沈 奔，陳 敏，韓 宇，嚴(yán)啊妮，趙秀娟，施春偉，王洪榮

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院, 江蘇 揚(yáng)州 225009；2.海門區(qū)海門港新區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村和社會(huì)事業(yè)局, 江蘇 南通 226100；3.南通科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 南通 226007）

隨著我國(guó)畜牧業(yè)的快速發(fā)展，規(guī)?；c集約化生產(chǎn)已成為畜牧業(yè)現(xiàn)代化的主要標(biāo)志。當(dāng)前，我國(guó)多數(shù)中、小養(yǎng)殖場(chǎng)為了提高牛羊的生產(chǎn)效率，常飼喂以谷物淀粉為主的高精料飼糧，這種飼養(yǎng)模式在提高動(dòng)物生產(chǎn)效率的同時(shí)，也易導(dǎo)致反芻動(dòng)物瘤胃液pH 快速下降，并伴隨出現(xiàn)以亞急性瘤胃酸中毒(Sub-acute ruminal acidosis，SARA)為主的營(yíng)養(yǎng)代謝疾病[1]。研究表明，SARA 可引起反芻動(dòng)物瘤胃上皮損傷、腹瀉、肝臟膿腫、跛行等病癥，增加反芻動(dòng)物消化道中的細(xì)菌毒素濃度，最終導(dǎo)致其采食量和產(chǎn)奶量下降[2]。在生產(chǎn)環(huán)節(jié)中，飼料品質(zhì)差或飼養(yǎng)管理不善也會(huì)造成上述病癥。因此，針對(duì)反芻家畜SARA，預(yù)防比治療更為重要[3-4]。

海藻含有豐富的生物活性物質(zhì)，其具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗病毒及抗心血管疾病等功能。研究表明，海藻油可抑制牛鏈球菌的豐度，減少乳酸在瘤胃內(nèi)的快速堆積[5]。Cruywagen 等[6]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在奶牛高精料飼糧中添加鈣質(zhì)海藻可有效降低瘤胃液中的乳酸濃度，提高乙酸和總揮發(fā)性脂肪酸的濃度，從而改善瘤胃發(fā)酵模式，緩解瘤胃代謝性酸中毒。泡葉藻(Ascophyllum nodosum)富含巖藻多糖，可提高機(jī)體的抗氧化能力，而泡葉藻硫酸多糖可改善腸道菌群失調(diào)和腸道炎癥[7-8]。羊棲菜(Sargassum fusiforme)是生長(zhǎng)于沿海低潮帶巖石上的藻類植物，富含可溶于水的酸性多糖，包括褐藻膠、褐藻多糖硫酸脂以及褐藻淀粉等，具有較強(qiáng)生物活性[9]。研究發(fā)現(xiàn)，羊棲菜中帶有聚陰離子的多糖可通過抑制有害菌的相對(duì)豐度、提高有益菌的相對(duì)豐度來改善瘤胃內(nèi)環(huán)境，調(diào)節(jié)機(jī)體代謝[10]。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于泡葉藻和羊棲菜對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃發(fā)酵的相關(guān)報(bào)道較少。因此，本研究選取3 只體重相近且安裝有永久性瘤胃瘺管的健康湖羊作為體外發(fā)酵瘤胃液的供體，利用體外模擬瘤胃發(fā)酵技術(shù)，探究不同添加水平下，泡葉藻和羊棲菜對(duì)高精料日糧體外發(fā)酵參數(shù)的影響，篩選出緩解瘤胃酸中毒的適宜添加量，以期為泡葉藻和羊棲菜在反芻動(dòng)物健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)選取3 只(59 ± 1.5) kg，體況相近、健康且裝有永久性瘤胃瘺管的雄性湖羊?yàn)楸敬卧囼?yàn)發(fā)酵液的供體，湖羊的飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1 所示。每日07:00 和19:00 各飼喂1 次，自由采食和飲水。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在高精料底物(精粗比70 ? 30)中添加泡葉藻和羊棲菜，泡葉藻和羊棲菜分別購(gòu)自西安萬(wàn)方生物有限公司和溫州市洞頭北岙深海巴巴養(yǎng)殖場(chǎng)。發(fā)酵底物為玉米0.49 g、豆粕0.21 g、燕麥0.15 g、苜蓿0.15 g，共1.00 g (營(yíng)養(yǎng)水平：ME，10.36 MJ·kg-1；CP，16.65%；NDF，26.00%；ADF，16.14%；Ca，0.31%；P，0.33%)。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)5 種添加劑量0 (對(duì)照組)、1%、2%、3%、4% (干物質(zhì)基礎(chǔ))，每組設(shè)置3 個(gè)重復(fù)。分別于發(fā)酵后的6、9、12 和24 h，采集發(fā)酵液用于各發(fā)酵參數(shù)的測(cè)定。泡葉藻0 (對(duì)照組)、1%、2%、3%、4%添加組分別命名為ASC0、ASC1、ASC2、ASC3、ASC4；羊棲菜0 (對(duì)照組)、1%、2%、3%、4%添加組分別命名為SAR0、SAR1、SAR2、SAR3、SAR4。

