霍靜 吳忠隱 李偉 王璐 馮玉梅

(承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 1老年病科,河北 承德 067000;2血管外科;3體檢科)

下肢動脈閉塞癥是高血壓患者的常見并發(fā)癥〔1〕。超過70%的老年患者發(fā)病早期無典型臨床癥狀,表現(xiàn)為下肢酸痛、活動乏力等,常認為高齡、疲勞等原因所致而被忽視,當患者出現(xiàn)靜息痛、間歇性跛行等癥狀時已錯過最佳的治療時機,對患者的生存質(zhì)量造成嚴重不良影響〔2〕。血紅素氧合酶(HO)-1在炎癥過程中表達上調(diào)〔3〕。動脈硬化過程中淋巴細胞、巨噬細胞能夠分泌脂蛋白相關(guān)磷脂酶(Lp-PL)A2,同時釋放內(nèi)皮素1和免疫激活物,損傷內(nèi)皮細胞,減少一氧化氮的合成與釋放〔4〕。本研究觀察老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2及炎癥因子水平變化并分析其意義。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取2019年7月至2020年9月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的老年原發(fā)性高血壓患者60例為單純高血壓組,高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者60例為合并下肢動脈閉塞癥組。納入標準:①年齡≥60歲,原發(fā)性高血壓診斷符合2018年修訂的中國高血壓防治指南;②符合下肢動脈硬化閉塞癥的外科治療策略中對下肢動脈閉塞癥的診斷標準;③理解和溝通能力正常,自愿完成本研究中的檢查項目。排除標準:①存在免疫系統(tǒng)功能異常,甲狀腺功能異常;②繼發(fā)性高血壓;③近3個月服用葉酸、B族維生素;④存在全身感染性疾病,精神疾病。另收集醫(yī)院體檢的老年健康志愿者40例為健康對照組,年齡≥60歲,均無高血壓、糖尿病等慢性病及重要臟器功能異常。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過,受試者均自愿參與本研究。

1.2資料收集和糖脂代謝指標檢測 記錄3組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、飲酒史、吸煙史。入院后次日或健康體檢時采集空腹肘靜脈血,檢測糖化血紅蛋白水平,2 h內(nèi)4 ℃ 2 500 r/min離心10 min,收集血清,全自動生化分析儀檢測血脂指標。

1.3血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2水平檢測 采集3組空腹肘靜脈血5 ml,2 h內(nèi)4 ℃ 2 500 r/min離心10 min,收集血清,酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2水平。具體操作步驟如下:將預(yù)配制的標準品100 μl分別加入空白對照孔、標準孔,37 ℃恒溫靜置30 min,反復(fù)沖洗。棄去酶標板中的液體,加入酶標試劑,37 ℃恒溫靜置30 min,反復(fù)沖洗后加入顯色劑,混勻后顯色,加入終止液,上酶標儀讀取450 nm處的吸光值。

1.4單核細胞及血清白細胞介素(IL)-8、IL-17水平檢測 采集3組空腹肘靜脈血5 ml,取其中2 ml使用全自動血液分析儀檢測單核細胞水平;計算單核細胞與高密度脂蛋白比值(MHR)。取另外3 ml空腹肘靜脈血,4 ℃ 2 500 r/min條件下離心10 min,收集血清,放射免疫分析法測定血清IL-8、IL-17水平。

1.5下肢動脈閉塞癥嚴重程度評估 老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者使用便攜式彩超彩色多普勒超聲診斷系統(tǒng)測定踝臂指數(shù),根據(jù)測定結(jié)果判斷下肢動脈閉塞癥嚴重程度:踝臂指數(shù)正常參考值范圍是1.00～1.30,0.70～0.99為輕度狹窄,0.40～0.69為中度狹窄,<0.40為重度狹窄。

1.6統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS25.0軟件行χ2檢驗、方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗,評估診斷價值采用受試者工作特征(ROC)曲線分析。

2 結(jié) 果

2.1各組一般資料及糖脂代謝指標比較 合并下肢動脈閉塞癥組糖化血紅蛋白、三酰甘油、總膽固醇、低密度脂蛋白明顯高于其他兩組(P<0.05);單純高血壓組糖化血紅蛋白、低密度脂蛋白水平明顯高于健康對照組(P<0.05)。性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、飲酒史、吸煙史在各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組一般資料及糖脂代謝指標比較

