夏方山, 王 勃, 陰禹舟, 李尹琳, 岑慧芳, 朱慧森

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院, 山西 太谷 030801)

硒是人類(lèi)和動(dòng)物身體健康不可或缺的微量元素,是人類(lèi)和動(dòng)物機(jī)體抗氧化和免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)發(fā)揮作用的重要活性成分,被稱(chēng)為“抗癌之王”[1-2]。人類(lèi)機(jī)體內(nèi)一旦硒缺乏就會(huì)誘導(dǎo)克山病、大骨節(jié)病、白肌病、不孕等一系列疾病的發(fā)生[3]。然而,硒在人類(lèi)或動(dòng)物體內(nèi)無(wú)法自主合成,必須從食物中獲取,致使土壤缺硒造成的人類(lèi)健康問(wèn)題是世界各國(guó)共同關(guān)注的一個(gè)公共衛(wèi)生焦點(diǎn)[1,4-5]。因此,如何科學(xué)生產(chǎn)富硒動(dòng)植物產(chǎn)品,解決人體缺硒問(wèn)題是當(dāng)下食物安全研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一[6-7]。研究發(fā)現(xiàn),適宜的硒處理不僅能促進(jìn)小麥(Triticumaestivum)[8]、水稻(Oryzasativa)[9-10]、玉米(Zeamays)[11]、燕麥(Avenasativa)[12]等植物的生長(zhǎng)發(fā)育,還能提高其硒含量、產(chǎn)量和品質(zhì),從而能夠?yàn)槿祟?lèi)提供豐富的優(yōu)質(zhì)富硒食物來(lái)源。植物體內(nèi)抗氧化能力的提升是外源硒處理實(shí)現(xiàn)上述功能的重要原因,這已在玉米[11]、花生(Arachishypogaea)[13]、白術(shù)(Atractylodesmacrocephala)[14]、黃精(Polygonatumsibiricum)[15]、葡萄(Vitisvinifera)[16]及青花菜(Brassicaoleracea)[17]等多種植物中得到證實(shí)。然而,過(guò)度的硒處理也會(huì)導(dǎo)致植物發(fā)生劇烈的生理變化及物質(zhì)轉(zhuǎn)換,從而降低其產(chǎn)量[12,18]。所以,硒濃度、作用時(shí)間及處理方式就成為了決定富硒農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵因素[19-20]。種子引發(fā)是一種控制濃度及作用時(shí)間最簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)而有效的生物強(qiáng)化策略,其不僅能促進(jìn)植物種子的萌發(fā)及其幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育,還能提高植物的逆境適應(yīng)能力[21-22]。因此,硒引發(fā)已被廣泛用作富硒農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)的生物強(qiáng)化策略[4,23]。

紫花苜蓿(Medicagosativa)具有產(chǎn)量高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富、適口性好、消化率高等優(yōu)良特點(diǎn),成為享譽(yù)全球的“牧草之王”[24-25],是近年來(lái)“中央一號(hào)”文件和“糧改飼”等政策優(yōu)先發(fā)展的牧草資源[26]。牧草中硒含量不僅與草食動(dòng)物飼養(yǎng)及畜群健康有密切關(guān)系,還會(huì)間接影響到人類(lèi)的身體健康,因而富硒苜蓿草產(chǎn)品生產(chǎn)受到世界各國(guó)的共同關(guān)注[27]。適量施硒不僅能促進(jìn)紫花苜蓿的生長(zhǎng)發(fā)育,還可提高其飼草產(chǎn)量和品質(zhì),而過(guò)量施硒則相反[28-29]。目前,紫花苜蓿富硒策略研究已經(jīng)涉及土壤施肥[30]、葉面噴施[28]及種子引發(fā)[23,31]等多種形式。研究發(fā)現(xiàn),土壤基施和葉面噴施硒肥既可增加紫花苜蓿葉片的抗氧化能力,又可提高紫花苜蓿的產(chǎn)量和品質(zhì)[28-30]。硒引發(fā)也能提高紫花苜蓿種子的抗氧化能力[31],但其對(duì)不同品種紫花苜蓿種子抗氧化能力的影響存在差異[20],而且紫花苜蓿幼苗的抗氧化能力對(duì)硒引發(fā)如何響應(yīng)尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,試驗(yàn)以發(fā)芽第10 d的紫花苜蓿幼苗為材料,分析不同濃度亞硒酸鈉溶液引發(fā)不同時(shí)間后其幼苗抗氧化酶活性及脂質(zhì)過(guò)氧化的變化規(guī)律,以期揭示硒濃度和引發(fā)時(shí)間對(duì)紫花苜蓿幼苗抗氧化能力的影響,為富硒紫花苜蓿產(chǎn)品的科學(xué)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料來(lái)源