1.3 體外發(fā)酵試驗(yàn)方法

于晨飼前進(jìn)行瘤胃液的采集，分別于瘤胃前、中、后3 個(gè)部位采集瘤胃液，混勻經(jīng)4 層紗布過濾至提前預(yù)熱(39 ℃)且充滿二氧化碳(CO2)的保溫瓶中，帶回實(shí)驗(yàn)室后放入39 ℃恒溫水浴鍋保溫并持續(xù)通入CO2以保證厭氧狀態(tài)。人工唾液鹽參照Menke 等[11]的方法配制；充分混勻后放入39 ℃恒溫水浴鍋中并持續(xù)通入CO2，按照瘤胃液與人工唾液1 ? 2 的比例混合均勻，取60 mL 分裝至裝有底物的120 mL 培養(yǎng)瓶中(持續(xù)充入CO2保持厭氧環(huán)境)，分裝完畢后，用橡膠塞和鋁蓋將發(fā)酵瓶密封并迅速置于39 ℃恒溫振蕩水浴搖床，以125 r·min-1的速度持續(xù)振蕩培養(yǎng)6、9、12 和24 h。達(dá)到各時(shí)間點(diǎn)后，將培養(yǎng)瓶取出并置于冰水浴以結(jié)束發(fā)酵，取出發(fā)酵液測(cè)定pH，并將其分裝置于-20 ℃保存，用于揮發(fā)性脂肪酸(VFA)、乳酸、氨態(tài)氮(NH3-N)和微生物蛋白(MCP)含量的測(cè)定。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

發(fā)酵液pH 的測(cè)定使用FE20 型pH 計(jì)于采樣后立即測(cè)定；VFA 使用Erwin 等[12]的方法測(cè)定；乳酸濃度使用對(duì)羥基聯(lián)苯法[13]測(cè)定；NH3-N 的濃度使用酚-次氯酸鈉比色法[14]測(cè)定；MCP 的濃度使用嘌呤法[15]測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010 整理，通過SPSS 25.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan 法進(jìn)行多重比較，采用一般線性模型對(duì)發(fā)酵終點(diǎn)的pH、NH3-N、MCP、乳酸和VFA 進(jìn)行方差分析，并采用Tukey 法進(jìn)行多重比較。通過正交多項(xiàng)式矩陣檢測(cè)它們的一次和二次效性。結(jié)果以平均值和總標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，在0.05 水平上進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液pH 的影響

隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，發(fā)酵液的pH 逐漸降低，在發(fā)酵24 h 時(shí)pH 降到最低。ASC3和ASC4組在發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)pH 顯著高于ASC0組(P< 0.05)；隨著泡葉藻添加量的提高，6 和9 h 發(fā)酵液pH 呈線性升高趨勢(shì)(P< 0.05)，12 和24 h 時(shí)呈現(xiàn)出顯著的二次效應(yīng)(P< 0.05)。SAR3組pH 在發(fā)酵發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)顯著高于SAR0組(P< 0.05)；在發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)，發(fā)酵液pH 隨著羊棲菜添加量的提高呈線性升高趨勢(shì)(P< 0.05) (表2)。