2.2各組血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、單核細胞及MHR水平比較 合并下肢動脈閉塞癥組血清HO-1、Lp-PLA2、單核細胞、MHR水平明顯高于其他兩組,血清一氧化氮水平明顯低于其他兩組;單純高血壓組上述指標與健康對照組比較差異顯著(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、單核細胞、MHR及血清炎癥因子水平比較

2.3各組血清炎癥因子水平比較 合并下肢動脈閉塞癥組血清IL-8、IL-17水平明顯高于其他兩組,單純高血壓組血清IL-8、IL-17水平明顯高于健康對照組(P<0.05)。見表2。

2.4不同程度下肢動脈閉塞癥血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、單核細胞及MHR水平比較 隨著下肢動脈閉塞癥嚴重程度的增加血清HO-1、Lp-PLA2、單核細胞、MHR水平明顯提升,一氧化氮水平明顯降低(P<0.05)。見表3。

表3 不同程度下肢動脈閉塞癥血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、單核細胞及血清炎癥因子水平比較

2.5不同程度下肢動脈閉塞癥血清炎癥因子水平比較 隨著下肢動脈閉塞癥嚴重程度的增加,血清IL-8、IL-17水平明顯增加(P<0.05)。見表3。

2.6血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17檢測對老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者的診斷價值 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17單獨和聯(lián)合檢測對老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者均具有較高的診斷價值(P<0.05);其中各項指標聯(lián)合檢測的預(yù)測價值最高〔曲線下面積(AUC)=0.952〕,敏感度和陽性預(yù)測值明顯高于各指標單獨檢測。見表4、圖1。

圖1 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17對老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者診斷價值的ROC曲線

表4 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17對老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者的診斷價值

3 討 論

老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥為動脈內(nèi)膜血栓形成、鈣化、增厚,出現(xiàn)下肢動脈供血不足、淤血等臨床癥狀,嚴重影響患者的生存質(zhì)量〔5〕。早期診斷和評估病情,對改善老年原發(fā)性高血壓合并下肢動脈閉塞癥患者的預(yù)后具有重要意義。HO-1是在胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的具有誘導(dǎo)活性的抗氧化酶,在多種疾病中依次表達〔6〕。冠心病患者外周血中HO-1高表達,且與冠脈病變嚴重程度呈正相關(guān)〔7〕。HO-1參與動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展,但在下肢動脈閉塞癥中作用的研究仍未完全明確。一氧化氮參與高血壓的發(fā)展過程,高血壓患者體內(nèi)炎癥反應(yīng)會激活巨噬細胞、內(nèi)皮細胞,釋放內(nèi)皮素1及相關(guān)免疫樣激活物,損傷內(nèi)皮細胞,內(nèi)皮細胞釋放的一氧化氮減少,減弱了抑制血栓形成、舒張血管等作用〔8〕。動脈粥樣硬化斑塊中的淋巴細胞和巨噬細胞能夠合成并分泌Lp-PLA2,與低密度脂蛋白相互結(jié)合后存在于外周血中,水解氧化磷脂后大量分泌游離脂肪酸、溶血磷脂等促炎因子,破壞血管內(nèi)皮完整性,誘發(fā)局部反應(yīng),增加斑塊不穩(wěn)定性〔9〕。

炎癥因子參與動脈粥樣硬化的發(fā)生與進展,已有較多關(guān)于MHR在心血管方面的研究,但在下肢動脈閉塞癥中作用的研究仍較為少見〔10〕。單核細胞是人體免疫系統(tǒng)的重要成分,外界刺激因素作用于血管后單核細胞在損傷部位聚集,分化為巨噬細胞,將血管損傷部位的脂質(zhì)吞噬后形成泡沫細胞,生成斑塊附著于血管內(nèi)膜中,導(dǎo)致管腔狹窄或閉塞〔11〕。高密度脂蛋白可逆向轉(zhuǎn)運膽固醇,下調(diào)單核細胞趨化蛋白1表達,進而抑制單核細胞活性,降低單核細胞的轉(zhuǎn)移、黏附及聚集〔12〕。IL-8在炎癥因子刺激下成纖維細胞、內(nèi)皮細胞等均能夠產(chǎn)生〔13〕。IL-8與特異性受體結(jié)合后能夠激活中性粒細胞的生物學(xué)功能,將大量中性粒細胞聚集與炎癥部位發(fā)揮生物學(xué)作用,最終加劇局部炎癥反應(yīng)〔14〕。IL-17促炎作用明顯,在IL-6、轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)下,分泌IL-17A、腫瘤壞死因子-α等細胞因子,增強人體的炎癥反應(yīng)〔15〕。