李家寧，劉麗雪，薛 磊

（山東省煙臺生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心，山東 煙臺 264000）

引言

磷作為水體中重要的營養(yǎng)物質(zhì)，也是微生物生長不可或缺的重要元素，當(dāng)水體中的磷含量超標(biāo)時，微生物會迅速繁殖導(dǎo)致水體缺氧形成富營養(yǎng)化，嚴(yán)重破壞水環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)。近幾年來隨著工農(nóng)業(yè)發(fā)展，化肥農(nóng)藥使用量劇增、生活污水及工業(yè)廢水排放量增加，河流、湖庫富營養(yǎng)化問題日益突出，總磷已成為長江流域首要污染物。

目前存在多種水質(zhì)總磷監(jiān)測方法，大體可分為兩大類，手工監(jiān)測方法和自動監(jiān)測方法。樣品量大，傳統(tǒng)手工方法分析工作量大，耗時長，難以滿足高頻次監(jiān)測要求，總磷自動監(jiān)測儀器分析速度快，適合大批量、高頻次樣品分析，節(jié)省人力物力，但也受限于懸浮物多、顆粒物粒徑大的樣品，所以探尋不同水樣合適的總磷分析方法十分必要。通過對比手工方法和總磷自動分析儀法兩種方法，分析不同水樣更適合的總磷分析方法。

1 水質(zhì)總磷測定原理

天然水及廢水中，磷的主要存在形式為元素磷、正磷酸鹽、縮合磷酸鹽（焦磷酸鹽、偏磷酸鹽、多磷酸鹽）及有機基團結(jié)合的磷酸鹽（磷脂），總磷是以水中可被強氧化物質(zhì)氧化轉(zhuǎn)變成磷酸鹽的各種形態(tài)的磷的總量計。目前無論是手工監(jiān)測方法還是自動儀器監(jiān)測方法，都常采用強氧化劑（如過硫酸鉀、硝酸-高氯酸）對含磷水樣進(jìn)行消解，將所有其他形式存在的磷全部氧化為正磷酸鹽，在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨發(fā)生反應(yīng)，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成比較穩(wěn)定的藍(lán)色絡(luò)合物，根據(jù)朗伯比爾定律測定其含量。

2 水質(zhì)總磷測定方法

2.1 手工分析方法

2.1.1 鉬酸銨分光光度法

鉬酸銨分光法是一種最常用的水質(zhì)總磷測定方法，《水質(zhì) 總磷的測定 鉬酸銨分光光度法》（GB/T 11893-1989）頒布已經(jīng)三十多年了，仍然是總磷的國標(biāo)分析方法，利用鉬酸銨與總磷生成藍(lán)色絡(luò)合物，通過紫外分光光度計在700 nm下比色測定其濃度[1]。該方法適用于各類水樣，適用范圍廣，如地表水、污水和工業(yè)廢水，同時兼具靈敏度及準(zhǔn)確性高、穩(wěn)定性好、試劑價格低等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于環(huán)保、農(nóng)業(yè)、食品等領(lǐng)域。

2.1.2 微波消解法

微波消解法是近些年來發(fā)展起來的一種新的樣品前處理方法，也被用于總磷前處理，是在鉬酸銨分光光度法基礎(chǔ)上的改進(jìn)，將其原有的高溫高壓消解變?yōu)槔酶哳l電磁波將待測水樣迅速升溫，使其在較短時間內(nèi)得到良好的消解效果，可以極大地提高工作效率和測量精度，是一種非常有效的水質(zhì)總磷測定方法。這種方法操作簡便，安全可靠，并且也可以適用于多種不同類型的樣品，包括各類自來水、廢水、地表水等。目前，微波消解法還廣泛應(yīng)用于食品檢測領(lǐng)域，在檢測食品中的污染物等方面發(fā)揮著重要作用。微波消解測定總磷的方法還沒有國標(biāo)認(rèn)證，也需要考慮樣品前處理及工作量等問題，但其安全性、準(zhǔn)確性值得研究及推廣。