表2 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液pH 的影響Table 2 Effects of Ascophyllum nodosum and Sargassum fusiforme supplementation on pH of fermentation in vitro

2.2 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液NH3-N 濃度和MCP 濃度的影響

ASC3組NH3-N 濃 度 在 發(fā) 酵9、12 和24 h 時(shí) 顯著低于ASC0組(P< 0.05)；隨著泡葉藻添加量的提高，發(fā)酵液NH3-N 濃度在發(fā)酵12 和24 h 時(shí)呈線性降 低 趨 勢(shì)(P< 0.05)。SAR3組NH3-N 濃 度 在 發(fā) 酵12 和24 h 時(shí)顯著低于SAR0組(P< 0.05)；隨著羊棲菜添加量的提高，24 h 發(fā)酵液NH3-N 濃度呈線性增加趨勢(shì)(P< 0.05) (表3)。

表3 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液NH3-N 濃度的影響Table 3 Effects of Ascophyllum nodosum and Sargassum fusiforme supplementation on NH3-N concentration of fermentation in vitro mg·dL-1

ASC3組MCP 濃度在發(fā)酵各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均顯著高于ASC0組(P< 0.05)；泡葉藻各添加組發(fā)酵液MCP 濃度在發(fā)酵各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均呈現(xiàn)出顯著二次效應(yīng)(P< 0.05)。羊棲菜各添加組MCP 濃度在發(fā)酵9 和12 h 時(shí)顯著高于ASC0組(P< 0.05)；發(fā)酵24 h時(shí)，SAR3組MCP 濃度顯著高于SAR0組(P< 0.05)；在發(fā)酵9、12 和24 h 時(shí)發(fā)酵液MCP 濃度隨著羊棲菜添加量的提高呈顯著線性關(guān)系(P< 0.05) (表4)。

表4 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液微生物蛋白含量的影響Table 4 Effects of Ascophyllum nodosum and Sargassum fusiforme supplementation on microbial protein(MCP) concentration of fermentation in vitro mg·mL-1

2.3 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液乳酸濃度的影響

ASC1組 和ASC3組 乳 酸 濃 度 在 發(fā) 酵12 h 時(shí) 顯著低于ASC0組(P< 0.05)；各添加組乳酸濃度在發(fā)酵24 h 時(shí)均顯著低于ASC0組(P< 0.05)；在發(fā)酵9、12 和24 h 時(shí)隨著泡葉藻添加量的提高各添加組乳酸濃度呈現(xiàn)顯著二次效應(yīng)(P< 0.05) (圖1)。

圖1 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液乳酸濃度的影響Figure 1 Effects of Ascophyllum nodosum and Sargassum fusiforme supplementation on the lactic acid concentration of fermentation in vitro

羊棲菜各添加組乳酸濃度在發(fā)酵24 h 時(shí)均顯著低于SAR0組(P< 0.05)，乳酸濃度隨著羊棲菜添加量的提高呈現(xiàn)顯著的線性關(guān)系(P< 0.05) (圖1)。

2.4 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液VFA 比例及濃度的影響

各添加組發(fā)酵液中乙酸的均隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)升高趨勢(shì)(圖2)。ASC4組發(fā)酵液乙酸比例在發(fā)酵9、12 和24 h 時(shí)均顯著高于ASC0組(P< 0.05)，丙酸比例均顯著低于ASC0組(P< 0.05)。ASC3組和ASC4組發(fā)酵液乙酸/丙酸在發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于ASC0組(P< 0.05)；發(fā)酵液乙酸比例、丙酸比例和乙酸/丙酸在發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)隨著泡葉藻添加量的提升呈現(xiàn)顯著線性關(guān)系(P< 0.05)。ASC4組發(fā)酵液丁酸比例在發(fā)酵24 h 時(shí)顯著低于ASC0組(P< 0.05)。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，體外發(fā)酵液總揮發(fā)性脂肪酸(total volatile fatty acid, FA) 濃度逐漸增加，ASC0組體外發(fā)酵液TVFA 濃度均低于其余各添加組。ASC3組和ASC4組發(fā)酵液TVFA濃度在發(fā)酵24 h 時(shí)均顯著高于ASC0組(P< 0.05)。

