邊 靜,楊 東,張為民,閆 雪,宣立娜
(長春中醫(yī)藥大學,長春 130117)
肥胖是脂肪組織與脂肪細胞增長所致體質量或體脂率異常增高的一種沉積脂肪的病理狀態(tài),是影響人類健康的第五大危險因素[1-3]??蓪е氯绺哐獕?、代謝疾病、心臟疾病、腦血管疾病以及某些癌癥[4-6],肥胖產生的問題不止停留在生理健康層面,還極大的影響心理健康,降低生活質量[7]。目前,如何防治肥胖是諸多疾病的上游目標。中醫(yī)學和西醫(yī)學對肥胖的研究和治療已取得一定的成效,西醫(yī)學主要以生活方式干預為主,輔以降糖降脂口服藥物達到維持相關指標的穩(wěn)定,但長期服用藥物損害肝腎功能,停藥后維持效果較差[8]。中醫(yī)學以整體觀念、辨證論治為指導原則,在治療肥胖方面擁有豐富的理論基礎,且療效較好,也越來越受到更多的關注[9-10]。中藥內治法在指導原則下結合體質學對肥胖的調控效果顯著[11-12],本課題為了探尋簡便、有效、易于推廣的治療方法,探討豐隆穴配伍脾俞穴對肥胖模型大鼠體質量、肝臟系數和三酰甘油(TC)、總膽固醇(TG)的影響,報道如下。
1.1 實驗動物 SPF 級雄性Wistar 大鼠(170±10) g,30 只,購自長春億斯實驗動物技術有限責任公司。動物飼養(yǎng)室溫度21 ~22 ℃,相對濕度55%~60%,12 h光照:12 h 黑暗周期中,適應性飼養(yǎng)1 周,免費供應普通飼料,飲用蒸餾水。將30 只大鼠隨機分為空白組(n= 10)和其他組(n= 20)。空白組喂養(yǎng)普通飼料,飲用蒸餾水。其他組喂養(yǎng)高脂飼料(普通飼料47%、蔗糖10%、蛋黃粉20%、豬油20%、膽固醇2%、脫氧膽酸鈉1%),飲用10%(m/v)的果糖溶液。成模時間8 周,期間每周測量所有大鼠體質量,以其他組大鼠體質量均值超過空白組體質量均值1.4 倍為造模成功標志[13]。造模成功后,將其他組(n= 20)隨機分為模型組(n= 10)和針刺組(n= 10)。
1.2 實驗方法 成模后進行實驗,空白組維持普通飼料喂養(yǎng),飲用蒸餾水直至實驗結束。模型組、針刺組維持高脂飼料喂養(yǎng),飲用果糖溶液直至實驗結束。期間空白組、模型組同針刺組相同方法固定大鼠,不參與針刺。頻次時間均與針刺組相同,固定方法體現(xiàn)人文關懷。
針刺組大鼠固定后選用安迪牌1 寸常規(guī)針具(0.25 mm×25 mm)針刺大鼠脾俞穴、雙側豐隆穴,連續(xù)治療5 d 休息2 d,每次20 min,共治療4 周。脾俞穴[14]:第12 胸椎下兩旁肋間;斜刺5 ~7 mm。豐隆穴[15]:小腿中點處腓骨后緣,直刺5 ~7 mm。
1.3 標本制備 針刺期間,每7 d 測量全部大鼠體質量并記錄。末次針刺后,禁飼料不禁蒸餾水12 h。稱重后2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,腹主動脈取血,血液樣品37 ℃恒溫箱孵育1 h 后4 ℃恒溫放置3 h,隨后5 000 r/min 離心10 min,采集血清。隨后脫頸處死大鼠解剖摘取肝臟,去除臟器周圍結締組織與臟器表面血,測量肝臟重量,記錄后立即放置液氮中留存?zhèn)溆谩W罱K將收集到的血清、肝臟分裝置于-80 ℃留存?zhèn)溆谩?/p>
1.4 肝臟系數(LW/BW) 計算肝臟質量(LW)與體質量(BW)的比值,即肝臟系數(LW/BW),以此評價肝臟病變程度。
1.5 生化指標 TC、TG 均采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定,ELISA 試劑盒購買于上海晶美生物技術有限公司,按照廠家說明方法檢測血清中三酰甘油(TC)、總膽固醇(TG)水平。
1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 21.0 統(tǒng)計軟件對數據進行統(tǒng)計分析。全部數據以均數±標準差(±s)表示,各組間數據采用方差比較分析(One-Way ANOVA)。以P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。
2.1 體質量變化 造模期間,與空白組相比,其他組大鼠腹圓形寬,飲用食水量增多,體質量有明顯提升,高于空白組1.4 倍。見表1。
表1 造模期間各組大鼠體質量均值變化(± s) g
表1 造模期間各組大鼠體質量均值變化(± s) g