2.2 自動分析方法

2.2.1 流動注射-鉬酸銨分光光度法

《水質(zhì) 總磷的測定 流動注射-鉬酸銨分光光度法》（HJ671-2013）于2013年10月25日發(fā)布，2014年1月1日開始實施，是一種高效、準(zhǔn)確、便捷的水質(zhì)總磷測定方法。該方法采用了流動注射技術(shù)，在酸性條件下，將試樣中各種形態(tài)的磷在125 ℃的高溫高壓下消解后全部轉(zhuǎn)化成正磷酸鹽，在銻鹽催化下與鉬酸銨反應(yīng)生成磷鉬雜多酸，迅速被抗壞血酸還原生成藍(lán)色絡(luò)合物，在880 nm波長下測量吸光度[2]。該方法測定范圍廣，適用于各類水樣總磷的測定，監(jiān)測范圍可達(dá)0.020 mg/L～1.00 mg/L。相對于傳統(tǒng)的水質(zhì)總磷測定方法，該方法具有更高的自動化和可重復(fù)性，檢測速度快，能夠快速并準(zhǔn)確地處理大量的樣品，操作簡單，效率高，樣品及試劑消耗量少，被廣泛應(yīng)用于河流自動站及污水處理站的總磷監(jiān)測中，同時在海水總磷的分析中應(yīng)用顯著。需要注意的是，由于流動注射分析儀流路管徑較細(xì)，當(dāng)樣品含懸浮顆粒物較多或顆粒粒徑大于250 μm的樣品時，容易堵塞管徑。

3 水質(zhì)總磷測定干擾因素的消除方法

3.1 排除濁度與色度的影響

自然界中水體在流動過程中含有大量的泥沙、膠體等雜質(zhì)，會給總磷測定過程帶來濁度、色度影響。總磷采樣要求自然沉降30分鐘，能去除大部分干擾，但是仍存在渾濁的樣品。中國環(huán)境監(jiān)測總站要求原水濁度小于等于200 NTU時，采用自然沉降30分鐘，取上清液；濁度為200～500 NTU時，自然沉降60分鐘，取上清液；濁度大于500 NTU時，采用2 000 r/min離心2分鐘，取上清液。這種采樣方式能最大限度降低濁度干擾[3]。經(jīng)驗表明，該處理后的地表水基本能滿足自動分析儀進(jìn)樣要求。對于消解后仍有濁度及色度干擾的樣品如何避免干擾依然是我們研究的熱點，同時也是難點。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)手工監(jiān)測可選用兩種方法：

（1）消解后樣品仍有濁度干擾的，采用中性濾紙或者纖維濾膜過濾后定容至50 mL，再加入顯色劑后比色，此方法要注意濾紙及纖維濾膜要提前用純水多次淋洗以去除濾紙中的磷元素，過濾后要用純水沖洗比色管及濾紙，確保磷元素完全進(jìn)入比色管，此方法操作麻煩，誤差也相對較大。

（2）濁度-色度補償法，該方法也可應(yīng)用在連續(xù)流動自動分析儀中。消解前先配置參比試樣，消解后添加相應(yīng)的濁度-色度補償液但不添加抗壞血酸溶液和鉬酸鹽溶液來去除雜質(zhì)干擾，從而消除干擾因素的影響，經(jīng)驗表明，該方法相較于過濾更加便捷，準(zhǔn)確度也相對較高。

3.2 共存離子與其他干擾因素的影響

在采用鉬酸銨分光光度法進(jìn)行水質(zhì)總磷測定時，水中的某些物質(zhì)會與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生干擾。當(dāng)水中含有較高濃度的砷離子（超過2 mg/L）時，可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生較大的影響，硫代硫酸鈉可消除此干擾。硫化物濃度超過2 mg/L時，也會對測定結(jié)果產(chǎn)生干擾，且可能導(dǎo)致測定值偏低[4]。因此，在實際測試中注入氮氣能夠有效消除干擾；當(dāng)水樣中的鉻含量超過50 mg/L時，可以采取添加亞硫酸鈉溶液來去除干擾；氧化消解及加磺胺可以去除亞硝酸鹽的干擾；某些金屬離子也會對實驗產(chǎn)生干擾，如鐵含量達(dá)到20 mg/L時，監(jiān)測結(jié)果會偏低5%。在日常河流湖庫監(jiān)測中，水質(zhì)比較簡單，共存離子干擾較少，但是污水水質(zhì)復(fù)雜，總磷分析時要特別注意共存離子的干擾。

4 實驗部分

哈希（HACH）公司的IL500總磷自動分析儀是在流動注射-鉬酸銨分光光度法及鉬酸銨分光光度法基礎(chǔ)上研發(fā)出來的總磷自動分析儀，在酸性條件下，采用過硫酸鉀將樣品在150 ℃下快速消解，加入鉬酸銨及酒石酸銻鉀顯色測定總磷濃度，測量范圍可達(dá)3.8 mg/L，廣泛應(yīng)用于自動站、污水在線以及實驗室分析。本文通過傳統(tǒng)手工鉬酸銨分光光度法和IL500總磷自動分析儀測定水中總磷進(jìn)行比對分析，為不同水質(zhì)總磷分析提供更多選擇[5]。