圖2 泡葉藻對(duì)體外發(fā)酵液揮發(fā)性脂肪酸比例及濃度的影響Figure 2 Effects of Ascophyllum nodosum supplementation on the ratio and concentration of volatile fatty acid(VFA) in fermentation in vitro

SAR4組發(fā)酵液乙酸比例在發(fā)酵12 和24 h 時(shí)均顯著高于SAR0組(P< 0.05) (圖3)；SAR2、SAR3和SAR4組發(fā)酵液丙酸比例在發(fā)酵9 h 時(shí)均顯著低于SAR0組(P< 0.05)。SAR4組酵液乙丙比在發(fā)酵12 h時(shí)顯著升高(P< 0.05)，各添加組發(fā)酵液乙酸/丙酸比在發(fā)酵24 h 時(shí)均顯著升高(P< 0.05)且呈現(xiàn)出顯著二次效應(yīng)(P< 0.05)。SAR4組發(fā)酵液丁酸比例在發(fā)酵12 和24 h 時(shí)均顯著低于SAR0組(P< 0.05) 。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，體外發(fā)酵液TVFA 濃度逐漸增加，SAR0組的體外發(fā)酵液TVFA 濃度均低于其他各組。SAR3組發(fā)酵液TVFA 濃度顯著在發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)均顯著高于SAR0組(P< 0.05) 。

圖3 羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液揮發(fā)性脂肪酸比例及濃度的影響Figure 3 Effects of Sargassum fusiforme supplementation on the ratio and concentration of VFA in fermentation in vitro

3 討論

3.1 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液pH 的影響

瘤胃液pH 是衡量瘤胃健康以及維持瘤胃正常發(fā)酵的重要指標(biāo)之一，影響瘤胃液pH 的因素有飼糧種類及精粗比、唾液分泌量、瘤胃內(nèi)乳酸及有機(jī)酸生成、吸收和排出速度等[16]。正常情況下，反芻動(dòng)物瘤胃液pH 維持在6.5 左右，若長(zhǎng)期飼喂大量谷類等易于發(fā)酵的碳水化合物飼料，使短鏈脂肪酸和乳酸在瘤胃中積累，致使pH 降至5.2～5.6，并誘發(fā)SARA[1,17]。本研究結(jié)果表明，發(fā)酵24 h 時(shí)，對(duì)照組發(fā)酵液pH 處于5.2～5.6，這說明體外SARA 誘導(dǎo)成功。發(fā)酵的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，ASC3組發(fā)酵液pH 顯著高于ASC0組，這與Alejandro 等[18]研究結(jié)果一致。各個(gè)發(fā)酵采樣時(shí)間點(diǎn)，SAR3組的發(fā)酵液pH 均顯著高于SAR0組。Boeckaert 等[19]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加微藻可顯著降低奶牛瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的濃度，提高瘤胃pH；此外泡葉藻和羊棲菜均富含膳食纖維，這可促進(jìn)反芻動(dòng)物唾液的分泌，增加反芻的次數(shù)，從而減緩瘤胃pH 的下降[20]。值得注意的是，本研究中添加3%的泡葉藻和羊棲菜后，體外發(fā)酵液中TVFA 濃度顯著上升，此時(shí)pH 并未顯現(xiàn)出降低的趨勢(shì)，反而顯著上升，這可能是由于在添加兩種海藻之后，發(fā)酵液中乳酸濃度顯著降低，而乳酸對(duì)瘤胃pH 的貢獻(xiàn)率為TVFA 的近10 倍[21]；其次海藻在發(fā)酵瓶?jī)?nèi)形成的堿性氧化物以及藻內(nèi)抑菌物質(zhì)發(fā)揮作用都有可能緩解了pH 的降低[20]，但具體機(jī)制還需要進(jìn)一步試驗(yàn)證明。本研究說明高精料飼糧中添加3% ASC 或SAR 可有效緩解瘤胃pH 的降低，進(jìn)而改善瘤胃SARA。

