徐一平，王如霞，周倩，周瑤，湯浩蕾

(江蘇省中江海外進出口有限公司，南京 210000)

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

蟲螨腈標準樣品(質量分數≥98%，宜興宜州化學制品有限公司)；虱螨脲標準樣品(質量分數≥97%，宜興宜州化學制品有限公司)；480 g/L 蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑(蟲螨腈400 g/L+虱螨脲80 g/L；定遠眾邦生物工程有限公司)；乙腈(色譜級，安徽天地高純溶劑有限公司)；超純水(自制)。

1260 型高效液相色譜儀(美國安捷倫科技有限公司)，具自動進樣器(進樣體積100 μL)和DAD 檢測器；不銹鋼色譜柱[150 mm×4.6 mm(i.d.)，內裝4 μm C18填充物]；過濾器(濾膜孔徑4.5 μm)；UV-1800型紫外可見分光光度計(日本島津株式會社)；KH-25013 型超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；XS205 型電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多集團)。

1.2 色譜操作條件

流動相為乙腈∶水=80∶20 (體積比)，流速1.0 mL/min，檢測波長254 nm[5]，進樣體積5 μL，柱溫(30±2.0)℃。在上述色譜條件下，蟲螨腈和虱螨脲的保留時間分別為4.5、4.1 min。

1.3 測定步驟

1.3.1 標準溶液的制備

分別稱取0.02 g 蟲螨腈標準樣品和0.02 g 虱螨脲標準樣品(均精確至0.002 g)，置于同一50 mL 容量瓶中，加入適量乙腈超聲溶解，取出靜置至室溫，隨后用乙腈定容至刻度線處，搖勻后過濾備用。

1.3.2 樣品溶液的制備

準確稱取0.1 g 480 g/L 蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑(精確至0.002 g)，置于50 mL 容量瓶中，加入適量乙腈超聲溶解，取出靜置，隨后用乙腈定容至刻度線處，搖勻后過濾備用。

1.3.3 有效成分的測定

參照1.2 節(jié)中色譜操作條件，待儀器進入基線平穩(wěn)狀態(tài)后，多次注入數針標準樣品溶液，計算相鄰2 針標樣溶液峰面積相對變化值K，直至K＜1.0%[6]。

1.3.4 有效成分的計算

分別取2 針標樣溶液和試樣溶液的峰面積進行平均，通過式(1)進行計算有效成分的質量分數[7]。

式中：X為有效成分的質量分數，%；A1為標準樣品溶液中蟲螨腈或虱螨脲對應的峰面積平均值；A2為樣品溶液中蟲螨腈或虱螨脲對應的峰面積平均值；m1為標準樣品的質量，g；m2為樣品的質量，g；w為標樣中蟲螨腈或虱螨脲的質量百分數，%。

2 結果與分析

2.1 波長的選擇

通過對蟲螨腈和虱螨脲進行全波段掃描，分別得到不同波長下蟲螨腈和虱螨脲的紫外吸收光譜圖(圖1)。由圖1 可知：蟲螨腈和虱螨脲在254 nm 處吸光度較高，且檢測靈敏度和穩(wěn)定性較高。由于乙腈在截止波長處具有很強的末端吸收，考慮到譜圖范圍以及檢測器的適宜波長，因此選擇254 nm 作為檢測波長，在此波長下，2 者吸收峰面積均較大，同時可以避免溶劑干擾吸收。

圖1 蟲螨腈和虱螨脲紫外吸收光譜圖

2.2 流動相的選擇

不同流動相及其比例對樣品物質分離過程有著重要影響。根據蟲螨腈的物化性質，480 g/L 蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑采用乙腈和水作為流動相。經測定，當水相比例小于20%時，分離效果較差，且虱螨脲出峰時間過早，導致與雜峰混合，無法精確檢測；當水相大于20%時，雖然雜峰與有效成分分離效果有所改善，但蟲螨腈出峰時間延遲，工作效率降低。因此，選定乙腈∶水=80∶20(體積比)作為流動相，流速為1.0 mL/min，此條件下樣品出峰時間適宜，雜質與有效成分分離清楚，基線平穩(wěn)，峰形尖銳對稱，工作效率高(圖2、圖3)。

圖2 蟲螨腈和虱螨脲標樣液相色譜圖

圖3 蟲螨腈和虱螨脲試樣液相色譜圖

2.3 線性相關性

分別稱取蟲螨腈和虱螨脲標準樣品各0.02 g(均精確至0.002 g)，置于50 mL 容量瓶中，用適量乙腈超聲溶解后定容，分別移取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 置于25 mL 容量瓶中，乙腈稀釋后定容，搖勻過濾并按照上述色譜操作條件進行測試分析。以質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標分別繪制標準曲線，如圖4 所示?？梢?，蟲螨腈(虱螨脲)的質量濃度與其相應響應值之間表現出良好的線性相關性，蟲螨腈線性回歸方程為：y=11.988 1+7.186 1x，相關系數r為0.999 3；虱螨脲線性回歸方程為：y=16.787 49+9.178 54x，相關系數r為0.999 8。

圖4 蟲螨腈和虱螨脲線性關系圖

2.4 方法的精密度

準確稱取5 份同一試樣，在上述條件下進行平行測定，并分別計算有效成分的標準偏差與變異系數，結果如表1 所示。

表1 分析方法的精密度測試結果

可見，蟲螨腈與虱螨脲的標準偏差分別為0.140 5 和0.031 6，變異系數分別為3.47%和3.76%，說明此方法精密度良好。

2.5 方法的準確度

準確稱取5 份同一試樣，按上述方法配制試樣溶液，分別加入一定量蟲螨腈和虱螨脲標準品，在1.2 節(jié)色譜條件下進行測定分析，結果如表2 所示。可見，虱螨脲平均回收率為99.45%，蟲螨腈平均回收率為98.72%，該方法回收率均超過95%，準確度較高，符合產品質量檢測標準。

3 結論

本文建立了同時檢測480 g/L 蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑中2 種有效成分的高效液相色譜分析方法，并對此進行了驗證。結果表明蟲螨腈和虱螨脲相關系數分別為0.999 3 和0.999 8，標準偏差分別為0.140 5和0.031 6，回收率分別為98.72%和99.45%。此方法可以避免雜質干擾，簡單快捷，具有良好的分離效果，同時準確度和精確度均能達到分析要求，可為工業(yè)生產中該產品的質量控制提供方法支撐。