組別 例數 初始體質量 第2 周 第4 周 第6 周 第8 周空白組 10 170.63±2.47 227.34±7.07 293.94±8.88 359.52±8.53 401.69±13.79其他組 20 169.85±4.23 294.77±13.07 388.70±14.40 477.40±31.47 573.30±13.30
實驗開始后,空白組、模型組、針刺組體質量較前均有不同程度下降。針刺組較模型組有明顯下降(P<0.01),第1 周最明顯,有逐漸遞減趨勢。見表2,圖1。
圖1 實驗期間大鼠體質量分布圖
表2 實驗期間各組大鼠體質量均值變化(± s,n = 10) g
表2 實驗期間各組大鼠體質量均值變化(± s,n = 10) g
注:與模型組比較,## P <0.01
組別 第1 周 第2 周 第3 周 第4 周空白組 392.38±10.92 383.86±9.57 375.72±8.48 369.64±9.23模型組 557.98±13.63 545.05±13.33 535.14±11.57 527.55±10.92針刺組 526.48±16.37## 489.89±11.48## 463.19±12.08## 444.72±15.4##
2.2 肝臟系數 與空白組相比,模型組肝臟系數明顯增加(P<0.01);針刺組肝臟系數有所增加(P<0.05)。與模型組相比,針刺組肝臟系數顯著下降(P<0.01)。見表3。
表3 各組大鼠肝臟系數(± s,n = 10)
表3 各組大鼠肝臟系數(± s,n = 10)
注:與空白組比較,# P <0.05,## P <0.01;與模型組比較,△△P <0.01
序號 空白組 模型組 針刺組肝臟/g 肝臟系數/% 肝臟/g 肝臟系數/% 肝臟/g 肝臟系數/%1 9.0 24.66 17.7 34.20 12.6 27.96 2 10.0 27.51 20.1 37.40 12.9 29.11 3 10.2 28.70 17.1 32.71 12.8 29.68 4 10.0 26.08 17.3 32.55 12.7 29.24 5 9.8 26.09 15.6 29.58 14.8 32.28 9.4 25.36 16.4 31.51 12.6 27.13 7 10.4 28.92 16.8 32.34 13.1 27.84 8 9.7 25.89 18.3 35.54 11.4 26.40 6 10.2 26.72 19.4 35.24 12.5 28.72 10 10.3 28.07 17.9 33.56 12.6 29.49均值 26.80 33.46## 28.78#△△9
2.3 生化指標 與空白組相比,模型組TC、TG 水平均有顯著提高(P<0.05);與模型組相比,針刺組TC、TG 水平顯著降低(P<0.05)。見圖2。
圖2 針刺對大鼠TC、TG 水平的影響
在能量代謝途徑中[16-18],肝臟功能的強弱是代謝的重要環(huán)節(jié),肝臟系數能夠直接反映出肝臟功能的強弱和代謝的情況,進而表現(xiàn)為大鼠機體的健康狀態(tài)[20]。脂肪組織是平衡人體能量的重要調節(jié)器[19],脂肪組織的沉積直接體現(xiàn)于體質量的升高。本研究結果顯示,體質量的上升與肝臟系數的增加呈正比,這說明肝臟系數的變化可作為檢測療效的重要參考指標。
中醫(yī)認為,脾主運化,脾俞穴位于足太陽膀胱經,是脾之背俞穴,是治療消化、內分泌系統(tǒng)相關疾病的常用腧穴[21-23]。胃為受谷納食之所,豐隆穴位于足陽明胃經,是多氣多血之經[24],為胃經絡穴,可以連通脾胃二經經氣,是祛痰要穴,被證實有降脂之功[25]。兩穴配伍使用,能夠共助脾胃升降之司,通過增強全身水液能量的運化之力來減輕肥胖程度。通過本研究結果可以觀察到,相較于模型組,針刺組體質量、肝臟系數和TC、TG 水平均有明顯降低(P<0.05),說明豐隆穴配伍脾俞穴可以有效降低脂肪沉積病理狀態(tài)與TC、TG 水平,能夠有效抑制肥胖的發(fā)展。
通過本實驗可以發(fā)現(xiàn),豐隆穴配伍脾俞穴不僅可以有效降低體質量與改善肝臟系數,還可以降低TC、TG 水平,從而一定程度上恢復機體正常的能量代謝功能,改善脂肪沉積病理狀態(tài)而減輕肥胖程度。且體質量、肝臟系數與TC、TG 水平呈正相關。證明豐隆穴配伍脾俞穴能夠通過機體代謝途徑改善脂肪沉積病理狀態(tài),改善TC、TG 水平。