3.2 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液NH3-N 濃度和MCP 濃度的影響

瘤胃微生物利用飼料蛋白降解的NH3-N 為氮源合成MCP，因此，瘤胃液NH3-N 濃度可反映瘤胃微生物對(duì)氮的利用情況[22]。褐藻是唯一一種能夠在體內(nèi)積攢褐藻多酚(phlorotannins)的海藻，多酚可改善瘤胃發(fā)酵，提高蛋白質(zhì)代謝率、降低甲烷產(chǎn)生[23]。熊穎[24]研究表明，0.3%板栗總苞多酚可顯著降低體外發(fā)酵液中NH3-N 的濃度，提高M(jìn)CP 的含量。本研究中，泡葉藻組和羊棲菜組發(fā)酵6～12 h 時(shí)，發(fā)酵液的NH3-N 濃度均處于適宜范圍(6.3～27.5 mg·dL-1)[25]，而 發(fā) 酵24 h 時(shí) 體 外 發(fā) 酵 液 的NH3-N濃度并不在此濃度范圍內(nèi)，這可能是體外發(fā)酵缺少動(dòng)物體內(nèi)發(fā)酵所擁有的氮素循環(huán)機(jī)制導(dǎo)致了NH3-N的堆積[21]。泡葉藻、羊棲菜均可作為“益生元”調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，促進(jìn)胃腸道微生物活性[26-27]。孫福昱[21]發(fā)現(xiàn)，海帶(Laminaria japonica)、紫菜(Porphyra tenera)和裙帶菜(Undaria pinnatifida)能夠促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)繁殖，并顯著降低體外發(fā)酵液NH3-N 濃度，提高M(jìn)CP 的生物合成量，說明藻類能夠促進(jìn)瘤胃氮代謝，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。本研究中ASC3組和SAR3組發(fā)酵液NH3-N 濃度顯著低于各自對(duì)照組，而MCP 濃度顯著升高，這說明添加3%的泡葉藻和羊棲菜能夠促進(jìn)腸道微生物的活性，提高了NH3-N的吸收和轉(zhuǎn)化。

3.3 ASC 和SAR 對(duì)體外發(fā)酵液乳酸濃度的影響

在高精料飼養(yǎng)水平下，瘤胃內(nèi)淀粉分解菌會(huì)爆發(fā)性地增殖，產(chǎn)生大量VFA 導(dǎo)致瘤胃pH 下降。瘤胃pH 的迅速下降會(huì)使以牛鏈球菌為首的低pH 耐受菌大量繁殖，形成優(yōu)勢(shì)菌群，產(chǎn)生大量乳酸，在瘤胃內(nèi)造成乳酸的堆積，引起瘤胃pH 進(jìn)一步下降，并最終導(dǎo)致SARA 的發(fā)生[28]。研究發(fā)現(xiàn)，乳酸的解離常 數(shù)(pKa = 3.9)遠(yuǎn) 小 于VFA 的 解 離 常 數(shù)(pKa =4.8)，乳酸對(duì)瘤胃pH 的貢獻(xiàn)率為TVFA 的近10 倍[20]。發(fā)酵24 h 時(shí)，泡葉藻和羊棲菜各添加組發(fā)酵液乳酸濃度均顯著低于ASC0組，且ASC4組和SAR3組發(fā)酵液乳酸濃度最低，說明在瘤胃發(fā)酵過程中添加泡葉藻和羊棲菜有利于緩解乳酸的累積，添加量以4%和3%最為適宜。研究報(bào)道，海藻多酚是海藻的主要活性成分，能夠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的產(chǎn)生[29]。泡葉藻是褐藻多酚含量最高的海藻之一[30]，瘤胃中乳酸產(chǎn)生菌大多為革蘭氏陽(yáng)性菌，泡葉藻中的海藻多酚可能抑制了乳酸產(chǎn)生菌的繁殖或者相較于乳酸利用菌而言其對(duì)產(chǎn)生菌的抑制作用更強(qiáng)。另外，羊棲菜多糖可以抑制α-葡萄糖苷酶的活性，降低瘤胃內(nèi)碳水化合物的產(chǎn)生，從而降低牛鏈球菌產(chǎn)乳酸速率[31]，這在一定程度上可以阻止乳酸在瘤胃中快速堆積，減少瘤胃酸中毒的發(fā)生。

