程 蒙 高廣林 康 迪 河南省平頂山市第二人民醫(yī)院檢驗科 467000

肝臟為機體重要器官,是蛋白質(zhì)合成的重要場所。肝臟損傷可導(dǎo)致機體多種血清蛋白等表達水平改變。細胞角蛋白18(CK18)是構(gòu)成肝細胞骨架的主要中間絲蛋白之一,主要保護肝細胞免受各種損傷,還能調(diào)節(jié)細胞周期,其表達水平可反映感細胞損傷程度,可作為肝病發(fā)生發(fā)展的檢測指標[1]。D-二聚體作為反映機體高凝狀態(tài)、繼發(fā)性纖溶亢進的指標,與肝病患者肝功能分級有關(guān),在肝病進展過程中具有重要作用。微小RNA(miRNAs)為一類不編碼蛋白,在調(diào)控細胞功能方面具有重要作用?；诖?本文選取我院收治的100例肝病患者進行分析,以探討血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合檢測的診斷價值,從而為肝病診斷提供參考?，F(xiàn)分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2019年2月—2022年4月收治的100例肝病患者作為研究組(慢性乙型肝炎39例,肝硬化43例,肝癌18例),另選同期94例健康體檢者為對照組。研究組女41例,男59例,年齡29～75歲,平均年齡(51.67±10.14)歲,體質(zhì)量指數(shù)(BMI)19.8～29.6 kg/m2,平均BMI(24.66±2.03)kg/m2;對照組女36例,男58例,年齡24～75歲,平均年齡(49.86±11.70)歲,BMI 19.8～29.6kg/m2,平均BMI(25.01±1.94)kg/m2。兩組一般資料(性別、BMI、年齡)均衡可比(P>0.05)。研究經(jīng)我院學(xué)術(shù)委員會、醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準。

1.2 選擇標準

1.2.1 納入標準:研究組均符合慢性乙型肝炎[2]、肝硬化[3]、肝癌[4]相關(guān)診斷標準;認知、精神功能正常;血液系統(tǒng)功能正常;知情本研究,簽署同意書。

1.2.2 排除標準:合并凝血及纖溶活性的疾病;其他類型病毒性肝炎;嚴重心、肺等臟器功能障礙;獲得性免疫缺陷綜合征;合并其他惡性腫瘤或惡性腫瘤肝臟轉(zhuǎn)移;臨床資料不完整。

1.3 方法 所有入選者于晨起后采集空腹外周靜脈血,約5ml,抗凝,4 000r/min,10min,取血清,使用酶聯(lián)免疫吸附法測定CK18,使用全自動血凝儀(Sysmex CA1500型)測定D-二聚體,使用全自動生化分析儀(日本日立7600型)測定天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、總膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL);使用比較CT法定量了解miR-152-3p濃度相對水平。

1.4 觀察指標 (1)比較兩組治療前肝功能相關(guān)指標,包括AST、ALT、TBA、TBIL。(2)比較兩組治療前血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平。(3)分析血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平與肝功能指標的相關(guān)性。(4)分析肝病發(fā)生的危險因素。(5)分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合檢測對肝病的診斷價值。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前肝功能相關(guān)指標比較 研究組AST、ALT、TBA、TBIL水平高于對照組(P<0.05);研究組不同肝病患者AST、ALT、TBA、TBIL水平比較:肝癌患者>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者(P<0.05),見表1。

表1 兩組肝功能相關(guān)指標比較

2.2 兩組血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平比較 與對照組相比,治療前研究組血清CK18、D-二聚體較高,miR-152-3p水平較低(P<0.05);研究組不同肝病患者血清CK18、D-二聚體水平比較:肝癌患者>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者(P<0.05);研究組不同肝病患者血清miR-152-3p水平比較:肝癌患者<肝硬化患者<慢性乙型肝炎患者(P<0.05),見表2。

表2 兩組血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平比較

2.3 血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平與肝功能指標的相關(guān)性 研究組患者血清CK18、D-二聚體水平與AST、ALT、TBA、TBIL指標呈正相關(guān)(P<0.05);血清miR-152-3p水平與AST、ALT、TBA、TBIL指標呈負相關(guān)(P<0.05),見表3。