供試紫花苜蓿品種為‘偏關(guān)苜蓿’,種子由山西農(nóng)業(yè)大學(xué)草類(lèi)植物育種與種子科學(xué)實(shí)驗(yàn)室于2018年10月在校內(nèi)試驗(yàn)站收集,并密封保存于—20℃種子庫(kù)內(nèi)至2021年3月試驗(yàn)進(jìn)行。

1.2 硒引發(fā)處理

將飽滿(mǎn)均勻的紫花苜蓿種子分別置于濃度為0,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0 mmol·L-1的亞硒酸鈉溶液中(亞硒酸鈉溶液濃度篩選參照參考文獻(xiàn)[31]),在20℃條件下浸泡0(CK),3,6,9和12 h后,用蒸餾水快速?zèng)_洗3遍,并用濾紙吸收種子表面水分后于25℃黑暗條件自然風(fēng)干至含水量為10%(鮮重基礎(chǔ))左右,于4℃條件下密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 發(fā)芽試驗(yàn)

發(fā)芽條件及發(fā)芽率的計(jì)算參照國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)制定的種子檢驗(yàn)規(guī)程(2019)[32]進(jìn)行,隨機(jī)選取100粒引發(fā)后的種子,放入鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿并加入5 mL蒸餾水,于20℃恒溫光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 d,最終獲得試驗(yàn)所需幼苗樣品。每個(gè)處理重復(fù)4次。

1.4 生理指標(biāo)測(cè)定

粗酶液提取參照Kibiza等[33]的方法,發(fā)芽第10 d準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1 g幼苗,冰浴研磨后上清液于4℃條件保存?zhèn)溆?。超氧化物歧化?Superoxide dismutase,SOD)活性參照Rao等[34]的方法測(cè)定,過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)活性參照Aebi[35]的方法測(cè)定,抗壞血酸過(guò)氧化物酶(Aseorbate peroxidase,APX)活性參照Nakano等[36]的方法測(cè)定,谷胱甘肽還原酶(Glutathione reductase,GR)活性參照Madamanchi等[37]的方法測(cè)定,丙二醛(Maloddialdehyde,MDA)含量參照Bailly等[38]的方法測(cè)定,可溶性蛋白含量采用南京建成科技有限公司所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

使用SPSS 22.0軟件對(duì)紫花苜蓿幼苗的各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,多重比較(P<0.05)則采用Duncan’s法進(jìn)行,最終以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤方式表示結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗SOD活性的影響

由表1可知,濃度為0 mmol·L-1和0.5 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗的SOD活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),均顯著高于CK(P<0.05),并在引發(fā)12 h時(shí)顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05);濃度為1.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗SOD活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后下降的趨勢(shì),濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)9 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),濃度為2.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)3 h和6 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),濃度為4.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)3 h和6 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),而引發(fā)12 h時(shí)顯著低于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)3 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),引發(fā)12 h時(shí)顯著低于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05)。相同引發(fā)時(shí)間下,紫花苜蓿幼苗SOD活性均隨濃度的增加呈先升高后下降的趨勢(shì);引發(fā)3 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度(P<0.05);引發(fā)6 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度(P<0.05);引發(fā)9 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1和1.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05),并在濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)12 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1時(shí)顯著高于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05),而在濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)低于試驗(yàn)中所有處理時(shí)。

表1 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗SOD活性的影響

2.2 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗CAT活性的影響

由表2可知,濃度為0 mmol·L-1和0.5 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗的CAT活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),均顯著高于CK(P<0.05);濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí),隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后下降的趨勢(shì),濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)9 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),濃度為2.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)3 h顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05);濃度為4.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗CAT活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)而下降,均在引發(fā)12 h顯著低于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05)。相同引發(fā)時(shí)間下,紫花苜蓿幼苗CAT活性均隨濃度的增加呈先升高后下降的趨勢(shì);引發(fā)3 h時(shí),紫花苜蓿幼苗CAT活性在濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于0.5 mmol·L-1外的其他濃度(P<0.05);引發(fā)6 h和9 h時(shí),在濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)12 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1時(shí)顯著高于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05),而在濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05)。

表2 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗CAT活性的影響

2.3 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗APX活性的影響

由表3可知,濃度為0 mmol·L-1和0.5 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗的APX活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),均顯著高于CK(P<0.05);濃度為1.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí),隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后下降的趨勢(shì);濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí)均顯著高于CK(P<0.05),并分別在引發(fā)9 h和3 h時(shí)顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05);濃度為4.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)3 h時(shí)最高,濃度為4.0 mmol·L-1時(shí)引發(fā)9 h和12 h顯著低于CK(P<0.05)。相同引發(fā)時(shí)間下,紫花苜蓿幼苗APX活性均隨濃度的增加呈先升高后下降的趨勢(shì);引發(fā)3 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度(P<0.05),但濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)6 h和9 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05),并在濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)12 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1時(shí)顯著高于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05),而在濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05)。