3.4 泡葉藻和羊棲菜對(duì)體外發(fā)酵液VFA 比例及濃度的影響

反芻動(dòng)物碳水化合物的主要利用形式為VFA，其主要成分為乙酸、丙酸、丁酸，可占TVFA 總量的95%左右，同時(shí)VFA 也是反映瘤胃發(fā)酵、消化等代謝活動(dòng)狀況的重要指標(biāo)之一[32]。已有研究發(fā)現(xiàn)[33]，奶山羊在亞急性瘤胃酸中毒時(shí)期表現(xiàn)出瘤胃液乙酸濃度降低，丙酸和丁酸濃度增加。Brossard 等[34]研究發(fā)現(xiàn)在發(fā)生亞急性瘤胃酸中毒后，綿羊瘤胃內(nèi)乙酸濃度下降，丁酸濃度大幅升高。Penner 等[35]研究發(fā)現(xiàn)高精料飼喂的小母牛相比于正常組瘤胃液中乙酸的摩爾比例降低，丙酸和丁酸的比例顯著升高。海藻內(nèi)含有豐富的膳食纖維，在瘤胃發(fā)酵過程中可產(chǎn)生更多的乙酸[36]。另外，羊棲菜含有的巖藻多糖可以提高乙酸產(chǎn)生菌Alloprevoella的相對(duì)豐度[37]。本研究中，與對(duì)照組相比，添加泡葉藻和羊棲菜可有效提高發(fā)酵液乙酸比例和乙酸/丙酸，降低丙酸和丁酸比例。飼喂高精料日糧會(huì)引起反芻動(dòng)物瘤胃中丁酸濃度迅速上升，破壞瘤胃上皮緊密連接，降低瘤胃上皮通透性，導(dǎo)致瘤胃上皮屏障功能受損，損害動(dòng)物機(jī)體健康[38-39]。本研究中添加泡葉藻能夠降低發(fā)酵液中丁酸比例，這與Zhou 等[26]試驗(yàn)結(jié)果一致。泡葉藻不僅能夠通過抑制丁酸產(chǎn)生菌Roseburiasp.和Coprococcussp.來降低丁酸濃度，還可以提高瘤胃微生物對(duì)丁酸的代謝水平[26]。瘤胃中溶纖維丁酸弧菌的主要代謝物為乙酸和丁酸，并且能夠?qū)⒁宜徂D(zhuǎn)化為丁酸。研究報(bào)道，多酚可降低體外發(fā)酵液中溶纖維丁酸弧菌的數(shù)量，從而降低丁酸比例[40]。本研究中，羊棲菜組發(fā)酵液丁酸比例降低，這可能是由于羊棲菜中多酚物質(zhì)抑制了丁酸產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)繁殖。泡葉藻和羊棲菜中的生物活性物質(zhì)均具有益生元效應(yīng)，能夠提高微生物的發(fā)酵效率[26,41]。發(fā)酵24 h 時(shí)，3%添加量的泡葉藻組和羊棲菜組TVFA 濃度均顯著提高。本研究研究發(fā)現(xiàn)高精料飼糧中添加ASC 和SAR 可有效改善瘤胃發(fā)酵模式，提高體外發(fā)酵液乙酸比例和乙酸/丙酸。

4 結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)添加泡葉藻和羊棲菜均能夠有效緩解體外發(fā)酵液pH 降低，顯著降低乳酸濃度，提高乙酸/丙酸，改善瘤胃發(fā)酵模式。在本研究條件下，兩種海藻添加量為3%時(shí)對(duì)緩解瘤胃酸中毒具有積極意義。