4.1 儀器與試劑

4.1.1 儀器

T6新悅可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；GI54TW立式自動壓力蒸汽滅菌器（致微（廈門）儀器有限公司）；IL500總磷自動分析儀（哈希）。

4.1.2 試劑

過硫酸鉀（GR.天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；酒石酸銻鉀（AR.天津市博迪化工有限公司）；鉬酸銨（AR.南京化學(xué)試劑有限公司）；抗壞血酸（AR.國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；硫酸（GR，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；濁度-色度補償溶液；總磷試劑（哈希）；實驗用水為三級水。

磷標(biāo)準(zhǔn)溶液：磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液（500 mg/L，生態(tài)環(huán)境部環(huán)境發(fā)展中心環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所）；磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（50 mg/L，保存期6個月）；磷標(biāo)準(zhǔn)使用液（2.0 mg/L，現(xiàn)用現(xiàn)配）。

總磷標(biāo)準(zhǔn)樣品：批號203999（0.287±0.018 mg/L），批號203913（1.72±0.06 mg/L）。

4.2 實驗方法

4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)序列溶液的配制

鉬酸銨分光光度法：取7支50 mL比色管，依次分別加入0.0 mL，0.50 mL，1.00 mL，3.00 mL，5.00 mL，10.0 mL，15.0 mL磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，加水定容至25 mL標(biāo)線。

IL500總磷自動分析儀法：配制0.0 mg/L，0.04 mg/L，0.06 mg/L，0.10 mg/L，0.50 mg/L，1.00 mg/L，2.00 mg/L磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

4.2.2 樣品分析

鉬酸銨分光光度法：將樣品混合均勻，取25 mL均勻樣品于50 mL比色管中，樣品濃度高時進(jìn)行稀釋處理，濁度色度高的樣品需要配制參比試樣。然后加入4.0 mL過硫酸鉀溶液，蓋緊比色管蓋，放入高壓鍋中120 ℃高壓30分鐘，高壓消解結(jié)束后取出冷卻至室溫，分別向各消解樣品中加入1 mL抗壞血酸混勻，30秒后加入2.0 mL鉬酸鹽溶液混勻。有顏色或者濁度的樣品參比試樣加入3 mL濁度-色度補償液搖勻。室溫下顯色15分鐘，在700 nm波長下，用30 mm比色皿比色，扣除空白吸光度后從曲線查得總磷濃度。

4.3 實驗結(jié)果

4.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

本次實驗鉬酸銨分光光度法曲線方程相關(guān)系數(shù)為0.999 9，IL500總磷自動分析儀相關(guān)系數(shù)顯示為1.000，說明傳統(tǒng)手工方法和自動分析儀法分析總磷重現(xiàn)性都很好，都能滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。兩種方法的曲線回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2。

表2 不同方法標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程和相關(guān)系數(shù)

4.3.2 標(biāo)準(zhǔn)樣品分析結(jié)果

本實驗選取高（1.72±0.06 mg/L）、低（0.287±0.018 mg/L）兩種濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品，分別用兩種方法進(jìn)行分析，分別重復(fù)測定6次，計算各標(biāo)準(zhǔn)樣品的平均濃度及相對誤差，結(jié)果見表3。

表3 總磷標(biāo)準(zhǔn)樣品的測定結(jié)果

實驗結(jié)果表明，兩種分析方法精密度、準(zhǔn)確度均滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，結(jié)果均真實可靠。

4.3.3 實際樣品分析結(jié)果

本次實驗選取5個地表水樣品及5個污水樣品進(jìn)行比對分析，結(jié)果如表4。

表4 地表水樣品測定結(jié)果

實驗結(jié)果表明，在水質(zhì)相對復(fù)雜的情況下，鉬酸銨分光光度法和IL500結(jié)果無顯著差異。

5 結(jié)論

傳統(tǒng)手工鉬酸銨分光光度法與總磷自動分析儀方法精密度、準(zhǔn)確度均能滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，對于懸浮物較多，顆粒物粒徑較大的水質(zhì)樣品，自動分析儀容易發(fā)生阻塞，需要用手工方法進(jìn)行分析。日常監(jiān)測任務(wù)中的普通樣品，自動分析儀相較于傳統(tǒng)手工方法全自動化程度高，更迅速，更安全，能夠減輕分析者的工作負(fù)擔(dān)，減少人為誤差，同時提高了分析速度，提升了工作效率，適用于高頻次、大批量以及應(yīng)急樣品分析，能夠被更廣泛地應(yīng)用于總磷監(jiān)測中。