表3 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗APX活性的影響

2.4 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗GR活性的影響

由表4可知,濃度為0 mmol·L-1和0.5 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗的GR活性隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),除濃度為0 mmol·L-1引發(fā)3 h外均顯著高于CK(P<0.05);濃度為1.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí),隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后下降的趨勢(shì);濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí)均顯著高于CK(P<0.05),濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)在引發(fā)9 h時(shí)顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),濃度為2.0 mmol·L-1時(shí)在引發(fā)3 h時(shí)顯著高于引發(fā)6 h外的其他時(shí)間(P<0.05);濃度為4.0 mmol·L-1和8.0 mmol·L-1時(shí)均在引發(fā)3 h時(shí)最高,顯著高于CK(P<0.05)。相同引發(fā)時(shí)間下,紫花苜蓿幼苗GR活性均隨濃度的增加呈先升高后下降的趨勢(shì);引發(fā)3 h時(shí),在濃度為2.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度(P<0.05);引發(fā)6 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1和2.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度時(shí)(P<0.05),濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)9 h時(shí),在濃度為1.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度時(shí)(P<0.05),濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05);引發(fā)12 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1時(shí)顯著高于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05),在濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于濃度為0 mmol·L-1時(shí)(P<0.05),并在濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05)。

表4 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗GR活性的影響

2.5 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗MDA含量的影響

由表5可知,濃度為0 mmol·L-1和0.5 mmol·L-1時(shí),紫花苜蓿幼苗的MDA含量隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后降低的趨勢(shì),濃度為0 mmol·L-1時(shí),除引發(fā)3 h外均顯著高于CK(P<0.05),濃度為0.5 mmol·L-1時(shí),除引發(fā)3 h外均顯著低于CK(P<0.05);濃度為1.0 mmol·L-1時(shí),隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后下降再升高的趨勢(shì),引發(fā)6 h和9 h時(shí)顯著低于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05),而引發(fā)12 h時(shí)顯著高于其他引發(fā)時(shí)間(P<0.05);濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí),隨引發(fā)時(shí)間的延長(zhǎng)呈升高趨勢(shì),均顯著高于CK(P<0.05)。相同引發(fā)時(shí)間下,引發(fā)3 h時(shí),紫花苜蓿幼苗MDA含量均隨濃度的增加呈上升趨勢(shì);引發(fā)6 h～12 h時(shí),均隨濃度的增加呈先下降后升高的趨勢(shì);引發(fā)6 h和9 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1和1.0 mmol·L-1時(shí)顯著低于其他濃度(P<0.05),在濃度為2.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于其他濃度(P<0.05);引發(fā)12 h時(shí),在濃度為0.5 mmol·L-1時(shí)顯著低于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05),在濃度為1.0 mmol·L-1～8.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于濃度為0 mmol·L-1(P<0.05),并在濃度為8.0 mmol·L-1時(shí)顯著高于試驗(yàn)中所有處理時(shí)(P<0.05)。

表5 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗MDA含量的影響

2.6 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗抗氧化性能的雙因素方差分析

雙因素方差分析表明(表6),不同硒濃度對(duì)紫花苜蓿幼苗SOD,APX,GR和MDA均有顯著影響(P<0.05),不同硒引發(fā)時(shí)間紫花苜蓿幼苗SOD,CAT,APX,GR和MDA均有顯著影響(P<0.05),而硒濃度和引發(fā)時(shí)間的交互作用則對(duì)SOD,CAT,APX,GR和MDA均有極顯著影響(P<0.01)。