表3 血清miR-152-3p、CK18和D-二聚體水平與肝功能指標相關(guān)性分析

2.4 偏回歸分析影響肝病發(fā)生的危險因素 以是否發(fā)生肝病為因變量,將血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體水平作為自變量,對自變量進行賦值(以194例的平均值為界:≤平均值=1,>平均值=2)。Logistic回歸分析顯示,血清miR-152-3p(≤6.96)、CK18(>138.68ng/ml)、D-二聚體(>826.10μg/L)水平是發(fā)生肝病的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 偏回歸分析影響活動性肺結(jié)核患者疾病復(fù)發(fā)的危險因素

2.5 ROC分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合檢測對肝病的診斷價值 以發(fā)生肝病為陽性標本,以健康體檢者為陰性樣本,繪制ROC曲線,結(jié)果顯示,血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合診斷肝病的AUC為0.915,敏感度87.00%,特異度93.62%,優(yōu)于三者單一診斷。見表5。

表5 ROC分析血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合檢測對肝病的診斷價值

3 討論

肝病為常見消化系統(tǒng)疾病,具有高發(fā)生率、高死亡率的特點,主要包括肝炎、肝硬化、肝癌等。肝組織活檢為臨床診斷的金標準,但其屬于有創(chuàng)檢查,且價格昂貴,部分患者還需反復(fù)取材,導(dǎo)致臨床應(yīng)用受限。故而需尋找更為有效、安全的檢測肝病的方法。

CK18為人類細胞角蛋白家族成員之一,呈酸性,在肝細胞損傷發(fā)生凋亡時,其可被裂解為高度凋亡特異性片段,并釋放入血,可反映肝細胞受損程度。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn),肝病患者CK18呈異常表達,且肝癌患者CK18>肝硬化患者>慢性乙型肝炎患者,與郭曉會等[1]學(xué)者研究結(jié)果類似。細胞凋亡為肝臟疾病發(fā)生的重要因素。肝細胞因各種原因受損凋亡后,CK18會被降解成片段進入血液,且多個研究發(fā)現(xiàn)其在非酒精性脂肪性肝病、肝癌、肝硬化等肝臟疾病中顯著升高[5-6]。同時,本文結(jié)果還發(fā)現(xiàn),CK18與AST、ALT、TBA、TBIL指標呈正相關(guān),提示CK18可作為生物標志物診斷肝病或預(yù)測肝病程度。

本文中,肝病患者D-二聚體高于健康體檢者,且肝癌患者D-二聚體水平較肝硬化、慢性乙型肝炎患者高,隨著肝病患者病情程度加重,其表達水平越高。D-二聚體為交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物,可引起微血栓形成、纖溶亢進,加重肝損傷,促使病情惡化[7-8]。有研究發(fā)現(xiàn),D-二聚體具有較高的特異性,但準確性相對較差,聯(lián)合其他指標進行診斷,能提高診斷準確性[9]。

多種miRNA可參與到癌細胞生物程序調(diào)控過程中,發(fā)揮抑癌、促癌作用,其在腫瘤疾病的診斷、治療、預(yù)后評估中也越來越得到臨床重視[10-11]。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn),肝癌患者miR-152-3p顯著低于慢性乙型肝炎、肝硬化者,且表達水平與肝功能指標呈負相關(guān),提示,miR-152-3p可參與肝病的發(fā)生發(fā)展。miR-152-3p通過調(diào)節(jié)細胞增殖、凋亡、遷移等過程,可對肝癌的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生影響。有關(guān)研究還指出,miR-152-3p通過調(diào)控靶基因AKAP1、MRPL50、STAU1、FOXRED1、MRPL28、SHC1作用于線粒體呼吸鏈,還能影響細胞氧化呼吸功能,促進肝癌復(fù)發(fā)[12]。

本文結(jié)果發(fā)現(xiàn),血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體聯(lián)合診斷感染性肺炎的AUC、敏感度、特異度均高于三者單一診斷,提示三者聯(lián)合檢測用于肝病診斷具有良好的價值。

綜上所述,血清miR-152-3p、CK18、D-二聚體對不同病變程度的肝病具有指導(dǎo)意義,聯(lián)合檢測能幫助臨床進行診斷、鑒別,了解肝臟病變程度,對治療、預(yù)后評估具有重要作用。