科學(xué)監(jiān)管理念;完善注冊(cè)申請(qǐng)人與藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)的溝通交流機(jī)制。另外,仿制藥企業(yè)應(yīng)結(jié)合市場(chǎng)需求制定合理的開發(fā)策略,及時(shí)跟進(jìn)國(guó)內(nèi)外監(jiān)管機(jī)構(gòu)發(fā)布的指南和法規(guī)文件,高質(zhì)量研發(fā),滿足廣大人民群眾的用藥需求。