表6 硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗抗氧化性能的雙因素方差分析

3 討論

硒是調(diào)控植物體內(nèi)抗氧化等代謝反應(yīng)的重要微量元素,對(duì)于植物的逆境損傷修復(fù)和富硒生物強(qiáng)化具有重要作用[39],因而適宜的硒處理能促進(jìn)植物種子的萌發(fā)及其幼苗生長(zhǎng)[14-15]。外源硒濃度和引發(fā)時(shí)間是造成種子引發(fā)中出現(xiàn)雙重效應(yīng)的關(guān)鍵因素,一般低濃度或短時(shí)間的引發(fā)處理產(chǎn)生促進(jìn)作用,而高濃度或長(zhǎng)時(shí)間引發(fā)則往往產(chǎn)生抑制作用[20,31]。研究發(fā)現(xiàn),外源硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿種子活力也具有雙重效應(yīng),低濃度(0.5 mmol·L-1)的硒引發(fā)促進(jìn)了紫花苜蓿種子的萌發(fā),其中濃度為0.5 mmol·L-1引發(fā)12 h時(shí)其種子發(fā)芽率顯著高于CK(P<0.05),而高濃度則抑制其萌發(fā)[31]。本試驗(yàn)中,硒濃度和引發(fā)時(shí)間的交互作用則對(duì)SOD,CAT,APX,GR和MDA均有極顯著影響(P<0.01),而且低濃度(0.5 mmol·L-1)的硒引發(fā)(3 h～12 h)提高了紫花苜蓿幼苗的SOD,CAT,APX和GR的活性,這是因?yàn)榈蜐舛任幚砑忍岣吡酥参锏目寡趸芰4],又促進(jìn)了種子內(nèi)蛋白質(zhì)及多糖等貯藏大分子物質(zhì)的分解[40],從而為其萌發(fā)過(guò)程中細(xì)胞分裂提供了充足的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)。然而試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),紫花苜蓿幼苗的MDA含量在低濃度(0.5 mmol·L-1)引發(fā)時(shí)出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),這可能是因?yàn)榈蜐舛任l(fā)使種子發(fā)生了一定程度的吸脹損傷,且初期抗氧化酶活性的升高尚不足以修復(fù)這種損傷,因而出現(xiàn)了MDA含量升高的現(xiàn)象[41],直到引發(fā)12 h時(shí)紫花苜蓿幼苗內(nèi)抗氧化酶活性的升高才能修復(fù)其吸脹損傷。

植物體內(nèi)抗氧化能力的下降造成了其細(xì)胞內(nèi)引起脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的活性氧自由基(Reactive oxide species,ROS)含量升高,表現(xiàn)為其細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的標(biāo)志性產(chǎn)物MDA含量上升[42]。試驗(yàn)中,高濃度(≥4.0 mmol·L-1)硒引發(fā)時(shí)間越長(zhǎng),紫花苜蓿幼苗內(nèi)的SOD,CAT,APX和GR活性越低,其MDA含量則越高,說(shuō)明高濃度硒引發(fā)降低了紫花苜蓿幼苗的抗氧化能力,進(jìn)而導(dǎo)致其脂質(zhì)過(guò)氧化損傷加劇,這與硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿種子抗氧化性能的影響研究結(jié)論相似[20,31]。此外,這在外源硒處理對(duì)玉米[11]、花生[13]、白術(shù)[14]、黃精[15]及青花菜[17]等植物幼苗氧化酶活性的影響研究中也到了證實(shí)。這可能是因?yàn)榈蛷?qiáng)度的外源硒處理通過(guò)調(diào)控植物細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的防御能力,及時(shí)地保持了其體內(nèi)ROS動(dòng)態(tài)平衡,緩解了細(xì)胞膜系統(tǒng)的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷,從而表現(xiàn)為其MDA的產(chǎn)生相對(duì)較少。過(guò)量的硒不僅誘導(dǎo)了引起細(xì)胞膜系統(tǒng)脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的ROS增多,還對(duì)種子內(nèi)所有需要硫的反應(yīng)部位產(chǎn)生毒害[43-44],將植物體內(nèi)無(wú)機(jī)態(tài)的硒轉(zhuǎn)化成有機(jī)態(tài)的硒代半胱氨酸,并與非特異性蛋白質(zhì)結(jié)合而干擾其正常功能的發(fā)揮,最終使植物體內(nèi)的代謝平衡出現(xiàn)紊亂,從而影響了植物的生長(zhǎng)發(fā)育[17,43]。本試驗(yàn)中,硒濃度為0.5 mmol·L-1引發(fā)12 h時(shí),紫花苜蓿幼苗細(xì)胞內(nèi)SOD,CAT,APX和GR活性均保持最高水平,而其MDA含量卻最低,因而這可能是紫花苜蓿草產(chǎn)品富硒生產(chǎn)的最佳處理。

4 結(jié)論

外源硒引發(fā)對(duì)紫花苜蓿幼苗抗氧化能力的影響與其濃度及引發(fā)時(shí)間均有密切關(guān)系。低濃度(≤1.0 mmol·L-1)的外源硒引發(fā)能提高紫花苜蓿幼苗的抗氧化性能,從而降低其脂質(zhì)過(guò)氧化損傷;高濃度長(zhǎng)時(shí)間引發(fā)(≥4.0 mmol·L-1,12 h)時(shí),紫花苜蓿幼苗的抗氧化性能下降,而其脂質(zhì)過(guò)氧化損傷加劇。濃度為0.5 mmol·L-1的亞硒酸鈉溶液引發(fā)12 h時(shí)是提高紫花苜蓿幼苗抗氧化能力的最佳處理。